氧化苦参碱与抗肿瘤药物联合作用对HNE-1、HNE-1(200)细胞增殖抑制的影响

目的了解天然有效成分氧化苦参碱联合常用抗肿瘤药物(长春新碱、平阳霉素、5-Fu、顺铂)对HNE-1、HNE-1 (200)细胞的增殖抑制作用。方法本研究以鼻咽癌HNE-1细胞株以及由放射线照射诱导的耐药细胞株HNE-1(200)为研究对象,采用氧化苦参碱与低毒剂量的常用抗肿瘤药物联合应用,用MTT法测定其对实验细胞的增殖抑制率。结果对试验细胞抑制率低于20%的低毒浓度的长春新碱、平阳霉素、5-Fu、顺铂加入低毒浓度(0.5mg/mL)的氧化苦参碱后,使4种药物对细胞的抑制率增加,浓度越低,增幅越大。结论低浓度的天然药物与抗肿瘤药物联合应用对肿瘤细胞有明显的增殖抑制作用,并且时放射线照射诱导的耐药细胞株有一定的逆转作用。     

氧化苦参碱与抗肿瘤药物相互作用对HNE-1、HNE-1(200)细胞周期的影响

目的了解天然有效成分氧化苦参碱(oxymatrine,Oxy)与常用抗肿瘤药物长春新碱(vincristine,VCR)、平阳霉素(bleomycin,BLM)、顺铂(cisplatin,DDP)、5-Fu相互作用后,对鼻咽癌HNE-1、HNE-1(200)细胞周期的影响。方法本研究以鼻咽癌HNE-1细胞株和由放射线诱导的鼻咽癌耐药细胞株HNE-1(200)为研究对象,分为不加任何药物的对照组、抗肿瘤药物与Oxy合用组以及维拉帕米(verapamil,VRP)与抗肿瘤药物合用组,采用流式细胞仪检测各组细胞周期的变化。结果(1)Oxy与抗肿瘤药物相互作用使实验细胞株发生明显的G_0/G_1期阻滞。(2)VRP与药物相互作用使实验细胞株也发生G_0/G_1期阻滞。(3)VRP与Oxy与药物相互作用结果相似,并且对两细胞株作用无显著差别。结论Oxy联合抗肿瘤药物后,可使鼻咽癌耐药细胞株和非耐药细胞株均产生G_1期阻滞,抑制细胞增殖,其作用与经典化疗增敏剂VRP相似,这为将Oxy作为化疗增敏剂提供了依据。     

化疗药物诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的研究

目的观察顺铂(CDDP)、长春新碱(VCR)、平阳霉素(BLM)、顺铂+平阳霉素、顺铂+长春新碱在体外对人宫颈肿瘤细胞的作用。方法用四甲基偶氮唑盐(MTT)测定法观察药物对Hela细胞的影响,用流式细胞仪观察细胞凋亡变化。结果CDDP、VCR、BLM单用对Hela细胞抑制率和凋亡率均高于联合用药组。各用药组对细胞抑制率均高于凋亡率,仅CDDP组两作用相近。结论CDDP、VCR、BLM能有效抑制Hela细胞生长,联合应用出现拮抗作用。     

洛铂联合替加氟诱导化疗并同步洛铂放化疗治疗局部晚期鼻咽癌的疗效及安全性分析

<正>鼻咽癌在我国南方及东南亚地区高发~([1]),因其解剖部位隐密,临床表现复杂。早期无明显症状,因此发现时多为中晚期,顺铂联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)是治疗鼻咽癌的标准化疗方案。替加氟是氟尿嘧啶的衍生物,与5-Fu的作用机制及抗病谱相似,化疗指数为氟尿嘧啶的2倍,为药物毒性仅是5-Fu的1/7~1/4。洛铂是第三代铂类药物,与顺铂的抑制癌细胞作用相似,对顺铂耐药的细胞株具有细胞毒作用~([2])。本研究对应用洛铂联合替加氟对照顺     

短肽修饰的甲氨蝶呤的制备及细胞毒性作用

目的:制备促黄体激素释放激素-甲氨蝶呤(LH-RH-MTX)并考察其对表达有促黄体激素释放激素(LH-RH)受体的肿瘤细胞的毒性作用。方法:以临床抗恶性肿瘤药物甲氨蝶呤(MTX)为模型药物,以促黄体激素释放激素[D-Lys6]LH-RH为导向物,通过共价键连接制备LH-RH-MTX。应用MTT法分别考察游离MTX和LH-RH-MTX对鼻咽癌HNE-1及前列腺癌PC-3细胞株的细胞毒性作用。结果:MTT法结果表明游离MTX和LH-RH-MTX对2种细胞株均有生长抑制作用,对前列腺癌PC-3细胞的抑制率大于鼻咽癌HNE-1细胞;给药12h后抑制率达到最大;当药物质量浓度为200.0μg.L-1,作用12h后:LH-RH-MTX对前列腺癌PC-3细胞的抑制率可高达97.73%,游离MTX为49.90%;LH-RH-MTX对鼻咽癌HNE-1细胞的抑制率为38.92%,游离MTX为7.41%;在同一种细胞株上,LH-RH-MTX的IC50值小于游离MTX。结论:经过短肽修饰的化合物LH-RH-MTX可与表达有LH-RH受体的肿瘤细胞特异性结合并发挥抑制作用,抗肿瘤活性高于游离MTX。提示用LH-RH作为TDDS的导向物...     

姜黄素联合顺铂对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖的抑制作用

目的探讨姜黄素及其联合顺铂对体外培养人卵巢癌细胞株SKOV3增殖的抑制作用。方法将培养的人卵巢癌SKOV3细胞分别单独(姜黄素组或顺铂组)及联合(姜黄素与顺铂联用组)加入不同浓度姜黄素(5、10、20、40μmol/L)、顺铂(2.5 mg/L)作用后,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测SKOV3细胞增殖情况。结果不同浓度姜黄素组随着药物浓度增加、作用时间延长,细胞的增殖抑制率上升,差异有统计学意义(P<0.05);联合用药组明显高于单一用药组(P<0.05),两药联合应用具有协同作用。结论姜黄素对卵巢癌SKOV3细胞增殖具有抑制作用,在一定范围内,这种抑制作用呈剂量-时间依赖性;姜黄素与顺铂联合应用具有协同作用,可提高SKOV3细胞对顺铂的敏感性,是一种理想的化疗增敏剂。     

5-氟尿嘧啶核苷前药脂质体对人鼻咽癌HNE-1细胞株增殖抑制与凋亡作用的影响

目的：研究5-氟尿嘧啶核苷前药脂质体对人鼻咽癌细胞株HNE-1细胞株增殖与凋亡作用的影响。方法本研究以人鼻咽癌HNE-1细胞株为研究对象,以5-氟尿嘧啶为对照,用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定5-氟尿嘧啶核苷前药脂质体对HNE-1细胞的增殖抑制率;用流式细胞仪（FCM）测定5-氟尿嘧啶核苷前药脂质体作用与HNE-1细胞72h后细胞的凋亡率。结果5-氟尿嘧啶核苷前药脂质体对HNE-1细胞的IC50是5-氟尿嘧啶的1/3;浓度为0.043μg/mL 5-氟尿嘧啶和5-氟尿嘧啶核苷前药脂质体作用于HNE-1细胞的凋亡指数分别为（6.31±0.17）％、（19.53±1.79）％。结论本实验研究显示,与5-氟尿嘧啶相比较,5-氟尿嘧啶核苷前药脂质体对人鼻咽癌HNE-1细胞具有很好的生长增殖抑制作用,并且能够显著提高HNE-1细胞的凋亡率。     

优选顺铂、二甲双胍、槲皮素三药联用方案影响人鼻咽癌细胞活性的研究

本研究在单因素试验基础进行正交试验，采用Cell Counting Kit-8评价顺铂、二甲双胍和槲皮素不同剂量联合用药方案对鼻咽癌细胞增殖的作用，利用SPSS20.0软件对正交试验结果进行方差和组间差异显著性SSR检验，优选三药联用最佳组合方案。结果表明，随着顺铂、二甲双胍和槲皮素浓度的升高，其对Sune-1细胞的抑制作用越显著，这三种药物对Sune-1的IC₅₀值分别为30.68、6.85、81.96μmol/L,其中顺铂对Sune-1细胞的IC₅₀值最低，表明Sune-1细胞对顺铂的敏感程度强于其他两种药物，槲皮素次之；三药联用有强大抗肿瘤活性，三者的贡献水平由高到低分别为顺铂、二甲双胍、槲皮素，当顺铂浓度61.36μg/mL、二甲双胍浓度13.71 mmol/L、槲皮素浓度163.92μmol/L的高剂量联合用药方案时对人鼻咽癌Sune-1细胞增殖的抑制作用最强，但是，中、低剂量的联合用药方案对人鼻咽癌Sune-1细胞增殖的抑制率也都超过50%,因此，临床上可结合药物毒副作用、患者耐受程度、经济情况等综合因素，考虑选用较低剂量的联合用...     

氧化苦参碱对鼻咽癌耐药细胞株HNE-1(200)耐药逆转机制的研究

目的:研究天然有效成分氧化苦参碱对鼻咽癌耐药细胞株HNE-1(200)耐药逆转的机制。方法:以放射线照射诱导的鼻咽癌耐药细胞株HNE-1(200)为研究对象,采用免疫细胞化学法、免疫印迹(Western Blot)法检测细胞P-糖蛋白(P-gp)表达的变化,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测多药耐药1基因(mdr1)的mRNA的改变。结果:氧化苦参碱作用于HNE-1(200)细胞24h后,免疫细胞化学方法和Western Blot显示:人鼻咽癌(P-gp)表达下调;RT-PCR显示:HNE-1、HNE-1(200)细胞的mdr1表达无差异。结论:氧化苦参碱能通过下调P-gp表达,在一定程度上逆转耐药,但是mRNA表达并无变化,说明鼻咽癌多药耐药引起P-gp表达上调受多种机制控制。     

人鼻咽癌耐药裸鼠移植瘤模型的建立及耐药性检测

目的：优化建立人鼻咽癌CNE-1／顺铂耐药裸鼠移植瘤模型的方法,并检测其药耐药性,为后续鼻咽癌的耐药机制研究奠定基础。方法采用顺铂诱导鼻咽癌CNE-1细胞,建立其多药耐药细胞株CNE-1／顺铂细胞;将3个不同浓度的耐药细胞分别接种于裸鼠皮下,观察其成瘤性及转移情况;蛋白印迹法检测LRP、VEGF、Bcl-2在CNE-1细胞、CNE-1／顺铂耐药细胞和移植瘤的表达情况。结果经顺铂诱导建立了鼻咽癌CNE-1／顺铂耐药细胞株;其对顺铂、长春新碱和紫杉醇的耐药性分别增加35．83、23．74和10．54倍。5×106／ml的耐药细胞成瘤率为83．33％,其他2个浓度耐药细胞未见成瘤,所有裸鼠均未见肝、肺等器官出现转移瘤。 LRP、VEGF和Bcl-2蛋白在耐药细胞和移植瘤中的表达均高于CNE-1细胞（ P ＜0．05）。结论 CNE-1／顺铂耐药细胞的成瘤性与细胞浓度有关,CNE-1耐药细胞移植瘤依然保持很好的耐药性,可为鼻咽癌耐药逆转剂的研究提供较理想的动物模型。     

我院地高辛血药浓度监测结果分析

目的:为临床安全、有效、合理使用强心苷类药物提供参考依据。方法:采用荧光偏振免疫法测定地高辛血药浓度,对监测的结果进行统计分析。结果:在监测的126例使用地高辛的临床病例中,其血药浓度>2.0ng·mL-1的有32例(25.4%),0.8~2.0ng·mL-1的有83例(65.9%),共有16例(12.7%)出现中毒症状,<0.8ng·mL-1的有11例(8.7%)。结论:及时监测地高辛血药浓度,对制定个体化给药方案,确保临床疗效,减少毒性反应的发生,具有十分重要的意义。     

万古霉素高谷浓度给药方案的研究

目的建立万古霉素谷浓度为10～20μg·mL-1的给药设计方案。方法 采用Matxke方法估算药物动力学参数,以目标谷浓度为10～20μg·mL-1,利用药物动力学参数设计给药方案,比较预测谷浓度与实际谷浓度的差别并计算AUC0～24/MIC。结果43例患者的预测谷浓度为(15.25±1.60)μg·mL-1,实际谷浓度为(14.47±2.46)μg·mL-1,预测谷浓度的ME为0.78μg·mL-1(95%CI:0.13～1.42),MAE为1.57μg·mL-1(95%CI:1.09～2.06),RMAE为2.21μg·mL-1(95%CI:1.41～2.79)。预测谷浓度与实际谷浓度具有相关性(P<0.001,r=0.535);43例患者中有41例(95.35%)患者的实际谷浓度在10～20μg·mL-1。患者实际日剂量明显高于说明书推荐剂量(P<0.001)。当MIC≤1μg·mL-1时,43例患者中有42例(97.67%)患者的AUC0～24/MIC均可>400。结论本研究建立的给药方案可以满足谷浓度为10～20μg·mL-1的要求。     

半夏生物碱对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响

目的:研究半夏生物碱对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响。方法:将Bel-7402与半夏生物碱(400、200、100μg·mL-1)共同培养,采用MTT比色法测定半夏生物碱对Bel-7402增殖的影响,TUNEL技术检测其对Bel-7402细胞凋亡的影响,免疫组化SABC染色法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达情况。结果:作用24h后,半夏生物碱高、中、低剂量(400、200、100μg·mL-1)对Bel-7402增殖有显著抑制作用,且抑制作用随着药物浓度增加而加强,最高抑制率可达到36.98%。TUNEL结果显示,半夏生物碱高、中、低剂量(400、200、100μg·mL-1)能有效诱导Bel-7402细胞凋亡,且呈量效关系。半夏生物碱高、中、低剂量(400、200、100μg·mL-1)可使Bax表达显著升高而Bcl-2表达显著下降。结论:半夏生物碱对Bel-7402生长有一定的抑制作用,可诱导其凋亡,其作用机制可能为上调Bax和下调Bcl-2。     

广西藤茶总黄酮对免疫抑制小鼠细胞免疫功能的影响

目的：探讨藤茶总黄酮（TF）对免疫抑制小鼠细胞免疫功能的影响。方法：以皮下注射地塞米松或环磷酰胺（CTX）复制小鼠免疫抑制模型．药物组给予不同剂量的TF（200,100和50mg·kg^-1）,并设空白组与模型对照组。分别以5,10μg·mL^-1刀豆蛋白（ConA）刺激脾淋巴细胞,以MTT法测定其增殖功能;以MTT法和廓清率测定小鼠的NK细胞杀伤活性和单核细胞吞噬功能。结果：TF能够显著提高免疫抑制小鼠NK细胞杀伤活性和单核细胞廓清率。当ConA浓度为10μg·mL^-1时,200mg·kg^-1和100mg·kg^-1 TF能促进免疫抑制小鼠脾淋巴细胞增殖;当ConA浓度为5μg·mL^-1时,200mg·kg^-1 TF能显著促进免疫抑制小鼠脾淋巴细胞增殖。结论：TF可提高免疫抑制小鼠的细胞免疫功能。     

蛋白激酶C抑制药enzastaurin对吉非替尼耐药的人非小细胞肺癌细胞株生长的影响

目的：观察新型靶向制剂enzastaurin单独或联合吉非替尼对耐药人非小细胞肺癌细胞株的影响,设计合理的治疗药物组合。方法：CCK8法检测细胞增殖,Chou-Talalay联用指数法判定联合用药效果,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果：单药吉非替尼及enzastaurin作用NCI-H460耐药肺癌细胞72 h的半数抑制浓度（IC50）分别为6.99μmol·L-1（95%CI 3.55~13.79μmol·L-1）,7.25μmol·L-1（95%CI 4.77~1.02μmol·L-1）。两药联合应用对肺癌细胞的抑制作用增强（P 〈0.05）,同时给药组抑制效果更显著（P〈0.01）。同时给药组、序贯给药组（先用吉非替尼）和序贯给药组（先用enzastaurin）吉非替尼对H460细胞的IC50值分别为0.006μmol·L-1（95%CI 0.002~0.020μmol·L-1）,0.02μmol·L-1（95%CI 0.011~0.037μmol·L-1）,0.085μmol·L-1（95%CI 0.042~0.170μmol·L-1）。联合指数法显示在吉非替尼浓度0.05μmol·L-1以上时,同时给药组联合指数均〈1。细胞周期分布实验结果显示同时给药组可显著提高G0/G1期细胞比例（P〈0.05）,阻滞细胞于G1期。结论：蛋白激酶C抑制药enzastaurin与EGFR抑制药吉非替尼联用具有较好的协同作用,两药联合应用可能是出现吉非替尼耐药的非小细胞肺癌后续治疗的一个新选择。     

香椿乙醇提取物对糖尿病模型小鼠降血糖作用的初步研究

目的:研究香椿乙醇提取物对糖尿病模型小鼠的降血糖作用及机制。方法:将四氧嘧啶用0.9%NS配成0.02g.mL-1溶液,按200mg·kg-1腹腔注射小鼠,5d后测血糖,空腹血糖>10.00mmol.L-1为高血糖模型小鼠。将模型小鼠随机分为4组,即模型(0.9%NS)、二甲双胍(70mg·kg-1)和香椿乙醇提取物高、低剂量组(剂量分别为1、0.5g·kg-1);另设正常组(蒸馏水),5组均每天灌胃1次,连续7d,末次给药后禁食24h,空腹眼眶静脉取血,测血糖和血清胰岛素水平。结果:与模型组比较,香椿乙醇提取物高、低剂量组血糖水平显著降低(P<0.05或P<0.01);血清胰岛素水平显著增高(P<0.05或P<0.01)。结论:香椿乙醇提取物对四氧嘧啶所致的高血糖模型小鼠有显著的降血糖作用,其作用机制可能与升高血清胰岛素水平有关。     

头孢克肟胶囊人体药动学研究及生物等效性评价

目的：研究头孢克肟胶囊在健康人体内的药动学及生物等效性。方法：以18名健康志愿者为试验对象，采用同体交叉试验方法，分别单剂量口服受试制剂或参比制剂各400mg，采用HPLC法测定血浆中药物浓度。结果：参比制剂和受试制剂的tmax分别为（3．39±0．50）和（3．39±0．50）h，cmax分别为（2．33±0．33）和（2．27±0．25）μg／mL，t1／2分别为（3．92±0．85）和（4．41±0．68）h，AUC0～16分别为（14．61±2．67）和（14．82±2．02）μg·h·mL^-1，AUC0～∞分别为（16．00±3．13）和（16．81±2．62）μg·h·mL^-1。结论：受试制剂与参比制剂生物等效，受试制剂的相对生物利用度为（98．69±13．13）％。     

巴洛沙星片人体药动学研究

目的:研究巴洛沙星片在健康人体内的药动学。方法:采用随机双交叉试验设计,12名健康志愿者口服巴洛沙星片100mg或200mg,用高效液相色谱法测定血、尿药物浓度,用DAS软件进行数据处理。结果:志愿者单剂量口服巴洛沙星片100、200mg的Cmax分别为(0.970±0.245)、(1.849±0.466)μg.mL-1,tmax分别为(1.25±1.10)、(1.24±0.81)h,t1/2分别为(7.14±1.01)(7.11±0.72)h,AUC0～36分别为(7.309±1.368)、(15.214±1.727)μg.h.mL-1,AUC0～∞分别为(7.531±1.386)、(15.695±1.762)μg.h.mL-1,36h尿平均累积排出率分别为(64.47±11.56)%、(63.24±11.93)%。结论:健康志愿者口服巴洛沙星具血药峰浓度高、半衰期长的良好药动学特点。本方法灵敏、准确、可靠、特异性强,可满足药动学研究需要。     

新城疫病毒疫苗及白细胞介素-15对卵巢癌细胞株体外作用的实验研究

目的研究新城疫病毒疫苗（ATV—NDV）和白细胞介素-15（IL-15）对人卵巢癌细胞株体外生长的作用。方法将正常人卵巢上皮细胞和人卵巢癌细胞株3AO体外培养;分离正常人外周血淋巴细胞;制备人卵巢癌细胞株3AO ATV-NDV,（1-2）×10^7细胞／0．5ml;将ATV—NDV、IL-15、ATV—NDV＋IL-15分别与正常人外周血淋巴细胞共培养24、48、72、96小时;用正常人外周血淋巴细胞作对照,用MTT比色法测定不同浓度ATV-NDV、IL-15作用不同时间对淋巴细胞增殖程度的影响,将ATV-NDV（50μl）、rhIL-15（50ng／ml）及ATV-NDV（50μl）＋IL-15（50ng／ml）与人外周血淋巴细胞共培养48小时,按效靶比分别为50：1、25：1、10：1加入正常人卵巢上皮细胞和人卵巢癌细胞株3AO,继续培养24、48、72、96小时,MTT法测定细胞生长抑制率;HE染色法观察效靶比为50：1、继续培养24—96小时后细胞形态学变化。结果1．淋巴细胞增殖改变：ATV—NDV、IL-15具有对淋巴细胞的增殖活性,随浓度的增加和时间的延长而增强（P〈0．05）,与对照组相比差异有显著性（P〈0．01）。IL-15与ATV—NDV具有协同作用,并且这种协同作用与IL-15、ATV-NDV的单独作用相比差异有显著性（P〈0．01）;IL-15、ATV—NDV对正常人外周血淋巴细胞增殖作用的影响与对照组相比差异有显著性（P〈0．01）;IL-15与ATV-NDV作用相比差异无显著性（P=0．35）。2．ATV-NDV、IL-15对肿瘤细胞生长抑制作用：活化的淋巴细胞与靶细胞共培养可杀死肿瘤细胞,并具有时效性（P〈0．05）。3．细胞形态学变化：活化的淋巴细胞作用48小时后肿瘤细胞即已出现凋亡形态,作用96小时时即有坏死细胞形态出现。结论ATV—NDV和IL-15对正常人外周血淋巴细胞增殖有影响,经ATV-NDV、IL-15及ATV—NDV＋IL-15共培养的正常人外周血淋巴细胞可有效地抑制细胞株3AO生长,具有时间、浓度依赖性。