荧光探针的应用

荧光在近几十年来应用日益广泛,在工业、农业、医药学、考古学、矿物学等各个方面都具有广泛的用途。在工业上,常利用荧光进行各种金属制件的检疵。例如有人利用钙指示剂作荧光探针,测定钢铁中微量铝以控制产品质量。在农业上,荧光常被用于检查农副产品的纯度,鉴定种子的生活力,及早发现农副产品的败坏,判断果实成熟程度以及诊断农作物病虫害等,对农药进行分析检测也是一个较重要的方面。     

海洋来源的荧光天然产物

近年来海洋天然产物越来越引起科学家们的关注。由于在珊瑚礁珊瑚和海葵等海洋无脊椎动物中具有荧光现象普遍,许多海洋天然产物除了药用和生物学价值外,还具有突出的荧光特性。本文从来源、发色团结构以及应用等方面进行综述,介绍了Ageladine A、Marmycin A、两种新型羟基蒽醌和Zoanthoxanthins等几种海洋来源的荧光小分子,以及代表性的海洋荧光蛋白GFP家族和藻胆蛋白。它们具有独特的光学性质将在生物医学领域广泛应用。     

荧光标记多糖的技术及其应用

多糖是生命科学中不可缺少的生物大分子,由于其本身缺少易于检测的发光基团,一直困扰着人们对多糖进一步的研究。荧光物质具有荧光发光基团,通过化学合成的方法将其结合到糖链分子上,从而使多糖带有荧光基团,以便于我们用常用的检测手段进行检测,从而进一步了解多糖发挥的作用,并对其作用机制进行研究。     

介质环境对小檗碱荧光光谱影响的研究

探讨介质环境对小檗碱荧光光谱性质的影响。方法配制在不同溶剂及ＰＨ条件下的２＊１０＾－５ｍｏｌ．Ｌ＾－１小檗碱溶液，测定灾光光谱。结果：随着溶剂极性的降低，其荧光发射光谱紫移并且荧光强度显著提高。结论小檗碱所具有的特殊荧光性质，可作为生物荧光探针的优选试剂。     

KH34基因荧光表达质粒的构建

目的：构建KH34基因的荧光表达质粒。方法应用分子生物学手段将KH34基因克隆入phage-UBC-flag-cherry载体,构建KH34的荧光表达质粒,并以该质粒转染293T细胞,荧光显微镜下观察该质粒在细胞内的定位。结果成功构建了KH34的荧光表达质粒,并成功转染293T细胞。结论本实验成功构建了KH34的荧光表达质粒,转染后的293T细胞也具有明显的红色荧光,为后续分析KH34对细胞的功能影响奠定了基础。     

氧氟沙星与DNA的相互作用

目的:用荧光光谱技术研究在生理条件下氧氟沙星与DNA分子间结合作用的机理。方法:在pH 7.20条件下,测量不同DNA浓度下氧氟沙星的荧光激发与发射光谱。结果:DNA存在能使氧氟沙星荧光猝灭,测得该反应的结合常数K=2448 L·mol-1。结论:氧氟沙星与DNA结合生成了不发光的复合物导致氧氟沙星的荧光猝灭。     

荧光光谱法测定甘草中甘草苷的含量

摘要目的建立甘草中甘草苷的荧光含量测定方法。方法采用二维和三维荧光,进行含量测定。结果以L 色氨酸为参比,测得甘草苷荧光量子产率为0.007 1。根据甘草苷的二维和三维荧光光谱图,研究了酸度对其荧光特性的影响。在0.107 8～8.192 0 μg•mL－1范围内,甘草苷浓度与其荧光强度呈良好的线性关系,检出限为0.392 0 μg•mL－1。利用荧光光谱法测定甘草中甘草苷的含量为7.63%,平均回收率为99.96%。结论该方法简便快捷,灵敏度高,可用于甘草中甘草苷的含量测定。     

三维荧光指纹图谱用于鉴别真伪厚朴的研究

目的根据三维荧光指纹图谱,建立一种鉴别真伪厚朴的新方法。方法在相同的实验条件下,扫描真伪厚朴的三维荧光指纹图谱,对所得图谱进行对比。结果真伪厚朴的三维荧光指纹图谱在荧光峰个数、峰位置及峰强度方面均有明显差异。结论本方法简单、准确,为鉴别真伪厚朴提供了一种新的手段。     

多种药材的增荧光薄层鉴别研究

目的拓宽薄层鉴别检测途径,提高中药成方制剂中的薄层鉴别增订率。方法将各药材的样品溶液点于薄层板上,展开后,进行不同方式的增荧光反应研究。结果药材中多种无检测信息的成分呈现出不同颜色的荧光,斑点清晰,检测灵敏度提高,信息量增大。结论本研究有效拓宽了薄层鉴别检测途径,使多种无检测信息的中药材,能够被高灵敏度、准确地进行定性和定量控制。     

荧光标记在药物分析领域的应用进展

荧光染料具有高灵敏度、高稳定性和高选择性等特点。荧光标记作为一种非放射性标记技术,已成为现代药物分析检测中不可或缺的方法之一。而新型荧光标记材料量子点的出现,克服了传统荧光染料的某些缺点,更有利于荧光标记技术在药物分析领域的推广应用。综述药物的荧光标记及其在药物分析领域的应用进展。     

浅谈中药饮片的荧光鉴别

目的探讨荧光法鉴别中药饮片真伪优劣的可行性。方法选取30种中药饮片,放置于紫外分析仪365nm或254nm下,观察荧光。结果 30种中药饮片中有10种荧光鉴别与文献一致,占33.3%;有8种结果与文献不完全相符,也占26.7%;另有4种荧光鉴别于文献记载完全不同,占13.3%;另有8种中药饮片的荧光鉴别书中未收载,经检查这8种也有荧光反应。结论荧光鉴别法可以作为中药饮片鉴别的依据之一。     

Cu(Ⅱ)-阿莫西林体系的荧光特性及Cu(Ⅱ)的含量测定

目的 建立荧光光度法测定实际样品中铜离子的含量.方法 基于铜离子对阿莫西林的荧光有显著的熄灭作用,建立了荧光法快速测定铜离子含量的新方法.结果 铜离子与阿莫西林发生配合反应,配合物的组成比为1:2,将该方法用于水样中铜离子的测定,铜离子浓度的线性范围为1.00×10<'-6>～5.00×10<'-2>mol/L,检出限为1.87×10.7mol/L.样品回收率为94.0%～106.5%.结论 该方法简便、快速、准确.     

用荧光参数表征牛血清白蛋白在脲中的变化过程

目的 研究牛血清白蛋白在脲中的构象变化过程,根据荧光参数的变化,建立蛋白构象与环境变化的关系,从分子水平探讨蛋白质构象变化而致不稳定的原因.方法 采用内源性荧光法、荧光淬灭法及荧光探针法研究牛血清白蛋白在脲中的构象变化过程.结果 随着脲浓度的增加,牛血清白蛋白中内源性色氨酸荧光峰位先蓝移后红移,荧光强度逐步衰减;而8 -苯胺基-1-萘磺酸与牛血清白蛋白结合物的荧光峰位则逐步红移,荧光强度逐渐衰减.结论 在变性过程中,牛血清白蛋白的色氨酸残基所处区域构象经历了一个先紧缩后舒展的三态过程;而8 -苯胺基-1-萘磺酸的探针结合位点与色氨酸残基可能位于牛血清白蛋白的不同区域,且构象变化更为灵敏.     

湖南省怀化市葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的筛查分析

目的：提高人口素质,预防智力障碍,减少残疾儿发病率。方法：在新生儿出生后72小时采足跟血3滴,直接滴于美国产S＆S903滤纸上。采用改良G6PD荧光斑点法进行G6PD初筛,确诊用改良G6PD定量比值法进行检测。结果：①共收集全市182家新生儿疾病筛查率〉85%以上的医院全年的标本共16240份,其中男婴9018例,女婴7222例。初筛阳性者男350例,女120例。确诊患儿男264例,女88例。检出率为男1.83%,女0.29%。②检出的G6PD患儿农村46例,城市26例。结论：我市发病率较广东、广西稍低,而G6PD发生率以靖州县最高,可能与该县新生儿筛查率达95%有关。原因需进一步探讨。     

时间分辨荧光免疫法检测甲胎蛋白的应用及其临床意义

以往测定甲胎蛋白（AFP）用ELISA法，但是这种方法只能达到半定量，而且还有钩状效应。第二种方法是酶联荧光（ELFA）法，虽然能定量检测AFP，但以常用荧光素作为标记物，往往受血清成分、试管、仪器组件等的本底荧光干扰，以及激发光源的杂色光的影响，使灵敏度受到很大限制。时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）是针对这些缺点加以改进的一种新型检测技术。其基本原理是以镧系元素铕（Eu）螯合物作为荧光标记物，利用这类荧光物质寿命长的特点，延长荧光测量时间，待短寿命的自然本底荧光完全衰退后再行测定，所得信号完全为长寿命镧系螯合物的荧光，从而有效排除非特异性本底荧光的干扰。本研究应用TR-FIA法测定AFP，并与ELFA法作比较，另外还对其临床意义作初步探讨，现报告如下。     

高度近视眼黄斑病变眼底荧光造影的探究

目的探讨高度近视眼黄斑病变眼底荧光造影（FFA）的临床特征。方法选取我院自2011年6月至2012年6月收治的98例（98眼）行眼底荧光造影检查的高度近视眼黄斑病变患者,并对其临床资料进行回顾性分析。结果本组98例患者中35例患者为漆样裂纹性黄斑病变,占35．71％,13例患者为高度近视性Fuclls斑,占13．27％,15倒患者为高度近视性黄斑萎缩,占15.31％,27例患者为新生血管性高度近视眼黄斑病变,占27．55％,5例患者为漆样裂纹性黄斑出血,占5．10％,3例患者为高度近视性黄斑裂孔,占3．06％。结论高度近视眼光斑病具有多种病变特征,给予患者眼底荧光造影检查有利于确定患者的病变性质,从而为判断预后及治疗提供有效的依据,临床效果显著,值得推广和应用。     

胰岛素脂质体的结构特点

目的研究胰岛素脂质体中胰岛素所处的位置及结构特点.方法采用激光散射测定其粒径大小与分布,用透射电镜测定形态;用HPLC法、荧光扫描、胰蛋白酶降解和聚丙烯胺凝胶电泳等实验手段研究胰岛素在脂质体中所处的位置.结果胰岛素脂质体平均粒径为218.3nm,多分散度为0.073,拟合度为7.2,形态多为圆球或近圆球形.HPLC测定结果显示,胰岛素脂质体中含有胰岛素;荧光扫描结果显示胰岛素脂质体中无胰岛素荧光发射峰;胰岛素脂质体可抵抗胰蛋白酶对胰岛素的降解;胰岛素脂质体的聚丙烯胺凝胶电泳谱图中未见胰岛素的条带.结论胰岛素脂质体中胰岛素被包裹在脂质体的内部,因此可抵抗胰蛋白酶的降解.     

植物凝集素稳定性的荧光光谱分析

植物凝集素分别溶于纯水或生理盐水中，得到△λ=20nm、55nm的同步荧光光谱．在荧光分光光度计中插入起偏器和检偏器测得偏振度。结果表明植物凝集素在纯水中发生聚集，酷氨酸残基可能位于聚集部位，植物凝集素在纯水中不稳定，易沉淀。     

虎杖鞣质的荧光偏振分析

目的 通过测定荧光偏振度分析了解亚硫酸盐对鞣质分解的影响。方法 从虎杖中提取鞣质，加入亚硫酸盐使鞣质分解，随着亚硫酸钠浓度配比的变化，观察鞣质溶液的荧光偏振度值的改变。结果 两组实验结果显示，随着亚硫酸钠浓度对鞣质配比的增大，鞣质溶液的荧光偏振度变得越来越小。结论 测定鞣质溶液荧光偏振度，可以用来检测鞣质结构的改变。     

荧光光谱法研究卡铂与牛血清白蛋白的相互作用

目的研究卡铂与牛血清白蛋白(BSA)在人体生理条件下的相互作用。方法采用荧光光谱法研究卡铂与BSA的荧光猝灭机制、结合位点数、结合常数;利用热力学参数考察其作用力类型;采用同步荧光光谱法探讨卡铂对BSA构象的影响。结果卡铂与BSA形成1∶1的复合物引起BSA的荧光猝灭,其猝灭类型为静态猝灭。卡铂与BSA结合位点数为9.81×103 mol/L,两者以疏水作用为主。卡铂与BSA相互作用使色氨酸残基所处的微环境发生改变。结论卡铂与BSA相互作用形成复合物,并改变BSA的构象。