扩增鼠源性mAb和人源性抗体κ轻链基因中引物的作用

目的比较扩增鼠源性mAb和人源性抗体Vκ基因中引物的作用.方法从5株抗HFRS病毒鼠源性mAb杂交瘤细胞系和人PBL中提取细胞总RNA.逆转录后,用不同的引物进行PCR扩增,克隆后测定核苷酸序列并比较不同引物的作用.结果 5株mAb杂交瘤细胞的Vκ基因及人源性抗体的Vκ基因,需采用不同的引物组合才可得到.结论 5'端引物在PCR扩增抗体Vκ基因中起重要作用.     

HIV—1gp41基因的分段克隆和表达

目的 在大肠杆菌中表达HIV－1gp41N肽和C肽基因。方法 用PCR方法从含HIV－1gp160基因的质粒中扩增HIV－1gp41N肽和C肽基因,重组人pGEX-4T-1载体,并亚克隆人pGEM7zf( )中测定核苷酸序列,限制性酶切鉴定后进行原核表达。结果 成功地扩增到HIV－1gp41N肽和C肽基因,酶切鉴定及测序结果与已知HIV－1亚型的gp41N肽区和C肽区基因序列一致,SDS－PAGE结果显示,表达出与预期分子量大小相同的蛋白。结论 N肽和C肽基因的成功表达,为进一步研究其结构和功能奠定了基础。     

汉滩病毒M、S基因部分片段在大肠杆菌中的融合表达

目的在大肠杆菌中融合表达含主要抗原位点的汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与NP片段。方法将汉滩病毒76118株M基因编码G1的片段与S基因编码区5′端约0.7kb的片段连接,克隆入pGEX4T2,构建嵌合基因原核表达载体pGEX4T2G1S0.7,并在大肠杆菌XL1Blue中,诱导GSTG1S0.7融合蛋白的表达。表达产物用ELISA和Westernblot进行鉴定。结果成功地构建了嵌合原核表达载体pGEX4T2G1S0.7。经IPTG诱导后,ELISA活性测定结果表明,该融合蛋白可与抗汉滩病毒NP及糖蛋白的mAb特异性结合。Westernblot结果显示,诱导出相对分子质量Mr大于1×105的G1S0.7与GST的融合蛋白。结论获得具有特异性结合活性的融合蛋白GSTG1S0.7,为汉滩病毒基因工程疫苗的研制奠定了基础。     

中国人脂联素基因rs2241766单核苷酸多态性与高血压相关性研究的Meta分析

目的:探讨中国人脂联素基因(ADIP0Q)rs2241766单核苷酸多态性与高血压的相关性。方法:通过文献检索收集2016年4月以前完成或公开发表的,脂联素基因rs2241766单核苷酸多态性与高血压相关性的病例对照研究,剔除不符合要求的文献,以漏斗图检验入选文献的偏倚性,并根据各入选文献结果的同质性检验结果进行数据合并,计算总比值比,Meta分析采用Review Manager 5.3版软件。结果:总共有8篇文献纳入本次研究,其中有1 907例高血压患者和2 263例正常对照组。Meta分析结果显示:脂联素基因rs2241766等位基因模型(G VS T)合并后的总[OR=1.13,95%CI:1.03,1.24];共显性模型(GG VS TT)合并后的总[OR=1.33,95%CI:1.08,1.65]。结论:中国人脂联素基因rs2241766单核苷酸多态性可增加患高血压的风险。     

核苷酸序列分析法在测定HFRSV Chen株型别中的初探

作者用PCR方法扩增了HFRSV Chen株M片段3′末端基因,将之克隆入PUC_(18)质粒,测定出该基因片段的核苷酸序列。通过将该序列与已知6株不同型别HFRSV M片段相应部分进行比较,发现Chen株与76-118株同源性最高,而与其它株差别较大,推测两者是同属一个血清型的不同毒株。本文所应用的方法,对HFRSV基因分型研究及分子流行病学调查都有一定意义。     

非线性回归分析在研究药代动力学资料中的应用

介绍了研究药代动力学数据资料的非线性回归分析方法。运用非线性回归理论并借助SPSS统计软件以数值实例给出非血管给药的药物动力学模型的参数估计方法及其渐进置信区间,同时以最大值函数作为模型,给出某药两种剂型血药浓度随时间变化的趋势分析。结果表明,对于已知模型(或模型的微分方程形式)的数据资料非线性拟合的结果要比线性化拟合好。     

成人经皮动脉导管未闭封堵术后主动脉瓣关闭不全的临床分析

目的 分析成人经皮动脉导管未闭(patent ductus arteriosus,PDA)封堵术后发生主动脉瓣关闭不全(aortic regurgitation,AR)的风险、临床相关因素及转归.方法 入选101例PDA成年患者,分析PDA封堵术后26例(25.74％)新发生AR或AR程度加重患者的基本临床特征、PDA特征、封堵情况及转归,利用logistic回归模型分析发生AR的危险因素.结果 26例新发生AR或AR程度加重患者与未发生AR患者比较,平均肺动脉压[(46.2±20.7)vs (31.4±17.5)mmHg,1 mmHg=0.133 kPa]、左心室舒张末期内径[(5.2±0.2)vs (4.2±0.4)cm]、PDA大小[(14.0±6.4) vs (9.0±3.5) cm]、术前有轻度AR患者发生率38.46％(10/26) vs 18.67％(14/75)]差异均有统计学意义(P＜0.05).Logistic回归分析提示左心室舒张末期内径(OR=33.541,95％ CI:5.883～191.235,P=0.000)和PDA大小(OR=7.512,95％ CI:1.976～28.564,P=0.003)是AR的独立危险因素.随访期间,26例AR患者中有22例(84.62％) AR愈合,1例于术后第30个月死于进行性加重的AR及心力衰竭.结论 左心室舒张末期内径和PDA大小是成人经皮PDA封堵术后发生AR的独立危险因素.大多数AR患者的转归良好.     

SinoSCORE对心脏瓣膜术后院内死亡及并发症的预测价值

目的 评价中国冠状动脉旁路移植手术风险评估系统(SinoSCORE)对心脏瓣膜术后院内死亡及术后并发症的预测价值.方法 回顾性收集2005年至2011年第二军医大学长海医院行心脏瓣膜手术患者的围手术期资料,采用SinoSCORE模型计算全组患者院内预期死亡风险,并验证SinoSCORE与术后并发症[低心排血量综合征、肾衰竭、肺部感染、使用主动脉内气囊泵(IABP)、延迟拔除气管插管、ICU住院时间延长以及二次手术]发生率间的关系,采用ROC曲线下面积评价模型区分度,以Hosmer-Lemeshow拟合优度检验评价模型校准度,采用Youden指数确定SinoSCORE有较好预测价值的术后并发症的最佳诊断界值.结果 入选3407例患者,平均年龄(49.2±13.3)岁.术后院内死亡率ROC曲线下面积为0.754(95％可信区间为0.701～0.806),提示模型有较好区分度.总体术后院内死亡率为3.05％(104/3 407),SinoSCORE预测院内死亡率为(3.1士0.1)％,Hosmer-Lemeshow拟合优度检验x2=9.545,P=0.490,提示模型有较好校准度.SinoSCORE对术后低心排血量综合征、肾衰竭及使用IABP有较好的预测价值(ROC曲线下面积分别为0.708、0.711和0.718),最佳诊断界值分别为5.5、7.5和6.0.结论 SinoSCORE模型预测中国心脏瓣膜手术患者的术后院内死亡风险效果良好,对术后低心排血量综合征、肾衰竭及使用IABP也有较好的预测作用.     

动态情景任务对自闭症儿童社交能力影响研究

目的 探析动态情景任务对自闭症儿童社交能力的影响。方法 纳入我院 2021 年 1 月至 2021 年 12 月收治的 60 例自闭症 儿童为观察对象。按照入院先后顺序分为对照组和观察组。对照组采用传统康复治疗,观察组在此基础上实施动态情景任务干 预。分析和对比两组的自闭评分、社交回避及苦恼感受和孤独症行为。结果 干预前两组儿童自闭症评定量表评分,社交回避 及苦恼量表评分和闭症儿童行为量表评分无显著差异（P>0.05）。干预后观察组儿童自闭症评定量表评分,社交回避及苦恼量表 评分和闭症儿童行为量表评分显著优于对照组（P<0.05）。结论 自闭症患儿采用动态情景任务干预,能够改善社交回避倾向和 苦恼感受,提升社交能力,对促进患儿的康复和健康成长具有重要的意义。     

磁珠法和滤膜法提取核酸在手足口病荧光定量检测中的比较

目的 分析比较磁珠法和滤膜法提取病毒核酸的重复性及灵敏度.方法 选用国产的磁珠法和滤膜法试剂同时提取核酸检测临床手足口病标本,荧光相对定量比较两种方法的重复性及灵敏度.结果 磁珠法提取核酸的标本用量较少,成功率较高,磁珠法试剂检测重复性较好,灵敏度较高.结论 磁珠法提取核酸在手足口病的荧光定量检测中优于滤膜法.