利用酵母双杂交技术筛选鉴定STCH与RanBP9的相互作用

以人应激和分子伴侣蛋白(STCH)为诱饵蛋白,利用酵母双杂交技术在高严格条件下筛选人脑cDNA文库。在SD/-4培养基上共获得156个阳性克隆,将酵母菌扩增后抽提质粒,转化大肠杆菌,进行序列分析,并经过回复杂交验证,潜在的与STCH相互作用的蛋白有:VDAC、MBP2、ZNF251、RanBP9、Phosophate glycolase、β-tubulin、up1、up2和WW adaptor蛋白。基于各候选蛋白与神经系统疾病的关系,选择RanBP9作进一步验证实验。经体外GST-Pulldown和体内免疫共沉淀实验证实RanBP9和STCH能够相互作用,明确RanBP9的羧基端为相互作用的最小功能域。此结果为我们进一步揭示STCH作用的分子机制提供了线索。     

肝癌系统治疗中肿瘤超进展研究现状

随着肝癌系统治疗的快速发展,靶向治疗、免疫治疗等系统治疗已广泛应用于不可切除肝癌或交界可切除肝癌的转化治疗。肿瘤的超进展是一种肿瘤加速生长的现象,在接受系统治疗的肝癌等实体瘤病人中均有发生,主要与免疫治疗相关。目前,临床上对肝癌中肿瘤超进展的认识不足,缺乏相关的临床研究,尚无法正确评估肿瘤超进展是否发生及严重程度。     

小剂量胰鸟素治疗糖尿病酮症酸中毒86例临床分析

糖尿病酮症酸中毒 (ＤＫＡ)是由于体内胰岛素缺乏引起的以高血糖、高酮血症和代谢性酸中毒为主要改变的临床综合征 ,是糖尿病的一种急性并发症。现将我院 1995～ 1999年 86例临床治疗体会报告如下 :1　临床资料1.1　一般资料 :86例全部为住院病人 ,男性 52例 ,女性 34例 ,年龄 15～ 72岁 ,平均 4 1 51岁。糖尿症Ⅰ型2 9例 ,Ⅱ型 57例。发病诱因 :①各种感染 61例 (占70 93% ) ;②停减胰岛素 14例 (占 16 2 8% ) ;③饮食失控 3例占 ( 3 4 9% ) ;④精神因素及应激 5例占( 5 81% ) ;⑤不明原因 3例 (占 3 4 9% )。1.2　临床表现及实验室检查 :…     

星形胶质细胞在体内直接重编程为神经元的研究进展

人类神经元几乎不具有再生能力,这也意味着神经元一旦受损或退化,神经系统的自我修复将无计可施。研究发现,星形胶质细胞作为一种广泛分布于中枢神经系统(CNS)中的神经胶质细胞,具备诱导转化为神经元的潜力。事实上,各国研究学者已经成功利用多种技术手段将来源不同的星形胶质细胞重编程为神经元。本文综述了脊髓损伤(SCI)、脑卒中(CS)、帕金森病(PD)、阿尔茨海默病(AD)和亨廷顿病(HD)、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)等神经系统相关疾病中星形胶质细胞直接重编程为功能性神经元的再生策略。     

PCR介导化学合成广谱细胞生长因子基因半分子

目的建立一种通过PCR介导的单链法人工合成基因的新方法.方法采用固相亚磷酰胺法,化学合成广谱细胞生长因子基因5′端半分子各寡核苷酸片段,其间按搭桥方式相接,通过重叠PCR扩增的方法以获得全长半分子基因,再通过带酶切位点的两端引物扩增,以获得大量特异的半分子基因,而后克隆,测序,筛选阳性重组子.结果随机检测4个阳性重组子,有3个序列完全正确,一个有一位点突变.结论 PCR介导的单链化学合成法是一种简单、有效的人工合成基因的新方法.     

人工合成广谱细胞生长因子全基因

目的利用PCR介导的半酶促半化学法人工合成经改造的广谱细胞生长因子基因.方法将基因依据其限制性内切酶切点分为左中右三个区段.化学合成若干寡核苷酸小片段,利用PCR的方法介导寡核苷酸小片段之间的连接.最后将三条基因区段组合为完整的基因.结果各区段及全基因的序列经测定与设计方案完全相符.结论广谱细胞生长因子基因的成功合成为将来的表达与应用研究创造了条件,同时证明PCR介导的人工基因合成法是一种简便快速并且行之有效的人工基因合成的新方法.     

机械通气患者下呼吸道感染抗生素治疗的临床观察

目的：探讨机械通气患者并发下呼吸道感染菌群变化规律，方法：将机械通气患者49例，且通气时间48h以上者，每日查痰培养，隔日照X线胸片，记录痰培养致病菌出现时间规则使用抗生素，直至脱机时的变化规律。结果：以革兰阴性杆菌致病几率为最高，其次为革兰阳性菌、金黄色葡萄球菌及肠球杆菌。发病至气管吸痰细菌培养阳性的时间表明，机械通气〈4d，痰培养阳性率为15％（3例／20例）；5～6d者达50％（4例／8例）；超过7d者，痰培养阳性率100％（n=21）。结论：本观察表明机械通气患者并发下呼吸道感染的防治中，加强呼吸道管理，防止交互感染，合理使用抗生素，对患者的预后是不可忽视的。     

甲羟戊酸对人类肾小球系膜细胞增殖的影响

目的探讨甲羟戊酸(MVA)对人类肾小球系膜细胞(HMC)增殖的作用和机制。方法用酶联免疫检测仪检测不同浓度MVA作用下HMC在490 nm波长处的光吸收(A490 nm)值以测定不同浓度和时间点MVA作用下HMC的增殖水平。结果MVA在10-100 nmol/L范围内对HMC增殖有促进作用,且作用呈浓度依赖性,100 nmol/L MVA作用下A490 nm值从正常组0.408±0.019上升到0.509±0.011。100 nmol/L MVA对HMC的增殖作用在12-48 h内呈时间依赖性。12,24,48 hA490 nm值分别为0.201±0.040,0.326±0.019,0.509±0.011。结论MVA是HMC增殖的促进剂。     

重症急性胰腺炎46例护理体会

目的探讨提高重症急性胰腺炎(SAP)患者抢救成功率的护理体会。方法总结了2001年3月￣2006年1月46例SAP患者的监测和护理。结果本组患者有39例经积极治疗痊愈,2例转化形成胰腺假性囊肿手术后治愈,5例抢救无效死亡。结论促进胃肠道功能恢复,对呼吸、循环、神经系统、肝肾功能等重要脏器进行有效支持,同时控制感染,做好心理护理,能有效提高SAP患者的治愈率。     

高渗盐水支气管激发试验

气道高反应性是哮喘的重要病理生理学特征，药物直接激发试验测定气道高反应性已被广泛应用，多年来在哮喘的诊断中发挥了重要作用。然而药物直接激发测定气道高反应性存在种种不尽人意的地方，近年来国内外有较多文献报道了高渗盐激发试验。为探讨高渗盐激发试验的应用价值，笔者对此作一综述。