CXCL12-CXCR4生物轴与卵巢癌关系的动物实验研究

目的：探讨CXCL12-CXCR4趋化因子轴与卵巢癌发病的关系。方法将36只裸鼠按照体重大小编号,随机分为3组,将转染质粒SKOV3／CXCR4、转染载体SKOV3／neg及未转染的SKOV3三种卵巢癌细胞进行体外培养,取三种细胞悬液4×106个（200μl）于裸鼠左下腹注入腹腔,建立荷人卵巢癌细胞裸鼠腹腔移植瘤模型。自注入肿瘤细胞后第2天起,将每组裸鼠又随机分为对照组和处理组,对照组腹腔内注射0い．9％氯化钠溶液0．2 ml,处理组腹腔内注射CXCL12-CXCR4拮抗剂AMD3100,观察各组裸鼠自然死亡后腹腔成瘤数、体积、腹水量和存活期的变化。结果 SKOV3／CXCR4、SKOV3／neg及SKOV3三种卵巢癌细胞接种于裸鼠腹腔后1周左右荷瘤裸鼠在对照组和处理组体重差比较,差异有统计学意义（ P ＜0．05）。接种SKOV3／CXCR4细胞的裸鼠对照组的平均生存期与CXCR4拮抗剂AMD3100处理组裸鼠比较,差异有统计学意义（ Z ＝－2．29, P ＜0．05）;而接种SKOV3／neg细胞的裸鼠对照组的平均生存期与CXCR4拮抗剂AMD3100处理组裸鼠比较,差异无统计学意义（ P ＞0．05）;接种SKOV3细胞的裸鼠平均生存期与CXCR4拮抗剂AMD3100处理的裸鼠比较,差异无统计学意义（ P ＞0．05）。接种SKOV 3／CXCR4细胞裸鼠的对照组腹腔移植瘤的平均个数和平均重量与CXCR4拮抗剂AMD3100处理组比较,差异有统计学意义（ P ＜0．05）。结论 CXCL12-CXCR4趋化因子轴与卵巢癌的发生有一定的相关性,可能是其发病的一个重要原因,在一定程度上也反映了病情的轻重。     

MMP-2、MMP-14、TIMP-2在退变腰椎间盘髓核组织的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-14（MMP-14）和金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）在退变腰椎间盘髓核组织表达的意义。方法应用免疫组织化学法检测36例退变腰椎间盘髓核组织（退变组）、20例腰椎骨折腰椎间盘髓核组织（对照组）MMP-2、MMP-14和TIMP-2表达。结果退变组MMP-2、MMP-14表达明显高于对照组（P〈0.001）,TIMP-2表达无明显改变（P〉0.05）;椎间盘退变等级与MMP-2、MMP-14及TIMP-2表达呈正相关（分别rs=0.710,P〈0.001;rs=0.617,P〈0.001;rs=0.406,P=0.014）;MMP-2与MMP-14、TIMP-2表达呈正相关（分别rs=0.665,P〈0.001;rs=0.516,P=0.001）。结论 MMP-2、MMP-14和TIMP-2表达加强可能是导致椎间盘退变的重要原因之一。     

CXCL12-CXCR4生物轴与卵巢癌关系的动物实验研究

目的探讨CXCL12。CXCR4趋化因子轴与卵巢癌发病的关系。方法将转染质粒SKOV3／CXCR4、转染载体SKOV3／neg及未转染的SKOV3三种卵巢癌细胞进行体外培养,建立荷人卵巢癌细胞裸鼠腹腔移植瘤模型,观察各组裸鼠自然死亡后腹腔成瘤数、体积、腹水量和存活期的变化。结果3组裸鼠生存时间、腹腔移植瘤的个数和重量比较差异有统计学意义（P〈0．05）,CXCL12浓度越高,受试裸鼠腹腔移植瘤个数越多,重量越大,生存时间越短。结论CXCL12-CXCR4趋化因子轴与卵巢癌的发生有一定的相关性,可能是其发病的一个重要原因,在一定程度上也反映了病情的轻重。     

卵巢肿瘤干细胞中趋化因子的表达与细胞侵袭转移能力的关系

目的探讨卵巢肿瘤干细胞中趋化因子的表达与细胞侵袭转移能力的关系,为卵巢肿瘤的治疗提供新的研究思路和药物作用靶点。方法采用流式细胞术与RT-PCR方法检测卵巢肿瘤干细胞系CAOV-3中CXCR4的表达,通过体外微孔隔离室（Transwell）检测CXCR4对CAOV-3细胞侵袭转移能力的影响。结果 CXCR4在CAOV-3中细胞呈阳性表达,CXCL12可促进CAOV-3细胞的迁移,CXCR4的封闭能抑制CXCL12对CAOV-3迁移的促进作用。结论 CXCL12-CXCR4相互作用可促进卵巢肿瘤干细胞侵袭转移,在卵巢肿瘤的生长和侵袭转移过程中起着重要作用。     

苯并[a]芘通过CXCL12/CXCR4轴影响早孕小鼠子宫内膜炎症反应CSCD

目的探讨CXCL12/CXCR4轴在苯并[a]芘(Benzo[a]pyrene,B[a]P)影响早孕小鼠胚胎着床过程中的作用及其机制。方法将8周龄昆明小鼠每晚按雌雄2∶1比例合笼,次晨将查得阴栓者记为孕第1天(D1),并随机分为对照组和B[a]P组。B[a]P组孕鼠每日晨称重后以0.1 ml/10 g动物体重灌胃给予0.2 mg/(kg·d)B[a]P,对照组则灌胃等体积玉米油。体外分离小鼠原代子宫内膜基质细胞,将其分为对照组、B[a]P组和rhCXCL12+BaP联合处理组。ELISA法检测小鼠血清CXCL12水平;qRT-PCR、Western blot和免疫组化法检测CXCL12、CXCR4的表达;qRT-PCR和Western blot检测炎症因子IL-1β、IL-10、NLRP3和TNF-α的表达;Western blot检测着床相关因子MUC1、MMP9和HOXa10的表达情况。结果与对照组相比,B[a]P暴露明显降低孕早期小鼠血清中CXCL12含量,同时下调小鼠子宫组织及基质细胞内CXCL12和CXCR4的表达,抑制炎症反应的发生,影响着床相关因子表达。上调小鼠原代子宫内膜基质细胞内CXCL12表达,可缓解B[a]P所导致的炎症抑制和着床相关因子表达异常。结论B[a]P可能通过下调CXCL12/CXCR4表达,抑制炎症反应,影响孕早期小鼠胚胎植入过程。     

环氧化酶2和基质金属蛋白酶2在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的探讨环氧化酶2（COX-2）和基质金属蛋白酶2（MMP-2）在宫颈癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学方法,检测COX-2和MMP-2在45例宫颈癌患者和20例正常宫颈组织中的表达水平。结果宫颈癌组织的COX-2、MMP-2积分吸光度（OD）值明显高于正常宫颈组织[（0．241±0．036）和（0．308±0．046）与（0．117±0．019）和（0．143±0．025）比较,（P〈0．05）]。高分化级宫颈癌COX．2、MMP-2的表达与病理分级、组织学类型及国际妇产科联盟（FIGO）分期无关（P〉0．05）;有淋巴结转移癌COX-2、MMP-2的表达明显高于无淋巴结转移癌（P〈0．05）;COX．2与MMP．2的表达呈正相关（r=0．487。p〈0．05）。结论COX-2和MMP-2的过表达可能参与了宫颈癌的发生和发展。     

Expression of Chemokine CXCL12/CXCR4 in Non-Small Cell Lung Cancer

目的:探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与临床病理特征间的关系.方法:采用免疫组织化学SP三步法检测95例NSCLC患者肿瘤组织及27例肺部良性肿瘤患者(对照组)的石蜡标本中CXCL12、CXCR4的表达情况,并比较其在不同临床病理参数患者间表达的差异.结果:对照组中,CXCL12和CXCR4的高表达率分别为0和7.4％(2/27),NSCLC患者的高表达率分别为54.7％(52/95)和42.1％(40/95),差异均有统计学意义(P＜0.01).在NSCLC中,淋巴结转移组的CXCL12和CXCR4的高表达率(67.2％、51.7％)均高于非转移组(35.1％、27.0％),差异均有统计学意义(P＜0.05).CXCL12、CXCR4的高表达率均随TNM分期的增高而逐渐增高,且Ⅲ期的高表达率明显高于Ⅰ期,差异有统计学意义(P＜0.01).NSCLC患者CXCL12与CXCR4之间无明显相关性.不同年龄、性别、肿瘤大小、组织学分型及分化程度NSCLC患者之间CXCL12、CXCR4的高表达率差异无统计学意义(P＞0.05).结论:CXCL12、CXCR4的表达水平可作为判断NSCLC预后的参考指标.     

CXCL12/CXCR7对胃癌生长、粘附、侵袭的影响

目的：运用免疫组化方法研究CXCL12/CXCR7在胃癌组织中的表达,并选取与粘附、侵袭有关的几个细胞因子进行相关性研究,揭示CXCR7与胃癌生长、粘附及侵袭的关系。方法：收集160例胃腺癌病人的癌组织和30例正常胃组织,采用免疫组化方法,检测CXCL12/CXCR7、Survivin、CD44v6、MMP-3在胃癌和正常组织中的表达,并用统计学方法分析其相关性。结果：CXCL12/CXCR7在胃癌组织中的表达明显高于对照组正常胃组织（P=0.000）,并且其在胃癌中的表达与胃癌的大小、浸润深度、是否有淋巴结转移及临床分期有关（P﹤0.05）。在胃癌组织中CXCR7表达与Survivin、CD44v6及MMP-3呈正相关。结论：CXCR7通过抗凋亡(Survivin)参与胃癌的生长,在胃癌的粘附及侵袭过程中通过CD44V6及MMP-3发挥作用,并可能参与胃癌的淋巴结转移。     

趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在肝癌侵袭 转移中的作用及机制

目的 探讨趋化因子受体 CXCR4 及其配体 CXCL12（CXCL12/CXCR4）在原发性肝癌侵袭转移中的作用 及机制。方法 分别采用 Western blot、免疫组化和 Real-time PCR 等方法检测 60 例肝癌及对应癌旁组织标本中 CXCL12/CXCR4 蛋白及 mRNA 表达水平。常规培养 4 种肝癌细胞（Huh7、MHCC97h、HepG2、Hep3B）和正常肝细胞 （7702）,Real-time PCR 检测上述细胞中 CXCL12、CXCR4 mRNA 的表达,筛选合适的实验细胞。将 CXCR4 干扰质 粒（sh-CXCR4）和对应空载体（sh-control）分别转染至 MHCC97h 构建稳转细胞系。Transwell 侵袭实验、细胞划痕实 验、MTT 实验分别检测 2 组细胞的侵袭、迁移和增殖能力。取稳定表达的 sh-control 和 sh-CXCR4 MHCC97h 细胞, 接种至 6 只裸鼠皮下,观察瘤体生长情况。Western blot 检测 sh-control 和 sh-CXCR4 MHCC97h 细胞及对应裸鼠移 植瘤中血管内皮生长因子-C（VEGF-C）的表达,同时对转染 CXCR 过表达质粒的 MHCC97h 中 VEGF-C 的表达水平 进行检测。结果 （1）Western blot、免疫组化和 Real-time PCR 的结果均证实肝癌组织中 CXCL12/CXCR4 蛋白及 mRNA 表达水平均高于癌旁组织。（2）Huh7、MHCC97h、HepG2、Hep3B 细胞中 CXCL12/CXCR4 mRNA 表达水平均高 于 7702 细胞,选取 MHCC97h 为实验细胞。转染 sh-CXCR4 的 MHCC97h 细胞的侵袭、迁移和增殖能力均明显低于 sh-control 组,同时接种含 sh-CXCR4 的 MHCC97h 细胞的裸鼠移植瘤的生长速度也明显小于 sh-control 组。（3）体外 和体内实验均证实 sh-CXCR4 组的 VEGF-C 表达水平均低于 sh-control 组,而过表达 CXCR4 后,VEGF-C 的蛋白表 达明显上调。结论 CXCL12/CXCR4 在原发性癌组织和肝癌细胞中呈现高表达,CXCL12/CXCR4 可能通过调控 VEGF-C 蛋白表达从而抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和转移。     

CXCL5和MMP-9在胃癌中的表达及意义

目的：通过检测趋化因子生长调节基因5（CXCL5）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在胃癌中的表达,探讨它们在胃癌发展、浸润和转移中的作用。方法：应用免疫组织化学方法检测36例胃癌组织和36例胃正常组织中CXCL5和MMP-9蛋白表达情况。结果：CXCL5和MMP-9在胃癌组织中的表达高于胃正常组织,两组之间差异有统计学意义（P〈0.01）;对于不同年龄、性别和肿瘤不同位置的患者,CXCL5和MMP-9的表达无统计学意义;CXCL5蛋白的表达与肿瘤的淋巴结转移相关（P〈0.05）;MMP-9蛋白的表达与肿瘤的分化程度、P-TNM分期、淋巴结转移相关（P〈0.05）。结论：在胃癌组织中CXCL5和MMP-9蛋白表达呈正相关关系,二者的高表达可能参与了胃癌的发生、侵袭和转移。进一步研究对指导临床治疗、判断预后有重要意义。     

趋化因子CXCL12/CXCR4在非小细胞肺癌中的表达

目的:探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与临床病理特征间的关系。方法:采用免疫组织化学SP三步法检测95例NSCLC患者肿瘤组织及27例肺部良性肿瘤患者(对照组)的石蜡标本中CXCL12、CXCR4的表达情况,并比较其在不同临床病理参数患者间表达的差异。结果:对照组中,CXCL12和CXCR4的高表达率分别为0和7.4%(2/27),NSCLC患者的高表达率分别为54.7%(52/95)和42.1%(40/95),差异均有统计学意义(P<0.01)。在NSCLC中,淋巴结转移组的CXCL12和CXCR4的高表达率(67.2%、51.7%)均高于非转移组(35.1%、27.0%),差异均有统计学意义(P<0.05)。CXCL12、CXCR4的高表达率均随TNM分期的增高而逐渐增高,且Ⅲ期的高表达率明显高于Ⅰ期,差异有统计学意义(P<0.01)。NSCLC患者CXCL12与CXCR4之间无明显相关性。不同年龄、性别、肿瘤大小、组织学分型及分化程度NSCLC患者之间CXCL12、CXCR4的高表达率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CXCL12、CXCR4的表达水平可作为判断NSCLC预后的参考指标。     

吲哚胺2，3-双加氧酶的表达与宫颈癌发生和病理进程的关系研究

目的：探讨吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO）的表达情况与女性宫颈癌的发生与病理进程的相关性。方法选取宫颈癌手术治疗后的石钠组织标本75例（宫颈癌组）,宫颈上皮瘤变Ⅰ级标本30例（CINⅠ级组）、宫颈上皮瘤变Ⅱ~Ⅲ级标本30例（CINⅡ~Ⅲ级组）、体检收集的正常宫颈标本30例（正常组）,采用免疫组织化学法检测各组样本中的 IDO 阳性表达率,并追踪观察 IDO 表达与宫颈癌患者病理及生存与后的关系。结果宫颈癌组标本的 IDO 阳性表达率显著的高于 CINⅠ级组、CINⅡ~Ⅲ级组和正常组（ P <0.05）;CINⅡ~Ⅲ级组 IDO 阳性表达率显著的高于正常组（ P <0.05）。低分化宫颈癌患者、Ⅲ+Ⅳ期宫颈癌患者、发生淋巴结转移的宫颈癌患者的 IDO 阳性率表达显著的增高,IDO 阳性表达与患者的分化程度、FIGO 分期、淋巴结转移具有一定的关系（P <0.05）。经过36个月的随访,IDO 阳性表达53例患者中有7例死亡、2例失访,IDO 阴性表达患者22例中有3例死亡,1例失访,IDO 表达阳性与阴性患者的3年病死率差异无统计学意义（ P >0.05）;IDO 阴性表达患者的3年生存中位时间35.4个月与 IDO 阳性表达患者的34.2个月差异无统计学意义（ P >0.05）。结论 IDO 在宫颈癌组织中高表达,与宫颈癌的分化程度、FIGO 分期、淋巴结转移具有一定的关系,与患者的3年生存预后关系不显著,需进一步延长随访时间进行观察。     

N-cadherin、E-cadherin及p63在宫颈癌中的表达及相关性

目的：研究N-cadherin、E-cadherin以及p63在宫颈癌中的表达及其与临床病理因素之间的相关性。方法采用免疫组化检测正常宫颈15例、宫颈上皮内瘤变(CIN)30例、50例宫颈癌组织中的N-cadherin、E-cadherin及p63的表达。结果 N-cadherin在正常宫颈组织、CIN以及宫颈癌中的阳性表达率逐渐升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。而E-cadherin和p63在正常宫颈组织、CIN以及宫颈癌中的阳性表达率则逐渐降低差异均有统计学意义( P <0.05),N-cadherin的表达与肿瘤的分期、病理分级以及淋巴结转移等密切相关( P <0.05)。结论 N-cadherin的高表达及E-cadherin、p63的低表达与宫颈癌的发生、发展、侵袭、转移密切相关,对上述因子的调控有可能成为宫颈癌治疗的新的靶点。     

MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-1、TIMP-2在宫颈癌中的表达

目的分析基质金属蛋白酶2（MMP-2）和MMP-9及其抑制因子1（TIMP-1）和TIMP-2在宫颈癌不同位置中的表达情况及其临床意义。方法选取经病理证实的宫颈浸润癌患者118例（ICC组）、宫颈上皮内瘤样病变患者75例（CIN组）,取病变中心组织和边缘组织;选取正常官颈组织标本45例为对照组。采用SABC法行免疫组化检测各组中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2因子表达阳性率、染色强度和表达强度。比较各组相关因子表达情况差异。结果ICC组中MMP-2和MMP-9的阳性率、染色强度和表达强度显著高于CIN组和对照组,TIMP-1和TIMP-2的阳性率、染色强度和表达强度显著低于CIN组和对照组（P〈0．05）。在ICC组,边缘癌组织的MMP-2与MMP-9的阳性率、染色强度和表达强度明显高于中心癌组织,而TIMP-1与TIMP-2的阳性率、染色强度和表达强度明显低于中心癌组织（P〈0．05）。结论MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-1、TIMP-2与宫颈癌的发生、发展密切相关,可能在宫颈癌的侵袭与转移中发挥着重要作用。     

HER-2与 Ki-67在直肠癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨HER-2与Ki-67在直肠癌组织中的表达及临床意义。方法选取2013年10月至2015年3月接收的80例直肠癌患者,收集切除后的直肠癌组织标本,作为观察组。另外,收集20例健康者肠黏膜组织标本作为对照组。采用免疫组化SP方法对2组标本HER-2与Ki-67的表达进行研究。结果直肠癌组织中的HER-2、Ki67阳性表达率明显高于正常肠黏膜组织,2组比较差异有统计学意义（ P ＜0?．05）;HER-2的表达与直肠癌患者的性别、年龄、淋巴结转移情况、肿瘤部位无明显关联（ P ＞0．05）,而与直肠癌患者Dukes分期、细胞分化程度、浸润深度有明显关联（ P ＜0．05）。 Ki-67表达与直肠癌患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、细胞分化程度无显著关联（ P ＞0．05）,而与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及Dukes分期有显著关联（ P ＜0．05）。对直肠癌患者组织中HER-2与Ki-67的表达情况进行等级相关分析,发现两者表达呈正相关（ r ＝0．354, P ＜0．01）。结论直肠癌组织中HER-2与Ki-67蛋白的表达在一定程度上与患者的性别、年龄、肿瘤部位、以及淋巴结转移情况无关,与直肠癌组织细胞分化程度、Dukes分期、浸润深度有关。 HER-2和Ki-67表达水平可作为判定直肠癌的生物学指标。     

MMP3与TIMP2蛋白在宫颈癌中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶子（MMP3）与基质金属蛋白酶抑制因子（TIMP2）蛋白在宫颈癌组织中表达、相互关系及意义。方法采用免疫组化学S-P法检测46例宫颈癌、20例宫颈上皮内瘤变（CIN）和10例宫颈良性病变上皮组织中MMP3及TIMP2的表达情况。结果宫颈癌组织中MMP3表达水平高于CIN及宫颈良性病变上皮（P〈0．05），而TIMP2蛋白表达水平低于CIN及宫颈良性病变上皮（P〈0．05）；MMP3的阳性表达率与宫颈癌分化程度、淋巴结转移有关（P〈0．05），与患者年龄、组织类型及临床分期无关（P〉0．05）；TIMP2的阳性表达率与宫颈癌分化程度及淋巴结转移有关（P〈0．05），与患者年龄、组织类型、临床分期无关（P〉0．05）；结论MMP3与TIMP2的表达程度与宫颈癌的发生发展密切相关，二者的比例失衡可能与宫颈癌的临床分期有关系。     

CD147及MMP9在乳腺癌移植瘤模型中的表达及其意义

目的:探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)及基质金属蛋白酶9(MMP9)在乳腺癌BCML-TAII 99模型移植瘤中的表达及其与肿瘤生长和转移的关系.方法:建立30只小鼠肺转移性乳腺癌BCML-TAII 99模型.用免疫组织化学SP法对小鼠肿瘤组织标本CD147及MMP9蛋白表达进行检测,并分析其与肿瘤大小及转移之间的关系.结果:CD147及MMP9蛋白表达阳性率分别为63.33%(19/30)和53.33%(16/30), CD147、MMP9均阳性表达者13只;两者均阴性者8只,两者表达呈正相关( χ~2 = 48.492,r = 0.786, P ＝ 0.025).CD147、MMP9在转移组与非转移组表达阳性率分别为92.31%、41.18%和76.92%、35.29%,差异有统计学意义(χ~2 = 6.238,P = 0.013和χ~2 = 5.129,P = 0.024).CD147和MMP9蛋白在≥3 g组和＜3 g组的阳性表达率分别为88.89%、25.00%和66.67%、33.33%,两者表达与肿瘤大小有关( χ~2 = 8.452,P = 0.009和χ2 = 4.652,P = 0.039, r分别为0.469和0.366 ).结论:CD147可能通过诱导MMP-9蛋白的产生在乳腺癌的浸润和转移过程中起重要作用.