三元公司乳品新技术研究最新进展——直投式乳酸菌发酵剂的研究(续)(连载二)

六．菌体富集培养1．乳酸菌富集培养时的特点乳酸菌在富集生长培养的过程中,代谢乳糖产生大量有机酸类,其中主要是乳酸。随着发酵进程的继续,乳酸含量逐渐增加,导致培养基的酸度升高,乳酸菌的繁殖受到抑制甚至死亡,所以普通发酵剂最高菌数一般仅达107-108cfu／ml。     

马克思克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)对发酵乳蛋白、质构的影响

在以保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌为发酵剂的基础上,添加一定比例的马克思克鲁维酵母进行共同发酵,研究其对发酵乳发酵及后熟过程中pH、蛋白含量、各乳蛋白相对含量及质构的影响并研究其相关性,为开发添加马克思克鲁维酵母的新产品提供数据参考。结果表明,酵母能促进发酵乳凝乳,降低凝乳时间、显著降低发酵乳pH;酵母的添加降低了蛋白含量、增加了发酵乳中蛋白的水解情况,并对发酵与后熟过程中蛋白的代谢产生影响,其中对κ-酪蛋白影响显著,除此之外,添加酵母后增加了发酵乳硬度、稠度、黏性等,相关性分析表明,pH、蛋白含量、κ-酪蛋白、β-乳清蛋白、α-乳白蛋白与发酵乳质构具有显著相关性,且添加酵母后相关性增加。     

PCRDGGE技术分析混菌发酵乳中马克斯克鲁维酵母与乳酸菌的相互作用

利用变性梯度凝胶电泳(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis,DGGE)技术,对混菌发酵及贮藏过程中马克斯克鲁维酵母与乳酸菌之间的相互作用进行分析,进而对整个过程中微生物优势菌群及其稳定性进行跟踪监测。结果表明:混菌发酵及贮藏过程中微生物组成比较稳定,优势菌为嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus,ST);发酵过程中,马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)的添加对乳酸菌生长起到促进作用,尤其是对保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus,LB)效果显著,贮藏期间该作用转变为抑制;整个过程乳酸菌的存在对酵母菌的生长具有一定的抑制作用。该研究可为深入探讨乳酸菌与酵母菌共同发酵机理及新型发酵乳制品的开发提供理论基础。     

北京地区奶牛养殖场中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

本研究旨在调查北京某牛场牛乳房炎源大肠杆菌的耐药性,提高药物治疗效率,避免同种药物多次使用造成的耐药性,为该牛场防治大肠杆菌型的乳房炎提供数据支持和乳房炎的临床治疗提供依据。从北京某牛场采集乳样、涂抹样、粪样中分离纯化并鉴定出48株大肠杆菌,并对大肠杆菌分离的菌株进行敏感性分析。结果表明:48株大肠杆菌对24种抗菌药物中的6种药物耐药率超过50%,青霉素、苯唑西林、万古霉素的耐药率甚至达到80%以上,同一菌株最多耐药17种,最少耐药2种,耐药5种以上菌株占到72.92%。研究发现分离的大肠杆菌对多种药物产生不同程度的耐药性,存在着严重的多重耐药情况。     

多重PCR检测原料乳中沙门氏菌、无乳链球菌和金黄色葡萄球菌的研究

目的:建立快速检测沙门氏菌、无乳链球菌和金黄色葡萄球菌的多重PCR方法。方法:根据沙门氏菌(Salmonella)组氨酸转运操纵子基因、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)的STRA-Agl-23-1D基因和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的耐热核酸酶nuc基因分别设计引物,进行PCR扩增及反应条件的优化,建立这3种菌的多重PCR检测方法。结果:通过建立多重PCR方法,3对引物同时特异性地扩增出495 bp、360 bp和279 bp目的片段;3种菌的检测限:沙门氏菌1.9×102 cfu/mL、无乳链球菌2.0×102 cfu/mL、金黄色葡萄球菌2.9×102 cfu/mL;3种菌DNA含量的(最低)检出限分别为3.86、25.5、3.47pg。结论:本文建立的多重PCR检测方法,简单、快速、灵敏度高,具有很好的应用前景。     

母乳中乳铁蛋白含量及影响因素研究

目的了解母乳乳铁蛋白在不同泌乳阶段(乳母分娩后0~5 d、12~14 d、1 m、3 m、4 m)的变化趋势,以及不同分娩方式、BMI、婴儿性别、乳母年龄和孕期健康状况等因素对其含量的影响。方法利用双抗体夹心ELISA法,对0~5 d、12~14 d、1 m、3 m、4 m时的母乳乳铁蛋白含量进行测定。结果从0~5 d到3 m乳铁蛋白含量呈下降趋势,由2.45 mg/mL逐渐降低至2.20 mg/mL,但无显著性差异(P0.05),直到4 m时显著降低至1.02 mg/mL(P0.05)。阴道分娩和剖宫产两组母乳中乳铁蛋白含量在0~5 d、1 m、3 m和4 m时无显著性差异(P0.05),12-14 d时剖宫产组母乳中乳铁蛋白含量显著高于阴道分娩组(P0.05)。孕前、产前和产后不同BMI(≤18,18~25和≥25),不同婴儿性别、不同年龄和不同孕期健康状况的乳母母乳中乳铁蛋白含量均无显著差异(P0.05)。结论母乳乳铁蛋白在初乳、过渡乳和成熟乳中的含量呈下降趋势,不同泌乳阶段和分娩方式影响乳铁蛋白含量。