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反转录酶合成cDNA常产生不完全的转录产物。为获得全长基因组的cDNA拷贝并提高它在总cDNA中的比例,文献中已提出了一些措施,效果如何尚有争论。我们以人胚肾培养细胞总Poly(A)~ mRNA为模板,参照Maniatis的方法,建立了一个比较简单易行的反转录程序,合成了较长的cDNA拷贝。材料和方法试剂和酶 dATP、dCTP、dGTP、dTTP均为Sigma产品。[~3H]-dTTP(27.2Ci/mmol,0.5mci/ml)上海原子能研究所产品。Oligo(dT)_(12-18),反转录酶(AMVRTase,20BRL单位/μl)为BRL产品。大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ(500单位/0.11ml)为Boehringer产品。SI酶为Sigma产品。其余试剂 相似文献
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等电点聚焦法是分离蛋白质的一项新技术,我们应用这项技术纯化了限制性内切核酸酶BglⅡ。现将具体操作及其结果综述如下。材料和方法 1.菌株 系中国科学院微生物所张静娟同志惠赠. 相似文献
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据文献报告,由球芽孢杆菌(Bacillus globigii)分离纯化限制性内切核酸酶BglⅡ的方法有:离子交换层析法,即通过磷酸纤维素(pll)柱和羟基磷灰石柱二步层析纯化(3),亲合层析法,即通过肝素-琼脂糖凝胶柱层析或汽巴蓝(cibacron blue)-琼脂糖凝胶柱层析纯化(1、2)。我们依据Bickle等人(1977)方法,采用肝素-琼脂糖凝胶层析法纯化了BglⅡ酶。 相似文献
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目的探讨5 000 m越野军训导致多器官功能障碍综合征(MODS)的临床治疗及分折。方法对收治的7例5 000 m越野军训导致MODS的患者采取积极物理降温、扩容、保护脑功能、抗感染、稳定细胞膜、应用抗氧化剂、保护胃黏膜、纠正DIC、营养支持等基础治疗及应用血液灌流(HP)联合连续性静脉—静脉血液滤过(CVVH)治疗。结果 7例患者中3例死亡(均死于MODS),其余4例住院21~25 d痊愈出院。结论 5 000 m越野军训导致MODS患者病情危重,阻断恶性循环是MODS抢救成功的关键,基础治疗及应用HP联合CVVH治疗效果较好。 相似文献
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我们之所以很难体会到本心,是因为日常生活中我们的所作所为大都在牵着我们朝与本心相反的方向走.很多习惯,尤其是心的习惯,让我们一而再、再而三地陷入窘境,比如前面说到的紧张对抗,还有趋利避害、推卸责任、自以为是、太在意自己的方式等等.我们修行便是要以一种温和的方式扭转这些习惯,使自己逐渐摆脱困窘的境地. 相似文献
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为比较分析耐多药结核分枝杆菌(MDR-MTB)对利奈唑胺(Lzd)和特地唑胺(Tzd)的药物敏感性,笔者采取直接抽选法选取2018年1—11月间重庆市公共卫生医疗救治中心中心实验室培养分离并经药物敏感性试验(简称“药敏试验”)鉴定为MDR-MTB的40株菌株,采用微孔板法测定Lzd和Tzd的最低抑菌浓度(MIC),并分析相关结果。结果发现,Lzd对MDR-MTB的MIC的中位数(四分位数)为0.500(0.500,1.000)mg/L,其中87.5%(35/40)的菌株MIC处于0.500~1.000mg/L;Tzd对MDR-MTB的MIC的中位数(四分位数)为0.250(0.250,0.250)mg/L,其中87.5%(35/40)的菌株MIC处于0.125~0.250mg/L。Lzd对MDR-MTB的MIC50和MIC90分别为0.500、1.000mg/L;Tzd对MDR-MTB的MIC50和MIC90均为0.250mg/L。Tzd的MIC明显小于Lzd的MIC,差异有统计学意义(Z=-5.51,P<0.001)。参照比例法药敏试验结果,40株MDR-MTB临床分离株可分为13株MDR-MTB,20株前广泛耐药结核分枝杆菌(pre-XDR-MTB)和7株广泛耐药结核分枝杆菌(XDR-MTB)。Lzd对MDR-MTB、pre-XDR-MTB、XDR-MTB菌株的MIC中位数(四分位数)均为0.500(0.500,1.000)mg/L;Tzd对MDR-MTB、pre-XDR-MTB菌株、XDR-MTB菌株的MIC中位数(四分位数)均为0.250(0.250,0.250)mg/L,差异均无统计学意义(Lzd:H=0.84,P=0.659;Tzd:H=0.59,P=0.746)。 可见,Lzd和Tzd对MDR-MTB菌株均有很好的杀菌效果,Tzd具有较Lzd更好的抗结核效果。 相似文献
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