鹿胎保健食品原料的工艺研究

目的：优选出双酶水解鹿胎原料效果最佳的生产工艺。方法：以水解度为指标,通过单因素试验,分别考察酶解温度、酶解时间、pH值、酶底比、料液比对蛋白酶酶解鹿胎的影响。结果：双酶水解最佳条件为碱性蛋白酶最佳酶解条件,即分别加入酶底比为1：80的碱性蛋白酶与胰蛋白酶,料液比1：40,pH值为9．0,温度45℃,酶解4h。结论：优选方法稳定,操作简便,提取率高。     

牡蛎酶解工艺的研究

目的 获得最佳牡蛎蛋白的酶解工艺及以期提高酶解液水解度和蛋白回收率.方法 综合考虑蛋白回收率、水解度和腥、苦味及澄清度,进行最佳酶的筛选;正交试验确定酶的最佳水解条件;以水解度和蛋白回收丰为指标,研究热处理、超声处理和微波处理对酶解的影响.结果 与结论菠萝蛋白酶比较适合牡蛎蛋白质的水解,其最佳条件为:pH6,温度55℃,料水比为1:3,加酶量为800U/g,酶解时间4h,在此条件下酶解产物水解度为29.86%,蛋白回收率为67.55%;热处理、超声处理和微波处理不利于牡蛎蛋白的水解.     

酶法制备牡蛎抗氧化肽研究

目的优化牡蛎酶解制备抗氧化肽的工艺。方法通过正交试验法确定胃蛋白酶、胰蛋白酶及这两种蛋白酶的酶解液抗氧化(Fenton体系)的最佳工艺条件;采用Sephadex G-25葡聚糖凝胶柱层析法对酶解液中抗氧化肽进行分离纯化。结果胃蛋白酶最佳酶解条件:温度35℃、加酶量2.5%、时间6h、pH 2.0,在此条件下清除率达到50%时的酶解液浓度(EC50)为1.929mg.mL-1;胰蛋白酶最佳酶解条件:温度45℃、加酶量2%、时间8h、pH 7.5,EC50为1.165mg.mL-1;胰蛋白酶、胃蛋白酶分步酶解法的酶解液EC50为0.869mg.mL-1。双酶酶解液经纯化后,得相对分子质量为751的抗氧化活性肽组分(BPO-Ⅱ),其EC50为0.529mg.mL-1。结论双酶酶解法优于单酶酶解法,从双酶酶解液中分离纯化得抗氧化肽BPO-Ⅱ。     

蜈蚣粉酶解工艺最佳用酶的初步筛选

目的分别利用胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶对蜈蚣粉进行酶解并选取最佳用酶来制备抗肿瘤多肽。方法利用4种酶对蜈蚣粉进行酶解,采用MTT体外抗肿瘤实验方法,以蛋白质的水解度及酶解提取液对乳腺癌MCF-7细胞的抑制率为指标,同时以蜈蚣粉的水溶性蛋白质含量为标准,评价4种酶对蜈蚣粉的酶解效果并筛选出最佳用酶。结果胃蛋白酶对蜈蚣粉的水解度为10.44%;胰蛋白酶对蜈蚣粉的水解度为28.29%,在0.125 mg·m L~(-1)及0.25 mg·m L~(-1)的较小浓度下对乳腺癌MCF-7细胞的抑制率低于对照组,但随浓度的增大抑制率逐渐增大,在0.5~2 mg·m L~(-1)浓度时,胰蛋白酶在4种酶中达到最大抑瘤效果;胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶的水解度分别为50.45%、44.16%,当浓度>0.5 mg·m L~(-1)时其对乳腺癌MCF-7细胞的抑制率高于对照组,在浓度为0.5mg·m L~(-1)时抑制率分别为2.86%、36.37%,且随浓度增大抑制率增大。结论蜈蚣粉酶解工艺最佳用酶为胰蛋白酶,其次是胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶,而胃蛋白酶活性较低可以去除。     

红非鲫(Oreochromis niloticus)鱼皮胶原蛋白酶解条件的研究

目的研究单酶和复合酶水解红非鲫鱼皮胶原蛋白制备具有抑制血管紧张素转换酶(ACE)生物活性的寡聚肽的工艺条件。方法根据6种单酶的水解产物对ACE抑制作用的测定结果,确定了两种酶即菠萝蛋白酶和alcalase 2.4L碱性蛋白酶组成复合水解酶。采用正交试验确定了这两种酶单独水解鱼皮胶原蛋白的最适酶解条件。结果与结论菠萝蛋白酶和alcalase 2.4L蛋白酶的最适酶解温度,pH,酶/底物,时间,底物浓度分别为45℃,pH4.5,4000U.g-1,4h,6%和55℃,pH7.5,6000U.g-1,2h,4%。在此基础上,进行复合酶水解实验,结果表明先采用菠萝蛋白酶水解,再用alcalase 2.4L蛋白酶水解,效果更佳。采用该双酶复合水解工艺,所得水解产物的水解度为30.43%,体外对ACE的抑制率达68.6%。     

天龙粉酶解工艺中最佳用酶的研究

目的探索天龙粉经过4种蛋白酶酶解后对肺腺癌A549细胞株的抑制作用,筛选出最佳用酶。方法天龙粉分别经过胰蛋白酶、胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶酶解,采用茚三酮比色法测定蛋白质的水解度,同时以天龙粉水提物作为对照组,用甲基噻唑蓝(MTT)法测定4种酶水解物对肺腺癌A549的抑制率。结果对照组不同药物浓度对肺腺癌A549细胞无明显抑制作用;弹性蛋白酶、胰蛋白酶对天龙粉的水解度分别为77.50%、28.02%,给药组不同药物浓度对肺腺癌A549细胞的抑制率明显高于对照组;胰凝乳蛋白酶和胃蛋白酶的水解度分别为34.63%、72.80%,给药组不同药物浓度对肺腺癌A549细胞无明显抑制作用。结论天龙粉酶解工艺的最佳用酶是弹性蛋白酶,其次是胰蛋白酶。     

地西泮代谢物的结合物水解条件研究

目的:考察β 葡萄糖醛酸苷酶水解尿液中地西泮代谢物的结合物的酶解条件.方法: 实验设计采用正交表L9(34).取尿样2 mL,加内标,再加不同量的β 葡萄糖醛酸苷酶,在不同温度、不同酶解时间下水解,然后用正己烷 二氯甲烷(5∶3)5 mL提取,挥干提取液后用50 μL甲醇溶解,10 μL进样,采用高效液相色谱法检测.结果:对水解产物峰面积与内标物峰面积的比值进行方差分析,发现水解尿液中去甲地西泮、替马西泮、奥沙西泮的葡萄糖醛酸苷结合物的最佳酶解条件分别为55℃,5 h,5 000 U酶量;55℃,2 h,1 000 U酶量;55℃,2 h,5 000 U酶量.结论:水解2 mL尿液中地西泮代谢物的结合物的最佳条件为55℃,5 h,5 000 U酶量.     

RP-HPLC法分析重组人胰高血糖素类多肽-1（7-36）肽图谱

目的:建立重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)[rhGLP-1(7-36)]胰蛋白酶或V_8蛋白酶肽图分析方法。方法:酶解缓冲液分别为1%碳酸氢铵缓冲液(pH7.8)和磷酸盐缓冲液(pH7.8),酶与底物的比例为1∶10,酶解时间分别为3h和6h。采用ODS柱(250mm×4.6 mm,5μm),以三氟醋酸-水(0.1∶100)为流动相A,三氟醋酸-水-乙腈(0.1∶5∶95)为流动相B。胰蛋白酶洗脱梯度:0-30min,流动相A与B的比例为80:20→55:45。V_8蛋白酶洗脱梯度:0-8min,流动相A与B的比例为99:1→95:5;8-55 min,比例为95:5→48:52。流速:1.0mL·min~(-1),检测波长214nm,柱温:37℃。结果:无论用胰蛋白酶或V_8蛋白酶酶解rhGLP-1(7-36),控制好酶与底物的比例及酶解的时间,都可以得到重现性好的稳定的肽图。结论:本方法可用于重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)胰蛋白酶和V_8蛋白酶肽图分析,简便,可行。     

响应面分析法优化九香虫蛋白的酶解工艺研究

目的优化九香虫蛋白质的酶解工艺条件。方法采用响应面分析法,优化酶法水解九香虫蛋白质的工艺条件,探讨酶浓度、pH、固液比和酶解温度对九香虫蛋白水解度的影响。结果九香虫蛋白的最佳酶解工艺条件为:温度60℃、pH为5.0、固液比1∶7。在此条件下,氨基氮的理论最大提取得率为1.22%。结论该工艺提取得率高、操作简便,易于工业化大生产。     

酶法制取黄粉虫蛋白复合氨基酸液的研究

目的探讨胃蛋白酶水解黄粉虫蛋白制取复合氨基酸液的工艺。方法以黄粉虫为原料,以碱法提取黄粉虫蛋白,采用胃蛋白酶水解黄粉虫蛋白制取复合氨基酸液。通过单因素试验探讨了底物浓度、pH值、酶浓度、水解温度及水解时间与水解率的关系,采用正交试验L16（4^5）优选水解工艺条件。结果最佳酶解工艺条件为：底物浓度为1∶5,pH值4.0,酶浓度1.5%,水解温度60℃,水解时间5 h。水解率达到24.15%。结论按最佳条件水解完毕后,通过酶灭活,中和,脱色等处理可得到黄色澄清的黄粉虫蛋白复合氨基酸液。所制得的复合氨基酸种类齐全,必需氨基酸含量高。     

星点设计-效应面法优化复合酶解酪蛋白制备抗凝血肽的工艺研究

目的 本文利用星点设计-效应面法优化复合酶解酪蛋白制备抗凝血肽的工艺条件,并测定其体外抗凝血活性与溶栓效果。方法 首先运用星点设计-效应面法来确定菠萝蛋白酶、胰蛋白酶、胰糜蛋白酶和木瓜蛋白酶这四种酶各自酶解酪蛋白的最佳反应条件,然后在各酶的最佳反应条件下对酪蛋白进行复合酶解,制得酪蛋白复合酶解液,再运用凝血酶滴定改进法来测定其体外抗凝血活性,并用抗凝血活性最高的酪蛋白复合酶解液进行体外溶栓实验。结果 四种酶酶解酪蛋白的最佳反应条件分别如下:菠萝蛋白酶:pH为6.50、温度为60.00 ℃、酶用量为12 000.00 U/(g底物)、时间为3.00 h、料水比为1:7(m/V);胰蛋白酶和胰糜蛋白酶均为:pH为8.00、温度为50.00 ℃、酶用量为6 000.00 U/(g底物)、时间为3.00 h、料水比为1:7(m/V);木瓜蛋白酶:pH为6.50、温度为60.00 ℃、酶用量为4 000.00 U/(g底物)、时间为3.00 h、料水比为1:7(m/V)。结论 本实验条件下,加酶组合为“菠萝蛋白酶-胰蛋白酶-胰糜蛋白酶-木瓜蛋白酶”的复合酶解制备的酪蛋白酶解液具有最高的体外抗凝血活性,为100.0 ATU/mL;新西兰大白兔的血栓线用100.0ATU/mL的酶解液浸泡24 h后全部溶解,且兔血与100.0 ATU/mL酪蛋白酶解液的比例(V/V）为1:1和4:6的样品组放置48 h仍不凝固。     

SPSS正交设计提取林蛙油多糖

目的研究中性蛋白酶水解提取林蛙油多糖的最佳工艺参数。方法以料水比、中性蛋白酶浓度、水解时间和水解温度为考察因素,提取液中多糖含量为指标,通过SPSS软件设计L9(34)正交试验,并用SPSS进行数据处理。结果通过正交实验,得出中性蛋白酶提取林蛙油多糖工艺条件为料水比1∶100、加酶量为5%、水解时间1h、水解温度50℃。结论运用SPSS软件设计L9(34)正交表并进行数据处理,大大方便了实验结果处理,使实验方便科学,得出中性蛋白酶水解提取林蛙油多糖的工艺。     

酶解-溶剂联合提取洋葱中槲皮素的研究

目的:研究酶解与溶剂联合提取洋葱中槲皮素的最佳工艺条件。方法:以槲皮素得率为考察指标,通过单因素试验及正交实验确定最佳提取工艺。结果:酶解-溶剂联合提取槲皮素的最佳工艺条件是:酶解pH为5.5,酶解浓度为0.5mg.ml-1,酶解温度为45℃,酶解时间为2 h,液固比为20∶1,提取温度为65℃,提取时间为1.5 h,乙醇浓度为60%,槲皮素平均得率为0.046%。结论:采用酶解-溶剂联合提取槲皮素,工艺方法简单,可大大提高原料利用率。     

鸡内金酶解产物氨基酸分析研究

目的:研究鸡内金在不同的酶作用下的水解程度以及酶解产物的氨基酸含量分析。方法:在胰蛋白酶、木瓜蛋白酶及中性蛋白酶作用下鸡内金水解,用氨基酸自动分析仪分析酶解产物的氨基酸含量。结果:在3种酶作用下鸡内金水解率平均值分别为36.77%,23.34%,25.44%;酶解产物中均有的16种水解氨基酸,但胰蛋白酶水解产物中氨基酸总量高于木瓜蛋白酶及中性蛋白酶,为146.52mg.(100mL)-1。结论:在3种酶的作用下鸡内金均能水解,但水解程度有差别,胰蛋白酶水解产物中水解氨基酸含量较高。     

自鳕鱼皮中制备流感病毒神经氨酸酶抑制活性肽

目的自鳕鱼皮中制备流感病毒神经氨酸酶抑制活性肽。方法选用9种蛋白酶对鳕鱼皮胶原蛋白进行酶解,以神经氨酸酶抑制率为指标进行比较,选择最佳水解蛋白酶,用响应面法对酶解条件进行优化。结果与结论胃蛋白酶水解产物的抑制活性最高,且呈剂量依赖性,IC50值为8.86mg.mL-1。响应面分析确定最佳酶解条件为加酶量1600U.g-1,底物浓度22mg.mL-1,酶解时间6.8h。在此最佳条件下,胃蛋白酶水解产物IC50值为7.95mg.mL-1。抗H1N1流感病毒活性的细胞实验结果显示,10mg.mL-1的胃蛋白酶酶解物病毒抑制率可达66.6%。     

酶法制备山药渣中水不溶性膳食纤维的研究

目的 以山药废渣为原料研究以淀粉酶和蛋白酶水解法制备水不溶性膳食纤维的工艺条件。方法 试验选取淀粉酶的用量、酶解时间、蛋白酶的用量、酶解时间四个因素,确定最佳酶解工艺条件。结果 淀粉酶用量为2 U·mL-1,酶解时间为80 min,蛋白酶用量为3 U·mL-1,酶解时间为30 min。结论 该法可提高山药的利用度,促进山药相关产品的开发利用。     

酶解-吸附澄清法提取水辣蓼总黄酮的工艺优化

目的 优化酶解-吸附澄清法提取水辣蓼总黄酮的工艺.方法 采用响应面法,构建多元二次回归数学模型,筛选酶法提取和絮凝澄清的最佳工艺条件.结果 最佳酶法提取工艺为料液比1∶50,pH6.06,复合酶用量0.24％,酶解温度50℃,酶解时间1.62 h;最佳澄清工艺为酶解液的浓缩比1∶5,药液pH5.24,膨润土用量0.45 mL·g-1,43.43℃下絮凝40 min.结论 酶法提取条件温和,膨润土絮凝能有效降低酶解液中总固形物的含量,优于传统醇沉法.     

正交法提取孔石莼膳食纤维工艺的研究

目的以孔石莼为原料,采用酶与化学结合的方法提取膳食纤维。方法就影响膳食纤维含量7个因素:酶用量、酶解时间、酶解温度、氢氧化钠浓度、氢氧化钠提取温度、氢氧化钠用量、氢氧化钠提取时间进行了单因素试验和正交试验。结果最佳提取工艺条件为蛋白酶与纤维素酶用量比为20:1,在40℃提取1.5h,用20倍1.5%氢氧化钠溶液在75℃提取2h,其产率达到了21%左右,色泽近淡黄褐色。结论研究确立了提取孔石莼膳食纤维的最佳工艺条件。     

裙带菜膳食纤维提取工艺的研究

目的 以裙带菜为原料,采用酶与化学结合的方法提取膳食纤维.方法就影响膳食纤维提取率的7个因素:酶用量、酶解时间、酶解温度、碳酸钠浓度、碳酸钠提取温度、碳酸钠用量、碳酸钠提取时间进行了试验.结果与结论提取膳食纤维的最佳工艺条件为在50℃条件下用30:1的蛋白酶与纤维素酶酶解1.5h.再用30倍1% Na2CO3溶液在65℃提取3h,膳食纤维的产率可达12.65%,颜色为近淡黄色,可作为功能性食品的膳食纤维添加剂.     

养殖鲟鱼软骨中硫酸软骨素的优化提取工艺研究

目的以养殖鲟鱼软骨为原料,提取硫酸软骨素、筛选提取工艺条件。方法用稀碱-盐解-酶解法提取硫酸软骨素,并对各工艺中影响提取效果的不同因素进行正交实验。结果碱提取最佳工艺组合为:碱浓度5%,料液比1∶6,碱提取时间3h;盐解最佳工艺组合为:盐浓度4%,盐解温度90℃,盐解时间20min;酶解最佳工艺组合为:酶浓度0.4%,酶解温度52℃,酶解时间2.5h。结论采用上述组合提取硫酸软骨素的得率为31.56%,显著高于(P<0.05)传统工艺的25.86%。