野生型p53基因转染卵巢癌SKOV-3细胞对放疗敏感性的影响

目的 探讨γ射线照射抑制平滑肌细胞（SMC）增殖的信号传递途径。方法 培养的动脉平滑肌细胞分别接受吸收剂量为3.5、7．0、14Gy^60Coγ射线照射后，以^3H-TdR掺入法测定平滑肌细胞增殖程度，放射活性法测定蛋白激酶C（PKC）及丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）活性。结果 7．0、14Gy^60Coγ射线能明显抑制平滑肌细胞增殖，同时有MAPK、PKC活性明显降低。结论 7．0、14Gy^60Coγ射线抑制血管平滑肌细胞增殖可能是通过降低MAPK、PKC活性途径实现的。     

小剂量放疗对弹性蛋白及弹性蛋白酶mRNA表达的影响

目的　探讨小剂量放射治疗对血管弹性蛋白及弹性蛋白酶mRNA基因表达的影响。方法　以 0、7、14和 2 8Gy6 0 Coγ射线照射培养的大鼠主动脉平滑肌细胞 ,用逆转录 竞争性聚合酶链反应观察照射培养的大鼠主动脉平滑肌细胞弹性蛋白和弹性蛋白酶mRNA水平。结果　 7Gy照射对血管平滑肌细胞弹性蛋白和弹性蛋白酶mRNA的表达无影响 ,14和 2 8Gy照射后细胞弹性蛋白mRNA水平较对照组增加了 80 7%及 10 2 3% (P <0 0 5 ) ,细胞弹性蛋白酶mRNA水平较对照组减少了 2 5 3%及 5 0 1% (P <0 0 5 )。结论　提示 14和 2 8Gy6 0 Coγ射线照射通过抑制弹性蛋白酶及增加弹性蛋白合成而影响血管细胞外基质的代谢。     

扇贝多肽对(60)Co γ射线诱导的胸腺细胞凋亡的影响

目的评价扇贝多肽对^60Coγ射线诱导的胸腺细胞凋亡的作用。方法昆明小鼠胸腺细胞^60Coγ射线3Gy照射，吸收剂量率0．6Gy／min。实验分空白对照组，模型组，扇贝多肽不同浓度(0．5，0．2．5和0．125mg／m1)预处理为实验组，通过受照细胞形态、生化、DNA和相关酶变化来进行评价。结果经扇贝多肽预处理的实验组细胞有较低的细胞毒性，细胞凋亡受到抑制，细胞脂质过氧化(MDA)水平有所降低而超氧化物歧化酶(SOD)活性可以维持在正常水平。结论扇贝多肽对^60Coγ射线照射所致昆明小鼠胸腺细胞的损伤有保护作用。     

125I粒子持续低剂量率照射对人前列腺癌细胞的抑制作用

目的探讨^125I粒子持续低剂量率照射对人前列腺癌细胞株（PC3）增殖抑制以及对细胞周期的影响。方法^125I粒子（初始剂量率2.77cGy/h）和^60Coγ射线（吸收剂量率2.215Gy/min）对体外培养的PC3细胞进行0、0.5、1、1.5、2、4、6和8Gy照射,用细胞计数、锥虫蓝染色和集落形成法检测细胞增殖、细胞活力和细胞存活率的情况;用单击多靶模型拟合剂量存活曲线;用流式细胞仪检测细胞周期。结果随着照射剂量的增加,^125I粒子照射组的细胞生长比^60Coγ射线组更加明显地受到抑制（P〈0.05）。^125I粒子照射PC3细胞D0值为2.243,Dq为0.87,N为1.618,SF2为0.5。^60Co照射组PC3细胞放射生物学参数D0值为2.824,Dq为1.08,N为1.587,SF2为0.7。^60Co和125I粒子的RBE比值为1.4。与空白对照组相比,^125I粒子组和^60Co组4Gy照射细胞24h后均出现G2期阻滞。结论^125I粒子照射能抑制人前列腺癌细胞的增殖并能使PC3细胞阻滞于G2期。     

γ射线照射对脐血淋巴细胞增殖和NK细胞活性的影响

目的观察γ射线照射对脐血淋巴细胞增殖和NK细胞活性的影响。方法取正常分娩的新生儿脐带血,体外肝素抗凝,应用常规密度梯度离心法分离脐血单个核细胞(MNC),计数并调整细胞浓度。Gamma Cell 1000数控细胞照射仪体外照射脐血MNC细胞,吸收剂量率3.72 Gy/min。①采用3H-TdR掺入法测量脐血淋巴细胞增殖:取已分离的单个核细胞,调至细胞浓度1×106个/ml,接受0.248、0.496、0.992、1.984、3.9685、.952、7.936和15.872 Gyγ射线照射。照射后继续培养56 h后加3H-TdR(3.7×107Bq/孔)再培养8 h后收集细胞,用Beckman液体闪烁计数器计数放射性核素每分钟闪烁数(计数/min)。②采用3H-TdR释放法检测脐血NK细胞活性:取传代培养24~48 h的K562细胞为靶细胞,调整浓度1×106个/ml,加入3H-TdR(3.7×108Bq/ml)孵育6 h,洗涤2次去除游离的3H-TdR,再制备成5×105个/ml备用。脐血单个核细胞调整细胞浓度为1×107个/ml作为效应细胞(效靶比20∶1),给以上述不同剂量γ射线照射。将效应细胞与制备好的靶细胞继续培养18 h后收集细胞,用Beckman液体闪烁计数器计数放射性核素每分钟闪烁数。结果在γ射线对脐血淋巴细胞增殖活性影响的研究中,0.248~15.872 Gyγ射线照射显著降低淋巴细胞增殖能力,增殖活性抑制程度与辐射剂量呈正相关(r=0.839,P<0.05);3.968 Gyγ射线照射组增殖活性仅为对照组的30.86%(P<0.01),SI=7.8,其中3.968~15.872 Gyγ射线照射未发现其明显的增殖活性。而γ射线对脐血NK细胞活性的影响的观察中发现0.248~1.984 Gyγ射线照射可引起脐血NK细胞活性显著增高(P<0.01);3.968 Gyγ射线照射保持NK细胞活性,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);5.952~15.872 Gyγ射线可引起脐血淋巴细胞NK细胞活性显著降低(P<0.01)。结论3.968 Gyγ射线照射完全抑制脐血淋巴细胞增殖的同时仍呈现脐血NK细胞抗肿瘤活性。因此,在进行供者淋巴细胞输注或混合脐血移植时,应用3.968 Gyγ射线照射淋巴细胞,再进行过继性细胞免疫治疗可能降低移植物抗宿主病效应,同时不影响移植物抗白血病效应;混合脐血移植时增强移植物抗白血病效应。     

抑制MAPK介导bcl-2抗低剂量电离辐射诱发白血病细胞凋亡

目的:利用髓性白血病细胞HL60细胞,研究低剂量电离辐射(1Gy)对MAPK(丝裂原激活的蛋白激酶)和JNK(c-JUN末端激酶)活性的影响,确定MAPK介导与细胞辐射敏感性以及bcl-2表达与细胞存活的关系。方法:在辐照前和辐照中用MEK1/2(MAPK激酶)的抑制剂PD98059处理转化的HL60/pCEP4(对照质粒)和HL60/bcl-2细胞,1Gyγ射线照射后测定MAPK、JNK、Cdc2激酶活性,流式细胞仪测定细胞周期,以细胞凋亡和细胞集落形成能力作为辐射敏感性指标。结果:1低剂量电离辐射后20min,HL60/pCEP4和HL60/bcl-细胞MAPK活性升高至峰值,而JNK激酶活性无显…     

γ射线诱导IEC-6细胞GSK-3β信号转导途径的激活

目的 观察60Co γ射线对IEC-6肠上皮细胞糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）信号转导途径的激活效应。方法 培养的IEC-6细胞接受6 Gy 60Co γ射线照射后,分别在照射后5、30、60和120min进行各项实验。应用RT-PCR法检测GSK-3 β、Akt、caspase-9和caspase-3 mRNA表达变化,Western blot检测GSK-3β和Akt蛋白磷酸化的变化,分光法检测caspase-9酶活性。结果 6 Gy γ射线照射后30 min GSK-3β mRNA表达开始增高,60、120 min GSK-3 β mRNA均明显高于对照组;照射后30 min GSK-3 β蛋白磷酸化水平开始降低,60、120 min GSK-3 β蛋白磷酸化水平明显低于对照组水平;AktmRNA在γ射线照射后与对照组相比无明显改变;蛋白磷酸化水平在照射后30 min开始降低,60和120 min均明显低于对照组;caspase-9 mRNA在照射后30 min开始增高,60和120 min均高于对照组,caspase-9酶活性变化趋势与mRNA一致,在照射后30 min开始增高,并在辐射后60和120 min逐渐升高;caspase-3 mRNA在照射后60和120 min高于对照组。结论 6 Gy γ射线照射可以使GSK-3β上游的信号分子Akt磷酸化抑制,活性降低,进一步使GSK-3β在γ射线照射后磷酸化水平降低,被活化,从而激活GSK-3β信号转导途径,激活后的GSK-3β可激活其下游介导的与细胞凋亡相关的蛋白激酶家族的成员caspase-9、-3,从而造成IEC-6细胞的损伤。     

γ射线对培养的兔血管平滑肌细胞的抑制作用

目的 观察体外培养的兔动脉平滑肌细胞(SMCs）对7射线照射的剂量效应关系，探讨电离辐射抑制SMCs增殖的细胞生物学机理。方法 静止期SMCs分别给予γ射线2．5，5，10，20及30Gy一次性照射后继续培养4，24或72h。以^3H—TdR掺入法、流式细胞术分析、微核实验和电镜观察γ射线对SMCs的DNA合成、增殖周期和损伤的影响。结果 在2．5Gy以上剂量γ射线一次性照射时，SMCs增殖明显抑制，细胞G0／G1期阻滞，均呈剂量依赖性。2．5Gy以下剂量γ射线照射后24h左右可见细胞凋亡增加，2．5Gy以上剂量7射线照射可使SMCs发生坏死。结论 电离辐射能抑制SMCs增殖，使细胞产生G0／G1期阻滞，并呈剂量依赖关系。SMCs死亡方式与受照射剂量有关。     

125I粒子持续低剂量率照射和60Co γ射线高剂量率照射对H1299细胞生物学效应的比较研究

目的：探讨125I粒子持续低剂量率（CLDR）内照射和60Co γ射线高剂量率（HDR）外照射对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞株H1299的细胞生物学效应。方法 H1299细胞处于指数生长期时分别行125I粒子CLDR照射和60Coγ射线HDR照射;克隆形成实验检测细胞存活分数,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率,Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果随着照射剂量增大,125I粒子CLDR照射比60Coγ射线HDR照射抑制H1299细胞增殖效应更明显。照射剂量为4 Gy时125I粒子组H1299细胞G2/M期百分比、细胞凋亡率分别为21．77±0．31%、13．79±0．50%;同样照射剂量下,60Co照射组H1299细胞G2/M期百分比仅为18．85±0．99%,细胞凋亡率仅为8．79±0．22%（P<0．05）。125I粒子CLDR照射明显上调Bax蛋白表达,同时下调Bcl-2蛋白表达。结论125I粒子CLDR内照射比60Coγ射线HDR外照射抑制H1299细胞增殖效应更明显。 Bcl-2/Bax蛋白比失衡在125I粒子CLDR照射抗肿瘤效应中可能发挥重要作用。     

用染色体畸变研究AT细胞系辐射敏感性和适应性反应

目的探讨毛细血管扩张运动共济失调症(ataxiatelangiectasia,AT)细胞系的辐射敏感性和对低剂量辐射能否诱导细胞遗传学适应性反应。方法用2cGy60Coγ射线预先照射进入G1期的AT5B1VA(AT)细胞和GM0639(GM)细胞,培养6h后再照射1.0Gy或3.0Gy60Coγ射线,分析染色体畸变。结果G1期的GM细胞在预照射2cGy60Coγ射线的诱导剂量后能非常显著地降低随后照射1.0Gy或3.0Gy60Coγ射线诱发的染色体畸变率,染色体畸变的观察值非常显著地低于预期值(P<0.001),而对AT细胞则没有观察到这种现象,染色体畸变的观察值与预期值差异无统计学意义(P>0.05);另外,1.0Gy或3.0Gy60Coγ射线诱发AT细胞的各种畸变率(包括着丝粒畸变、无着丝粒畸变和染色单体型畸变)均显著地高于GM细胞(P<0.001)。结论低剂量电离辐射不能诱导AT细胞产生细胞遗传学适应性反应;AT细胞对电离辐射诱发染色体畸变高度敏感,可能是由于不能正确修复DNA双链断裂的结果。     

辐照的血管内皮对造血干细胞迁徙的影响

目的通过对小剂量γ射线辐照的血管内皮细胞的蛋白激酶C（PKC）活性、黏附分子表达及造血干细胞跨内皮迁徙率的测定，研究辐照的血管内皮对造血干细胞跨内皮迁徙能力的影响。方法1～5Gyγ射线辐照人脐静脉内皮细胞（HUVECs）；用[γ-^32P]ATP掺入外源性底物测定PKC活性；用EUSA法测定黏附分子VCAM—1、PECAM-1、CD44的表达；用双室培养法测定造血干细胞跨HUVECs的迁徙能力。结果3Gy以下γ射线辐照后的HUVECs膜PKC活性逐渐升高，浆PKC活性逐渐降低，尤以2、3Gy辐照的HUVECs变化最为显著（P〈0．01），而高于3Gy辐照的HUVECs的膜、浆PKC活性呈下降趋势。3Gy以下辐照的HUVECs的VCAM—1、PECAM—1、CD44的表达量也显著升高（P〈0.001）。造血干细胞通过γ射线辐照后的HUVECs的数量显著增加（P〈0．01），但加入针对上述黏附分子的单克隆抗体后，能显著降低造血干细胞跨内皮能力。PKC活性与VCAM—1、PECAM—1、CD44的表达呈正相关关系。结论适当小剂量的γ射线辐照血管内皮细胞，能活化其PKC、增加PKC活性，并进而上调黏附分子VCAM—1、PECAM—1、CD44的表达，有利于造血干细胞的跨内皮迁徙。     

重离子12C对60Coγ射线诱发人染色体畸变效应的比较研究

目的 重离子和高剂量率^60Coγ射线照射离体人血建立染色体畸变的剂量-效应曲线；比较重离子^12C照射与^60Coγ射线照射诱发染色体畸变的相对生物效能。方法 重离子^12和^60Coγ射线照射离体人血，吸收剂量率为3Gy/min，吸收剂量为1．0～8．0Gy。主要记录染色体型畸变的非稳定性畸变，对双着丝粒体和着丝粒环做曲线拟合，并检验回归系数的显著性和曲线的拟合度。结果 重离子^12C和^60Coγ射线照射离体血诱发的染色体畸变(双 环)，在0—8Gy范围内，呈良好的剂量一效应关系。^12C离子诱发染色体畸变的RBE值是不恒定的，它随吸收剂量增加而减少，在0．3—8．0Gy范围内，RBE值(Dr/Dc)从2．62到1．00，平均1．58。结论 ^12C离子对^60Coγ射线照射诱发染色体畸变，在照射剂量较低时，有较高的生物效应。     

Fas和Bcl-2在受照射小鼠脾淋巴细胞中的表达及与细胞凋亡的关系

目的　探讨Fas和Bcl 2蛋白在受大剂量60 Coγ射线照射后小鼠脾淋巴细胞中的表达及与细胞凋亡的关系。方法　小鼠全身一次性γ射线照射 ,吸收剂量分别为 0、6、9、12、15和 2 0Gy ,于照射后 3、6、12、2 4h、3、7、14和 2 8d活杀取材 ,免疫组化LSAB染色观察后进行定量分析。结果　照射后 6h ,Fas的表达呈强阳性 ,6～ 12Gy剂量范围内阳性表达更明显 ,而随时间递增表达逐渐减少 ,但无明显的剂量效应关系 ,7d后表达明显减弱。Bcl 2的表达于 6h几乎为阴性 ,在 <12Gy剂量组更为明显。至照射后 2 8d依然未恢复。 结论　在受大剂量照射小鼠脾淋巴细胞中Fas癌基因蛋白表达升高与细胞凋亡有较好相关关系 ,即Fas蛋白可能有促进凋亡的作用。而在相同剂量照射后 ,Bcl 2抑制凋亡的作用被减弱甚至消失。上述两种癌蛋白对受大剂量60 Coγ射线照射的小鼠脾淋巴细胞凋亡均具有重要调控作用     

白蛋白融合型G-CSF对3.0 Gy ~（60）Co γ射线照射恒河猴造血损伤的作用

目的：观察重组人血清白蛋白-粒细胞集落刺激因子融合蛋白（HSA-G-GSF）对3.0Gy 60 Coγ射线照射恒河猴造血系统损伤的作用。方法：18只成年恒河猴给予3.0Gy 60 Coγ射线照射,随机分为照射对照,HSA-G-CSF,吉粒芬对照3组。吉粒芬对照组动物照射后0~13d每天1次皮下注射吉粒芬5μg/kg。HSA-G-CSF组动物分别于照射后0和7d皮下注射HSA-G-CSF 150μg/kg。观察各组动物外周血象、造血祖细胞数、造血组织病理学。结果：HSA-G-CSF可显著提高照射后恒河猴外周血中白细胞、中性粒细胞、网织红细胞和造血祖细胞的数量,可促进骨髓造血功能恢复,有效保护脾脏和淋巴结组织结构和细胞完整。结论：HSA-G-CSF融合蛋白可明显促进急性辐射损伤猴造血功能恢复,与吉粒芬相比,对3.0Gy 60 Coγ射线照射恒河猴造血损伤有更显著的治疗作用。     

STAT3RNAi联合γ射线照射对U251细胞增殖的影响

目的 构建特异性抑制信号转导与转录激活因子3 (STAT3)的小干扰RNA(siRNA)表达载体并检测联合 ⁶⁰Co γ射线照射对U251细胞STAT3表达及细胞增殖的抑制作用。方法 设计、合成STAT3特异性的19 bp短链寡核苷酸,经退火形成双链DNA片段,克隆到pSilence2.1-U6-H1载体中,构建STAT3特异siRNA的表达载体, HindⅢ和BamHⅠ双酶切及测序鉴定重组体,并转染U251细胞,免疫印迹法(Western blot)检测STAT3 mRNA和蛋白的表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖活性,克隆形成率及MTT实验确定放疗剂量。结果 经双酶切与测序鉴定成功构建pSilence2.1-STAT3表达载体,转染星形胶质瘤细胞株U251细胞可显著抑制细胞中STAT3 蛋白的表达水平;确定2 Gy为放疗剂量。转染pSilence2.1-STAT3,细胞增殖活性较未转染U251细胞显著降低(P<0.05),联合 ⁶⁰Co γ射线照射U251细胞增殖活性单独转染进一步显著降低(P<0.05)。结论 运用pSilence2.1-U6-H1载体构建的pSilence2.1-STAT3表达载体可有效抑制STAT3的表达及星形胶质瘤细胞的增殖; 联合2 Gy ⁶⁰Co γ射线照射可增加抑制效果。     

6 Gy全身一次~(60)Co γ线照射对大鼠小肠吸收酪氨酸的影响

目的 :探讨 6Gy全身一次 60Coγ线照射对大鼠小肠吸收酪氨酸的影响。方法 :用在体实验方法研究 6Gy全身一次60 Coγ线照射后第 1、3、5、7天大鼠小肠对酪氨酸的吸收率的变化 ,并进行相应的小肠上皮细胞计数。结果 :6Gy全身一次60 Coγ线照射后第 3天出现小肠对酪氨酸的吸收率下降 (P <0 .0 5 ) ,第 5天已恢复正常水平。小肠上皮细胞计数在照射后第 1天即出现明显下降 (P <0 .0 5 ) ,第 3天达最低 (P <0 .0 5 ) ,第 5天即恢复正常水平。结论 :6Gy全身一次 60 Coγ线照射后大鼠小肠对酪氨酸吸收率的变化与小肠上皮的损伤和修复有关     

β和γ射线照射肿瘤细胞的生物效应比较

目的 比较低剂量率β射线和高剂量率γ射线照射诱发肿瘤细胞生物效应特点。方法采用^32Pβ射线和^60Coγ射线照射人宫颈癌HeLa细胞系，用台盼蓝排除法和X-gal衰老细胞染色法比较两种照射肿瘤细胞死亡方式的差异。结果 ^32Pβ射线(0．375cGy/min)和^60Coγ射线(206cGy/min)照射HeLa细胞后72h的结果表明，低剂量率β射线抑制细胞增殖为渐进性，使多数的细胞在一个或几个细胞倍增周期后死亡，以增殖性死亡为主；高剂量率γ射线对细胞的抑制作用直接、迅速，细胞坏死比例高，增殖性死亡(衰老)比例低于持续低剂量照射方式。结论 不同的辐射方式对细胞的杀伤方式不同，了解其放射生物学机理有助于临床治疗方案的选择。     

护生宝口服液对辐射的防护作用研究

目的　研究中药辐射防护剂护生宝 (HSB)对60 Coγ射线损伤的防护作用 ,为HSB的临床应用提供实验依据。方法　用 3种不同浓度的HSB和生理盐水灌胃实验组和单纯照射组小鼠 ,各组受试鼠给予 7 5Gy60 Coγ射线一次性全身照射 ,观察不同处理组小鼠的存活率及血象变化情况。结果　HSB保护组小鼠的 30d存活率、外周血白细胞 (WBC)和血小板 (PLT)均显著高于单纯照射组 (P <0 0 1) ,平均保护系数高达 1 77。结论　HSB具有较强的抗辐射作用、能显著提高受致死剂量60 Coγ射线照射小鼠的存活率 ,降低辐射对小鼠外周血WBC和PLT的损伤作用     

电离辐射调控脂质体介导的p16基因在HeLa细胞中的表达

目的探讨不同剂量γ射线照射后诱导脂质体介导的p16基因在HeLa细胞中的表达及抗癌作用。方法用脂质体Lipofectamin介导重组质粒Egr-p16转染人HeLa细胞，采用RT-PCR的方法检测了。Coγ射线照射转染后的人HeLa细胞剂量效应和时程变化，用细胞计数检测细胞增殖的变化，用流式细胞术检测细胞周期的变化。结果研究证实0．5～8Gv照射后p16的转录水平高于对照，在2～4Gy照射后达到峰值，2Gy照射后2—24h高于对照组，在照射后4h达到峰值，然后逐渐下降。细胞生长曲线显示体外稳定转染联合。Coγ射线照射对HeLa细胞的增殖具有明显的抑制作用。细胞周期变化显示转染后的HeLa细胞经过照射后G0／G1期比例呈现剂量依赖性的下降，而S期则出现剂量依赖性的增加，出现明显的S期阻滞，G2／M期在2Gy出现明显的阻滞，在5和10Gy时逐渐下降，但是仍然高于对照组。结论^60Coγ射线可诱导转染的HeLa细胞p16转录水平的增强，同时在细胞增殖上出现明显的变化。     

肉碱棕榈酰转移酶1对60Co γ射线照射大鼠小肠上皮细胞IEC-6增殖的影响及相关机制研究

目的探索60Co γ射线诱导大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)中CPT1A和CPT1B蛋白表达变化, 并进一步研究肉碱棕榈酰转移酶1(CPT1)变化对受照细胞增殖的影响及相关分子机制。方法 IEC-6细胞经棕榈酸、血清饥饿以及血清饥饿联合棕榈酸处理后, 给予0、5、10或15 Gy60Co γ射线照射, 照射后24 h收集细胞并提取蛋白, 利用Western blot方法检测CPT1A和CPT1B蛋白的表达水平变化;ETO是CPT1的小分子抑制剂, 利用克隆形成率实验和CCK-8实验分析ETO抑制CPT1对60Co γ射线照射IEC-6细胞存活及增殖的影响;利用Western blot方法检测5 Gy60Co γ射线照射ETO处理IEC-6细胞48 h后细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)蛋白表达及磷酸化水平变化。结果棕榈酸处理组中, CPT1A蛋白在15 Gy γ射线照射后表达量显著增加(t=-2.82, P<0.05)。血清饥饿处理组中, CPT1A蛋白在5、10和15 Gy γ射线照射后表达量明显升高(t=-3.28、-8.72、-8.67...