羟基化壳聚糖衍生物的制备及其抗凝血性能

合成了几种羟基化壳聚糖衍生物，并观察了它们的抗凝血性能。凝血时间和复钙时间的测定结果表明，与玻璃和硅油涂层玻璃相比，衍生物有较好的抗凝血性能。衍生物的凝血时间与其特性粘度有关。     

黑曲霉AS 3.739对莪术二酮的羟基化修饰

目的筛选对莪术二酮具有羟基化修饰作用的菌株。方法通过二级发酵法培养菌株,应用TLC和HPLC法检测转化结果 ,通过硅胶柱层析法分离纯化羟基化产物,应用光谱学方法鉴定产物的化学结构。结果从数十株丝状真菌筛选得到黑曲霉AS 3.739对莪术二酮具有羟基化修饰作用,并分离、纯化和鉴定了2种主要产物1、2。结论用黑曲霉(Aspergillus niger)AS3.739对莪术二酮实现了羟基化修饰,2种产物分别鉴定为2β-羟基莪术二酮(1)和3α-羟基莪术二酮(2),其中主产物2为首次用曲霉(Aspergillus)菌属转化获得。     

11α-羟基坎利酮生物转化中副产物的影响因素

基于质谱数据推测11α-羟基坎利酮生物转化中的副产物为双羟坎利酮。考察了投料浓度、转化时间、装液量、转速、投料时间和后期转化温度对副产物生成的影响。得到副产物生成量较小的工艺条件为:坎利酮浓度6 g/L,转化时间60 h,转速160 r/min,装液量100 ml/500 ml,后期转化温度28℃,投料时间20 h,11α-羟基坎利酮的转化率为94%。     

高效液相色谱测定甾体化合物的微生物转化过程

对甾体的几种典型微生物转化反应如11α-,11β-,16α-羟基化、1,2位脱氢、A 环芳构化以及不对称还原等产物有效地进行反相高效液相色谱分离。同时还定量测定微生物1,2位脱氢所形成的16 β-甲基-17 α-羟基孕-1,4,9(11)-三烯-3,20-二酮。     

重组P450_(BM3):生物催化的多面手

目的介绍近年来重组P450BM3在生物催化领域的研究进展,为定向进化P450BM3获得催化其它底物的突变体提供参考。方法通过系统的文献调研,以近年来60余篇外文相关文献为依据进行归纳总结。结果介绍了P450BM3结构与功能关系,并对已报道的P450BM3及其突变体催化的反应进行分类与总结。结论为拓展P450BM3催化的底物谱奠定基础。     

雌激素的代谢机制及其与疾病的相关性

对重要雌激素的代谢途径及其代谢酶进行了综述,其中有影响雌激素代谢垢因素以及雌激素代谢与疾病的关系的内容。     

Sandoz与Fresenius Kabi签订羟乙基化技术的协议

Sandoz公司已获得使用Fresenius Kabi公司的Hesylation（羟基化）技术的许可权。这种基于羟乙基淀粉（HES）的技术能通过与活性成份轭合而靶向修饰药物。     

日内瓦毛霉对妊娠烯醇酮的生物转化研究

目的：探索日内瓦毛霉微生物对妊娠烯醇酮的生物转化问题。方法将妊娠烯醇酮经生物转化后,发生7-羟基化,得到两种产物,通过红外、核磁、质谱分析,确定其化学结构进行优化研究。结果碳源、氮源对转化率的影响很大,试验最佳的碳源、氮源确定为葡萄糖和蛋白胨,辅助氮源为酵母膏。结论通过单因素条件优化,确定碳源和氮源加量分别为3.6%和1.3%。对不同浓度无机盐KH2PO4对转化率的影响,确定其浓度为0.16%,初始pH为4.5时,最终得到主产物的转化率为59.2%。     

碘作用下羰基物的α-羟基化反应

碱性条件下，酮或醛在碘作用下于甲醇中可转化为α-羟基缩酮，6例六元环酮收率50％～89％，无环酮不会进行相应的反应。5例醛收率50％～80％。     

内生真菌SEF15927对截短侧耳素的微生物羟化研究

目的 研究植物内生真菌SEF15927对截短侧耳素的转化作用.方法 利用液体培养生长细胞对截短侧耳素进行生物转化.发酵液经乙酸乙酯萃取和硅胶柱层析分离获得一个羟化产物.运用质谱和核磁共振光谱鉴定结构.结果 转化产物为2-羟基截短侧耳素.结论 植物内生真菌SEF15927为一具有高转化率的截短侧耳素羟化菌株,     

羧基化三维有序大孔炭载体用于提高羟基喜树碱的溶出度

目的制备羧基化三维有序大孔炭载体,提高水难溶性药物羟基喜树碱的溶出度。方法采用硬模板法制备三维有序大孔炭载体,以扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)进行表征。采用表面氧化法进行羧基化修饰,对修饰前后的载体进行IR表征及Zeta电位测定。采用溶剂挥发法载药,测定载药量并对载药体系的水分散性进行考察。以DSC考察药物于载体中的存在状态,对原料药及羧基化修饰前后的载药体系的药物溶出度进行测定。结果制得的三维有序大孔炭载体孔道呈互相连通的三维结构,外孔孔径为500nm,内孔孔径为200nm。羧基化修饰后载体的Zeta电位显著降至-16mV,IR谱图中可见明显的羧基吸收峰。羟基喜树碱的载药量质量分数约为24%,羧基化修饰的载药体系水分散性显著提高,DSC显示其中所载药物的结晶峰明显减弱。原料药1h累计释放度仅为24.7%,羧基化修饰的载药体系药物累计释放度升至83.6%。结论制备的羧基化三维有序大孔炭载体可利用其独特的结构特征及改善的水分散性显著提高羟基喜树碱的溶出度。     

细胞稀释工艺转化甾体11β-羟基的研究

以相等溶氧速率系数KLa为基础将甾体11β－羟基细胞稀释转化工艺由250ml摇瓶放大到2L、10L发酵罐。通过对通风量、接种量、种龄等发酵参数的研究，确定了细胞稀释转化工艺条件。在10L发酵罐上，转化工艺为二级工艺，发酵温度为28℃，二级种子接种量15％，缺压0．04－0．05MPa，搅拌转速180－200r/min，通风量7L/min，稀释比1：1，转化周期24h，氢化可的松转化率74％－77％。测定了转化过程中底物和主产物β体的含量变化。     

油酸盐对苯并[A]芘酚葡萄糖醛酸化抑制的作用机理

利用肝脏灌流模型及肝脏微粒体对油酸影响羟基苯并[a]芘葡萄糖醛酸化的机理进行了研究,结果表明,低剂量的油酰辅酶A可非竞争性地抑制大鼠肝微粒体UDP-葡萄醛酰转移酶的活性,使3-羟基苯并芘葡萄糖醛酰化作用受抑制,牛血清白蛋白与Triton X-100可促进油酰辅酶A对转移酶的抑制作用。 600 μmol·L~(-1)的油酸灌流肝脏,可使肝脏中UDPGA,UDPG及ATP分别下降44％,49％及44％,因此高剂量的油酸亦可通过改变辅因子供应而抑制羟基苯并芘的葡萄糖醛酸化过程。 250μmol·L~(-1)的油酸灌流缺乏β-葡萄糖醛酸酶的C_3H/He小鼠肝脏,可使流出液中游离羟基苯并芘增加136％,而与葡萄糖醛酸结合的羟基苯并芘减少了32％,同时肝脏中与葡萄糖醛酸结合的羟基苯并芘减少64％,以油酸灌流具有高β-葡萄糖醛酸酶的DBA/2小鼠肝脏可见同样改变,在肝脏微粒体的实验中亦未见油酰辅酶A对苯并芘-0-葡萄糖醛酸的水解作用有何影响,据此,油酸对羟基苯并芘葡萄醛酸化状态的影响与β-葡萄糖醛酸酶无关。     

LZ0202菌株对炔雌醇的微生物转化研究

目的：从本地土壤中筛选出一株对炔雌醇有转化能力的真菌,经形态观察,鉴定为镰刀属真菌,利用该菌株对炔雌醇进行微生物转化研究。方法：转化产物经柱层析分离后,利用质谱、二维核磁图谱等分析方法,确定了产物的结构。结果：底物炔雌醇被LZ0202菌株转化为6α-羟基-17α-乙炔基雌二醇。结论：化合物是炔雌醇衍生物类避孕药的一种重要的中间体,也是其相关研究中的重要参考指标和对照品,本研究为炔雌醇及其衍生物的进一步研究提供了物质条件和理论基础。     

甾体衍生物羟基化的生物转化研究进展

目的综述甾体化合物羟基化修饰的生物合成研究进展,为解决甾体衍生物溶解度低和合成困难等问题,提供新思路。方法总结近几年国内外发表的29篇论文,将甾体化合物采用生物转化法进行羟基化修饰过程研究进展进行分类、归纳并总结。结果细菌和丝状真菌都可以对不同的甾体化合物进行不同位点的羟基化,其中以丝状真菌为主。通过不同的微生物对甾体进行羟基化修饰可以增大甾体化合物的溶解度,增加药效或降低毒性以及提高生物利用度。结论生物转化法利用微生物体内的生物酶可以在一步之内得到不同的甾体衍生物,为绿色快捷地合成种类丰富的甾体类化合物提供了参考,为最终实现临床应用奠定了基础。     

白首乌C21甾苷元C11α-羟化的两种微生物同步转化

目的对白首乌C21甾苷元告达庭甾苷元和开德甾苷元（Ⅱ）实现C11α-羟基化,要求副产物少,收率高。方法采用黑根霉（Rhizopus nigricans）和犁头霉（Absidia sp.）两种微生物在水-正丁醇双相体系中同步转化的方法,羟化反应中控制值pH在5.0～6.0,于30℃温度下振荡培养70h。结果产物经IR、MS、NMR分析确认是C11α-羟基化了的告达庭甾苷元（Ⅲ）和开德甾苷元（Ⅲ）,副产物少,收率达70.1%。结论用黑根霉（Rhizopus nigricans）和犁头霉（Absidia sp.）两种微生物在水-正丁醇双相体系中同步转化的方法是实现C11α-羟基化的有效方法。     

雅致小克银汉霉AS3.2028对香紫苏醇的初次及二次羟基化修饰

目的应用生物转化的方式对香紫苏醇的反式十氢萘环进行羟基化修饰。方法选择经典的药物代谢模型真菌雅致小克银汉霉AS3.2028对香紫苏醇进行一次和二次转化,转化产物经过硅胶柱层析及葡聚糖凝胶Sephadex LH20分离纯化,进而采用MS、1D/2D NMR技术鉴定转化产物结构。结果与结论雅致小克银汉霉AS3.2028对香紫苏醇初级转化,得到4个转化产物,分别为2α-OH香紫苏醇、3β-OH香紫苏醇、18-OH香紫苏醇和19-OH香紫苏醇。继而首次以3β-OH香紫苏醇为底物再次进行羟基化,得到3β,6α-OH香紫苏醇及3-羰基香紫苏醇,其中3β,6α-OH香紫苏醇为未见报道的新化合物。     

2—羟基—5—氯苯甲醛的合成

2-羟基-5-氯苯甲醛(1),又称5-氯水杨醛,是药物和其它有机试剂的中间体。其合成方法虽有多种[1～3],但均以2-羟基苯甲醛(2)为原料。一是由2与次氯酸叔丁酯反应制备,但后者不易买到;二是在2中直接通入干燥氯气,该法不易控制,产物沉淀易堵塞管道,反应不完全,产率低,且过量Cl2外泄会污染环境。我们借鉴文献[3],以2和磺酰氯反应,通过改变配比、控制反应温度和磺酰氯的滴加速度,加强搅拌以排出生成的SO2和HCl,使2得以充分利用,获得较满意的结果。本法原料价廉易得,反应条件温和,产率高,纯度好。OHCHO　2 SO2Cl2ClOHCHO　1 SO2 HCl　　实…     

柱前衍生化HPLC法测定不同产地胡芦巴中4-羟基异亮氨酸的含量

目的柱前衍生化法测定4-羟基异亮氨酸含量。方法采用异硫氰酸苯酯作为衍生化试剂,色谱柱(Zorbax Eclipse XDBC18,150mm×4.6mm,5μm,Agile);流动相A:乙腈,流动相B:1mL·L~(-1)磷酸水,梯度洗脱(A相∶B相):(0~20min,20∶80;20min,60∶40);流速:1.5mL·min~(-1);进样体积:20μL;检测波长:254nm;柱温:30℃。结果 4-羟基异亮氨酸在质量浓度4.2~20.9μg·mL~(-1)范围内线性关系良好(r=0.999 3),平均回收率为96.8%,RSD为1.7%。结论该方法简便、稳定,结果准确,可作为4-羟基异亮氨酸的含量测定方法。     

HPLC法测定水合羟基化头孢克洛杂质研究

摘要：目的 建立HPLC法测定水合羟基化头孢克洛杂质方法。方法 采用C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱;流动相A为0.78%磷酸二氢钠溶液(取磷酸二氢钠7.8 g,加水溶解并稀释至1000 mL,用磷酸调pH至4.0),流动相B为0.78%磷酸二氢钠溶液(pH 4.0)-乙腈(55:45);流速1.2 mL/min;检测波长220 nm;柱温25℃。结果 水合羟基化头孢克洛杂质在9.108×10-4~3.4×10-2 mg/mL 范围内线性关系良好(r=1.0000),平均回收率为104.03%,RSD为0.82%(n=9),定量限为17.721 ng。在回收率试验中加入的水合羟基化头孢克洛杂质,采用外标法和加校正因子的主成分自身对照法的结果一致,该杂质的相对保留时间约为1.11,校正因子为1.02。结论 该方法操作简便、准确度高、重现性好,可以采用不加校正因子的主成分自身对照法对水合羟基化头孢克洛杂质进行检测。