体外培养大鼠骨髓间质干细胞的超微结构

[目的]研究体外培养大鼠骨髓间质干细胞的超微结构。[方法]采用常规技术对SD鼠骨髓间质干细胞进行体外培养传代、鉴定、诱导分化和透射电镜分析。[结果]流式细胞仪检测,细胞表达CD29和CD44,不表达CD11b和CD45;经5-氮杂胞苷和两性霉素B诱导分化后结蛋白和肌球蛋白染色阳性。透射电镜观察有巨噬样、内皮样和成纤维样三类基本细胞,巨噬样细胞表面有胞质突起,胞浆含电子密度高的结晶样包涵体;内皮样细胞靠胞膜边有吞饮小泡,胞浆中有电子密度高的内皮特殊小体;成纤维样细胞呈梭形,较幼稚,细胞器简单,有丰富的糖原和核糖体;经诱导分化的肌样细胞胞浆靠胞膜缘可见无细胞器的条状肌丝区带;细胞间存在胞膜局部紧密连接和胞质突起接合。[结论]传代贴壁生长的为骨髓间质干细胞;超微结构分析显示早期幼稚细胞发育的特征,但各有特点;在不同培养条件诱导下,细胞具备向肌肉和脂肪组织分化的潜能。本研究为进一步了解和掌握骨髓间质干细胞的生物学特性和临床应用打下基础。     

稳定表达人BACE1启动子及荧光素酶报告基因HEK293细胞株的建立

目的 对人β位点裂解酶-1(BACE1)基因核心启动子进行克隆,构建携带BACEI基因启动子的荧光素酶报告载体,筛选稳定表达细胞株并分析其转录活性.方法 提取人胚肾HEK293细胞基因组DNA,以其为模板,PCR扩增BACE1核心启动子(-691～+67)并克隆至荧光素酶报告载体pGL4.21中,构建BACE1基因启动子荧光素酶报告载体pGL4.21-BACE1,将其转染HEK293细胞(无启动子的pGL4.21载体作阴性对照),利用嘌呤霉素筛选稳定表达株后检测其转录活性.结果 成功扩增到758 bp的BACE1核心启动子,pGL4.21-BACE1载体经双酶切鉴定正确;HEK293细胞被该载体转染后经嘌呤霉素筛选得到6株稳定表达BACE1启动子的细胞株,其转录活性分别是对照组(HEK293/pGL4.21)的(134.7±22.3)、(634.0±13.9)、(437.6±6.1)、(805.5±5.5)、(492.8±59.1)、(1 021.1±46.6)倍(P=0.001).结论 成功构建了人BACE1基因启动子荧光素酶报告载体.     

普罗雌烯治疗女性绝经后膀胱过度活动症疗效及安全性观察

目的观察普罗雌烯治疗女性绝经后膀胱过度活动症的疗效及安全性。方法将80例女性绝经后膀胱过度活动症患者随机分为观察组与对照组,每组40例。对照组口服小剂量雌激素并配合生活方式调整及行为疗法,观察组在此基础上联合普罗雌烯外用,2组均治疗11周。对比2组尿急、尿频及急迫性尿失禁症状的改善情况,采用膀胱过度活动症症状评分表(OABSS)综合评估症状改善程度,并检测治疗前后血清雌二醇、促卵泡激素(FSH)、子宫内膜厚度及尿动力学相关指标,采用生活质量量表(QOL)评价患者生活质量,统计不良反应发生率。结果治疗后,2组患者24 h排尿次数、夜尿次数、急迫性尿失禁次数、OABSS评分、残余尿量(RUV)、QOL评分均显著降低,且初始尿意容量(VFD)、强烈尿意容量(VSD)、最大尿流率(Q_(max))、最大尿流率逼尿肌压力(PdetQ_(max))显著增加,且观察组上述指标改善情况均明显优于对照组,差异均有统计学意义(P均0.05);2组患者治疗前后雌二醇、FSH及子宫内膜厚度对比差异均无统计学意义(P均0.05),且在正常范围内,不良反应发生率比较差异亦无统计学意义(P0.05)。结论普罗雌烯治疗女性绝经后膀胱过度活动症能取得更佳的症状改善获益,且安全性佳。     

灭活柯萨奇B1病毒在原代培养骨骼肌细胞中促进基因转移 …

研究灭活后的柯萨奇病毒在原代培养骨骼肌细胞中，对报道基因ｐＣＤＮＡ３－ＬａｃＺ转移效率的影响。方法用聚乙二醇沉淀和蔗糖低温超速离心法提纯并用β－丙内酯灭活病毒，将灭活ＣＶＢ１，转铁蛋白聚赖氨和报道基因设计成不同浓度组合，观察肌肉细胞中β－乳糖苷酶染色阳性的细胞数。     

尿流动力学检查在排尿障碍疾病诊治中的应用

目的：评价尿流动力学检查在排尿障碍疾病诊治中的作用。方法：采用Laborie尿流动力学分析仪对54例排尿障碍患者进行尿流动力学检查,并根椐结果分型行相关治疗。结果：根据尿流动力学检查结果分析,33例前列腺增生中有3例合并神经源性膀胱,3例为轻度前列腺增生,6例前列腺术后排尿不畅确诊为逼尿肌无力,其余病例与该检查前诊断相符。治愈24例,有效25例,无效3例,总有效率94%。结论：尿流动力学检查对排尿障碍疾病的诊断分型、治疗具有重要意义。     

高效液相色谱法测定复方罗红霉素片的有关物质

目的建立测定复方罗红霉素片有关物质的高效液相色谱法。方法采用Diamonsil ODS C18柱（250mm×4．6mm,5μm）,以0．067mol／L磷酸二氢铵溶液（用三乙胺调pH至6．5）-乙腈（65：35）为流动相,检测波长210nm,流速1．5mL／min,室温操作,采用不加矫正因子的主成分自身对照法。结果有关物质与主药的分离效果较好（R〉1．5）。结论方法重现性好、操作简单,可用于药品的质量控制。     

膜片钳技术在成年大鼠海马脑片应用的初步研究

目的：制备成年大鼠海马脑片,使其适应于膜片钳全细胞记录,并观察海马锥体神经元的电生理特性。方法：选200 g左右的成年SD大鼠,雌雄不拘,10%水合氯醛腹腔注射麻醉,四肢固定,剪开胸腔,夹闭下腔静脉,以0 ℃切片液进行心脏灌注,断头,取下全脑,置入0 ℃切片液中冰镇3 min,再修块,切片,厚度约350 μm,移入37 ℃预热的人工脑脊液中孵育1 h后,转入23 ℃水浴中孵育30 min备用。倒置相差显微镜和红外微分干涉相差显微镜观察脑片的神经元形态;全细胞膜片钳记录脑片神经元的电生理学特性。结果：海马CA1区神经元光泽度好,立体感强且突起明显;在进行膜片钳全细胞记录时,封接顺利,并且可以记录到电流和动作电位的变化图形。结论：本方法制备的成年大鼠脑片,可以耐受离体后缺血缺氧造成的损伤,保持电生理活性而适应膜片钳全细胞记录模式。     

高血压患者的血压波动

正常人血压一天24h内并非恒定不变,而是存在自发性的变化,这种自发性变化即血压波动性。正常人血压波动呈周期性,且在人体可耐受的适当范围内变化。但部分高血压患者24h内的血压波动变化明显,不仅引起头痛、心悸、胸闷等各种症状,还能诱发心血管疾病的急性发作,临床医师应正确认识和合理处理高血压患者的血压波动问题。     

红斑狼疮在心血管方面的几种临床表现

红班狼疮(SLE)是一种累及全身各器官系统的自身免疫性疾病,心脏是常见受累器官之一。患病率在1/250-1/2000。本病的病理变化,主要是全身性小血管炎症,以致临床表现多种多样,一般不具有特殊性,所以心血管的临床表现被忽视。近来由於医疗技术