母乳和牛乳中乳脂肪球膜蛋白质的差异分析

为比较乳脂肪球膜（milk fat globule membrane,MFGM）蛋白在母乳和牛乳中的差异,采用有机试剂提取法,从母乳和牛乳中提取分离出MFGM蛋白,经皮尔斯TM去垢小柱去除十二烷基硫酸钠后,通过液相色谱-质谱联用技术检测分析,检测结果根据特异性肽段匹配数不小于1筛选后,在母乳和牛乳中分别检测到863 种和454 种蛋白,其中二者共有175 种,分别独有688 种和279 种。将母乳中差异表达的688 种蛋白质按PANTHER数据库进行蛋白质的Gene Ontology（GO）功能注释,这些蛋白主要是细胞部分、细胞器、细胞膜等组分,参与的生物途径有新陈代谢过程、生物调节、刺激性反应、免疫系统过程、再生作用等,具有催化、黏合、转运、酶调节等多种分子功能。另外,母乳中的这些差异蛋白参与氨酰tRNA生物合成、致病性大肠杆菌感染、脂肪酸代谢、丙酸代谢、甾体合成、酸降解等都是牛乳中的乳脂肪球膜蛋白不具有的功能。通过分析得出母乳和牛乳中的MFGM蛋白具有明显差异,虽然有部分组成和功能的重叠,但在丰度和代谢路径上,牛乳MFGM蛋白不能替代母乳MFGM蛋白。     

基于NanoLC-Orbitrap MS技术分析牛乳中的乳脂肪球膜蛋白质

运用纳升高效液相色谱与静电场轨道阱组合式高分辨质谱(Nano LC-Orbitrap MS)技术对牛乳中的乳脂肪球膜蛋白质进行定性、定量分析。采用超高速离心提取的方法,从牛乳中分离提取乳脂肪球膜蛋白,经超滤管辅助酶解法前处理,用Nano LC-Orbitrap MS技术分析酶解后的肽段,与数据库检索比对识别蛋白质,并利用PANTHER数据库对所识别的肽段匹配数≥2的蛋白质进行基因本体功能注释和分类。运用两个技术重复和3次连续进样,验证方法的重复性和精确度;从比对结果中提取部分离子流色谱图和二级质谱图,显示出质谱的高可靠性和灵敏度。采用此方法一次进样分析,可识别的蛋白质多达658种,选取识别出611种蛋白质的数据进行分析,具有可靠定量信息的蛋白593种,特异性肽段匹配数≥2的蛋白244种,对这244种蛋白进行GO注释,结果显示这些蛋白主要分布在细胞部分、细胞器、细胞膜和一些高分子复合物中,参与代谢过程、细胞过程、定位、生物调节和免疫系统过程等生物途径,具有很多的分子功能,如催化活性、粘合作用、转运活性、酶调节活性和结构分子活性等。此方法可为基于质谱技术的蛋白组学在乳脂肪球膜蛋白质的应用中提供理论指导。     

超滤法分离干酪乳清中蛋白的研究

研究了热钙法预处理干酪乳清、超滤技术从干酪乳清中回收蛋白的工艺条件。结果表明,干酪乳清经过预处理可降低乳清混浊度,提高超滤效率,通过单因素试验,确定了干酪乳清预处理工艺:CaCl2的加入量为0.28%、pH为6.6~7.0,在此条件下,干酪乳清混浊度(500 nm吸光值)由2.74降低至0.07;通过L9(33)正交试验,得到最佳超滤工艺条件:压力0.21 MPa(30 psi),pH 6.0,V(乳清)∶V(水)=2∶1,在此条件下,超滤膜透水通量为32.66 L/(h.m2),乳糖脱除率为93.13%,蛋白截留率为94.65%。     

多重PCR检测金黄色葡萄球菌六型肠毒素基因的研究

目的:为了建立一种简单、快速检测金黄色葡萄球菌六型肠毒素基因的多重PCR方法。方法:根据相关文献和Genebank报道的编码金黄色葡萄球菌肠毒素A、B、C、D、E、H的基因序列,选择合成了6对特异性引物,建立多重PCR体系,并对反应条件进行了优化。结果:6对引物能同时特异地扩增出120、478、257、319、170、375bp的目的片段,表明6对引物具有良好的特异性。结论:成功地建立了一种同时检测金黄色葡萄球菌六型肠毒素基因的多重PCR方法,在金黄色葡萄球菌肠毒素快速筛查方面具有良好的应用前景。     

鸡胚蛋在孵化期间营养成分变化的研究进展

鸡胚蛋是受精鸡蛋孵化至一定天数后,还未破壳,可食用的鸡蛋。鸡胚蛋在温暖条件下21天即可孵化出小鸡,这意味着鸡胚蛋中含有构成生命体的所有成分。而在孵化过程中,通过多种酶的作用,鸡胚蛋内的营养成分发生了很大变化。近年来国内外对不同孵化期间的鸡胚蛋的营养成分变化情况也有一定的研究,本文对鸡胚蛋在孵化期间的营养成分变化情况进行了综述,包括蛋白质的含量以及转移情况,脂肪以及氨基酸等含量的变化,维生素含量的变化,金属离子含量以及其他一些功能性成分的变化情况等,如免疫球蛋白,牛磺酸含量等。     

酵母菌对发酵乳质构和蛋白的影响

探讨了酵母菌对酸奶蛋白和质构的影响。添加酵母菌没有对酸奶的质构造成显著性的影响,添加酵母菌的样品没有产生更多种类的多肽,但是氨基氮和游离氨基酸质量浓度下降,这可能是酵母菌与乳酸菌之间存在对营养物质竞争利用的原因。     

干酪乳清中乳铁蛋白分离纯化的研究

采用超滤、阳离子交换层析方法从热钙法处理过的干酪乳清中分离纯化乳铁蛋白。结果表明,经预处理后的干酪乳清加入经过磷酸盐缓冲液(pH值为8.0)平衡的树脂中,分别用浓度为0.3 mol/L和0.8 mol/L的NaCl进行阶跃洗脱,所得乳铁蛋白经SDS-PAGE和免疫印迹法(Western Blotting)检测,纯度达93.6%。     

踝臂指数与冠状动脉旋磨术的相关研究

【摘要】 目的 探讨踝臂指数（ABI）在冠状动脉严重钙化旋磨治疗患者中的意义。方法 回顾性分析149例行经皮冠状动脉旋磨（CRA）治疗的不稳定型心绞痛（UA）患者，按ABI检查结果分为ABI正常组（0.9 ≤ ABI ≤ 1.4）96例和ABI降低组（ABI ＜ 0.9）53例，分析患者冠状动脉造影（CAG）及CRA治疗资料。结果 ABI降低组左室射血分数低于ABI正常组；ABI降低组使用平均旋磨头个数、预扩球囊数、后扩球囊数、旋磨血管并发症高于ABI正常组，组间比较差异有统计学意义（P < 0.05）。结论 与ABI正常组相比，ABI降低组的冠状动脉血管腔狭窄程度重，行CRA时，旋磨头、预扩张球囊、后扩张球囊等耗材数量及旋磨血管并发症增加。
     

运用SPE-GC/MS技术分析马克思克鲁维酵母对发酵乳中游离脂肪酸的影响

利用固相萃取及气相色谱质谱联用仪(solid-phase extraction-gas chromatography mass spectrometry,SPEGC/MS)技术,分析以马克思克鲁维酵母菌(Kluyveromyces marxianus)和乳酸菌(Streptococcus thermophilus,ST;Lactobacillus bulgaricus,LB)为混合发酵剂的发酵乳中游离脂肪酸含量变化,并对整个发酵过程进行跟踪监测。结果发现:使用SPE-GC/MS共检测出12种游离脂肪酸,其中短链及中链脂肪酸(C4-C12)有5种,长链饱和脂肪酸(C14-C18)7种,不饱和脂肪酸2种。2种发酵乳中主要的游离脂肪酸为棕榈酸、硬脂酸、肉豆蔻酸、油酸,且随着发酵时间的延长,混菌发酵乳中的含量显著高于双菌发酵乳(P0.001)。在发酵1~6 h范围内,马克思克鲁维酵母菌的添加显著增加了双菌发酵乳中游离脂肪酸的含量(P0.001)。     

乳及乳制品中矿物质元素检测方法的研究进展

乳及乳制品中矿物质元素的种类和含量是评价其营养质量的关键指标,选择出高效、灵敏、快捷的矿物质元素检测方法,在乳及乳制品的科研、生产、贸易等方面显得尤为重要。文章首先讨论乳及乳制品中矿物质元素检测的前处理方法,然后比较乳及乳制品中矿物质元素的检测方法,包括火焰原子吸收光谱法、石墨炉原子吸收光谱法、氢化物原子吸收光谱法、原子荧光光谱法、原子发射光谱法、电感耦合等离子质谱法、免疫分析法、中子活化分析法、伏安溶出法、酶抑制法等方法,最后总结各种方法的优缺点,旨在为乳及乳制品中矿物质元素检测方法的应用、研究和发展提供参考。