方斑东风螺配合饲料中硒的添加量研究

选用(2.7±0.15)g的方斑东风螺幼螺900只,随机分到18个养殖箱,共分成6个实验组,每组3个重复。以鱼粉、豆粕为主要蛋白源的基础饲料中,分别添加Na2SeO3 0.00、.2、0.40、.60、.8、1.0 mg/kg,以添加0.0 mg/kg硒的饲料组作为对照组。在自然水温和盐度条件下养殖8周,以研究饲料中硒的添加水平对方斑东风螺生长和软体组织营养成分的影响。结果表明:添加硒的实验组增重率、壳增长率均高于对照组,添加量为0.8 mg/kg时达到最大值(P>0.05),饵料系数达到最小值(P<0.05),各组间成活率无显著差异(P>0.05)。各组之间肥满度也无显著差异,但硒的添加显著影响了软体组织蛋白质、脂肪、灰分、水分和组织硒的含量,添加量0.6 mg/kg组脂肪含量最低,0.8 mg/kg组水分最低、灰分最高。综合生长性能、软体营养成分和实验的实际情况,在饲料中添加0.6~0.8 mg/kg的硒较为适宜。     

番木瓜中6个BG生物合成相关基因荧光定量分析

异硫氰酸苄酯（benzyl isothiocyanate,BITC）是医学界公认的具有防癌抗癌活性的成分,对多种癌症具有很好的作用。BG是BITC的前体物质,可以在芥子酶的作用下水解生成BITC。研究表明,BG在热带水果番木瓜中含量丰富。本研究在克隆了番木瓜中6个相关基因和测定了BG在番木瓜不同组织中含量的基础上,采用实时荧光定量PCR技术,对6个基因在番木瓜不同组织中的表达量进行测定,并与BG的含量进行比较,考察其相关性。结果表明各基因的表达量相对较高时BG的含量也较高,即6个基因在番木瓜中的表达量与BG的含量存在相关性。我们推测,这6个基因可能是番木瓜中BG生物合成相关基因。本文结果为进一步研究基因的功能提供了理论依据。     

原核表达的PRSV HC-Pro 基因同源dsRNA 诱导番木瓜抗性的研究

 利用番木瓜环斑病毒（PRSV）HC-Pro 基因3′端824 bp 区段,通过OZ-LIC 法构建了含有PDK 内含子的发夹RNA 编码结构,并选用pSP73 和M-Jm109LacY 分别作为宿主载体和宿主菌,构建了高效的同源dsRNA 原核表达工程菌M-Jm109LacY/pSP73-RNAi-H824,经IPTG 诱导表达的dsRNA 不被DNase I 和RNase A 降解,稳定性较好。采用喷洒dsRNA 粗制品的方式对番木瓜植株进行保护性处理和治疗性处理,症状观察及ELISA、Real-time RT-PCR 分析结果表明,保护性处理能有效诱发对番木瓜环斑病毒的抗性（发病率低,发病时间晚）;治疗性处理（植株已接种PRSV 25 d）能在处理初期引起番木瓜环斑病毒积累量发生短暂降低。     

番木瓜凝乳蛋白酶基因启动子的克隆及功能研究

 采用 PCR技术从番木瓜品种‘穗中红’克隆了木瓜凝乳蛋白酶基因的部分序列及其5'侧翼序列,构建含有两种长度启动子片段的植物表达载体,并用基因枪轰击番木瓜叶组织和农杆菌转化烟草叶盘。结果表明,克隆产物长719 bp,163 bp 3'侧翼序列与 GenBank中的番木瓜凝乳蛋白酶基因序列同源性为99%,556 bp的 5'侧翼序列有基础启动子区,转录起始位点位于ATG上游38bp的T。序列登录号为 AY803756。预测在启动子区存在 TATA-box、CAAT-box、WUN和HSE等顺式作用元件。两种启动子片段驱动的GUS基因瞬时表达和稳定表达结果表明,该启动子片段具有乳管特异表达活性。     

番木瓜CYP79A2基因片段的克隆与序列分析

苯丙氨酸氮羟化酶是植物中催化异硫氰酸苄酯(BITC)生物合成的第1个酶。笔者以番木瓜嫩叶总RNA反转录得到的cDNA为模板,依据拟南芥(NM-120608)和油菜(EU877074)的CYP79A2基因序列,并结合番木瓜的全基因组序列草图设计引物,进行PCR扩增,得到了大小为923bp的基因片段,命名为CP-CYP79A2。生物信息学分析结果表明,其为番木瓜的CYP79A2基因片段。为进一步研究番木瓜BITC的生物合成调控打下了良好的基础。     

我国番木瓜产业发展的关键问题及对策

针对我国番木瓜产业发展现状和制约我国番木瓜产业发展的关键问题以及现有产业发展研究基础,提出解决我国番木瓜产业发展的措施和途径,为我国番木瓜产业的健康和可持续发展提供决策依据。     

2个番木瓜品种组培苗成苗率研究

[目的]寻找一种针对番木瓜成苗率高、商品苗质量优的育苗技术。[方法]选用番木瓜品种"梭罗"作为试验材料,MS为基本培养基,添加IBA、NAA、KT等生长调节剂,利用正交试验进行生长调节剂不同配比生根培养基组合筛选。[结果]最佳生根调节剂组合:IBA 0.75 mg/L,NAA 0.05 mg/L,KT 0.01 mg/L,其生根率为66.7%,但自育品种"蜜红"并未获得同样的效果。最佳生根水浓度为50 mg/L,其成苗率最高达86.1%。在不考虑时间成本情况下,生根水浸泡时间8 h,成苗率最高达87.5%。[结论]2个番木瓜品种成苗率基本一致。     

番木瓜不同性别基因表达cDNA-AFLP分析

在番木瓜幼苗期,利用cDNA-AFLP技术鉴定植株性别并分析不同植株性别基因表达的差异;通过对差异表达基因进行序列和功能分析,探讨调控番木瓜性别分化的分子机理.结果表明,每次反应扩增获得的稳定条带总数为25～75条,番木瓜3种植株性别基因表达存在明显差异,每种性别植株都有特异性条带,其中雄性株14条、雌性株13条、两性株9条.将获得的部分差异TDFs序列与GenBank数据库中的所有序列进行Blastx和Blastn比对,其中一部分差异片段为未知功能基因序列,另一部分差异片段序列与谷胱甘肽转移酶基因、植物甾醇类激素合成相关基因、分裂原活化蛋白酶基因、与端粒相连的核酸序列、杨树叶中克隆的未知功能基因及拟南芥花和花蕾中克隆的未知功能基因等具有较高的同源性.因此,cDNA-AFLP技术可在幼苗期鉴定番木瓜的植株性别,不同番木瓜植株性别基因的差异表达可能是其植物体一系列功能基因调控植株性别发育及生长发育的综合反应.     

菠萝蜜锈病分级标准及田间病害调查

海南省是菠萝蜜的重要产区之一。自2016年起对海南省11个菠萝蜜规模化种植地区的果园进行了菠萝蜜锈病普查,对发病较严重的5个市县进行了连续两年的固定点监测。结果表明:万宁、定安、澄迈、琼海等地的菠萝蜜锈病发病率极显著高于其他地区;除琼海外,其它市县菠萝蜜果锈病发病率4～6月的均高于9～11月;发病率最高的是2017年五指山,达20.00%,最低的是2018年澄迈,为9.33%;病情指数方面五个监测点2017年均大于2018年。单苞和单果锈病严重度均为5级。综上,4～6月是菠萝蜜锈病发病的高峰期;综合两年比较,各地区的平均发病率与平均病情指数均有所下降,病果数量也在下降。通过提出锈病分级标准,为明确锈病害发生规律,提高防治水平提供参考依据。     

Expansin超级家族的进化与命名

综述了expansin基因家族的命名法和进化研究的最新进展,介绍了expansin超级家族的发现过程和定义,分析了其基因结构和进化状况,详述了expansin这个超级家族成员的命名法则.