P16与P53蛋白在脑胶质瘤中的表达及意义

目的:探讨P16与P53蛋白在人脑胶质瘤中的表达及与病理分级的关系。方法:采用免疫组化方法检测52例胶质瘤手术标本及2株人脑胶质瘤细胞系中P16与P53蛋白的表达状况,并分析其与该类肿瘤病理级别的关系。结果:随胶质瘤病理级别的升高P16蛋白的表达率逐渐降低,Ⅰ～Ⅳ级阳性率分别为75.0％、64.7％、42.8％和33.3％,低度恶性组(Ⅰ～Ⅱ级)与高度恶性组(Ⅲ～Ⅳ级)间有显著差异(P<0.05)。P53蛋白表达率随胶质瘤病理级别的升高有上升趋势。结论:P16及P53基因表达在胶质瘤恶性演变中有重要意义。     

EXPRESSION OF SV40 Tag AND FORMATION Tag-p53 AND Tag-Rb COMPLEXES IN CHINESE BRAIN TUMORS

Simian virus 40 (SV40), one type of polyomavirus, is able to transform different species including human normal cells to the neoplastic phenotype cell. The biological plausibility of SV40 as a tumorigenic agent has been extensively demonstrated. SV40 is tumorigenic in rodents and can immortalize human epithelial cell lines in vitro. It is also understood that SV40 large tumor antigen (Tag) interferes with p53 and Rb gene functions, and it may induce chromosomal instability. Furthermore, th…     

次声作用下大鼠脑皮质内mGluR5 mRNA表达的变化及其意义

目的：探讨8Hz、120dB次声作用后大鼠脑皮质内代谢性谷氨酸受体5亚型（mGluR5)mRNA表达的变化及意义。方法：SD大鼠60只被随机分为对照组及次声作用1、7、14次组和次声作用组，采用自制的次声压力舱用8Hz、120dB的次声按规定次数，每次作用2小时。利用地高辛标记寡聚核苷酸探针原位杂交技术与计算机图像分析系统，在光镜与透射电镜下观察mGluR5分别在额、顶、颞及枕皮质1区阳性神经元表达的改变，以及相应皮质的病理变化。结果：次声作用1次组，额、顶、颞、枕脑皮质内mGluR5 mRNA阳性神经元表达减少，次声作用7次组脑皮质内mGluRt mRNA阳性神经元表达数减少至谷底与对照组和次声作用1次组比较P均＜0．01，次声作用14次组脑皮质内mGluR5 mRNA阳性神经元表达数基本恢复到正常水平；阳性神经元在脑皮质浅层散在分布，mGluR5 mRNA在胞浆和胞核内均匀地呈颗粒状表达。结论：次声脑损伤可抑制mGluR5的表达和生成，其作用可能与mGluR1α不同，参与机体对次声脑损伤的保护。     

胶质瘤患者人源性噬菌体抗体基因库的构建

目的 构建胶质瘤患者人源性噬菌体抗体基因库。方法 从脑胶质瘤患者外周血淋巴细胞（PBL）中提取细胞总RNA,经逆转录后用套式多聚酶链反应（PCR）分别扩增抗体轻链VK和重链VH基因。先构建VK基因库,并使linker与VK基因连接,再将VH基因克隆人VK基因库,即构建成功单链抗体（ScFv）基因库。随机挑取菌落鉴定后测序。结果 从PBL中扩增出人源性VK和VH基因,并构建了库容量约为2×106的ScFv噬菌体抗体基因库。随机挑取克隆的测序结果表明,测定的VH基因与Kabat的抗体基因库中人抗体VH基因有较高的同源性,证明所克隆的基因属于人抗体可变区基因。结论 本实验构建成胶质瘤患者人源性噬菌体抗体基因库,为进一步筛选入源性抗脑胶质瘤抗体奠定了基础。     

弥漫性脑损伤大鼠脑皮质Ⅰ、Ⅱ组代谢型谷氨酸受体表达及意义

目的：研究弥漫性脑损伤（DBI）后大鼠脑皮质代谢型谷氨酸受体（mGluRs）的变化及其意义。方法：SD大鼠随机分为对照与DBI组，采用Marmarou 加速性DBI模型，在伤后不同时间取样行原位杂交和病理学研究。结果：与对照组相比，DBI组脑皮质I组mGluRs阳性神经元表达在伤后12h开始增加，24h达峰值（P＜0．01）；Ⅱ组mGluRs阳性神经元表达在伤后24h开始减少，48h显减少（P＜0．01）。病理学研究提示，DBI后24h脑皮质神经元损伤严重（P＜0．01），与mGluRs表达变化的时间吻合.结论：Ⅰ、Ⅱ组mGluRs作用不同，分别具有神经元损害和保护作用；脑损伤后，I组mGluRs表达增加，参与DBI引起的神经元损伤， Ⅱ组mGluRs表达减少，其神经元保护作用减弱。这为阐明DBI的损伤机制及应用mGluRs激动剂和／或拮抗剂治疗提供了理论依据。     

甲紫糊退色原因的探讨及疗效观察

甲紫在临床上用于外搽消毒杀菌,我们配制了各种不同的浓度及剂型,如甲紫糊,甲紫霜等。在临床应用的过程中,发现糊剂逐渐退色,初配呈紫兰色,放置不久即慢慢变兰色,以后退成灰兰色,最后全部退成无色,呈现原来氧化锌糊的颜色,基于这个原因,我们改配成霜剂,效果较好。     

Simian virus 40 large tumor antigen forms specific complexes with p53 and pRb in human brain tumors

Objective　To study the role of simian virus 40 (SV40) early region gene coding product large tumor antigen (Tag) expression and the interaction between Tag and tumor suppressors p53 and pRb in human brain tumorigenesis. Methods　Tag was investigated by immunoprecipitation followed by silver staining and Western blot in 65 cases of human brain tumors and 8 cases of normal brain tissues. Tag-p53 and Tag-pRb complexes were screened in 18 and 15 Tag positive tumor tissues, respectively. Results　Tag was found in all 8 ependymomas and 2 choroid plexus papillomas, 90% of pituitary adenomas (9/10), 73% of astrocytomas (11/15), 70% of meningiomas (7/10), 50% of glioblastomas multiforme (4/8), 33% of medulloblastomas (2/6). 5 oligodendrogliomas, 1 pineocytoma, and 8 normal brain tissues were negative for Tag. Tag-p53 complex was detected in all 18 Tag positive tumors. Tag-pRb complex was found in all 15 Tag positive tumors. Conclusion　SV40 Tag is expressed in human brain tumors and can form specific complexes with tumor suppressors p53 and pRb. The inactivation of p53 and pRb due to the formation of Tag-p53 and Tag-pRb complexes may be an important mechanism in the etiopathogenesis of human brain tumors.     

二次脑损伤大鼠脑皮层代谢性谷氨酸受体1α的改变

目的研究二次脑损伤(SBI)大鼠脑皮层代谢性谷氨酸受体1α (mGluR1α)的变化及意义. 方法 SD大鼠90只,随机分为假手术对照、单纯脑损伤、脑损伤合并SBI 3组. 在Marmarou大鼠加速性弥漫性脑损伤模型基础上,以抽血造成低血压为SBI指标. 在伤后不同时间进行免疫组化和病理学研究. 结果与假手术对照相比,单纯脑损伤组脑皮层mGluR1α阳性神经元在伤后1 h表达明显增加, 为13.9±3.2(P<0.05),24 h达到15.3±3.7的峰值(P<0.01);脑损伤合并SBI组mGluR1α阳性神经元表达在伤后0.5 h即明显增加:13.5±3.8(P<0.05),伤后6 h达高峰:15.6±3.7(P<0.01). 结论在弥漫性脑损伤发生、发展过程中, mGluR1α改变可能是导致脑损害加重的因素之一, 合并SBI组脑皮层mGluR1α阳性神经元表达的增强和高峰的提前提示mGluR1α参与缺血过程.     

反义VEGF165真核表达载体的构建和表达

目的 进行抗血管生成治疗人脑胶质瘤实验,构建和鉴定携带人反义VEGF165基因的真核表达载体。方法 将VEGF165cDNA反向克隆入pcDNA3,构建CMV启动子控制的真核表达载体pcDNA-AVEGF165,用酶切鉴定结果;应用该载体转染人脑胶质瘤细胞SHG44,G418筛选阳性克隆;Western blot和免疫组化检测转染前、后瘤细胞的VEGF表达。检测转染前、后瘤细胞的生物学性状。结果 获得反向构建的pcDNA-AVECF165真核表达载体,VEGF165反义RNA阻断了SHG44细胞的VEGF表达,该细胞生物学性状不受外源基因的表达影响。结论 成功构建的反义VEGF165真核表达载体,为人脑胶质瘤的反义基因治疗提供了必要的条件。     

弥漫性脑创伤并二次脑损伤后脑组织MDA和SOD变化

目的 探讨弥漫性脑创伤及合并二次脑损伤后大鼠不同区域脑组织内自由基和超氧化物歧化酶（SOD）变化规律及其与创伤后脑水肿的关系。方法 在自由落体致弥漫性脑创伤及其合并双侧颈总动脉结扎造成二次脑损伤模型的基础上,对大鼠大脑皮层、纹状体和脑干区脑组织匀浆的丙二醛（MDA）和SOD含量进行测定,并对其与该区域脑组织的含水量的关系进行分析。结果 原发性脑创伤和二次脑损伤后各区域脑组织MDA含量增高、SOD含量下降,并与脑组织含水量呈一定的平行性;二次脑损伤后各区域脑组织MDA和SOD变化幅度明显较单纯原发性脑创伤后为高并且其高峰持续时间延长;不同部位脑组织对原发性创伤和二次损伤反应具有一定的差异。结论 弥漫性脑创伤后各区域脑组织自由基水平较高、自由基清除能力下降并与脑水肿的发生、发展具有一定的相关性,在伴随二次损伤因素情况下变化更为严重,并且在不同部位二对脑水肿程度的影响存在一定的差异。