KIM-1在UUO大鼠肾脏表达的研究

目的探讨KIM-1在UUO大鼠肾脏的表达情况。方法构建单侧输尿管梗阻(UUO)模型获得大鼠肾组织,RT-PCR检测KIM-1mRNA的表达,ELISA法检测尿液中KIM-1的分泌,免疫组织化学SP法检测KIM 1、α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)、波形蛋白(Vimentin)表达以及自动生化分析检测血尿生化指标。结果与假手术组比较,UUO组大鼠肾脏可见KIM-1阳性表达,且具有时间依赖性。UUO大鼠尿液中KIM 1的含量明显增加,具有时间依赖性。结论 KIM-1可以作为一种敏感性和特异性都较高的早期诊断梗阻所致肾小管损伤的标志物,具有临床病理诊断的参考意义。     

用RT-PCR技术检测石蜡包埋组织中的肠道病毒RNA

目的:应用逆转录PCR技术(RT-PCR)在石蜡包埋的心肌组织切片中检测肠道病毒(柯萨奇病毒B3,CVB3)RNA.方法:用Trizol法从石蜡包埋的心肌组织切片中提取CVB3RNA,用适当的引物合成cDNA第一链,从中取出适量进行聚合酶链反应(PCR).PCR结果用琼脂糖凝胶电泳检测并将PCR产物做核苷酸序列分析.阳性对照采用CVB3感染的人羊膜细胞.结果:用RT-PCR技术可扩增出一条约500 bp(540 bp)的核苷酸片段,测序结果表明是CVB3的一个片段.结论:RT-PCR技术应用于长期保存的石蜡包埋的组织切片进行肠道病毒的检测可获得较满意结果,可将RT-PCR技术用于回顾性研究.     

应用组织芯片研究CD4v9 mRNA在乳腺癌中的表达及与Ki-67相关性

目的:探讨CD44v9 mRNA和Ki-67在乳腺癌中表达的关系.方法:应用组织芯片分别结合原位杂交和免疫组化方法检测乳腺癌中CD44v9mRNA和Ki-67的表达.结果:乳腺癌组织CD44v9mRNA和Ki-67表达水平明显高于正常乳腺组织(P<0.05).乳腺癌组织中CD44v9 mRNA的表达与淋巴结转移、远处转移具有显著相关性,Ki-67的表达与组织病理分级、淋巴结转移均有显著相关性.它们的表达与肿瘤大小、年龄等无关(P>0.05).两者表达成正相关(r=0.367,P<0.01).结论:CD44v9 mRNA和Ki-67与乳腺癌的恶性生物学行为密切相关,可作为预测肿瘤转移潜能的指标.组织芯片技术是病理学研究的一种新方法,具有高效、简便及标准化的特点.     

流式细胞免疫表型分析在淋巴瘤诊断中的应用

流式细胞术发明于20世纪70年代，近年来在淋巴造血系统肿瘤的诊治应用中优势显著。2001年更新的WHO淋巴瘤分类标准依据形态学、免疫学表型、临床特征以及分子遗传学异常而界定的分类诊治体系中，进一步确立了应用免疫表型鉴定在淋巴瘤分类诊断中的重要地位。流式细胞免疫表型（flow cytometric inmmnophenotyping，FCI）检测以其快捷、敏感及多参数定量分析等优点已成为目前国际上恶性淋巴瘤分类诊断的重要手段，并在淋巴瘤的治疗和提示预后方面发挥重要作用。     

石蜡包埋组织切片原位核酸杂交研究

目的 :探讨石蜡包埋组织切片的原位核酸杂交方法 ,以检测克山病 ( KSD)尸检心肌中的RNA。方法 :应用生物素标记的人工合成寡核苷酸探针 ,对 72例心肌石蜡包埋组织切片进行原位核酸杂交。结果 :各型克山病心肌石蜡组织切片的阳性杂交信号为 80 %～ 87.9% ,而正常对照仅为 14.3%。结论 :应用人工合成寡核苷酸之原位核酸杂交技术 ,对长期保存的石蜡组织进行回顾性研究是可行的。     

乳腺癌和腋窝淋巴结转移癌组织中COX-2的表达及意义

目的：研究环氧化酶-2（COX-2）在乳腺癌原发灶和腋窝淋巴结转移灶中的表达并探讨其临床意义。方法：应用免疫组织化学S-P法检测9例癌旁正常乳腺组织、50例乳腺癌原发灶、19例腋窝阳性淋巴结和31例腋窝阴性淋巴结中COX-2的表达。结果：在乳腺癌原发灶和腋窝淋巴结转移灶中COX-2呈阳性表达,棕黄色颗粒弥漫分布于癌细胞的细胞浆内,在正常乳腺组织中棕黄色颗粒弥漫分布于间质细胞中,在非转移淋巴结棕黄色颗粒弥漫分布于淋巴结部分巨噬细胞的细胞浆内。COX-2在正常乳腺组织、原发癌组织、腋窝阳性淋巴结和腋窝阴性淋巴结中的阳性表达率分别为11.1%、60.0%、84.2%和32.3%,正常乳腺组织、原发癌组织、腋窝阳性淋巴结三者间COX-2的表达率比较差异有显著性(P<0.01),阴性淋巴结（32.3%）与阳性淋巴结（84.2%）之间COX-2的表达差异有显著性(P<0.001)。COX-2在淋巴结阳性原发癌组织（84.2%）和淋巴结阴性原发癌组织（45.2%）中的表达率比较差异有显著性(P<0.01)。结论： COX-2阳性表达的患者可能易发生乳腺癌腋窝淋巴结转移。     

肾小管损伤动物模型方法探讨

急、慢性肾脏疾病是临床常见疾病,常伴随较高的死亡率。由于肾小管对缺血、药物毒性等各种刺激均特别敏感,使得肾小管的损伤成为急、慢性肾脏疾病的主要特征之一。在防治急、慢性肾脏疾病的实验研究中,合格的动物模型建立是实验研究成功的基础和关键。现就肾小管损伤模型建立的方法作一综述。     

氟中毒大鼠肝细胞凋亡研究

目的研究氟化物对肝细胞凋亡的影响。方法用偏食饲料、饮水加氟化钠１００ｍｇ／Ｌ或同时加碳酸钙３２００ｍｇ／ｋｇ饲料喂饲大鼠２个月,用流式细胞术检测肝细胞凋亡小体百分率,同时检测了谷胱苷肽过氧化物酶活性和脂质过氧化物含量。结果发现氟中毒组大鼠肝细胞凋亡小体百分率较对照组明显升高（Ｐ＝０．０１～０．０５）,加钙可使这种改变更为明显（Ｐ＜０．０１）;而ＧＳＨ－ｐｘ活性则明显降低。结论氟化物的毒性可导致肝细胞凋亡,对机体抗氧化能力的降低可能起一定作用。     

儿童近视调节功能训练的有效性研究

目的探讨儿童近视经调节功能训练和用眼干预措施指导后近视调节功能的改善情况。方法选取2012年11月至2013年11月本院收治的近视患儿60例作为研究对象,所有患儿均进行3个月双眼调节功能训练并给予用眼干预措施指导,观察治疗后患儿近视调节功能的改善情况。结果治疗后患儿双眼调节灵敏度、调节幅度、正相对调节均得到明显改善,与治疗前比较差异均具有显著性(P<0.05),治疗后负相对调节较治疗前略有提升,但差异无显著性(P>0.05)。结论近视调节功能训练和用眼干预指导可明显改善近视患儿双眼调节功能,缓解近视进展,因此进行有效的近视调节功能训练和给予相应用眼干预指导措施势在必行。     

补阳还五汤加水蛭对脑梗死大鼠学习记忆能力和神经元自噬的影响＊

目的 探讨补阳还五汤加入水蛭对脑梗死大鼠学习记忆及自噬相关蛋白Beclin 1和LC3-Ⅱ表达的影响。方法 采用颈动脉注射微栓子的方法制备大鼠脑梗死模型，筛选模型后随机分为模型组、补阳还五汤加水蛭低、中、高剂量组、补阳还五汤原方组，另设假手术组。分组后连续14天各组灌胃给予相应药物治疗。巴恩斯迷宫观察进入目标洞的潜伏期和探究非目标洞的错误次数，苏木素-伊红（HE）染色观察脑梗死边缘区组织形态及细胞结构变化；免疫组化定性检测Beclin 1、LC3-Ⅱ蛋白表达，免疫蛋白印迹法（Western blot）半定量检测Beclin 1、LC3-Ⅱ的表达。结果 巴恩斯结果显示，与假手术组比较，模型组到达目标洞的潜伏期明显延长，进入错误洞的次数增加；与经过模型手术的实验鼠相比，补阳还五汤加水蛭低、中、高、补阳还五汤原方组治疗的大鼠成功进入目标洞的潜伏期显著缩短；进入错误洞的次数分别减少。HE染色显示，梗死边缘区脑组织损伤明显，海马区神经元密度显著减少，残存神经元出现核固缩、噬伊红现象。免疫组化显示，经过模型手术的脑梗死致模大鼠海马神经细胞中Beclin 1、LC3-Ⅱ与假手术组相比，棕黄色颗粒呈现高表达状态，补阳还五汤加水蛭低、中、补阳还五汤原方组药物治疗组Beclin 1棕黄色颗粒呈现阳性表达显著降低，补阳还五汤加水蛭低、中、高、补阳还五汤组LC3-Ⅱ棕黄色颗粒呈现阳性表达比模型组明显减弱。免疫蛋白印迹结果呈现，与假手术组比经造模手术大鼠脑组织中Beclin 1和LC3-Ⅱ蛋白含量显著升高。与模型组相比，补阳还五汤加水蛭各治疗组及原方药物治疗组Beclin 1含量显著下降，LC3-Ⅱ的含有量明显下降。结论 补阳还五汤加水蛭可通过下调脑梗死大鼠脑组织内LC3-Ⅱ和Beclin 1蛋白表达，抑制脑组织受损后激活的自噬过度，降低脑梗死体积，改善大鼠因脑梗而带来的学习记忆等障碍，逐瘀的治疗作用也优于补阳还五汤原方，对脑神经功能有维持及保护作用