野生型组织型纤溶酶原激活剂工程细胞株生物学特性分析

组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）是体内丝氨酸类蛋白酶。它能激活纤维蛋白溶酶原生成纤溶酶，后者将不溶性的纤维蛋白降解为可溶性肽段，使血栓溶解，血管再通。而且由于它与纤维蛋白有高亲和力，只激活血栓表面纤溶酶原，溶解局部血栓，因而引起全身出血倾向小。目前，...     

纤溶酶原激活剂及其活性测定

纤溶酶原激活剂（plasminogen activator,PA）是一种特异性的蛋白水解酶，它能将无活性的酶前体转变为纤溶酶（plasmin）。纤溶酶是一种有效的非特异性的蛋白水解酶，能够裂解血液内的纤维蛋白凝块使其成为可溶性的多肽。本文描述了纤港酶原激活系统的一些生化特征，及对纤溶酶原激活剂活性的测定方法。纤溶酶原激活剂在血栓性疾病和出血性疾病的诊断具有潜在应用价值。     

纤溶系统与炎症

纤溶系统包括纤溶酶原激活剂、纤溶酶原激活物抑制剂、纤溶酶原、纤溶酶、纤维蛋白原,是非常重要的细胞外基质降解系统,通过细胞外基质降解作用参与了组织屏障的破坏、炎症细胞的迁移.同时纤溶系统可以通过与整合素受体或非整合素受体的相互作用、信号传导等非蛋白降解功能来调节炎症细胞的激活分化及定向运动,在炎症反应中发挥了重要的作用.     

纤溶系统与炎症

纤溶系统包括纤溶酶原激活剂、纤溶酶原激活物抑制剂、纤溶酶原、纤溶酶、纤维蛋白原,是非常重要的细胞外基质降解系统,通过细胞外基质降解作用参与了组织屏障的破坏、炎症细胞的迁移.同时纤溶系统可以通过与整合素受体或非整合素受体的相互作用、信号传导等非蛋白降解功能来调节炎症细胞的激活分化及定向运动,在炎症反应中发挥了重要的作用.     

纤溶酶原激活剂及其活性测定

纤溶酶原激活剂 (plasminogen activator,PA)是一种特异性的蛋白水解酶 ,它能将无活性的酶前体转变为纤溶酶 (plasmin)。纤溶酶是一种有效的非特异性的蛋白水解酶 ,能够裂解血液内的纤维蛋白凝块使其成为可溶性的多肽。本文描述了纤港酶原激活系统的一些生化特征 ,及对纤溶酶原激活剂活性的测定方法。纤溶酶原激活剂在血栓性疾病和出血性疾病的诊断具有潜在应用价值。     

运动与纤维蛋白溶解系统

所有存在于血液、尿液和体液中与纤维蛋白分解或分解抑制有关的各种蛋白质的总体称为纤维蛋白溶解系统。纤维蛋白溶解作用是正常人体的重要生理功能,它在清除血管和腺体排泌管道内形成和沉积的纤维蛋白、保证管道畅通、防止血栓形成、排除伤口或炎症病灶内的纤维蛋白、促进伤口愈合等方面起重要作用。研究表明,纤溶活性低下是冠心病的高危因素,且组织纤溶酶原激活物抗原（ｔＰＡａｇ）和纤溶酶原激活抑制剂－１（ＰＡＩ－１）是心血管疾病的独立危险因子。１纤溶系统生理纤溶系统的外激活途径如下图所示。纤溶酶原激活系统（ＰＡ）是丝氨…     

重组人尿激酶原半成品的稳定性观察

尿激酶原或称尿激酶型纤溶酶原激活剂,是尿激酶的前体,它主要激活血栓部位纤维蛋白表面结合的纤溶酶原使其变成纤溶酶,后者再溶解血栓中的纤维蛋白,起到特异性的溶栓作用。临床上主要用于治疗急性心肌梗塞、肢体动静脉栓塞及脑血栓等疾病。80年代中期以来,许多发达国家采用基因重组技术先后在原核和真核细胞中表达并纯化出了尿激酶原产品。由于尿激酶原很不稳定,在纤溶酶、激肽释放酶、胰蛋白酶、内肽酶等的作用下,其158位Ｌｙｓ和159位Ｉｌｅ之间的肽键易断开,变成尿激酶,给尿激酶原的分离纯化带来一定的困难。为在纯化制备工艺中控制质量,…     

氨甲环酸在创伤患者中如何使用,其药理性质是什么?

<正>解答:对于出血或存在大出血风险的患者,推荐尽早使用氨甲环酸,首剂1g(给药时间10min),后续1g输注持续8h(1A);创伤出血患者应该在伤后3 h内使用氨甲环酸;在患者转送医院的途中应用首剂的氨甲环酸。氨甲环酸是一种赖氨酸类似物,它能可逆性地与纤溶酶原的环状结构域结合,阻止其激活成纤溶酶,从而防止纤维蛋白降解。     

蝮蛇抗栓酶治疗前房积血25例报告

蝮蛇抗栓酶是一种纤维蛋白溶酶原激活物,能激活纤维蛋白溶酶原,使之转变为纤维蛋白溶酶。后者具有强烈的水解纤维蛋白的     

用于血栓检测的放射性药物(续)

血纤维蛋白溶酶血中血纤维蛋白溶酶的主要作用是溶解新生栓塞.Back等的一项研究表明血纤维蛋白溶酶的血栓亲和力在纤维蛋白分解系统各组分中是最高的一个.自从Alkjaersig等发现被网着的纤维蛋白溶酶原被激活为血纤维蛋白溶酶,并在血栓中溶解纤维蛋白.对于其作用机理仍有争议.因此,人们怀疑外源的标记由纤维蛋白溶酶与血栓结合的量是否足以能得到外部显像结果.此外,血液中含有高浓度的血纤维蛋白溶酶抑制物,它会在血纤维蛋白溶酶刚注入体内就与其形成复合物,阻止其与血栓结合.一些临床试验报告了应用~(99m)Tc-血纤维     

纤维蛋白溶解系统功能的研究进展

纤维蛋白溶解系统即纤溶系统对人体血液保持流体状态与正常运行具有重要作用.研究发现纤溶系统的物质还具有很多新的生理功能.如纤溶酶原具有抑制血管内皮细胞增殖的能力;PAIS与t-PA的相互作用,动态平衡调节着滋养层细胞浸入子宫壁,绒毛间隙血窦中纤维蛋白的溶解等重要的生理过程;PAI-1可能通过抑制肿瘤细胞凋亡而促进肿瘤细胞生长,是一系列肿瘤发生时的不祥预兆因子等等.因此,进一步认识纤溶系统物质的功能很有必要.     

He—Ne激光血管内照射对家兔纤维蛋白溶解功能影响的实验研究

为探讨低强度Ｈｅ－Ｎｅ激光（６３２．８ｎｍ）血管内照射治疗缺血性心、脑血管病的机制，设计了形成颈动脉血栓的家兔模型，观测对此模型组进行三次低强度Ｈｅ－Ｎｅ激光耳静脉血管内照射（每天１次，平均剂量６７２．３Ｊ／ｃｍ２）前后，血浆中纤维蛋白溶解酶原（简称纤溶酶原）、纤溶酶原激活剂抑制物、组织型纤溶酶原激活剂活性与Ｄ－二聚体和纤维蛋白原含量的变化，并与对照组比较。结果表明：低强度Ｈｅ－Ｎｅ激光血管内照射对纤溶系统的激活与血液高凝状态的缓解有促进作用，可能是由于低强度Ｈｅ－Ｎｅ激光血管内照射循环血液，对血液系统的调制作用所致     

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂RNA探针的构建及应用

组织型纤溶酶原激活物（ｔＰＡ）和尿激酶型纤溶酶原激活物（μＰＡ）可使纤溶酶原转变为纤溶酶,参与纤溶、炎症、细胞迁移、排卵、肿瘤浸润和转移等许多生理和病理过程。Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂（ＰＡＩ－１）是这两者主要的快速作用的抑制剂,它能抑制ＰＡ介导的纤溶活性,认为是体内最重要的纤溶活性调节者,因而肿瘤组织中ＰＡＩ河的表达特性备受关注［１、２］。已检测过胃癌、结肠癌、乳腺癌、子宫癌等多种肿瘤组织中的ＰＡＩ－１河的表达特性,在乳腺癌患者中已作为诊断与预后的指标［３、４］。以往研究多采用免疫组化或ＤＮＡ探…     

纤维蛋白诱导活化系膜细胞表达明胶酶A、B的机制研究

为观察纤维蛋白对系膜细胞（HMC）表达明胶酶A（MMP-2）、明胶酶B（MMP-9）的作用并探讨其活化机制,应用RT-PCR、明胶酶谱分析法分别在基因转录水平与蛋白质活性水平上检测纤维蛋白对HMC表达MMP-2、MMP-9的作用,采用纤维蛋白酶谱法与平板法检测纤维蛋白对HMC表达纤溶酶原激活物（PA）活性的影响。结果发现,纤维蛋白呈剂量与时间依赖性促进HMC MMP-2与MMP-9表达的上调,并同时促进HMCtPA与uPA的表达;应用抑肽酶阻断纤溶酶活性后能够完全阻断pro-MMP-2与pro-MMP-9的活化。提示肾脏局部沉积的纤维蛋白可以促进HMC表达与活化MMP-2、MMP-9、而MMP-2与MMP-9的活化依赖于PA/纤溶酶系统的调控。     

u-PA在细胞培养上清中的稳定性

尿激酶型纤溶酶原激活剂 (u_PA)主要是由无酶催化活性的单链酶原 (scu_PA或pro_UK)和具有激活纤溶酶原 (plas minogen)活性的双链尿激酶 (tcu_PA或UK)组成。scu_PA只激活吸附在纤维蛋白表面的纤溶酶原 ,具有选择性溶栓作用[1] 。scu_PA由 411个氨基酸组成 ,可被体内纤溶酶或激肽释放酶催化在Lys15 8～Ile15 9之间的肽键水解断裂转换为双链尿激酶。我所已构建了表达水平为 5 μg/ (10 6细胞·d)的基因重组CHO工程细胞株用于生产u_PA[2 ] ,并已放大至30L培养规模 ,采用多孔微载体无血清连续培养工艺 ,培养上清中u_PA的最高浓度可达 …     

尿激酶型纤溶酶原激活剂诱发的纤溶反应及其调节因子

目的 研究一些凝血和纤溶因子对尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA)诱发纤溶反应的调节作用及机制。方法 采用凝块溶解测定和纤维蛋白检测板测定观察了一些凝血和纤溶因子对uPA诱导的纤溶反应的影响及相互作用。结果 凝血酶激活的纤溶抑制因子（TAFI）对uPA或单链uPA（scuPA）诱发的纤溶反应具有明显的拮抗作用，凝血酶调节因子（TM）可明显增强其抑制作用，凝血酶对uPA诱导的纤溶反应没有明显的影响，但可抑制scuPA诱导的纤溶反应，该作用亦可被TM所增强或被水蛭素所消除。结论 凝血酶／TM可通过激活TAFI对uPA或scuPA诱导的纤溶反应产生抑制作用，凝血酶对scuPA诱发的纤溶反应的抑制作用亦可通过其对scuPA的裂解失活而实现。     

抗纤维蛋白单克隆抗体及t—PA／u—PA用于血栓显…

血栓性疾病的及时，准确诊断及溶栓治疗效果，对疾病的预后起着关键作用，核素标记的抗纤维蛋白单抗及其片段，如鼠抗人纤维蛋白Ｄ－双聚体单抗ＭＡ１５Ｃ５与人纤维蛋白β链单抗５９Ｄ８，以及与抗纤维溶酶原活化剂ｔ－ＰＡ单抗组成的双特异嵌合抗体，作为血栓显像剂显示了很好的应用前景，由抗纤维旧白单抗与小分子纤溶酶原活化剂重组的蛋白分子，则可能成为新的有效溶栓剂。     

纤溶酶原激活剂抑制物-1的研究进展

纤溶酶原转变成有纤溶活性的纤溶酶是纤溶过程决定性的一步?t-PA是体内主要的纤溶酶原激活物之一,而纤溶酶原激活剂抑制物(Plasminogen Activator Inhibitor PAI)是组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)和尿激酶纤溶酶原激活剂(u-PA)的快速抑制剂,在纤溶系统中起着关键性调节作用?自1983年Chmielewska J等[1]发现纤溶酶原激活剂抑制物(PAI-1)以来,越来越多的证据表明PAI活性或含量的改变直接影响纤溶系统的活性,是许多疾病特别是血栓形成性疾病发病的危险因素之一[2～4]?1 生物学特性纤溶酶原激活剂抑制物(PAI)包括PAI-1,PAI-2,PAI-3,C…     

开搏通、氯沙坦对大鼠腹主动脉缩窄后纤溶活性变化的影响

目的：探讨压力对纤溶活性的影响及纤溶活性与肾素血管紧张素系统的可能关系，探寻ACEI及AT1拮抗剂减少心肌梗塞再发生的机理。方法：用发热底物法测定大鼠腹主动脉缩窄后血浆纤溶酶原激活抑制物-1(PAI-1)和组织型纤溶酶原激活物（t-PA）的活性变化以及肼苯达嗪、开搏通、氯沙坦应用后其活性变化。结果：发现腹主动脉缩窄后，随颈动脉压力升高，PAI-1活性升高，t-PA活性降低，纤溶活性降低；应用肼苯达嗪、开搏通、氯沙坦在有效降低压力同时，PAI-1活性降低，t-PA活性提高，纤溶活性提高，且开搏通及氯沙坦改善纤溶活性的作用更明显，此作用二者之间无显著差别；由此推论压力与纤溶活性密切相关，有效降低压力，提高纤溶活性。结论：肾素血管紧张素系统与纤溶系统有潜在的内在联系，ACEI及ATI拮抗剂均能提高纤溶活性。     

高原地区妊高征患者凝血纤溶系统的变化

目的：探讨高原妊高征患者血液纤溶系统变化;方法：选择高原地区妊高征患者36例,正常妊娠妇女23列,正常健康发性20例;采集空腹静脉血,检测受检者血浆组织纤溶酶原激活剂（t-PA)、纤溶酶原激活剂抑制物－1（PAI－1）活性及纤维蛋白原（FG）、纤溶降解产物（FDP）含量,并进行分析;结果：高原地区寻高征患者FG和FDP含量及PAI－1活性显著高于正常妊娠组及对照组,妊高征患者FG和FDP含量及PAI－1活性的变化与病情程度有关,正常妊娠组和妊高征组t-PA活性明显高于对照组,但在正常妊娠组和妊高征组之间无显著差异,结论：高原地区妊高征患者存在纤溶抑制功能亢进及凝血与纤溶系统的紊乱。