高氧暴露早产大鼠肺组织线粒体蛋白质组学初步研究以及ND4动态表达

目的 初步分析高氧暴露下早产大鼠肺组织线粒体蛋白质表达谱的改变,并对还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位4(ND4)的动态表达进行研究.方法 建立高氧暴露早产大鼠动物模型,采用双向电泳检测线粒体蛋白质差异性表达,运用RT-PCR和Western blot方法分别检测ND4 mRNA及其蛋白表达.结果 与空气组比较,高氧暴露4 d导致46种肺组织线粒体蛋白质出现差异性表达;高氧暴露1、4和7 d,早产大鼠肺组织ND4 mRNA和蛋白表达均较空气对照组显著降低(均P＜0.01),10 d时,差异则无显著性意义(P＞0.05).结论 高氧暴露导致肺细胞线粒体(包括呼吸链)功能状态改变可能是促使肺损伤发生发展的重要因素.     

女性性工作者感染艾滋病相关危险因素和行为特征研究

目的了解各类娱乐场所女性性工作者艾滋病知识知晓率、艾滋病相关危险因素和危险行为特征，为下一步开展娱乐场所高危人群行为干预提供可靠信息。方法采用分层抽样方法，在北京市A区（近郊）和B区（远郊）随机抽取调查对象，进行面对面问卷调查。结果共调查177名研究对象，艾滋病基本知识的知晓率为78．2％。最近一次与客人发生性行为时70．6％使用了安全套；最近一个月发生商业性行为时12．4％从未使用安全套、29．9％有时使用、53．1％每次都用。最近一周平均接待3个客人。结论娱乐场所女性性工作者存在艾滋病感染相关危险行为特征，应加强艾滋病的宣传教育和行为干预。     

北京市医疗卫生机构HIV抗体检测结果分析

目的调查北京市不同地区、不同级别医疗卫生机构HIV抗体筛查情况；了解HIV抗体筛查工作现状、资源分布特点；掌握目前不同地区、不同类型医疗卫生机构HIV抗体筛查人群分布及阳性率特点。方法分层抽样抽取不同地区、级别医疗卫生机构作为调查对象，收集HIV抗体筛查的人群、科室分布情况及阳性率情况。使用Excel电子表格进行数据录入，SPSS11．5软件进行数据分析。既往资料查阅历史记录。结果共抽取4个区，19家具有HIV初筛实验室资质的医疗卫生机构。其中城区9家，近郊区10家。2005年7月-2006年6月共进行HIV抗体筛查86277份，检出HIV／AIDS205例，总检出率0．24％。其中男性阳性率0．37％；女性阳性率0．12％。皮肤性病门诊1．13％；感染科0．76％；其他科室0．06％；妇科0．02％；外科0．005％；不详科室检出率为0．014％。城近郊区0．46％，高于城区0．14％，传染病专科医院1．24％、疾控中心1．45％高于综合医院0．01％。检出HIV／AIDS162例，总检出率0．26％。男性HIV抗体阳性率较女性高；30-40岁年龄组检测阳性率较其他年龄组高；近郊区检测阳性率高于城区；检出率最高的科室为皮肤性病科，阳性率为1．1％，高于既往同类人群检测阳性率。结论医疗机构就诊者HIV抗体阳性率总体上处于低水平；目前医疗卫生机构因职业暴露导致HIV感染的风险较小；通过介入性治疗导致HIV院内交叉感染的风险较小；高危人群人仍是当前HIV抗体筛查的重点人群。     

高浓度氧对早产大鼠肺组织中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位1表达的影响

目的探讨高浓度氧暴露对早产大鼠肺组织中还原型烟酰胺腺嘌岭二核苷酸脱氢酶亚单位1（ND1）表达的影响。方法早产SD新生大鼠生后1d随机分为高氧组和空气组，高氧组持续暴露于≥85％氧气中，空气组置于同一室内常压空气中。分别取两组大鼠高氧或空气暴露后1、4、7、10和14d肺组织标本，采用免疫组织化学和Western blot方法检测ND1蛋白的表达，半定量逆转录聚合酶链反应（RT-peR）检测ND1 mRNA的表达。结果①高氧组和空气组各时间点均有ND1蛋白表达；与空气组相比，高氧组在1、4和7dND1蛋白表达增高，随后其表达下降。②与同时间点空气组相比，高氧暴露后1、4和7dND1 mRNA表达显著增高（P〈0．05），其后ND1 mRNA表达逐渐下降，10d和14d时低于空气组，但两者相比差异无显著性意义（P〉0．05）。③ND1蛋白的表达变化趋势与ND1 mRNA的表达变化趋势一致。结论高氧导致早产大鼠肺组织ND1表达改变，提示ND1可能参与了高氧肺损伤的病理生理过程。     

γ泌肽酶抑制剂对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞Notch信号通路的影响

目的 探讨γ泌肽酶抑制剂在肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)与肺成纤维细胞(LF)共培养胎鼠模型中对Notch信号分子表达的影响.方法 应用Millipore插入式培养皿和Costar 6孔板构建AEC Ⅱ/LF共培养胎鼠模型.应用免疫组织化学法分别检测其细胞表面标志物表面活性蛋白C(SP-C)鉴定AEC Ⅱ、LF.锥虫蓝拒染实验检测AECⅡ、LF活力后将γ泌肽酶抑制剂加入最低必需培养基(MEM)(终质量浓度为0.2 g/L)作为实验组,未加入者为对照组.应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)在基因和蛋白水平检测二组在培养24、48、72、96 h AECⅡNotch受体、转录调节因子DNA结合蛋白(CBF-1)及转录因子分裂增强子(HES-1)表达.采用SPSS 11.5软件进行组间t检验和组内单因素方差分析.结果 原代培养AECⅡ纯度(94.7 ±1.9)%,细胞活力为(96.2 ±2.5)%;LF纯度(97.2±1.4)%,细胞活力为(98.5 ±2.6)%.实验组CBF-1 mRNA及CBF-1蛋白在24、48、72、96 h与对照组比较均无显著变化(Pa＞0.05),实验组Notchl mRNA在24、48、96 h,Notch3 mRNA在48、72、96 h较对照组均显著降低(Pa＜0.05),HES-1 mRNA及蛋白在各时间点均显著降低(Pa＜0.05,0.01).结论 γ泌肽酶抑制剂可部分阻断胎鼠AEC Ⅱ发育中的Notch信号通路传导,其机制可能通过非CBF-1依赖途径.     

北京市社区美沙酮维持治疗者治疗保持情况及其影响因素的随访研究

目的 了解北京市社区美沙酮维持治疗(MMT)者的长期治疗情况及其影响因素.方法 采用前瞻性队列研究设计,对2004-2006年参加MMT的548名治疗者进行随访研究.采用Log-rank法及Cox比例风险模型对长期治疗情况及其影响因素进行分析.结果 548名研究对象中男性(79.6%)、汉族(94.0%)、无业或待业(80.8%)为主,平均年龄(37.3±6.7)岁,吸毒时间为(9.1±4.0)年,参加治疗前6个月以注射吸毒为主(81.9%).MMT治疗时间中位数为2.1年,随访终点时保持率为41.2%.不同剂量组(Log-rank x2＝10.527,P＝0.005)、实际治疗比例(Log-rank x2＝ 19.027,P＜0.001)及尿吗啡检测阳性率(Log-rank x2＝159.485,P＜0.001)的治疗保持率间差异有统计学意义. Cox比例风险模型多因素分析结果显示,高中及以上文化程度(HR＝ 0.76,P＝0.021)、治疗剂量不低于60 mg/d(HR＝0.64,P＝0.002)、尿吗啡检测阳性率在1% ～ 9%(HR＝0.32,P＜0.001)等因素有助于研究对象长期参加治疗,而尿吗啡检测阳性率≥20%时(HR＝2.92,P＜0.001)研究对象很容易退出治疗.结论 高治疗剂量(≥60 mg/d)有助于治疗者长期保持治疗,而治疗期间偷吸毒品(≥20%)则增加治疗者退出治疗的风险.     

北京市某区未成年女性从事性服务原因的定性研究

目的探讨未成年女性从事性服务的原因,为在此人群中开展预防艾滋病工作提供参考。方法采用定性研究方法,对22位从事性服务的、15位提供三陪服务的、15位在劳务市场内找工作的未成年女性,以及5位劳务市场负责人、5位公安干警进行个人深入访谈。结果未成年女性从事性服务与贫穷、生存压力大、缺乏社会和家庭的支持、缺乏就业技能、过早的性经历、家庭关系紧张、价值观偏离等有关。结论外来打工妹,特别是三陪小姐应作为性病艾滋病防治的重点人群,应加强劳动就业部门职业技能培训与防治艾滋病培训相结合的力度。     

北京地区未经抗病毒治疗的HIV感染者HIV-1毒株耐药基因变异研究北大核心

目的观察北京地区未经抗病毒治疗的艾滋病病毒（HIV）感染者HIV-1毒株耐药基因的变异情况,用于指导临床用药。方法以2014年4-7月北京地区601例未经抗反转录病毒治疗的HIV感染者/艾滋病（AIDS）病人（简称HIV/AIDS病人）为对象。采集病人的静脉血,提取血浆病毒核糖核酸（RNA）,用反转录/巢式聚合酶链式反应扩增病毒pol基因,并进行序列测定和亚型分析。在Stanford University HIV耐药数据库查询,分析是否存在基因型耐药以及耐药种类。结果 601例未经抗反转录病毒治疗的HIV/AIDS病人中,扩增成功的458例,其中男性434例（94.8%）,女性24例（5.2%）;平均年龄33岁（17~77岁）。主要感染亚型依次为CRF01_AE（211例,46.1%）、CRF07_BC（126例,27.5%）、B亚型（106例,23.1%）和C亚型（15例,3.3%）。在扩增成功的病人中,7.4%（34/458）的病人存在原发耐药基因变异,其中7例病人对核苷类反转录酶抑制剂（NRTIs）耐药,16例病人对非核苷类反转录酶抑制剂（NNRTIs）耐药,8例对蛋白酶抑制剂（PIs）耐药,3例病人同时对NRTIs和NNRTIs耐药。结论北京地区未经治疗的HIV/AIDS病人中,有部分病人存在原发耐药基因变异,极少数病人同时存在对两种主要治疗药物耐药,因此治疗前需要根据耐药检测结果制定用药方案,有助于提高治疗有效率,避免治疗失败。     

脂氧素A4对高氧损伤肺泡Ⅱ型细胞系MLE⁃12的保护作用

目的：探讨脂氧素A4（LipoxinA4, LXA4）对高氧损伤肺泡Ⅱ型细胞系MLE-12的保护作用及机制。方法：体外传代培养MLE-12细胞,随机分为：空气组、高氧组、高氧+LXA4组、高氧+转化生长因了（TGF）-β1中和抗体组、高氧+LXA4+TGF-β1中和抗体组。倒置相差显微镜下观察各组MLE-12形态学变化;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测Ⅰ型胶原（collagenⅠ）、肌腱蛋白C（tenascin-C）、TGF-βR1、TGF-βR2和Smad3的mRNA水平。Western blot检测TGF-β1/Smads信号（TGF-βR1、Smad2、Smad3、Smad4、p-Smad2 和p-Smad3）蛋白表达。结果：①细胞形态：高氧组MLE-12明显失去原有正常细胞形态,细胞变圆,核固缩;药物干预组正常细胞数增多,大部分细胞形态与正常细胞形态基本相似;②细胞外基质（extracellular matrix,ECM）mRNA表达：LXA4和TGF-β1中和抗体能抑制高氧介导的collagenⅠ和tenascin-C mRNA的表达量升高（P < 0.05）,其中高氧+LXA4+TGF-β1中和抗体组作用最为显著（P < 0.05）;③TGF-β1/Smads信号mRNA和蛋白含量：LXA4和TGF-β1中和抗体能抑制高氧介导的TGF-βR1、TGF-βR2和Smad3的mRNA水平以及下调TGF-β1/Smads信号相关蛋白的表达量（P < 0.05）,其中高氧+LXA4+TGF-β1中和抗体组细胞的表达量下调最为显著（P < 0.05）。结论：LXA4对高氧损伤肺泡Ⅱ型细胞系MLE-12的保护可能与调控TGF-β1/Smads信号以及collagenⅠ和tenascin-C的表达有关。     

高胆红素血症新生儿肠道菌群特点及与β-葡萄糖醛酸苷酶活性的相关性

目的 探讨高胆红素血症新生儿肠道菌群特点及与β-葡萄糖醛酸苷酶（β-glucuronidase,β-GD）活性的关系。方法 选取2018年1~12月入院治疗的高胆红素血症新生儿50例为高胆红素血症组,选取非高胆红素血症新生儿30例为对照组。通过16S rRNA高通量测序方法分析两组新生儿肠道菌群的差异。通过酚酞-葡萄糖醛酸底物法测定高胆红素血症新生儿治疗前后肠道内的β-GD活性。结果 对治疗前高胆红素血症组和对照组肠道菌群分布属水平进行比较,发现两组间有52种细菌的丰度差异有统计学意义（P < 0.05）。对治疗后第3天高胆红素血症组和对照组入组3 d后肠道菌群分布属水平进行比较,发现两组间有42种细菌的丰度差异有统计学意义（P < 0.05）。高胆红素血症组新生儿治疗后,埃希氏菌属和葡萄球菌属在肠道内的含量明显低于治疗前（P < 0.05）,粪便中β-GD活性较治疗前明显降低（P < 0.05）。高胆红素血症新生儿治疗前后粪便β-GD活性与葡萄球菌属和埃希氏菌属丰度均呈正相关（r_s=0.5948~0.7245,均P < 0.01）。结论 高胆红素血症新生儿和非高胆红素血症新生儿肠道菌群存在差异。高胆红素血症新生儿粪便中β-GD活性与差异菌葡萄球菌属和埃希氏菌属丰度呈正相关。肠道菌群可能通过调节β-GD活性影响新生儿高胆红素血症的发生,通过对新生儿肠道菌群和β-GD活性进行测定和分析,可能对早期评估新生儿高胆红素血症的发生有一定的临床意义。