生化项目复检规则合理性的评价

为提高检测结果准确性,实验室按照一定的规则对标本进行复检.但是检测结果重复测定会延长结果报告临床的时间,增加检测成本,浪费人力资源,因此近年来其实际使用价值受到质疑.2009年,有文献[1]报道危急值复检并不能提高检测结果准确性,相反有可能延误了重要检测结果报告临床的时间.     

国产乙型肝炎病毒表面抗原酶联免疫吸附试验试剂盒的检测效果评价

目的:评价6种国产乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒的检测效果。方法:应用AXSYM全自动微粒子酶免疫化学发光分析仪检测测定后余留标本,对相关样品进行稀释,然后选取6种国产HBsAgELISA试剂盒进行检测,评价6种国产试剂盒的灵敏度、精密度、特异度、检测范围和钩状效应(Hook效应),确立临界值(cut-off)对应的浓度范围以及不同孵育时间对检测灵敏度的影响等。结果:6种试剂盒的灵敏度有一定差异,范围在0.40～0.60ng/mL之间。对低浓度标本,6种试剂盒的批内精密度变异系数(CV)分别为6.21%、9.45%、9.42%、13.04%、10.49%和4.84%;批间精密度CV分别为15.76%、19.12%、19.54%、23.89%、24.22%和14.99%。HBsAg质量浓度与临界值指数(COI)呈S型曲线关系。在本实验所分析的HBsAg浓度范围内未发现高剂量Hook效应。6种试剂盒临界值对应的质量浓度在0.3～0.5ng/mL之间。结论:国产HBsAgELISA试剂盒的灵敏度有待进一步提高。     

血清胆红素不同检测方法的评价

目的评价临床上最为常用的3种胆红素检测方法。方法使用罗氏、强生、和光3种胆红素试剂对58份新鲜患者血清做相关性分析。使用3种试剂分别检测梗阻性黄疸患者术前及术后的血清样本,并比较检测结果。结果3种试剂对总胆红素（TBil）检测的结果相关性较好,强生、和光与罗氏试剂的相关系数（r）分别为0．99、0．98,和光与罗氏试剂对直接胆红素（DBil）检测结果的r为0．99;强生试剂检测结合胆红素（Bc）／TBil比值在梗阻性黄疸成功解除梗阻后迅速下降,下降趋势较罗氏、和光试剂检测结果更为明显。结论罗氏、强生、和光3种胆红素试剂由于方法不同,其对胆红素的检测结果有一定的差异。强生试剂测定Bc更能准确反映梗阻性黄疸的疗效观察。     

血清胆红素不同检测方法的评价

目的评价临床上最为常用的3种胆红素检测方法。方法使用罗氏、强生、和光3种胆红素试剂对58份新鲜患者血清做相关性分析。使用3种试剂分别检测梗阻性黄疸患者术前及术后的血清样本,并比较检测结果。结果3种试剂对总胆红素(TBil)检测的结果相关性较好,强生、和光与罗氏试剂的相关系数(r)分别为0.99、0.98,和光与罗氏试剂对直接胆红素(DBil)检测结果的r为0.99;强生试剂检测结合胆红素(Bc)/TBil比值在梗阻性黄疸成功解除梗阻后迅速下降,下降趋势较罗氏、和光试剂检测结果更为明显。结论罗氏、强生、和光3种胆红素试剂由于方法不同,其对胆红素的检测结果有一定的差异。强生试剂测定Bc更能准确反映梗阻性黄疸的疗效观察。     

C5L2表达与肝癌患者预后分析

 目的  探讨C5L2表达在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma ,HCC)患者预后判断中的价值。方法  回顾性分析2012年10月至2013年9月在复旦大学附属中山医院接受根治性切除术的175例原发性HCC患者。研究C5L2表达与临床基本参数之间的关系,运用COX回归模型分析各临床参数对术后复发的影响,通过Kaplan-Meier法评估C5L2和AFP联合应用的预后判断效能。在5种肝癌细胞系中检测C5L2表达,筛选Hep3B和Huh7分别对C5L2进行下调和上调,检测细胞侵袭迁移能力的改变并初步探索其机制。 结果  C5L2表达与性别、肿瘤大小和复发相关,C5L2低表达患者复发率更高,多因素分析显示C5L2低表达是肝癌复发的独立危险因素,C5L2和AFP联合应用可以更加有效地判断肝癌预后。在Hep3B中敲除C5L2可促进细胞侵袭迁移,伴随β-catenin和MMP2表达上调;相反,在Huh7中过表达C5L2可抑制细胞侵袭迁移,伴随β-catenin和MMP2表达下调。结论  C5L2可作为判断肝癌预后的辅助指标,帮助临床制定更有效的HCC治疗和监测方案。     

液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测血浆肾素活性(PRA)的方法学建立和临床应用评估

 目的    建立高血压患者血浆肾素活性(plasma renin activity,PRA)液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)的检测方法,用于早期筛查高血压患者中的原发性醛固酮增多症(primary aldosteronism,PA)。方法    arginine 13C 15N作为内标,采用Phenomenex Kinetex C18柱(2.6 μm,100 mm×3.0 mm)进行分离,柱温55 ℃。流动相为0.2%甲醇水溶液和0.2%甲酸甲醇溶液,流速为0.5 mL/min,梯度洗脱。考察该方法的特异性、基质效应、携带污染、重复性、定量下限(lower limit of measuring interval,LLMI)、线性、不精密度、回收率、稀释一致性和血浆标本稳定性。采用LC-MS/MS方法测定296名表面健康人群(男性153名,女性143名,平均年龄48岁)及360名高血压患者(平均年龄52岁,确诊为PA 27例)的血浆样本PRA,并与放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)进行比较。结果    该方法通过了特异性、基质效应、携带污染、重复性的性能评价。PRA的检测线性范围为0.084 4～30.000 0 ng/mL;PRA的LLMI为0.084 4 ngmL-1h-1;日间和批内的不精密度变异系数(coefficient of variation,CV)均＜15%;准确度偏差均<15%,回收率为92.28%～102.62%;建立的生物参考区间为0.25～5.12 ngmL-1h-1 (立位);与RIA比较,结果相关性较好(r2=0.81,P＜0.05),但存在-18.5%的偏倚;LC-MS/MS所得PRA的醛固酮/肾素活性比值(aldosterone to renin ratio,ARR)对PA的诊断特异性与灵敏度分别为96.3%与91.0%,诊断性能更佳(AUC:0.983 vs.0.894)。结论    我们建立了准确检测PRA的LC-MS/MS方法,适合于临床早期快速筛查PA。     

临时新型冠状病毒核酸实验室核酸污染监测及生物安全风险评估

目的对某新型冠状病毒定点医院临时新型冠状病毒核酸实验室进行核酸污染监测及生物安全风险评估。方法于2022年3月14日至5月16日每周一对某新型冠状病毒定点医院临时新型冠状病毒核酸实验室实验过程中以及消毒后各高风险实验活动区域及实验室工作人员防护物品表面进行新型冠状病毒核酸采样, 采用实时荧光定量PCR技术对样本进行检测。结果各高风险实验活动区域及实验室工作人员防护物品表面共40处采样点采集760份样本。样本处理区有8个采样点检出阳性, 阳性率为27%(27/100), 其中以生物安全柜、转运箱外表面和编号样本架阳性检出率最高, 分别为5/10、4/10和6/10。核酸检测区有7个采样点检出阳性, 全部出现在PCR综合实验间, 阳性率为7.1%(10/140), 其中以样本传递窗和核酸检测区门把手阳性检出率最高, 均为4/20。来自样本处理区的阳性样本靶基因Ct值显著高于核酸检测区。实验人员防护物品表面的检出阳性率为20%(16/80), 部分实验人员在实验过程中外层手套阳性检出率最高可达9/10。消毒后新型冠状病毒核酸实验室各区域及实验人员防护物品表面的核酸残留能够被有效清除。结论实验...     

关注心血管代谢领域检验医学的研究与发展

代谢性心血管病主要是指由于代谢危险因素累积造成的心血管疾病, 包括高血压、糖尿病、血脂异常、冠心病、卒中等, 在我国这类疾病发病率不断上升, 且呈年轻化的趋势。不断探索新型生物标志物与检测新方法, 规范检验技术, 加强临床和检验沟通合作, 培养跨学科人才是推进心血管代谢领域检验医学发展的工作重点。     

亲和层析法分离纯化人心肌肌钙蛋白Ⅰ

目的从人心肌组织提取纯化心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)。方法采用离子交换层析和疏水层析从兔骨骼肌中提纯肌钙蛋白C(TnC),制备连接有TnC的亲和层析介质,通过亲和层析法从人心肌组织中直接提纯cTnI。纯化的cTnI采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法进行鉴定。结果从10 g人心肌组织中共提纯2.44 mg cTnI,SDS-PAGE图上显示为单一条带,表观相对分子质量约为29000。免疫印迹法结果表明cTnI单克隆抗体能够特异性识别提纯的cTnI,纯化的cTnI SDS-PAGE和免疫印迹法结果均与商品化cTnI结果一致。结论具有免疫活性的天然cTnI的获取有助于急性心肌梗死诊断试剂盒的研制。     

2007至2010年检验不合格标本分析

目的 分析如何控制和降低不合格标本量,以确保分析前质量.方法 回顾性分析2007至2010年复旦大学附属中山医院检验科收到的住院患者血液不合格标本40 035份及2010年收到的住院患者体液不合格标本,包括尿液不合格标本162份及粪便不合格标本167份.以不合格率描述不合格标本情况.采用Pearson x2检验比较不同种类的抗凝管发生标本凝块的风险.结果 注射器-玻璃管、硅化塑料管加自配抗凝剂采集标本的不合格率远高于真空采血系统(不合格率分别为11.58％和1.33％)；2007至2010年真空采血系统采集标本的不合格率分别为13.29‰、1.49‰、0.76‰及0.52‰,呈逐年下降趋势；不合格的3大主要原因为标本凝块、标本量少及标本类型错误,其中标本凝块又以柠檬酸钠抗凝管最常见(x2=202.3,P=0.000)；体液不合格标本以粪便标本无标本为主,通过改用透明容器后不合格率由原先的2.0‰以上下降至1.5‰以下.结论 检验科应建立控制标本不合格率的制度,并通过不断分析及与临床医护人员的沟通交流,有效降低标本不合格率,确保分析前质量.