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目的克隆西尼罗病毒(WNV)前膜蛋白(prM)基因,将其在果蝇细胞(S2)中表达,为制备研制诊断试剂所需的单克隆抗体奠定基础。方法以质粒WNV-CME为模板,PCR扩增获得prM基因,与T载体连接,测序正确后酶切,酶切产物与果蝇表达载体pMT/Bip/V5-HisC重组,重组质粒与pCoBlas共转染果蝇S2细胞,25μg/ml Blasticidin筛选获得抗性细胞,500μmol/L CuSO4溶液诱导表达,72h后收集细胞与细胞上清进行Western blot鉴定。结果酶切与测序结果表明成功构建重组表达载体WNV-prM-pMT,Western blot显示目的蛋白在果蝇细胞S2内稳定表达。结论在果蝇S2细胞内成功地稳定表达WNV prM蛋白,为下一步WNV单克隆抗体的制备奠定了实验基础。 相似文献
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制备了针对西尼罗河病毒preM/EⅢ融合蛋白特异性单克隆抗体,并分析了其在临床检测中的应用价值。方法 采用原核表达系统表达西尼罗河病毒preM/E融合蛋白,作为抗原,免疫BALB/c小鼠,按常规单克隆抗体技术将免疫后小鼠脾细胞与SP2/0 细胞融合,采用有限稀释法筛选能稳定分泌抗preM/EⅢ单抗的杂交瘤细胞株。接种杂交瘤细胞于小鼠腹腔,抽取腹水纯化单克隆抗体。采用间接ELISA和Western blot对抗体特异性和效价进行分析,并对临床样本进行检测。结果 获得了1株能稳定分泌preM/EⅢ蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为ME1。纯化后抗体效价为10-6,其亚类为IgG1。ME1单抗均能与西尼罗病毒preM/EⅢ蛋白以及西尼罗病毒发生特异性反应,而与日本脑炎病毒(JEV)、圣路易斯脑炎病毒(SLEV)、黄热病毒(YFV)和登革热病毒(DENV)无交叉反应。临床诊断准确率为97.78%。结论 ME1单克隆抗体具有较高的特异性,临床诊断准确性较高,具有临床应用价值。 相似文献
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目的:观察肌电诱发的神经肌肉电刺激疗法在脑卒中肩关节半脱位中的临床疗效。方法:脑卒中肩关节半脱位患者60例,随机分为A、B、C组各20例。3组均给予常规康复治疗,B组加用神经肌肉电刺激疗法,C组加用肌电诱发的神经肌肉电刺激疗法。治疗前后分别采用双侧肩关节X线片及肩关节指诊评价复位情况;采用运动功能评定量表(FMA)中上肢部分评定上肢功能恢复情况。结果:治疗6周后,C组复位率明显高于A、B组(45%、15%、25%,P<0.05);3组FMA的分值均较治疗前明显提高,C组更高于A、B组(P<0.05)。结论:肌电诱发的神经肌肉电刺激治疗脑卒中肩关节半脱位优于单纯常规治疗方法和神经肌肉电刺激疗法。 相似文献
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超声诊断在产科中的应用有较多的报道 ,且已为临床医师所承认。但应用超声诊断胎位异常中的面先露却报道较少。本文自1990年6月~2000年6月共遇到4例,均经临床证实。现报告如下。临床资料一、一般资料4例孕妇临产时在我院作B超检查 ,其中年龄最大的35岁 ,最小的23岁 ,均为初产妇。二、方法采用AIOK -SSD -630超声诊断仪 ,探头频率为3.5mHz。受检查取仰卧位 ,首先找到胎头 ,确定胎位 ,并进行胎头的常规测量与观察 ,然后以胎头为起点 ,进行胎儿颅骨的纵断检查 ,顺着顶部下移 ,连续观察脊柱各节段 ,并注意胎… 相似文献
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目的对减数矫治病例拔牙间隙关闭后牙龈折痕的影响因素进行研究。方法回顾性分析于2009年12月~2012年12月在我院拔除前磨牙行方丝弓固定矫治的132例患者的临床资料,采用单因素和Logistic多因素回归分析拔牙间隙关闭后牙龈折痕的影响因素。结果 132例患者中共发生牙龈折痕31例,牙龈折痕发生率为23.5%;不同性别、年龄和关闭间隙时间患者的牙龈折痕发生率无显著差异(P>0.05);关闭间隙距离≥1 mm以上者牙龈折痕发生率明显高于<1 mm者(P<0.05),下颌牙龈折痕发生率明显高于上颌(P<0.05);Logistic多因素回归分析显示,关闭间隙距离和部位是减数矫治病例拔牙间隙关闭后牙龈折痕的主要影响因素(P<0.05)。结论减数矫治病例拔牙间隙的距离是影响牙龈折痕的主要因素,且下颌更易产生牙龈折痕。 相似文献
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甲状腺结节细针穿刺细胞学检查影响涂片质量因素探讨 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨甲状腺结节细针穿刺术涂片不满意的常见原因,提高超声引导下甲状腺结节细针穿刺术的有效细胞抽取量及涂片质量.方法 对37例68张高频超声引导下甲状腺细针穿刺活检(US-FNAB)术病理诊断为涂片不满意的病例进行回顾性分析、总结其结节声像图特点.分析US-FNAB操作方式及涂片方法对涂片质量的影响.结果 涂片为大量红细胞干扰29例,其中23例声像图表现为结节血供丰富,2例为甲状腺整体血流信号丰富,4例结节和甲状腺血流信号正常.6例涂片太厚,其声像图均含微小强回声点.1例无明显细胞成分,1例操作原因导致取材失败.结论 多种因素可导致US-FNAB术病理诊断涂片不满意,血液污染是最主要的原因之一,完善技术细节可以提高US-FNAB术病理诊断满意度. 相似文献
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陈丽丹 《浙江中西医结合杂志》2020,30(8)
正脓毒症是由于机体出现病原体感染后所引发的全身炎症反应综合征,可对机体多器官功能造成损伤,严重影响患者临床预后[1-2]。急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)是脓毒症患者中常见的一种并发症,具有着较高的病死率。研究显示,早期有效的治疗干预措施可延缓疾病进程而有助于患者临床预后的改善[3]。连续性肾替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT)已经成为目前脓毒症合并AKI患者临床治疗的主要手段之一[4]。而前列腺素E1可有效改善患者肾功能,减少蛋白尿而保护残余肾功能,从而延缓肾脏病进展[5]。为进一步提高脓毒症 相似文献
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目的:为了研究大肠杆菌ibeA的有效表达方法。方法:通过PCR扩增得到大量ibeA基因,并将扩增后的ibeA蛋白基因插入pGEX载体,转化E.coliDH5α,得到ibeADNA重组子的克隆。并以包涵体和可溶形式获得大量表达。结果:亲和层析纯化后获得了大量纯化蛋白,所获得的ibeA蛋白具有良好的抗原性。结论:该方法为进一步研究ibeA介导E.coli穿入血脑屏障的机理,以及筛选ibeA侵袭素的拮抗剂奠定了基础。 相似文献