大黄蒽醌在大鼠体内的药动学研究

目的建立HPLC-MS/MS法同时检测大鼠ig大黄蒽醌后血浆中大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚和番泻苷A,研究大黄蒽醌在大鼠体内的药动学。方法采用Shim-pack VP-ODS C_(18)色谱柱(150 mm×2 mm,5μm);流动相为含0.1%甲酸、2 mmol/L乙酸铵的水溶液–乙腈,采用梯度洗脱方式;柱温40℃;体积流量0.3 m L/min。采用电喷雾离子源(ESI),多重反应监测(MRM)模式扫描,负离子方式检测。SD大鼠分别ig 37.5、75、150 mg/kg大黄蒽醌,分别于给药后0、0.083、0.25、0.5、0.75、1、2、3、4、6、8、12、24 h取血,采用HPLC-MS/MS法测定血药浓度,绘制血药浓度–时间曲线,采用Win Nonlin软件进行数据分析,计算药动学参数。结果各蒽醌类成分在选定的质量浓度范围内线性关系良好。在低、中、高3个质量浓度下6种成分的提取回收率为88.22%~102.04%,基质效应为89.26%~106.01%。在37.5 mg/kg剂量组中,仅检测到大黄酸、大黄素和芦荟大黄素;在75、150 mg/kg剂量组中,检测到大黄酸、大黄素、芦荟大黄素和大黄酚。在3个剂量组中均未检测到大黄素甲醚和番泻苷A。大黄酸在体内迅速吸收,3个剂量组中均在30 min内就达到最大血药浓度(C_(max))。大黄酸、大黄素、芦荟大黄素和大黄酚C_(max)和曲线下面积(AUC_(0→∞))均随剂量的增加而增加,具有剂量相关性。血浆清除率(CL/F)和表观分布容积(V/F)不随剂量增加而明显改变,此4个成分药动学标志物的药动学行为呈线性动力学特征。结论建立了同时测定大鼠血浆中大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚和番泻苷A 6种成分的HPLC-MS/MS方法,适用于大黄蒽醌在大鼠体内的药动学研究。     

5个蒽醌三三配伍治疗脑缺血大鼠的药代动力学研究

目的:建立LC-MS方法测定大鼠血浆中蒽醌成分含量,探讨5个大黄蒽醌成分(芦荟大黄素、大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚)三三配伍时在脑缺血大鼠模型中的药代动力学特征。方法:MCAO法制备大鼠局灶性脑缺血模型。模型大鼠随机分成11组,空白组1组,给药组10组。给药组将5个大黄蒽醌三三结合,给药剂量:芦荟大黄素(A)13.05 mg·kg^-1,大黄素(B)34.65 mg·kg^-1,大黄酸(C)17.25mg·kg^-1,大黄酚(D)39.45 mg·kg^-1,大黄素甲醚(E)26.4 mg·kg^-1。血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,XBridge^TMC₁₈色谱柱分析,高分辨质谱检测。流动相为甲醇-3 mmol·L^-1乙酸铵,梯度洗脱。采用内标法测血药浓度,Kinetica 5.0药动学软件以非房室模型计算药代动力学参数。结果:当与不同的2个大黄蒽醌联用时,芦荟大黄素、大黄素、大黄酸、大黄酚和大黄素甲醚的药代动力学参数均存在差异。结论:本研究为这5个大黄蒽醌的作用机制研究提供理论基础,为其临床用药提供了实验参考。     

决明子发酵前后5种蒽醌类成分变化研究

目的:探讨固态发酵对决明子中5种蒽醌类成分含量的影响。方法:采用高效液相色谱法测定决明子发酵前后芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量并进行对比研究。色谱柱为C18-ODS反相柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1mL.min-1,检测波长为280nm。结果:决明子经过发酵后,游离型蒽醌含量呈上升趋势。以未发酵成分含量为100%计算,5种成分变化分别为104.6%、102.2%、93.4%、215.6%、134.8%,其中芦荟大黄素、大黄酸和大黄素变化不明显,大黄酚与大黄素甲醚分别增加至2.15倍和1.34倍,可见发酵增加了蒽醌苷元的含量。结论:决明子通过发酵,有利于增加活性成分蒽醌苷元的含量。     

酒制大黄对大鼠体内药动学的影响

目的：建立同时测定大鼠血浆及组织中芦荟大黄素、大黄酸和大黄素的液-质联用方法,并探讨酒制大黄中游离蒽醌成分对大鼠体内的药动学的影响。方法：分别给予SD大鼠灌胃大黄生品和酒制品水煎液后,采用LC-MS测定血浆中大黄酸、芦荟大黄素、大黄素的血药浓度的含量。结果：大黄酒制品组的药动学参数（Tmax、Cmax、T1/2和AUC0-t）与生品组相比具有显著性差异,大黄酒制后,芦荟大黄素和大黄素在大鼠体内的Tmax均有不同程度的延长,Cmax均较生品组高,AUC0-t也有不同程度的增加,说明大黄酒制后有助于促进芦荟大黄素和大黄素的吸收,增加其生物利用度。但两者的半衰期T1/2均有所减少,说明两者在体内代谢较快;大黄酸的药动学参数变化不大。结论：酒制大黄中游离蒽醌成分对大鼠体内的药物代谢动力学有较大影响,该研究结果为探讨大黄炮制机理提供实验依据。     

大鼠体内桃核承气汤蒽醌类药代动力学研究

目的研究桃核承气汤中蒽醌类成分在大鼠体内药代动力学规律。方法大鼠灌胃给予桃核承气汤5、10 g.kg-1后,采集血浆、尿和胆汁,用HPLC方法分析样品中蒽醌类成分、测定血浆中大黄酸浓度经时变化,浓度-时间数据用3P97药代动力学软件进行分析,计算药动学参数。结果大鼠灌胃给予桃核承气汤后,血浆中检测到芦荟大黄素、大黄酸、大黄素,尿中检测到芦荟大黄素、大黄酸、大黄素和大黄酚,胆汁中检测到大黄酸和大黄酚;血液、尿液和胆汁中均以大黄酸含量最高,且经尿排泄的量明显多于经胆汁排泄的量。灌服桃核承气汤5和10 g.kg-1剂量组,T12(α)为0.03和0.13 h,T12(β)为1.46和2.51 h,T12(Ka)为0.01和0.12 h,V1为0.14和0.12 L.kg-1,CL为0.77和0.33 L.h-1.kg-1,Cm ax为(2.15±0.29)和(9.70±2.50)mg.L-1,Tpeak为(0.19±0.04)和(0.23±0.04)h,AUC0-∞为1.69和6.50 mg.L-1.h。结论桃核承气汤中蒽醌类成分可以吸收进入体内,其中以大黄酸为主;体内蒽醌类成分经尿和胆汁排泄,其中以尿排泄为主。大鼠灌服桃核承气汤,血浆中大黄酸浓度时间过程符合二室开放模型。     

均匀设计法优选决明子中蒽醌类物质的提取工艺

目的：优选决明子中蒽醌类成分的最佳提取方法和提取工艺。方法：以决明子中总蒽醌、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量为指标,考察超声法、加热回流法和索氏提取法提取决明子中蒽醌类成分优劣,确定索氏提取法为最佳提取方法。通过均匀设计法研究总蒽醌、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的提取工艺,其中总蒽醌含量用紫外分光光度法测定,5种蒽醌类化合物含量用HPLC法测定。结果：最佳提取工艺：提取时间61min,提取次数1次,甲醇浓度95度．蒽醌类成分综合评分可达0．1751。结论：该工艺简便合理,稳定准确,适用于决明子中蒽醌类物质的提取。     

大黄总蒽醌胶囊血清药化学研究

目的:初步分析大黄总蒽醌胶囊含药血清中药源性成分。方法:大鼠灌胃给予大黄总蒽醌胶囊内容物,采集含药血清,高效液相色谱法测定其指纹图谱,与相同条件下测定的胶囊内容物、对照品及空白血清图谱比较,分析大鼠给药后体内产生的药源性成分并进行鉴定。结果:含药血清中产生药源性成分20个,其中6个为体外原形成分,14个为代谢产物,6个原形成分分别被鉴定为大黄素-8-O-葡萄糖苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚,1个代谢产物被鉴定为芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷,其余13个代谢产物均具有大黄蒽醌类成分的紫外吸收特征。结论:本研究建立的方法准确可靠,可用于大黄总蒽醌胶囊血清药化学研究。     

不同浓度甲醇对决明子中5种蒽醌类成分含量的影响考察

目的:考察不同浓度甲醇对决明子中5种蒽醌类成分含量的影响。方法:用不同浓度(95%、80%、30%)甲醇溶液提取决明子药材,采用高效液相色谱法测定药材中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量。结果:不同浓度甲醇溶液提取的决明子药材中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量范围分别为0.0010～0.0181、0.0104～0.0637、0.0209～0.2535、0.0031～0.9157、0.0051～0.1263mg·g-1;平均回收率范围为96.34%～97.16%,RSD均小于3%(n=5)。结论:不同浓度甲醇提取的决明子药材中5种蒽醌类化合物含量差异大;以95%甲醇提取效果最佳,30%甲醇提取效果最差。     

决明子中蒽醌类成分的定量测定

决明子为豆科决明属植物决明(Cassia obtusifolia L)及小决明(Cassia fora L)的干燥成熟种子。具清肝明目、润肠通便等功效。常用于目赤涩痛、羞明多泪、头痛眩晕、大便秘结等。为常用中药。其主要成分有大黄酚、大黄素甲醚、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、决明素(obtusin)、黄决明素(chrysoobtusin)、决明子内酯(toralactone)等。本文对决明子中蒽醌类成分按文献方法:即用醋酸镁-甲醇液反应法可得到稳定的红色,并对其中游离蒽醌和结合蒽醌进行定量     

菊明提取物中蒽醌类活性成分的质量标准研究

目的:建立菊明提取物中蒽醌类成分的薄层色谱(TLC)鉴别及反相高效液相色谱(RP-HPLC)对大黄酚和大黄素同时定量检测的方法,为制订质量标准提供依据。方法:以大黄酚、大黄素为对照品,TLC法鉴别方中决明子。以RP-HPLC法同时测定菊明提取物中大黄酚和大黄素的含量:色谱柱为Discovery C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(85∶15,V/V),流速为1 ml/min,柱温为30℃,检测波长为254 nm。结果:决明子的TLC斑点清晰、专属性强。大黄酚和大黄素的质量浓度分别在0.345¹72.500μg/ml和0.246172.500μg/ml和0.246¹23.000μg/ml范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r均为0.999 9);平均加样回收率分别为98.27%和99.04%,RSD分别为2.26%和2.71%(n均为6)。结论:所建立的方法准确、重复性好,可用于菊明提取物中蒽醌类有效成分的质量控制。     

大黄5个蒽醌类成分与大鼠血浆蛋白结合率的测定

目的建立测定大黄苷元中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚5种成分与大鼠血浆蛋白结合率的方法。方法采用体外平衡透析法,模拟大黄苷元与血浆蛋白的结合过程,以固相萃取柱处理血浆样品,用高效液相色谱法测定大黄苷元中5种蒽醌类成分在透析袋内血浆中的浓度与透析袋外缓冲液中的浓度,计算血浆蛋白结合率。结果芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚提取回收率分别为68.6%,91.5%,78.6%,88.2%和71.4%,与大鼠体外血浆蛋白结合率分别为93.1%,91.3%,95.2%,87.5%和89.7%。结论大黄5种苷元与大鼠血浆蛋白结合率较高,且蛋白结合率与血药浓度无明显依赖性。     

Anthraquinone pharmacokinetics in Xiexin decoction and the different combinations of its constituent herbs

Xiexin decoction (XXD), a classical pyretolytic formulation, is composed of Rhei rhizoma (DH) Radix scutellaria (HQ) and Coptis chinensis (HL), and commonly used in the clinical setting. The aim of this study was to investigate the pharmacokinetic differences between the five anthraquinones it contains (aloe-emodin, rhein, emodin, chrysophanol and physcion) in rats after the oral administration of XXD and after the administration of the different combinations of its constituent herbs. Twenty rats were divided into four groups and randomly administered one of the four extracts: DH, DH and HQ (DH-HQ), DH and HL (DH-HL), and XXD (DH-HQ-HL) via intragastric gavage (i.g.). Anthraquinone concentrations in the plasma were determined by an HPLC technique. Pharmacokinetic parameters were calculated from the plasma concentration time data. Compared with DH alone, the DH-HL combination showed maximum plasma concentration decreased (Cmax) and area under curve (AUC) for the values anthraquinones, and a prolonged eliminatun half life (T(1/2)) for rhein, while the DH-HQ combination showed a decrease Cmax for rein and a prolonged T(1/2) for aloe-emodin and physcion. Finally, XXD (DH-HQ-HL) administration resulted in an increased AUC for all five anthraquinones compared to DH-HL, and increased the total of AUC for rhein, emodin, chrysophanol and physcion compared to DH alone. These results showed that the oral bioavailability of the five anthraquinones was significantly decreased by combining DH with HL, whereas HQ increased the amounts of absorbed anthraquinones (except for aloe-emodin), and weakened the effect of HL which inhibited the absorption of anthraquinones.     

增视口服液质量标准研究

目的:建立增视口服液的质量标准。方法:采用薄层色谱法对枸杞、决明子、五味子进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定大黄酚的含量。结果:增视口服液可用枸杞、决明子、五味子进行定性鉴别;大黄酚进样量在0.083~0.416μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9999);平均回收率为98.38%,RSD=1.72%。结论:所建标准可用于增视口服液的质量控制。     

Effects of Cassia obtusifolia (sicklepod) extracts and anthraquinones on muscle mitochondrial function

Naturally occurring quinones and quinone-containing extracts of seeds of the toxic plant Cassia obtusifolia (sicklepod) affected muscle mitochondrial function. Aqueous suspensions and organic extracts of C. obtusifolia seeds slightly elevated plasma creatine kinase levels of Sprague-Dawley rats. These extracts were analyzed by fused silica capillary gas chromatography and found to contain nine anthraquinones and three anthrones. Urinary metabolites primarily consisted of beta-glucuronide conjugates of the anthraquinones. The three anthrones or conjugate analogues were not present in the urine in detectable amounts. Emodin, doxorubicin and organic extracts of C. obtusifolia inhibited NADH:cytochrome c oxidoreductase activity of bovine heart mitochondrial particles and NADH:CoQ oxidoreductase activity of porcine heart mitochondrial NADH dehydrogenase, whereas juglone was stimulatory. Relative quinone metabolism correlated with semiquinone formation rate and with redox potential. A protective effect of coenzyme Q against enzyme inhibition by anthraquinones was also observed.     

决明子化学成分的分离与鉴定

目的:对决明子的化学成分进行研究。方法:采用微波辐射苯-H2SO4浸提法和硅胶柱色谱分离纯化决明子,根据理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果:从决明子的苯-H2SO4提取物中共分离鉴定出8种化合物,分别为大黄酸(1)、美决明子素(2)、美决明子素甲醚(3)、芦荟大黄素(4)、大黄素(5)、橙黄决明素(6)、大黄酚(7)和大黄素甲醚(8)。其中化合物1是首次从该植物中分离得到。结论:本方法简单、快速,可为决明子的进一步研究提供一定依据。     

Rapid simultaneous quantification of five active constituents in rat plasma by high-performance liquid chromatography/tandem mass spectrometry after oral administration of Da-Cheng-Qi decoction

A rapid, sensitive and specific liquid chromatography-electrospray ionization/tandem mass spectrometry (LC-ESI/MS/MS) method has been developed and validated for simultaneous determination of five active constituents (including magnolol, honokiol, rhein, emodin and aloe-emodin) from Da-Cheng-Qi decoction (DCQD) in rat plasma. After the addition of gliquidone as the internal standard (IS), plasma samples were prepared by one-step protein precipitation using methanol and separated by HPLC on a short reversed phase C(18) column packed with smaller particles (100 mm x 3.0 mm, 3.5 microm) using a mobile phase of methanol-0.1% formic acid aqueous solution (70:30, v/v). Analytes were determined in a triple-quadrupole mass spectrometer in the selected reaction-monitoring (SRM) mode using electrospray source with negative mode. The method was proved to be rapid, sensitive, specific, accurate and reproducible and has been successfully applied to the determination of the five compounds in rat plasma after oral administration of low dose DCQD for pharmacokinetic study.