SM－1通过激活前胱天蛋白酶－3诱导人胃腺癌BGC－823细胞凋亡发挥抗肿瘤作用

目的：探讨前胱天蛋白酶（ procaspase）－3激活剂SM－1体内外对人胃癌BGC－823细胞的抗肿瘤作用及初步机制。方法体外MTT法测定SM－1对BGC－823细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪分析不同浓度SM－1对BGC－823细胞凋亡率的影响,分别用Western印迹和RT－PCR测定SM－1对胱天蛋白酶（ caspase）－3蛋白和procaspase－3 mRNA表达的影响,采用裸鼠皮下移植瘤模型评价SM－1体内抗肿瘤作用。结果 SM－1体外呈剂量依赖性地抑制BGC－823细胞增殖并诱导其凋亡;SM－1暴露48 h 后, caspase－3蛋白和 procaspase－3 mRNA 表达水平增加;在300 mg／kg剂量下,SM－1对BGC－823皮下移植瘤生长具有明显的抑制作用,其抑制率达到56．3％（ P＜0．05）。结论 SM－1体内外对BGC－823细胞及皮下移植瘤具有较好的抑制作用,其机制主要通过激活procaspase－3诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。     

子宫内膜腺癌中MMP-2、MMP-9的表达及意义

目的探讨MMP-2、MMP-9与子宫内膜腺癌的关系。方法应用免疫组织化学法检测MMP-2、MMP-9在不同子宫内膜中的表达情况。结果MMP-2、MMP-9在子宫内膜腺癌中的阳性表达率明显高于正常子宫内膜和子宫内膜单纯性增生组织,并与子宫内膜腺癌组织学分级、浸润深度和淋巴结转移有关。结论MMP-2、MMP-9在子宫内膜腺癌中的表达呈正相关,可作为检测子宫内膜腺癌恶性程度的指标。     

Darbufelone对胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤生长的影响

目的观察5-脂氧合酶/环氧合酶-2双重抑制剂Darbufelone对胃癌SGC7901细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响,并探讨其机制。方法建立裸鼠皮下实体瘤模型,随机分为Darbufelone治疗组及对照组(n=7),Darbufelone治疗组给予Darbufelone,45mg/(kg·d),连续灌服4周,对照组给予等量生理盐水。测定移植瘤体积及质量并计算抑瘤率。采用RT-PCR及免疫组织化学法检测肿瘤组织中COX-2、5-LOX、PCNA、Bcl-2及Caspase-3的表达。结果 Darbufelone对裸鼠移植瘤的生长有明显抑制作用,与对照组相比,Darbufelone治疗组体重及移植瘤体积均明显减低(P<0.05),抑瘤率为58.42%,且未见不良反应。Darbufelone治疗组COX-2、5-LOX、PCNA、Bc1-2的mRNA及蛋白表达均明显下降,Caspase-3 mRNA及蛋白表达则显著增加(P<0.05)。结论 Darbufelone可抑制体内胃癌生长,其机制与抑制肿瘤细胞增殖及诱导凋亡有关。     

uPA和MMP-9在胃癌组织中的表达及意义

目的研究胃癌组织中尿激酶型纤维蛋白溶解酶原激活剂（uPA）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）的表达及与临床病理特征的关系,以及二者的关系。方法运用免疫组化SP法检测56例胃癌组织和56例正常胃黏膜组织中uPA和MMP-9的表达。结果胃癌组织中uPA和MMP-9的表达率分别为76．79％和80136％,高于正常黏膜中uPA和MMP-9的表达率（分别为46．43％和48．21％）,差异有统计学意义（P〈0．05）;uPA表达与MMP-9表达呈正相关（P〈0．05）。低分化癌中uPA及MMP-9的表达强于高分化癌,差异有统计学意义（P〈O．05）;有淋巴结转移组中uPA和MMP-9的表达强于无淋巴结转移组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论uPA和MMP-9的表达与胃癌的浸润及转移密切相关,uPA和MMP-9的表达具有协同性。二者的联合检测可作为判断胃癌发展及预后的分子指标。     

达沙替尼提高胃癌细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体敏感性机制研究

目的探讨胃癌细胞中肝细胞生长因子受体(MET)活化的原因以及达沙替尼提高胃癌细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的敏感性。方法免疫印记法检测BGC823和MGC803胃癌细胞中MET、p-MET、Src、p-Src蛋白的表达,MTT法检测达沙替尼和TRAIL处理后胃癌细胞的增殖,免疫荧光法检测Src和MET之间的相互作用。结果 TRAIL作用BGC823和MGC803胃癌细胞后,诱导了Src和MET的磷酸化。Src激酶抑制剂达沙替尼预处理后,抑制了TRAIL诱导的Src和MET的磷酸化。TRAIL能明显提高BGC823胃癌细胞中Src和MET的结合,而达沙替尼联合TRAIL处理BGC823胃癌细胞,Src和MET的结合减少。与TRAIL和达沙替尼单纯用药比较,达沙替尼联合TRAIL对BGC823和MGC803胃癌细胞的增殖抑制作用增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论达沙替尼通过阻止Src与MET的结合进而抑制了Src与MET的活化,提高了胃癌细胞对TRAIL的敏感性。     

MMP-9和TIMP-1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

 目的 探讨基质金属蛋白酶(MMP)-9及组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达及其临床意义。方法 采用SP免疫组化法检测62例NSCLC中MMP-9和TIMP-1蛋白的表达水平。结果 MMP-9和TIMP-1的阳性表达率分别为74.2％和69.4％。腺癌中二者表达率均显著高于鳞癌(P＜0.05)。随肿瘤TNM分期增加而二者表达率增高,Ⅲ+Ⅳ期二者阳性表达率均显著高于Ⅰ+Ⅱ期(P＜0.05)。淋巴结转移组的阳性表达率显著高于无淋巴结转移组(P＜0.05)。结论 MMP-9可作为判断肺癌恶性程度、转移及预后的指标。TIMP-1不是简单对MMP-9的局部升高起反应。     

TACE对肝癌MMP-2和MMP-9表达及患者预后的影响研究

目的探讨经导管动脉化疗栓塞术(TACE)对肝癌(HCC)基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因的表达以及对HCC患者预后的影响。资料与方法72例可切除HCC患者分为两组,一组行术前TACE然后行手术切除(A组,n=36),另一组直接行手术切除(B组,n=36)。对手术切除的标本行常规病理、免疫组织化学检查,比较两组切除标本中癌组织、癌旁组织中MMP-2和MMP-9基因的表达和分布。比较两组生存期,同时行Cox回归模型分析影响预后的因素。结果A组MMP-2表达呈强、弱和无表达分别为6例、12例和18例,而B组MMP-2表达呈强、弱和无表达分别为18例、3例和15例,两组比较有显著差异(χ2=11.67,P=0.03)。A组MMP-9表达呈强、弱和无表达分别为10例、15例和11例,而B组表达呈强、弱和无表达分别为18例、15例和3例,两组比较有显著差异(χ2=6.857,P=0.03)。A、B两组中位生存期分别为37.0个月和26.0个月,A组12、24、36个月生存率分别为94.4%、69.4%、50.9%,B组分别为88.6%%、60.0%、25.7%。两组差异有统计学意义(...     

凝血酶促进肺癌Glc-82移植瘤的发展及其机制探讨

目的探讨凝血酶在体内促进肺癌Glc-82移植瘤的发展及其作用机制。方法细胞黏附试验和细胞迁移试验观察凝血酶对Glc-82细胞黏附特性和转移特性的影响,裸鼠移植瘤实验观察凝血酶对Glc-82移植瘤荷瘤小鼠体质量、瘤质量、肺结节及生存期的影响,Western印迹法观察凝血酶对移植瘤组织细胞外信号调节激酶（ERK）、黏着斑激酶（FAK）和抑癌蛋白PTEN（10号染色体上检出的磷酸酶和张力蛋白同源蛋白）的影响。结果凝血酶在体外显著促进Glc-82细胞的黏附和迁移;在体内,凝血酶可降低荷瘤小鼠的体质量、增加瘤质量占体质量比、部分凝血酶组小鼠肺转移增多、荷瘤小鼠的生存时间缩短;Western印迹结果显示,凝血酶可促进肿瘤组织ERK的激活,促进FAK的表达,并且抑制抑癌基因PTEN的表达。结论凝血酶促进肺癌Glc-82移植瘤的恶性进展,可能与促进肿瘤细胞的黏附和迁移特性,促进肿瘤组织ERK、FAK的激活及表达有关,并可能通过抑制抑癌蛋白PTEN的表达而发挥作用。     

MMP-2、MMP-9与脑出血的研究进展

基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases,MMPs）是-组同源的酶活性依赖钙离子和锌离子的中性蛋白酶基因家族,是广泛参与降解全身各种组织细胞外基质（ECM）的蛋白酶类,现发现20多种,其中MMP-2和MMP-9是MMPs家族的两个最主要的成员。由于MMP-2和MMP-9的作用使细胞外基质降解的正常平衡被破坏,从而导致多种病理过程的发生,如髓鞘脱失、血脑屏障损伤等。近年来的研究认为MMP-2和MMP-9与脑血管病的关系密切,其参与了脑出血后脑水肿及炎症反应以及继发性脑损伤的病理过程,并发挥重要作用。本文着重对其与脑出血的关系及研究进展作简要综述。     

MMP-9在子宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义

目的：检测NMP-9在子宫颈鳞状细胞癌中的表达情况,并探讨其与临床病理特征之间的关系。方法：采用免疫组织化学法分别检测MM-9在84例宫颈癌,20例慢性宫颈炎病例中的表达,分析其与临床分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移之间的关系。结果：MMP-9在宫颈癌中的阳性表达率为79．8％,显著高于慢性宫颈炎10％（P〈0．05）。在高、中、低分化癌中的阳性表达率分别为52．6％、79．5％、100％,其差异具有统计学意义（P〈0．05）。在TNMI期组中阳性表达率为58．3％,显著低于TNMⅡ期组95．8％（P〈0．05）,在淋巴结转移组阳性率为88％显著高于无淋巴结转移组67．6％（P〈0．05）。结论：在宫颈癌组织中MMP-9呈高表达,MMP-9可能与宫颈癌的浸润转移有关,对判断宫颈癌患者的预后具有一定意义。     

胚肺成纤维细胞对肺癌细胞增殖及MMP-2表达的影响

目的：研究体外胚肺成纤维细胞对肺癌H460细胞增殖及MMP-2的影响。方法：在单层平面培养条件下,H460细胞和与胚肺成纤维细胞条件培养基共同培养;单层平面及三维立体培养条件下,H460细胞和胚肺成纤维细胞共同培养,MTT或明胶酶谱法测定H460细胞的增殖活力及MMP-2的表达。结果：胚肺成纤维细胞条件培养基不能促进肺癌H460细胞的增殖和MMP-2的表达。胚肺成纤维细胞与肺癌H460细胞共同培养时出现了MMP-2的表达明显增强。结论：胚肺成纤维细胞能通过促进H460细胞MMP-2的表达影响肺癌的侵袭和转移。     

腺病毒介导p53基因转染增加人胃癌细胞的放射敏感性

目的评价腺病毒介导p53基因(Adp53)转染对人胃癌细胞的凋亡效应和放射增敏作用。方法以重组腺病毒介导p53基因感染4种不同p53状况的人胃癌细胞，用免疫组织化学法和Western blot法检测P53蛋白在胃癌细胞中的表达；用细胞集落形成法检测细胞存活率；用TUNEL法检测细胞凋亡。胃癌细胞感染Adp53后照射4Gy，用流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡；胃癌细胞种植肿瘤内注射Adp53后照射6Gy，以肿瘤相对体积增长曲线观察肿瘤抑制情况。结果1：100效靶比(MOI)Adp53产生细胞高转染率，以及p53基因在4种胃癌细胞中均高表达，并产生G2/M期阻滞、凋亡增加和细胞增殖抑制。如果以凋亡评价放射效应，Adp53转染对4Gy照射4种细胞的凋亡率比值为：W细胞3．0，M细胞3．6，neo细胞2．2，823细胞2．5。体内实验结果显示，Adp53对w细胞肿瘤6Gy照射的抑瘤率比值为1．41，而对M细胞肿瘤为1．91。结论腺病毒介导p53基因转染产生细胞凋亡并提高人胃癌细胞的放射敏感性，这种作用不依赖于细胞内在的p53状况。     

照射后不同p53基因状态胃癌细胞的G1期阻滞和凋亡

目的　评价抑癌基因ｐ５３（ 野生型ｐ５３） 对照射后人胃癌细胞系（ＢＧＣ８２３） 的Ｇ１ 期阻滞和凋亡的控制作用。方法　３ 种具有不同ｐ５３ 状态的人胃癌细胞系,即转染人野生型ｐ５３ 基因的ＢＧＣ８２３ｗｔｐ５３ 细胞、转染人突变型ｐ５３ 基因的ＢＧＣ８２３ｍｕｔｐ５３ 细胞和转染无ｐ５３ 基因的空载质粒的ＢＧＣ８２３ｖｅｃｔ 细胞,用流式细胞计分析细胞,４Ｇｙ 照射后０、８ 和２４ 小时后各细胞时相分布和凋亡的反应。结果　照射４Ｇｙ 后８ 小时和２４ 小时后的ＢＧＣ８２３ｗｔｐ５３ 细胞出现强烈的Ｇ１ 期阻滞（分别占原细胞总数的６７－９％ 和６１－１ ％） ,而ＢＧＣ８２３ｍｕｔｐ５３ 、ＢＧＣ８２３ｖｅｃｔ 细胞几乎没有Ｇ１ 期阻滞;照射４Ｇｙ 后８ 小时和２４ 小时后的ＢＧＣ８２３ｗｔｐ５３ 细胞出现明显的预示凋亡的亚Ｇ１ 峰,凋亡细胞比例分别达１３－０ ％ 和１５－３ ％ ;而ＢＧＣ８２３ｍｕｔｐ５３ 和ＢＧＣ８２３ｖｅｃｔ 细胞几乎没有出现亚Ｇ１ 峰和凋亡细胞比例都为零。结论　野生型ｐ５３ 基因具有促进照射后肿瘤细胞的Ｇ１ 期阻滞和凋亡作用,而ｐ５３ 变异和缺失则减低了肿瘤细胞对放射线的反应。     

青蒿素及其衍生物体外抗肿瘤活性研究

目的研究青蒿素及其衍生物体外抗肿瘤活性。方法采用四甲基偶氮唑盐法测定青蒿素、双氢青蒿素、蒿甲醚和青蒿琥酯体外抑制人肺癌细胞、人胃癌细胞、人结肠癌细胞、人红白血病细胞和人肝癌细胞的活性。结果青蒿素、双氢青蒿素、蒿甲醚和青蒿琥酯对5株肿瘤细胞有选择性的抑制作用。结论青蒿素及其衍生物在体外对不同的肿瘤细胞有抑制活性。     

肺癌MMP-9和VEGF的表达及意义

目的探讨肺癌组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达及其意义。方法采用免疫组化S-P法检测20例癌旁正常肺组织、84例肺癌组织中MMP-9和VEGF的表达。结果肺癌组织MMP-9和VEGF表达显著高于癌旁正常肺组织（P〈0.01）。小细胞肺癌和腺癌MMP-9表达高于鳞癌（P〈0.01）。肺癌MMP-9表达有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者（P〈0.01）,Ⅲ期和Ⅳ期高于Ⅰ期和Ⅱ期（P〈0.05）。肺癌VEGF表达有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者（P〈0.05）,Ⅲ期和Ⅳ期高于Ⅰ期和Ⅱ期（P〈0.05）。肺癌MMP-9和VEGF的表达呈正相关（P〈0.05）。结论MMP-9和VEGF表达与肺癌侵袭转移密切相关。     

In vitro and in vivo investigation of matrix metalloproteinase expression in metastatic tumor models

INTRODUCTION: Overexpression of matrix metalloproteinases (MMPs), particularly MMP-2 and MMP-9, has been correlated with poor prognosis in several cancer types including lung, colon and breast. Noninvasive detection of MMP expression might allow physicians to better determine when more aggressive cancer therapy is appropriate. The peptide CTT (CTTHWGFTLC) was identified as a selective inhibitor of MMP-2/9 that inhibits the growth of MDA-MB-435 human breast cancer xenografts. METHODS: CTT was conjugated with the bifunctional chelator DOTA (1,4,7,10-tetraazacyclotetradecane-N,N',N',N'-tetraacetic acid) for radiolabeling with (64)Cu (t(1/2)=12.7 h, 17.4% beta(+), 39% beta(-)), a radionuclide suitable for positron emission tomography (PET). In vitro affinity was determined in a fluorogenic substrate assay. Tumor gelatinase targeting was evaluated in both biodistribution and microPET imaging studies. RESULTS: Cu(II)-DOTA-CTT inhibited hMMP-2 (EC(50)=8.7 microM) and mMMP-9 (EC(50)=18.2 microM) with similar affinity to CTT (hMMP-2 EC(50)=13.2 microM; mMMP-9 EC(50)=11.0 microM). In biodistribution and microPET imaging studies, (64)Cu-DOTA-CTT was taken up by MMP-2/9-positive B16F10 murine melanoma tumors. Subsequently, imaging studies using (64)Cu-DOTA-CTT were performed on MDA-MB-435 tumor-bearing mice. With zymography, tumor MMP-2/9 expression in this model was shown to be inconsistent, resulting in microPET detection of the MDA-MB-435 tumor in only 1 of 24 imaged mice. Following limited imaging success, (64)Cu-DOTA-CTT was shown to have poor in vivo stability. CONCLUSIONS: Despite some evidence for selective uptake of (64)Cu-DOTA-CTT by gelatinase-expressing tumors, the low affinity for MMP-2 and MMP-9 and in vivo instability make this an inadequate radioligand for in vivo tumor evaluation.     

雌激素受体阴性乳腺癌中神经胶质瘤致病因子1、基质金属蛋白酶-9的表达及其临床意义

 目的 探讨雌激素受体(estrogen receptor ,ER)阴性乳腺癌中的神经胶质瘤致病因子1(glioma-associated oncogene homolog 1,Gli1)及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)的表达及临床意义。方法 用免疫组化Envision法检测ER阴性乳腺癌组织中Gli1、MMP-9、 CD34的表达情况, 分析Gli1、MMP-9表达与CD34、肿瘤大小、淋巴转移、临床TNM分期、HER-2表达的关系。结果 ER阴性乳腺癌组织中,Gli1阴性(-)、低表达(+)、中表达(++)及高表达(+++)组的CD34分别为48.83±7.53、60.69±10.02、64.68±12.92和75.91±11.30; MMP-9分别为48.15±8.44、61.69±10.71、67.76±14.03、73.11±12.78,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。ER阴性乳腺癌组织中Gli1、MMP-9表达与肿瘤大小、临床TNM分期呈正相关(P<0.05)。ER阴性乳腺癌组织中Gli1与MMP-9表达存在一定正相关性(r=0.462,P<0.01)。结论 Gli1与MMP-9表达呈正相关性,推测Gli1是ER阴性乳腺癌增殖途径中重要的调控节点之一。