RP-HPLC法测定酪丝亮肽中醋酸的含量

目的:建立高效液相色谱法测定酪丝亮肽中醋酸的含量,探讨化学合成多肽中醋酸的含量测定方法。方法:采用C18色谱柱(5μm,4.6 mm ×250 mm);流动相A为0.2 mol·L-1硫酸盐缓冲液(pH 2.3),B为乙腈-水(90:10);流速1.0 mL·min-1;先用流动相A-B(96:4)等梯度洗脱出醋酸峰至5 min,继用流动相A、B梯度洗脱多肽等其他强保留组分;紫外检测波长:220 nm;进样量:20μL。结果:方法的线性范围为1.0-5000μg·mL-1(r=0.9997);最低检测限20 ng;精密度RSD为0.83％(n=7);平均回收率为99.07％,RSD为0.49％(n=9)。结论:方法简便灵敏,结果准确可靠,可用于酪丝亮肽及其他合成多肽中醋酸的含量测定。     

RP-HPLC法测定酪丝亮肽及其制剂的含量和有关物质

目的:建立高效液相色谱法测定酪丝亮肽及其制剂的含量和有关物质。方法:采用C18色谱柱(5μm,4.6 mm×250mm);流动相A为0.2 mol·L-1硫酸钠缓冲液(pH 2.3),B为乙腈-水(90:10);流速1.0 mL·min-1,梯度洗脱;检测波长:220 nm;进样量:20μL;柱温:30℃。结果:方法的线性范围为0.31-8.29μg(r=0.9999);最低检测限0.2 ng;精密度的RSD为0.11％(n=7);制剂的平均加样回收率为99.1％(n=9)。结论:方法简便灵敏,结果准确可靠,可用于原料及制剂的含量测定及有关物质检查。     

酪丝亮肽多囊脂质体的制备和体外释放研究

目的:制备酪丝亮肽多囊脂质体,并考察其体外释药性能。方法:采用复乳法制备酪丝亮肽多囊脂质体,RP-HPLC法测定酪丝亮肽含量,以稳定性、包封率和体外释放为指标,正交试验设计法对酪丝亮肽多囊脂质体处方工艺进行优化。结果:酪丝亮肽多囊脂质体粒径均一,有80%的粒径分布在20~30μm,包封率达92.43%。酪丝亮肽多囊脂质体体外释放符合Korsmeyer-Peppas模型,37℃条件下在PBS介质中释药t1/2达111.5 h。结论:酪丝亮肽多囊脂质体稳定性好,包封率高,具有良好的缓释效果。     

首批酪丝亮肽国家对照品的研制

目的 建立首批酪丝亮肽国家对照品.方法 应用紫外分光光度计、液质联用仪等对酪丝亮肽进行结构确证,采用反相高效液相色谱法测定纯度及氨基酸比值,采用3种方法进行含量测定.结果 确证了酪丝亮肽原料的结构,并确定首批酪丝亮肽对照品含量为96.8％.结论 首批酪丝亮肽国家对照品（批号：140742-200701）的建立可有效控制产品质量.     

高效液相色谱法测定酪丝缬肽及其制剂的含量及有关物质

目的:建立高效液相色谱法测定酪丝缬肽及其制剂注射用酪丝缬肽的含量及有关物质。方法:采用反相高效液相色谱法,固定相为十八烷基硅烷键合硅胶,流动相为0.1 mol·L~(-1)磷酸二氢钠溶液-乙腈系统,梯度洗脱,流速1.0 mL·min~(-1),检测波长220 nm。结果:进样量在9.972～4986 ng 范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r=1.000),最低检测限为0.8 ng。制剂平均回收率(n=3)分别为100.0%,99.9%,100.1%;RSD 分别为0.26%,0.06%,0.31%。结论:方法专属性好,准确、灵敏,用于酪丝缬肽及制剂的含量及有关物质测定结果可靠。     

蛋白酶抑制剂对酪丝亮肽代谢及药代动力学的影响

研究蛋白酶抑制剂对酪丝亮肽代谢及药代动力学的影响。在酪丝亮肽体外血浆代谢系统中,分别加入4种常见的蛋白酶抑制剂,考察其对酪丝亮肽降解曲线的影响,并进一步考察联合使用对酪丝亮肽大鼠药代动力学的影响。体外血浆代谢研究表明,乌苯美司对酪丝亮肽体外血浆降解有明显抑制作用,其它3种酶抑制剂无影响;大鼠药代动力学研究表明,乌苯美司可显著改善酪丝亮肽药代动力学行为,提高体内血药浓度。氨肽酶是酪丝亮肽降解的主要酶,建议在临床中探索乌苯美司与酪丝亮肽的联合用药方案。     

RP-HPLC法测定降血压肽/聚乳酸-羟基乙酸微球中主药含量及包封率

目的:建立测定降血压肽(AHP)/聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)微球中AHP含量和包封率的反相高效液相色谱(RP-HPLC)法。方法:样品经二氯甲烷破坏并用水萃取后进行测定。反相色谱柱为Eclipse XDB-C18,流动相为乙腈-水(含0.05%三氟乙峰酸)均=得1到7∶很83好,流的速分为离1,.0A mHPL.检m测in浓-1,度柱线温性为范30围℃为,2检5～测6波25长μ为g.1m9L9-n(1mr,=进0样.99量9为9),2平0μ均L回。收结率果为:在9此8.7色8%谱,条日件内下和A日H间P与精辅密料度及分溶别为剂0.53%、0.86%(n=5)。结论:所建立的方法操作简单、快速,结果准确、可靠,可用于AHP/PLGA微球中主药含量及包封率的测定。     

不同PLGA型号对奥曲肽微球的包封率和体外释放行为的影响

考察了不同型号聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)作为水溶性药物奥曲肽微球载体对载药量、包封率和体外释放行为的影响.结果表明,PLGA中丙交酯含量降低,载药量和包封率降低,而突释量增大.PLGA型号相同时,黏度较大的PLGA微球载药量和包封率较高,突释量较小.采用PLGA与聚乳酸(PLA)混合材料制备的微球比单用PLGA材料微球的突释量小、载药量和包封率高、缓释效果好.     

HPLC法测定5-氟尿嘧啶磁性碳微球的药物含量及包封率

目的:建立磁性碳微球中5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)含量及包封率的HPLC测定法.方法:色谱柱为DiamonsilTM ODS-C18柱(200mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水(10∶90)为流动相,流速1.0 ml· min-1,检测波长为260 nm,柱温为30℃,采用磁性分离法分离微球和游离药物,测定并计算药物含量和包封率.结果:5-Fu在1.0～300.0 μg·ml-1范围内线性关系良好(r =0.999 9),方法回收率为99.52％～ 100.12％,日内、日间RSD均小于1.0％,制备的微球平均包封率为(66.62±1.18)％,平均载药量为(221.69±3.99) μg·mg -1.结论:本法简便,灵敏,准确,可用于5-Fu磁性碳微球的含量及包封率测定.     

酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:观察酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402的抑制作用,并分析其可能机制。方法:制备裸鼠移植瘤模型,随机分为生理盐水、氨基酸混合物、环磷酰胺、酪丝亮肽高低剂量等5组,每组12只,观察酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402肿瘤组织坏死和凋亡的影响;电镜观察其对肿瘤细胞超微结构改变;流式细胞技术分析其对细胞周期及细胞凋亡率的影响。结果:酪丝亮肽能够诱导肿瘤细胞坏死和凋亡、细胞周期阻抑、显著抑制肿瘤的生长,给药剂量为80μg.kg-1.d-1和160μg.kg-1.d-1时,肿瘤抑制率分别为42%与58%。结论:酪丝亮肽可以显著抑制人肝癌BEL-7402的生长,作用机制与促进肿瘤细胞的凋亡和坏死有关。     

乳酸/羟基乙酸共聚物分子量对艾塞那肽微球性质的影响

目的:制备艾塞那肽一乳酸/羟基乙酸共聚物(PLGA)微球,并研究PLGA分子量对微球性质的影响.方法:选用不同分子量的PLGA,采用复乳法制备艾塞那肽PLGA微球;对微球的粒径、载药量、包封率和体外释放等指标进行测定.结果:PLGA分子量对艾塞那肽PLGA微球的性质有明显影响.结论:可通过调节PLGA分子量调控微球的性质.     

RP-HPLC法测定壳聚糖微球中5-氟尿嘧啶的包封率

目的建立壳聚糖微球中5氟尿嘧啶包封率的测定方法。方法采用C18色谱柱,甲醇水(体积比为10∶90)为流动相,检测波长266 nm。用超声浸泡研磨法测定了药物的包封率,并与国内外常用的2种测定方法进行对比。结果平均回收率为103.64%,RSD为1.60%(n=5),质量浓度在2.0~20.0 mg.L-1内线性关系良好。测得壳聚糖微球的包封率为42.21%。而其他2种方法测定同一批微球的包封率值比实际偏高或偏低,即测定方法存在问题。结论该法简便灵敏,测得值真实、可靠,适用于交联法制备的壳聚糖微球中药物包封率的测定。     

HPLC法测定苦参碱微球的包封率

摘 要 目的：建立测定苦参碱微球包封率的HPLC法。方法: 使用Fortis Xi C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以甲醇 乙腈 3%磷酸溶液（11∶80∶9）为流动相,流速：0.6 ml·min^-1,检测波长：210 nm,柱温：25 ℃,进样量：20 μl。结果: 苦参碱在3~150 μg·mL^-1浓度范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=0.999 7),回收率为99.92%（RSD=0.97%,n=9）,制备的苦参碱微球包封率为（81.85±3.22）%（n=3）。结论:该方法可用于测定苦参碱微球的包封率。     

HPLC法同时测定大株红景天中红景天苷、酪醇和没食子酸的含量

目的建立同时测定大株红景天中红景天苷、酪醇和没食子酸含量的方法。方法采用HPLC法。色谱柱为Inertsil ODS-SP柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-体积分数0.03%磷酸水溶液(体积比7∶93);检测波长为220 nm;流速为1.0 mL.min-1。结果红景天苷、酪醇和没食子酸质量浓度分别在4.100~121.9 mg.L-1(r=0.999 9,n=6)、1.10~31.9 mg.L-1(r=0.999 8,n=6)、2.00~60.7 mg.L-1(r=0.999 9,n=6)内与峰面积呈良好的线性关系。平均回收率(n=9)分别为99.1%、98.9%和103.0%,RSD分别为3.0%、2.1%和0.8%。结论本方法快捷、简便,结果准确、可靠、重复性好,可作为大株红景天药材中红景天苷、酪醇和没食子酸的测定方法。     

不同封端的PLGA/PLA-醋酸曲普瑞林微球的制备及体内外评价

目的考察微球载体材料聚乳酸-羟基乙酸共聚物(poly-lactic-co-glycolic acid,PLGA)和聚乳酸(poly(D,L-lactide acid),PLA)的不同封端基团对于包载醋酸曲普瑞林(triptorelin acetate,TA)微球的形态、粒径、包封率、体外释放行为以及体内药效学的影响。方法使用复乳化-溶剂挥发法制备包载TA的PLGA和PLA微球;用扫描电镜观察微球的形态,用激光粒度测定仪测定微球的粒径;建立高效液相色谱法(HPLC)用于TA包封率及体外释放度的测定;采用酶联-免疫吸附法考察了微球经肌肉注射后对正常雄性Sprague Dawley大鼠血浆睾酮浓度的影响。结果制备得到的微球形态为球形或类球形,平均粒径约为30μm。PLGA和PLA,尤其是PLGA,其分子末端基团对TA的包封率和体外释放速率均有影响。酯封端的PLGA微球的包封率显著高于酸封端的微球,而酯封端的释放速度要慢于酸封端。体内药效学实验结果显示,大鼠体内睾酮水平在注射微球后两个小时达到峰值,之后逐渐下降,不同微球之间无显著性差异。结论不同封端结尾的PLGA和PLA对微球形态、包封率和体外释药速率有显著影响,但对正常大鼠体内睾酮水平的影响没有显著性差异。     

高效液相色谱法测定亮菌水提液中亮菌甲素的含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定亮菌水提液中亮菌甲素含量。方法色谱柱为Agilent 20RBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1 mol·L-1乙酸(50∶50),柱温为30℃,检测波长为366 nm。结果水提液中亮菌甲素在0.016～3.184 mg·L-1范围内线性较好,平均回收率为100.29%(RSD为0.36%)。结论该检测方法灵敏、准确、简便。     

杆菌肽脂质体的制备及其药物含量测定

目的：制备杆菌肽脂质体,并采用HPLC法测定杆菌肽脂质体中杆菌肽含量和包封率。方法用薄膜分散法将杆菌肽制备成杆菌肽脂质体;色谱条件：色谱柱为Diamonsil-C18色谱柱（150mm×4.6mm,5μm）;流动相为pH 6.0的磷酸盐缓冲液-甲醇（60∶40）;柱温为25℃;检测波长为254nm;流速为1mL/min。采用低温离心法分离杆菌肽脂质体中的游离药物。结果所制备的杆菌肽脂质体的平均包封率为87.94%（RSD 1.12%, n=5）;在本色谱条件下,杆菌肽在0.061~1.83μg范围内与峰面积积分值的线性关系良好（R2=0.9997）,平均回收率为99.68%~101.38%。结论本HPLC法简单,准确可靠,可用于杆菌肽脂质体中杆菌肽含量及其包封率的测定。     

胸腺肽α1微球的制备及其评价

目的:建立胸腺肽α1(Tα1)微球的制备及评价方法。方法:以聚乳酸-乙醇酸嵌段共聚物(PLGA)为载体材料,采用复乳法(w/o/w)制备Tα1长效注射微球,考察其粒径大小、外观、包封率等理化性质;采用RP-HPLC法测定微球中Tα1的含量。色谱柱为Kromasil柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈∶0.1%三氟乙酸(20∶80),流速1.0 mL/min,柱温为室温,进样量为50μL,检测波长210 nm。结果:Tα1微球球形圆整,包封率在80%以上。Tα1在5~100μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9),以Tα1的峰面积(A)对浓度(c)作线性回归,回归方程为A=24 179c-10 967。结论:Tα1微球的制备工艺合理,评价方法简便、快速、准确。     

高效液相色谱法测定多西他赛聚乳酸微球中多西他赛的含量

目的:建立高效液相色谱法测定多西他赛聚乳酸微球中多西他赛的含量.方法:采用C18色谱柱,以乙腈-水(50:50)为流动相,检测波长为229 nm.结果:多西他赛在4.98～124.62 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99.5%,RSD为0.59%(n=9).结论:本方法简便、快捷,准确可靠.     

高效液相色谱法测定葛根素-壳聚糖微球的载药率

目的:建立测定壳聚糖微球中葛根素载药率的高效液相色谱测定法。方法:微球经盐酸回流降解并用蒸馏水定容后进行测定。葛根素的定量分析采用Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-水(20∶80),流速1 mL.min-1,检测波长250 nm,柱温30℃,进样量为20μL。结果:在本文确定的色谱条件下,葛根素浓度在0.2～20.0μg.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9998,n=6);平均回收率(n=9)为100.3%。结论:本方法可用于壳聚糖微球中葛根素的载药率测定。