甲氧苄啶注射液及颗粒剂的HPLC法测定

建立了甲氧苄啶注射液及颗粒剂含量的HPLC测定法。以Inertsil ODS-3为固定相,0．14％高氯酸钠溶液－甲醇（70：30,用磷酸调节pH至3．6）为流动相,检测波长为280nm。注射液和颗粒剂的平均回收率分别为101．5％（RSD 0．23％）和99．3％（RSD 0．12％）,浓度20－200μg/ml范围内线性关系良好,相关系数为0．9999。     

英国药典1999年版配套光盘的介绍及其应用

英国药典(ＢＰ)自1998年版(第16版)开始在发行印刷版的同时,还提供配套光盘(ＣＤＲＯＭ)。1999年4月又发行了ＢＰ1999及配套光盘。ＢＰ1999是ＢＰ的第17版,已于1999年12月1日起执行,其中有些各论因提前执行,故在正文中用斜体字标识生效年月,例如“1/99”。该系统需求①48...     

培哚普利叔丁胺中差向异构体分离测定方法研究

目的:建立一种快速液相色谱方法分离培哚普利叔丁胺及(±)-1”-差向-培哚普利叔丁胺(差向异构体),并对该差向异构体进行测定。方法:采用Agilent Poroshell CS-C₁₈(100 mm×3.0 mm, 2.7μm)色谱柱,以0.15%庚烷磺酸钠溶液(磷酸调节pH 2.0)-乙腈/戊醇(217∶3)(82∶18)为流动相,流速0.8 mL·min^-1,柱温50℃,进样量2μL,在215 nm波长处分离培哚普利及(±)-1”-差向-培哚普利。结果:培哚普利及(±)-1”-差向-培哚普利在25 min内依次出峰,峰谷比和分离度满足测定要求。培哚普利叔丁胺及其差向异构体均在2～2 000μg·mL^-1范围内线性关系良好(r>0.999),定量限(S/N约10)和检测限(S/N约3)均分别约为1.0μg·mL^-1和0.3μg·mL^-1。差向异构体低、中、高3个浓度的平均加样回收率为97.2%(RSD=1.8%,n=9)。10批样品中(±)-1”差向-培哚普利叔丁胺含量...     

白藜芦醇抑制基质金属蛋白酶抗酒精性心肌纤维化

目的探索白藜芦醇对酒精诱导的心肌纤维化的作用及其分子机制。方法将雄性SD大鼠随机分为对照组、酒精组和酒精+白藜芦醇组,每组10只大鼠,干预6个月后取心肌行常规石蜡切片和Masson染色评估心肌纤维化,采用冰冻切片和免疫荧光法检测纤连蛋白的表达,采用免疫印迹法检测心肌组织中基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9的表达。结果 6个月酒精摄入可显著增加心肌间质纤维化并明显破坏纤连蛋白的结构,白藜芦醇能显著削弱酒精诱导的心肌纤维化和纤连蛋白破坏。酒精摄入可显著增加心肌组织中基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9的表达水平,而白藜芦醇能显著抑制基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9的表达水平。结论白藜芦醇能通过抑制基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9的表达来抗酒精诱导的心肌纤维化。     

牛痘相关激酶1在小鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和迁移中的作用及机制

目的：探讨牛痘相关激酶1(vaccinia-related kinase 1, VRK1)在小鼠肺动脉平滑肌细胞（pulmonary arterial smooth muscle cells, PASMCs）增殖及迁移中的作用及机制。方法：培养小鼠肺动脉平滑肌细胞系，细胞传至第3代至第5代细胞进行后续实验。在低氧条件下检测不同低氧时间干预后PASMC中VRK1蛋白水平的变化。为探究VRK1在低氧所致PASMCs增殖和迁移中的作用，通过携带Vrk1特异短发夹RNA(Vrk1 short hairpin RNA,sh Vrk1)或相关阴性对照RNA(shCon)的慢病毒转染PASMCs，将转染后的PASMCs分别进行常氧、低氧处理，Western blot检测VRK1和β-catenin蛋白水平变化，采用Ki-67细胞免疫荧光染色法检测PASMCs的增殖活性，划痕实验检测PASMCs的迁移能力。加入40μmol/L SKL2001恢复β-catenin活性后再次检测上述指标。结果：与常氧组相比，低氧处理24 h和36 h后PASMCs中VRK1蛋白表达水平升高（P<0.01）。常氧培...     

CIRBP对小鼠血管平滑肌细胞增殖及迁移的调控及机制研究

目的：探讨冷诱导RNA结合蛋白(CIRBP)对小鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及迁移过程的调控及机制。方法：将雄性C57BL/6J小鼠分为假手术对照组、假手术干扰组、颈总动脉损伤对照组和颈总动脉损伤干扰组，每组5只。造模后按照组别分别用阴性对照腺病毒(AD-NC)和沉默CIRBP腺病毒(AD-CIRBPI)转染，28 d后观察CIRBP表达及血管内膜的增生情况。将小鼠VSMCs分为对照组和腺病毒沉默组，分别用AD-NC和AD-CIRBPI转染细胞48 h，然后加入激活雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)活性的胰岛素。通过RT-qPCR检测CIRBP的mRNA表达，Western blot检测CIRBP、磷酸化核糖体蛋白S6(p-S6^Ser235/236)和磷酸化4E结合蛋白1(p-4EBP1^Thr37/46)蛋白水平变化，Ki67免疫荧光染色和CCK-8实验检测细胞增殖，划痕实验检测细胞迁移，HE染色检测颈动脉内膜增生程度。结果：沉默CIRBP后，VSMCs的活力下降，Ki67阳性细胞比率降低，细胞迁移速度减慢，同时mTORC1活性下降...     

钙激动剂介导血管平滑肌细胞增殖的信号转导途径

为探讨钙调神经磷酸酶依赖的信号通路在雷尼丁刺激的大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用，以培养的大鼠血管平滑肌细胞为模型，用雷尼丁刺激其内贮Ca^2 释放入胞浆，环孢素A阻断钙调神经磷酸酶信号通路，维拉帕米阻断钙通道，检测血管平滑肌细胞钙调神经磷酸酶、丝裂素活化蛋白激酶和蛋白激酶C活性，用^3H-亮氨酸及^3H－胸腺嘧啶掺入量作为反应细胞增殖的指标。结果显示，雷尼丁刺激组蛋白核酸合成速率明显增高，与对照组相比差异显著（P＜0．01）；环孢素A及维拉帕米能明显抑制雷尼丁介导的平滑肌细胞蛋白核酸合成速率增高，与雷尼丁刺激组相比差异显著（P＜0．01）。同时发现雷尼丁刺激组钙神经磷酸酶、蛋白激酶C活性与对照组平滑肌细胞相比差异显著（P＜0．05或0．01）。环孢素A和维拉帕米抑制雷尼丁介导的平滑肌细胞钙调神经磷酸酶活性增高，维拉帕米抑制雷尼丁介导的平滑肌细胞蛋白激酶C活性的增高。提示钙调神经磷酸酶信号通路在雷尼丁刺激的平滑肌细胞增殖中起重要作用，但钙调神经磷酸酶信号通路不是雷尼丁介导平滑肌细胞增殖的唯一信号通路，以丝裂素活化蛋白激酶为核心的信号通路亦参与了雷尼丁刺激的平滑肌细胞增殖。