调节性B细胞与免疫耐受

B细胞的典型特征是可产生包括自身抗体的各种抗体.然而,B细胞还有其他的免疫功能,例如产生各种细胞因子和次级抗原递呈[1].与T细胞一样,B细胞中也有致病性和调节性的细胞亚群.研究发现抗CD45RB抗体可诱导稳定的免疫耐受模型,在诱导免疫耐受时需有宿主B淋巴细胞的参与[2].最近研究表明,体内确实存在能产生白细胞介素10(IL-10)或转化生长因子β1(TGF-β1)等细胞因子的调节性B细胞(regulatory B cells,Bregs).Bregs通过产生抑制性细胞因子或分泌抑制性抗体影响其他免疫细胞,在免疫耐受中发挥作用[1].本文将对Bregs在免疫耐受中的作用机制做一综述.     

胰腺干细胞转分化为胰岛样细胞与天然胰岛细胞的基因差异性

背景：目前胰腺干细胞在体外诱导转分化效率和分化成熟度较低，哪些基因在转分化中起关键性调控作用尚不清楚。 目的：通过基因表达谱芯片分析转分化的胰岛样细胞与天然胰岛细胞在成熟度上的基因差异，筛选对转分化起关键性调节作用的基因。 设计、时间及地点：基因水平的对照实验，于2004-07/2006-04在暨南大学第二临床医学院（深圳市人民医院）临床医学研究中心实验室完成。 材料：SD大鼠胰腺分离的胰腺干细胞转分化的胰岛样细胞团，SD大鼠分离的天然胰岛。 方法：分离和消化SD大鼠胰腺，用差异性贴壁、低血清培养等方法纯化出大鼠胰腺导管上皮细胞，利用免疫组化方法鉴定CK-19和PDX-1。通过含有exendin-4、角质细胞生长因子、尼克酰胺等细胞因子和葡萄糖的培养基，使之转分化为胰岛样细胞团，应用双硫腙染色和胰岛素免疫荧光染色鉴定。提取转分化的胰岛样细胞和天然胰岛细胞RNA，利用大鼠22000位点寡核苷酸芯片进行杂交，筛选差异性表达的基因，并进一步采用反转录-聚合酶链反应验证13个相关基因的表达。 主要观察指标：转分化的胰岛样细胞团和天然胰岛鉴定，差异性基因筛选和鉴定。 结果：筛选出差异表达基因1 072个，其中表达上调的基因397个，上调10倍以上的基因35个；表达下调的基因有675个，其中下调20倍以上的基因37个。上调10倍以上的差异性基因中与细胞组织和生物发生相关基因最多，下调20倍以下的基因中与发育相关基因最多。对选定的13个与胰岛细胞发育密切相关的基因PDX-1, PDX-4, PDX-6, Nkx2.2, Nkx6.1，Nkx6.2，Ptfla，Isll，Ngn3，Myt1，Ptf1a，capn5，Ppy，通过反转录-聚合酶链反应进一步验证与芯片检测结果一致。 结论：转分化的胰岛样细胞与天然胰岛细胞基因表达差异显著，参与胰岛发育的关键基因表达明显下调。     

腹腔镜腹膜后精索内静脉高位结扎术临床应用与评估

我院自 1998- 0 8应用电视腹腔镜完成腹膜后精索内静脉高位结扎术 2 2例。现将临床应用报告如下。1　一般资料本组 2 2例均为左侧 ,年龄 18～ 32岁 ,平均 2 2 .5岁。中度曲张 8例 ,重度曲张 14例。病史 2～ 14年 ,12例中 5例婚后 2年不孕 ,占结婚不孕的 41.6 %。一次性治愈率达 10 0 %。2　手术方法采用德国Ｗｏｌｆ牌腹腔镜。全麻仰卧位 ,常规消毒 ,铺巾。先在脐上 (下 )切一小口 ,将气腹针置入腹腔并注入二氧化碳气体 ,使气腹压力达到 1.6～ 1.9ｋＰａ(12～ 14ｍｍＨｇ)时 ,拔针扩大皮肤穿孔 ,将 10ｍｍ穿刺锥及套管穿入腹腔 ,拔出穿刺锥…     

肾活检组织系膜细胞的培养和鉴定

目的 以身体肾小球系膜细胞做为转基因的载体，建立肾活检组织系膜细胞培养的方法。方法 ５例肾穿刺组织，用选择性ＤＭＥＭ培养液进行培养。结果 建立了肾穿刺组织系膜细胞培养方法，经组织学和免疫组化鉴定为人体系膜细胞。结论 为肾病的基因治疗提供了一种治疗性的自身移植载体。     

外周血CD4+淋巴细胞及Th1/Th2细胞因子变化与HIV/AIDS疾病发展的相关性

目的探讨CD4^＋细胞计数和Th1／Th2细胞因子与HIV／AIDS病程进展的相关性。方法利用流式细胞术及ELISA法检测15例HIV感染者和26例AIDS患者外周血CD4^＋细胞及Th1／Th2细胞因子水平。结果与正常组比较，AIDS组中CD4^＋细胞数与Th1细胞因子（IFN-γ）水平显著下降（P〈0．01），而Th2细胞因子（IL-4）水平显著升高（P〈0．01）。HIV组CD4^＋细胞数较正常组显著下降（P〈0．01）。Th1细胞因子（IFN-γ）与Th2细胞因子（IL-4）水平无显著性变化（P〉0．05）。随着AIDS病情的加重。Th1细胞因子水平降低与CD4^＋细胞绝对数降低呈显著正相关（P〈0．001），Th2细胞因子水平增高与CD4~细胞的绝对数降低呈显著负相关（P〈0．01）。结论人体感染HIV后，CD4^＋细胞计数和Th1／Th2细胞因子水平在评估AIDS的痰病严重程度中可作为一个重要指标。     

超前培养和储备医院管理人才的启示

对80年代中期南京军区超前培养和储备医院管理人才作了回顾性调查分析,认为：超前培养和储备医院管理人才需要有高起点的意识I超前型的管理人才需要综合性培养措施;超前培养和储备管理人才需要舍得投入。     

植物血凝素及脂多糖对人肾小球系膜细胞分泌IL-1 8的影响

目的 了解植物血凝素（ＰＨＡ）、脂多糖（ＬＰＳ）对人肾小球系膜细胞分泌ＩＬ－１８的影响。方法 体外培养的人系膜细胞经不同浓度的ＰＨＡ,ＬＰＳ诱导,ＥＬＩＳＡ测定培养上清。结果 ＬＰＳ和ＰＨＡ均可诱导人肾小球ＭＣ释放ＩＬ－１８,ＬＰＳ和ＰＨＡ呈浓度促进ＭＣ释放ＩＬ－１８,ＬＰＳ诱导作用较ＰＨＡ强,均显著高于对照组水平（Ｐ〈０．０５）。结论 肾小球系膜细胞在ＬＰＳ和ＰＨＡ诱导下可增加ＩＬ－１８分泌。．     

乌司他丁在大鼠胰岛分离中的抗凋亡作用

目的 探讨乌司他丁在大鼠胰岛分离过程中抑制胰岛细胞凋亡的作用.方法 将20只SD大鼠平均分为两组,处理组在胰岛分离全过程中加用胰蛋白酶抑制剂乌司他丁进行干预,对照组则不加乌司他丁处理,采用Ficoll非连续密度离心纯化后对两组胰岛细胞的凋亡、胰岛产量及活力进行比较.结果 加用乌司他丁处理组的胰岛细胞凋亡率显著低于对照组(P＜0.01),处理组胰岛产量和胰岛素释放水平均显著高于对照组(P＜0.01).结论 胰岛分离过程中加用胰蛋白酶抑制剂对胰岛具有抑制凋亡、提高胰岛产量及保护胰岛活力的作用.     

金纳米粒子在生物医学工程中的应用

金纳米粒子具有优良的电学、磁学、光学性质以及结构特性,鉴于其独特的物理化学以及优越的生物相容性,在快速免疫诊断方面、免疫组化、DNA检测等方面可以发挥其快速、准确的功效。由于金纳米粒子可以和胶原蛋白的特异性结合,它可以被用来作为药物的载体。在生物医学工程中有着及其广泛的应用前景。     

应用TaqMan实时荧光定量PCR技术研究系统性红斑狼疮疾病相关基因的表达

目的验证新发现的4个系统性红斑狼疮(SLE)相关基因与SLE发病的相关性,为SLE发病的分子机制研究提供资料。方法前期基因芯片工作中筛选得到4个在55例SLE患者及正常对照之间表达差异显著的基因,染色体定位发现其位于SLE连锁的染色体区段。应用TaqMan实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测该4种基因在SLE患者和正常对照外周血单核细胞及T、B淋巴细胞的表达。结果SLE患者外周血单核细胞中,TRIM基因ΔCt值显著低于正常人对照(P＜0．05),基因表达水平为正常对照的0．61倍；IL-4R基因与EGR1基因的ΔCt值显著高于正常人对照(P＜0．05),基因表达水平分别为正常对照的2．62、2．03倍；KLRC1基因的ΔCt值显著高于正常人对照(P＜0．01),基因表达水平为正常对照的5．33倍。在SLE患者外周血T细胞,TRIM基因ΔCt值显著低于正常人对照(P＜0．01),基因表达水平为正常对照的0．56倍；IL-4R基因与EGR1基因的ΔCt值显著高于正常人对照(P＜0．05),基因表达水平分别为正常对照的2．55、1．74倍；KLRC1基因的ΔCt值显著高于正常人对照(P＜0．01),基因表达水平为正常对照的5．19倍。在SLE患者外周血B淋巴细胞,由于B细胞淋巴所占淋巴细胞比率过低,基因检测数据不稳定,故未作统计学分析。4种狼疮疾病相关基因与狼疮活动指数SLEDAI无相关性。结论SLE患者TRIM,IL-4R,KLRC1和EGR1基因与正常人相比有明显差异,但与疾病活动程度无关。