谷胱甘肽S-转移酶π、DNA拓扑异构酶Ⅱ及P-糖蛋白在难治性癫痫患者脑内的表达

目的 探讨谷胱甘肽S-转移酶π（GST-π）、DNA拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）及P-糖蛋白（P-gp）在难治性癫痫（RE）患者脑内的表达及意义。方法 32例RE患者手术切除标本，采用免疫组化方法检测GST-π、TopoⅡ及P-gp表达。8例脑血管畸形患者作为对照。结果 对照组正常脑组织内星形胶质细胞及血管内皮细胞中有少量GST-π表达（2．2），癫痫组GST-π表达明显增强（10．9，P〈0．05）。TopoⅡ在对照组中无表达，癫痫组2例标本有少量表达（0．4，P〉0．05）。对照组中P-gp只在脑内血管内皮细胞中少量表达，癫痫组P-gp则在星形胶质细胞及血管内皮细胞中大量表达（12．9，P〈0．01）。结论 GST-π、P-gp在RE患者脑内表达可能与患者对抗癫痫药耐药有关。     

多药耐药相关蛋白-1在难治性颞叶癫痫患者脑组织中的表达及丙磺舒的干预作用

目的 观察难治性颞叶癫痫患者脑组织中多药耐药相关蛋白1( MRPl)及应用MRP1拮抗剂丙磺舒干预后的表达,探讨MRP1与难治性颞叶癫痫多药耐药的关系.方法 应用免疫组化检测难治性颞叶癫痫患者脑组织实验组和对照组MRP1的表达情况,同时应用免疫蛋白印记(Western blot)方法检测实验组、丙磺舒干预组和对照组MRP1的表达.结果 免疫组化结果显示MRP1在难治性颞叶癫痫患者脑组织中表达增强,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).Western blot结果显示丙磺舒干预组MRP1蛋白水平较实验组明显较少,差异有显著性(P＜0.05).结论 脑内高表达的MRP1参与难治性颞叶癫痫的耐药机制,丙磺舒可以降低脑组织内MRP1的表达.     

谷胱苷肽硫转移酶在耐药性癫痫脑组织中的表达

动物实验和细胞培养发现谷胱苷肽硫转移酶（GST-π）参与了难治性癫痫耐药机制的形成。本研究用免疫组化法研究了54例难治性癫痫患者手术标本中GST-π的表达及其规律，以探索其在难治性癫痫耐药机制中的作用。     

难治性癫痫患者脑组织穹隆体主蛋白表达的研究

目的探讨难治性癫痫患者脑组织穹隆体主蛋白(MVP)表达的改变。方法应用免疫组化、免疫荧光双标染色及Western blot方法检测38例难治性癫痫患者(癫痫组)手术切除的额叶致痫灶皮质及15例重型颅脑损伤患者(对照组)开颅减压术切除的额叶皮质中MVP的表达水平,并进行分析比较。结果对照组额叶皮质仅有MVP微量表达。癫痫组额叶皮质神经元MVP表达(主要在胞浆中和核膜上)均阳性,其MVP表达水平显著高于对照组(P0.05);同部位神经胶质细胞无MVP表达。结论药物难治性癫痫患者脑组织神经元的MVP表达增高,这可能是其对抗癫痫药物产生耐药的机制之一。     

海人酸致难治性癫痫大鼠脑组织及外周血P糖蛋白表达趋势相关性研究

目的 研究难治性癫痫大鼠脑组织及外周血中P糖蛋白表达的相关性,探讨难治性癫痫可能的耐药机制,并比较海人酸在不同核团致痫后P糖蛋白表达的差异.方法 用海人酸分别于大鼠杏仁核及海马进行化学点燃,制作难治性癫痫模型.采用免疫组化方法,分析比较难治性癫痫大鼠脑组织及外周血中P糖蛋白的表达.结果 杏仁核点燃组与海马点燃组大鼠脑组织及外周血P糖蛋白表达高于与其相对应的生理盐水卡马西平组及生理盐水对照组,有统计学意义(P＜0.05);杏仁核生理盐水卡马两平组及海马生理盐水卡马西平组大鼠脑组织及外周血P糖蛋白的表达高于杏仁核生理盐水对照组及海马生理盐水对照组,有统计学意义(P＜0.05);杏仁核点燃组和海马点燃组大鼠脑组织及外周血P糖蛋白的表达相近,无统计学意义(P＞0.05).结论 难治性癫痫大鼠外周血及脑组织中P糖蛋白的表达具有一定的相关性,难治性癫痫的耐药机制可能是癫痫本身、服用抗癫痫药物等多因素作用的结果.杏仁核点燃模型及海马点燃模型均可诱导相近似的P糖蛋白的表达.     

神经生长相关蛋白-43在耐药性颞叶癫痫患者脑组织中的表达及其意义

目的 研究神经生长相关蛋白-43（growth-associated protein-43,GAP-43）在耐药性颞叶癫痫患者脑组织中的表达,探索其在耐药性癫痫中的作用.方法 按随机化原则从我科建立的耐药性癫痫患者术后脑组织库中随机抽取42例耐药性颞叶癫痫患者术后脑组织标本,用免疫组化法检测生长相关蛋白-43在耐药性颞叶癫痫患者脑组织中的表达,并与对照组进行比较.结果 发现GAP-43在耐药性颞叶癫痫患者脑组织中的表达比对照组明显增加（P＜0.05）,这种蛋白表达产物主要分布在神经元的胞体和轴突.结论 GAP-43在耐药性颞叶癫痫患者脑组织表达增强,提示它们可能参与了耐药性癫痫的形成.     

海马硬化致耐药性颞叶内侧癫痫的耐药基因蛋白表达及意义

目的 观察耐药性颞叶内侧癫痫硬化海马中有关耐药基因蛋白的表达并探讨其临床意义.方法 对经手术治疗取自16例颞叶内侧癫痫的硬化海马标本进行免疫组化染色观察p-糖蛋白170(p-gp170)、谷胱甘肽硫转移酶-π(GST-π)、拓扑酶Ⅱ(TOP Ⅱ)、胸苷合成酶(TS)及O-6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)的表达.结果 p-gp170和GST-π在硬化海马组织中神经细胞、血管内皮细胞及胶质细胞均有表达,而以血管内皮细胞和胶质细胞阳性表达尤为突出.TOP Ⅱ、TS和MGMG在硬化海马中无明显阳性表达.结论 长期应用抗癫痫药物可能诱导p-gp170和GST-π表达增强,促进抗癫痫药物的排出与代谢,引起耐药.TOPⅡ、TS和MGMG可能与癫痫耐药机制无关.     

难治性颞叶癫痫患者颞叶皮层GRP78、caspase4的表达

目的观察难治性颞叶癫痫患者脑组织内质网应激相关分子GRP78、caspase4的表达,探讨内质网应激在难治性颞叶癫痫脑损伤中的作用。方法应用免疫组化、Western blot方法检测32例难治性颞叶癫痫患者手术切除的颞叶皮层脑组织GRP78、caspase4的表达,并与性别、年龄相匹配的对照组进行比较。结果与对照组相比,GRP78、caspase4在癫痫组表达明显上调(P0.05)。结论癫痫诱发了内质网应激,caspase4可能参与了癫痫后脑损伤,很可能为癫痫脑损伤的治疗提供新的靶点。     

难治性颞叶癫痫颞叶脑组织中uPAR蛋白的表达及临床意义

目的研究难治性颞叶癫痫患者脑组织中的uPAR的表达,探讨其在难治性癫痫发病中的意义。方法从第四军医大学唐都医院神经外科建立的难治性癫痫患者脑组织库中随机抽取30例难治性颞叶癫痫患者术后脑组织,用免疫组织化学、免疫印迹(Western blot)检测uPAR的蛋白表达产物,并与15例对照组进行比较。结果uPAR蛋白在难治性颞叶癫痫患者颞叶脑组织中的表达量与对照组相同部位比较明显增高。结论难治性颞叶癫痫患者颞叶脑组织中uPAR蛋白产物表达增高可能与难治性颞叶癫痫发病过程中病理生理学改变有重要关联,可能为难治性颞叶癫痫的治疗提供新的靶点。     

难治性颞叶癫痫患者脑组织中Vav3的表达

目的研究难治性颞叶癫痫患者脑组织中Vav3的表达,探讨其在难治性颞叶癫痫形成中的意义。方法应用免疫组织化学法检测难治性颞叶癫痫患者脑组织和正常脑组织中Vav3蛋白的表达。光学显微镜下观察Vav3蛋白表达结果,并对免疫组织化学结果进行分析。结果免疫组化检测发现Vav3蛋白在难治性颞叶癫痫患者脑组织中阳性表达率明显高于正常脑组织,两组相比差异具有统计学意义（x^2=15．841,P〈0．015。实验组患者海马组中Vav3染色评分2分和3分占总体的76．93％（10／13）,而在颞叶组中Vav3染色评分1分和2分占总体的64．71％（11／17）,可见在难治性颞叶癫痫患者海马组织较颞叶组织神经元中Vav3的表达明显增强。结论Vav3在难治性颞叶癫痫患者的海马和颞叶脑组织中表达增强,提示其有可能参与了难治性颞叶癫痫的形成。     

大脑后部离断术治疗难治性癫痫1例临床分析

目的介绍一种新的治疗后脑病变引起的难治性癫痫的手术方法——大脑后部离断术,并就该手术方法和适应证进行讨论。方法应用大脑后部离断术治疗1例左侧后皮层广泛病变引发的成年难治性癫痫患者。该患者左侧顶叶、枕叶、颞叶脑软化、坏死、萎缩,但中央前后回和额叶皮层结构完整,左侧运动感觉语言功能仍然存在。手术方法为彻底离断顶枕叶、颞叶。结果手术后癫痫得到有效控制,随访6个月,只有2次轻微的复杂部分性发作,Engel分级Ⅱ级,没有新的神经损害并发症发生。结论后脑离断术可以有效治疗大脑后皮层病变所致的难治性癫痫,较多脑叶切除术有手术创伤小、省时、并发症少的优点。     

Rnd1在难治性癫痫患者脑组织中的表达

目的观察Rnd1在难治性癫痫颞叶脑组织中的表达情况,探讨Rnd1在难治性癫痫发病的作用。方法收40例难治性癫痫患者脑组织颞叶(实验组)以及10例正常颞叶脑组织(对照组),用免疫组化、免疫荧光、Western-blot方法检测患者颞叶脑组织Rnd1的表达,并比较实验组与对照组颞叶脑组织中Rnd1的表达情况。结果免疫组化显示实验组Rnd1的平均灰度(127.62±6.23)与对照组(171.79±3.84)相比差异有统计学意义(t=29.86,p<0.01);实验组Rnd1的阳性细胞数(30.20±3.42)与对照组(11.18±0.67)相比差异有统计学意义(t=21.36,p<0.01)。免疫荧光显示Rnd1的阳性表达区域与特异性神经无性烯醇化酶(NSE)的分布基本重叠。结论 Rnd1主要表达于神经元,可能参与了癫痫的形成并在难治性癫痫形成的过程中发挥了重要作用。     

PTPRT在难治性癫痫患者及匹罗卡品致痫大鼠脑组织中的表达

目的 研究难治性癫痫患者及皮罗卡品致痫大鼠脑组织中PTPRT的表达,以探讨难治性癫痫可能的发病机制.方法 用免疫组织化学、免疫荧光、Western blot法检测PTPRT在难治性癫痫患者及癫痫发作后6h及1、7、14、30、60 d的匹罗卡品致痫大鼠脑组织中的表达,并分别与无癫痫发作的人以及大鼠的脑组织比较.结果 在人颞叶皮质中,PTPRT主要在对照组和病例组的神经元有表达,PTPRT在难治性癫痫患者(0.277 ±0.048)脑组织中比对照组(0.171±0.025)显著升高(t=9.586,P＜0.05).在大鼠颞叶脑组织中,对照组和实验组的PTPRT主要在神经元中表达.PTPRT在实验组颞叶中的表达与对照组相比,在癫痫发作后24 h内不断升高,7d和14 d后表达水平则下降,30 d和60 d后表达又升高(A比值:对照组0.443±0.039,6 h 0.840±0.032,24 h 1.113 ±0.064,7d 0.564±0.039,14 d 0.570±0.029,30 d 0.899±0.034,60 d 1.011±0.074,F=256.427,P＜0.05).结论 通过对PTPRT在癫痫动物模型和癫痫患者颞叶脑组织表达规律的研究,结合PTPRT的功能我们推测PTPRT可能通过突触重构以及苔藓纤维出芽参与了神经网络的重构,从而导致了难治性癫痫的发生.     

谷胱甘肽S-转移酶π、DNA拓扑异构酶Ⅱ及P-糖蛋白在难治性癫癎患者脑内的表达

目的探讨谷胱甘肽S-转移酶π(GST-π)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)及P-糖蛋白(P-gp)在难治性癫癎(RE)患者脑内的表达及意义。方法32例RE患者手术切除标本,采用免疫组化方法检测GST-π、TopoⅡ及P-gp表达。8例脑血管畸形患者作为对照。结果对照组正常脑组织内星形胶质细胞及血管内皮细胞中有少量GST-π表达(2·2),癫癎组GST-π表达明显增强(10·9,P<0·05)。TopoⅡ在对照组中无表达,癫癎组2例标本有少量表达(0·4,P>0·05)。对照组中P-gp只在脑内血管内皮细胞中少量表达,癫癎组P-gp则在星形胶质细胞及血管内皮细胞中大量表达(12·9,P<0·01)。结论GST-π、P-gp在RE患者脑内表达可能与患者对抗癫癎药耐药有关。     

硫化氢／3-巯基丙酮酸转硫酶在癫痫患者颞叶中的表达

目的探讨硫化氢(H_2S)/3-巯基丙酮酸转硫酶(3-MST)在癫痫患者颞叶中的表达。方法难治性癫痫患者(实验组)外侧颞叶标本15例,高颅压患者(对照组)内减压切除的正常外侧颞叶脑组织标本15例。检测外侧颞叶脑组织中H_2S含量,采用免疫荧光及Western blotting技术检测3-MST表达,观察H_2S/3-MST在癫痫患者外侧颞叶及高颅压患者正常外侧颞叶脑组织中的表达变化。结果实验组外侧颞叶脑组织细胞中H_2S/3-MST表达显著高于对照组,差异均具有统计学意义(均P0.05)。结论在癫痫的病理生理过程中,H_2S/3-MST的高表达可能与其在癫痫中神经保护作用相关。     

难治性癫痫患者颞叶新皮质中NCAM-140kDa的表达:颞叶新皮质的可塑性与难治性癫痫的关系

目的 研究难治性颞叶癫痫患者颞叶新皮质中NCAM-140kDa(神经细胞粘附分子B)的表达,探讨其在难治性癫痫形成中的意义,并初步探讨颞叶新皮质的可塑性与难治性癫痫的关系.方法按随机化原则,在我们建立的难治性癫痫患者术后脑组织库中抽取15例患者的颞叶脑组织,用免疫组织化学、免疫荧光法分别检测其NCAM-140kDa的表达,并与对照组进行比较.结果免疫组化检测到的实验组和对照组的NCAM-140kDa平均光密度值分别为:0.2290±0.0427、0.1789±0.0258,两组比较差异有显著性(P<0.05).免疫荧光检测到的实验组和对照组的NCAM荧光强度分别为28.8345±3.2635、20.4513±2.2834,与对照组相比,差异有显著性(P<0.05).结论 NCAM-140kDa在难治性颞叶癫痫患者的颞叶新皮质中表达增加,提示其参与了难治性颞叶癫痫的形成及颞叶皮质神经细胞的可塑性改变与难治性癫痫的形成密切相关.     

颞叶癫痫主穹窿蛋白表达及其作用研究

目的 探讨主穹窿蛋白(major vault protein,MVP)在颞叶癫痫大鼠模型脑组织的表达及其与难治性癫癎耐药是否相关.方法 用氯化锂-匹鲁卡品制作颞叶癫癎模型,并将它分为药物有效组和耐药组;用免疫组化和Western blot法检测MVP表达.结果 MVP主要表达在海马和皮质区的小胶质细胞,血管内皮细胞,血管周围的星形胶质细胞也有表达,神经元中少见表达;耐药组MVP表达较药物有效组和对照组明显增高,具有统计学意义(P<0.05).结论 耐药大鼠模型中MVP过量表达,提示MVP可能与难治性癫癎的耐药性有关.     

颞叶癫痫患者磁共振弥散张量成像及记忆损害的研究

目的利用磁共振弥散张量成像技术(DTI)研究颞叶癫痫(TLE)患者脑内微观改变及记忆损害的相关脑区。方法对颞叶癫痫患者15例和健康对照者15例,进行DTI检查,利用韦氏记忆量表检测记忆功能。结果 TLE患者部分各向异性弥散(FA)值降低激活区域有颞叶、边缘叶、扣带回和岛叶,升高区有:额叶、顶叶、枕叶,表观系数(ADC)值升高激活区域在颞叶、额叶、枕叶、顶叶;无ADC值降低区域。与健康者相比,颞叶癫痫患者的记忆商数(MQ)(90.73±19.72)显著下降,P<0.01。对照组FA值在左岛叶、颞叶与MQ值正相关;患者组FA值在右额、顶、枕叶、左顶叶与MQ值正相关,在左颞叶与MQ值负相关。对照组ADC与MQ正相关区域在左边缘叶,与MQ成负相关区域在左顶叶、患者组正相关区域在左、右颞叶。结论初步证实TLE患者的脑内结构变化不局限于颞叶,还包括颞叶外网络结构;TLE患者全脑DTI与MQ存在着相关激活脑区,表明记忆功能损害与脑内相关结构改变有关。     

难治性癫痫大鼠脑内多药耐药相关蛋白1表达的研究

目的 研究杏仁核电刺激点燃的难治性癫痫大鼠脑内多药耐药相关蛋白1（multidrug resistant-associated protein 1 MRP1）表达的情况.方法 建立杏仁核电刺激点燃的难治性癫痫大鼠模型,用免疫组织化学及免疫蛋白印记（western blot）的方法,分析比较MRP1蛋白在癫痫模型组与正常对照组的表达.结果 药物难治性癫痫大鼠组脑内多药耐药相关蛋白的表达显著高于正常对照组（P〈0.01）.在癫痫大鼠脑内广泛分布的MRP1免疫阳性细胞主要为毛细血管内皮细胞和星形胶质细胞.结论 癫痫大鼠脑内高表达的MRP1参与了难治性癫痫的耐药机制.     

药物难治性癫痫患者脑内多药耐药相关蛋白1表达的研究

目的 研究药物难治性癫痫患者脑内皮层多药耐药相关蛋白1（multidrug resistant-associated protein 1，MRP1）表达的情况。方法 选择12例药物难治性癫痫患者癫痫切除灶与12例正常对照脑组织标本．用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫组化及免疫蛋白印记（Western blot）方法，分析比较MRP1基因在各组的表达。结果 药物难治性癫痫患者组脑内MRP1的表达显著高于正常对照组（P〈0．01）。在癫痫病灶内广泛分布的MRP1免疫阳性细胞主要为毛细血管内皮细胞和星形胶质细胞。结论 脑内高表达的MRP1参与了难治性癫痫的耐药机制。