白细胞介素-2研究:从基础到临床

自细胞介素-2(IL-2)是辅助T细胞分泌的淋巴因子，在免疫系统中起着重要的作用。它能促进T细胞、NK细胞、B细胞的分化成熟及激活其生物活性，诱导淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)活性；还能促进许多淋巴因子如干扰素、肿瘤坏死因子等的合成与释放以及抗体生成。     

含人TNF-α基因的重组逆转录病毒载体的构建、包装及对人肝癌细胞的感染

利用逆转录病毒载体LN系列的三种载体LXSN,LNCX和LNSX构建了插入TNF_α基因的重组逆转录病毒载体L-tnfSN,LNC-tnf和LNS-tnf。重组载体用磷酸钙沉淀法引入病毒包装细胞PA317,经G418筛选后,用NIH3T3细胞测定病毒滴度,结果表明L-tnfSN产生的病毒滴度最高(1×10~5CFU/ml),LNS-tnf次之(5×10~4CFU/ml),LNC-tnf最低(3×10~4CFU/ml)。应用上述三种重组病毒培养液上清,分别感染人肝癌细胞SMMC7721,经G418筛选获得数株抗性克隆。对每种病毒感染的细胞随机挑取6个克隆扩大培养,测定培养液上清中TNFα的分泌量,结果显示L-tnfSN介导感染的克隆中TNFα分泌量最高(382U/10~6细胞/24h),LNC-tnf次之(221u/10~6细胞/24h),LNS-tnF最低(124u/10~6细胞/24h)。反映不同启动子元件有不同的表达强度。     

瘤内注射脂质体IL-2基因复合物治疗实验性肝癌

利用瘤内注射法将治疗基因直接转入体内的肿瘤细胞并获得表达，一方面可以提高治疗基因对肿瘤细胞的针对性，减少对非靶细胞可能带来的毒副作用，另一方面也较简便，更适应临床应用的需要。本文初步探讨了瘤内注射脂质体-IL-2基因复合物在实验性肝癌基因治疗中的应用将IL-2基因克隆人真核表达载体pME18S，     

2′—5′寡腺苷酸抗病毒作用的重要意义

2′—5′寡腺苷酸是干扰素作用于细胞后产生的物质,其中主要为PPPA_2′P_5′A_2′P_5′A(2′—5′P_3A_3)。干扰素有抗病毒作用,而2′—5′P_3A_3有否抗病毒作用呢?本研究用CaCl_22和2′—5′P_3A_3结合物引入胚皮肤肌肉纤维母细胞,发现它能广泛地抑制病毒的复制,从而对被病毒感染的许多细胞均有一定的保护作用。我们所用RNA病毒包括流感病毒A_3(77—38)、A_1(77—78)、仙台病毒、鼻病毒、人     

人白细胞介素家族的新成员——IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23

白细胞介素是激活的 T细胞分泌的一类细胞因子 ,它们在免疫调节中发挥重要作用 ,具有很高的临床应用价值。迄今为止 ,已有 2 3种人白细胞介素被发现 ,构成了一个庞大的家族。其中 2 0 0 0～ 2 0 0 1年间 ,就有 5种人白细胞介素家族最新成员的序列被阐明。本文简单介绍了它们的结构、诱导表达方式、功能、及其信号相关受体等各个方面的最新研究进展     

重组腺病毒载体携带凋亡素基因对肝癌细胞的作用

目的 探讨带有AFP启动子的重组腺病毒载体介导凋亡素基因对肝癌细胞的作用.方法 测定腺病毒AdAFPvp3滴度,并以MOI=100感染Hepal-6肝癌细胞(AFP ),HEK293细胞(AFP-),Lewis肺癌细胞(AFP-),24 h后Hoechst 33258染色观察凋亡形态学改变,RT-PCR检测vp3基因的表达.腺病毒AdAFPvp3以MOI=100感染hepal-6肝癌细胞,FCM检测肝癌细胞不同时段凋亡率.结果 腺病毒AdAFPvp3滴度为5×10(9)PFU/ml.Hoechst 33528染色显示甲胎蛋白阳性的Hepal-6肝癌细胞出现凋亡形态学改变,RT-PCR检测只有甲胎蛋白阳性的Hepal-6肝癌细胞表达vp3mRNA.FCM表明凋亡素基因能有效诱导肝癌细胞凋亡.结论 带有特异性甲胎蛋白启动子的重组腺病毒载体.介导凋亡素基因导入肝癌细胞后,对于能合成甲胎蛋白的肝癌细胞,具有特异性靶向性致凋亡作用.     

胞嘧啶脱氨酶基因联合干扰素-γ基因治疗大肠癌的实验研究

目的研究胞嘧啶脱氨酶基因(EC-CD)联合干扰素-γ(INF-γ)基因对大肠癌的治疗作用.方法以重组腺病毒载体AdCMVCD转导EC-CD基因;AdCMV INF-γ转导鼠INF-γ基因.采用体外培养和小鼠移植瘤实验,研究EC-CD基因联合INF-γ基因对CT26大肠癌细胞的杀伤作用.结果AdCMV IFN-γ感染对CT26细胞生长有明显的抑制作用.AdCMVCD/5-FC联合AdCMV INF-γ可以增强对CT26细胞的杀伤作用,IC50明显变小(P＜0.01),肿瘤生长明显抑制(P＜0.01).组织学检查显示,EC-CD基因与INF-γ基因联合治疗后肿瘤内有大量淋巴细胞浸润.结论EC-CD基因联合INF-γ基因可以明显增强抗肿瘤效应,局部淋巴细胞浸润增加可能起到一定作用.     

p35基因对MnCl2诱导PC12细胞凋亡的作用

目的：探讨p35基因对氯化锰(MnCl2)诱导的PC12细胞凋亡的作用。方法：将p35基因转染PC12细胞得到可稳定表达p35基因的PC12／p35细胞株，使用相差显微镜观察、MTT染色和流式细胞分析等方法检测p35基因对MnCl2诱导的PC12细胞凋亡的作用。结果．p35基因在PC12细胞中的稳定表达可以有效地抑制MnCl2诱导的PC12细胞凋亡。结论：p35基因对MnCl2诱导的PC12细胞具有保护作用。     

周围血白细胞2′-5′寡腺苷酸合成酶在细菌感染的诊断价值

为了探讨细菌感染的诊断,我们对27例各种细菌感染进行2′-5′寡腺苷酸合成酶(以下简称ESi)的检测,并以30名健康成人和41例病毒感染者为对照,现将结果报告于下。 27例细菌感染的患者包括急性阑尾炎13例,细菌性肺炎6例,急性胆囊炎3例,急性肾盂肾炎1例,急性细菌性腹膜炎1例,急性胰腺炎伴慢性胆囊炎1例,急性胃肠炎1例,下肢丹毒1例。这些患者于发病极期采血进行ESi的检测。 20～45岁30例健康的医院职工,其中男14例,女16例;41例病毒感染者中31例为急性病毒性肝炎,10例为带状疱疹。