TGF-β、Smad信号通路蛋白及α-SMA在糖尿病肾病患者肾组织中的表达和意义

【摘要】目的检测转化生长因子（TGF）-β、Smad信号通路蛋白和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）在糖尿病肾病（DN）患者肾活检组织中的表达,探讨DN的发病机制。方法收集DN肾组织标本28例（DN组）;非DM行肾切除的正常肾组织10例为对照组。应用免疫组化方法检测TGF-β1、TGF-β受体（R）Ⅰ、TGF-βRⅡ、Smad2/3、α-SMA在肾组织中的表达。结果（1）TGF-β1、TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ、Smad2/3在DN组和对照组中均有表达,前者高于后者,DN组早期光镜下肾组织未见明显异常时即有明显的高表达,而随着疾病的进展未见表达增高的现象。肾小球、肾小管出现纤维化后并不表达上述因子。（2）对照组的α-SMA仅表达于肾血管、肾小球和肾小管,而肾间质未见α-SMA表达,而DN组α-SMA在上述组织中均有表达。结论TGF-β及Smad信号转导通路参与了DN的发病,DN可能与免疫复合物性肾小球肾炎具有相似的发病机制。     

P38MAPK 抑制剂 SB203580对高糖诱导HK-2细胞转分化的影响

摘要： 目的 探讨不同浓度 P38 丝裂原活化蛋白激酶 （P38MAPK） 抑制剂 SB203580 在高糖诱导肾小管上皮细 胞-肌成纤维细胞转分化 （TEMT） 过程中的机制及其较佳作用浓度。方法 体外培养人近端肾小管上皮细胞 （HK- 2） 并分为对照组 （5.5 mmol/L GS）、 DMSO 组 （5.5 mmol/L GS + 30 μmol/L SB203580 等体积的 DMSO）、 高糖组 （30 mmol/L GS）, 以及 30 mmol/L GS +5、 10、 20、 30 μmol/LSB203580 处理的 S5、 S10、 S20 及 S30 组, 干预 48 h。四甲基偶 氮唑蓝 （MTT） 法检测细胞增殖情况, 计算半数抑制浓度 （IC50 ）; 选取对照组、 高糖组、 S30 组, Western blot 法检测 P38MAPK、 P-P38MAPK 及α-平滑肌肌动蛋白 （SMA） 的表达、 免疫荧光法检测α-SMA 的表达。结果 （1） 与对照组 相比, DMSO 对 HK-2 细胞增殖无显著抑制作用 （P > 0.05）; 高糖组、 S5 组 HK-2 细胞增殖增多 （P < 0.05）; S20、 S30 组 HK-2 细胞增殖减少 （P < 0.05）。与高糖组相比, S5、 S10、 S20、 S30 组细胞增殖均受到抑制 （P < 0.05）。（2） 与对照 组相比, 高糖组、 S30 组 P-P38MAPK 表达量增高 （P < 0.05）。与高糖组相比, S30 组 P-P38MAPK 的表达量降低 （P < 0.05）。3 组 P38MAPK 表达量无显著差异 （P > 0.05）。（3） 与对照组相比, 高糖组、 S30 组α-SMA 表达量增高 （P < 0.05）。与高糖组相比, S30 组α-SMA 表达量降低 （P < 0.05）。结论 30 mmol/L GS 可以诱导 HK-2 细胞 TEMT;30 μmol/L SB203580 是抑制 HK-2 细胞 TEMT 的较佳抑制浓度, SB203580 可能通过下调 P-P38MAPK 表达, 从而抑制 HK-2细胞增殖及胞浆中α-SMA 的表达, 延缓 TEMT 进程。     

白藜芦醇对H2O2 及TGF-β2诱导人小梁网细胞的影响及机制探讨

摘要： 目的 观察过氧化氢 （H2O2 ） 及转化生长因子 （TGF） -β2 诱导人小梁网细胞 （HTMCs） 后对纤维连接蛋白（FN）、 胶原蛋白 1 型 （COL1）、 核因子 （NF） -κB P65 蛋白和白细胞介素 （IL） -1β基因表达的影响及白藜芦醇 （RSV） 的干预作用。方法 （1） 选取汇合度 70%～80%的 HTMCs 分为 5 组。实验组于无血清培养基中分别加入浓度为 150、 300、 450、 800 μmol/L 的 H2O2 处理, 对照组的培养基中不加 H2O2。Western blot 法检测各组 FN、 COL1、 NF-κB P65、 NF-κB P65 磷酸化 （P-NF-κB P65） 蛋白的表达, 实时定量 PCR 法检测 IL-1β基因的表达。（2） HTMCs 细胞分为 3 组。对照组以不含 H2O2 及 RSV 的无血清培基处理, H2O2 组以 300 μmol/L 的 H2O2 处理, H2O2+RSV 组同时加入 300 μmol/L 的 H2O2 及 25 μmol/L 的 RSV 处理。检测各组上述蛋白和基因的表达情况。免疫荧光检测各组 NF-κB P65 在 HTMCs 中的定位。（3） HTMCs 细胞分为 3 组。对照组以不含 TGF-β2 及 RSV 的无血清培基处理, TGF-β2 组以 5 μg/L 的 TGF-β2 处理, TGF-β2+RSV 组为同时加入 5 μg/L 的 TGF-β2 及 25 μmol/L 的 RSV 处理。检测各组上述蛋白和基因的表达情况。结果 （1） 与对照组比较, 150、 300、 450、 800 μmol/L 组 FN 和 P-NF-κB P65 蛋白表达水平均增高, 300、 450、 800 μmol/L 组 COL1 蛋白和 IL-1β基因表达水平增高 （P < 0.05）, 其他指标比较差异均无统计学意义。（2） H2O2 组较对照组 FN、 COL1、 P-NF-κB P65 蛋白和 IL-1β基因表达水平均增高, 而 H2O2+RSV 组较 H2O2 组上述指标均降低, H2O2+RSV 组较对照组仅 IL-1β降低 （P < 0.05）。对照组仅细胞质表达 NF-κB P65, H2O2 组细胞胞质及核中均有 NF-κB P65 表达, 且核中表达较多; H2O2+RSV 组细胞胞质中表达 NF-κB P65 较核中多。（3） TGF-β2 组较对照组 FN、 COL1、 P-NF-κB P65 的蛋白和 IL-1β基因水平表达均增高 （P < 0.05）, TGF-β2+RSV 组较 TGF-β2 组上述指标均降低 （P < 0.05）。 结论 H2O2 和 TGF-β2 能上调 HTMCs 的 FN、 COL1、 P-NF-κB P65 蛋白及 IL-1β基因的表达, 可能参与青光眼的发生发展过程。RSV 能抑制H2O2和 TGF-β2对HTMCs 的影响, 对青光眼发挥一定的保护作用。     

自噬抑制剂对乙醇诱导的肝星状细胞活化作用的影响

【摘要】目的 观察自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）对乙醇诱导的肝星状细胞（HSC）活化作用,并探讨其作用机制。方法 体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6,设立空白对照组、阳性对照组（乙醇刺激组）、低剂量组（5 mmol/L3-MA+100mmol/L乙醇）、高剂量组（10mmol/L3-MA+100mmol/L乙醇）。RT-PCR分析各组HSC活化标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原基因表达,Western blot法检测各组HSC中自噬水平标志蛋白LC3Ⅱ、α- SMA、Ⅰ型胶原表达;MTT法检测3-MA对乙醇诱导的HSC增殖的影响。结果与空白对照组比较,阳性对照组中α- SMA、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达及LC3Ⅱ表达量明显增加（P＜0.05）,高剂量组却显著减少（P＜0.01）;与阳性对照组比较,低剂量组和高剂量组中α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达及LC3Ⅱ表达量逐渐减少（P＜0.05）;与低剂量组比较,高剂量组中α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达及LC3Ⅱ表达减少（P＜0.05）。与阳性对照组比较,加入3- MA处理后的HSC增殖显著减少（P＜0.05）。结论3-MA可抑制乙醇诱导的HSC-T6细胞中LC3Ⅱ蛋白的表达、α- SMA、Ⅰ型胶原mRNA及蛋白的表达,抑制HSC增殖,且高剂量的作用更明显。     

肾康注射液抑制体外培养小鼠腹膜间皮细胞中TNF-α、 TGF-β1、 VEGF、 CTGF的释放

摘要： 目的 探讨肾康注射液对体外培养的小鼠腹膜间皮细胞 （PMCs） 的肿瘤坏死因子 （TNF） -α、 转化生长因子（TGF） -β1、 血管内皮生长因子 （VEGF）、 结缔组织生长因子 （CTGF） 等细胞因子水平的影响。方法 小鼠PMCs经传代培养及鉴定后, 分为空白对照组 （A组, DMEM）; 阳性对照组 （B组, DMEM+ 140 mmol/L葡萄糖）; 低 （C组）、 中 （D 组）、 高 （E组） 剂量肾康干预组 （B组培养液+含体积比为1%、 2%、 4%肾康注射液）。培养24 h后分别收集细胞和培养上清液, 采用酶联免疫吸附试验检测培养上清液中TNF-α、 TGF-β1、 VEGF、 CTGF水平, Real-time RT-PCR检测 PMCs中TNF-α、 TGF-β1、 VEGF、 CTGF的mRNA转录水平。结果 与A组比较, B组TNF-α、 TGF-β1、 VEGF、 CTGF 浓度及mRNA表达水平均明显上升 （P＜0.05）; 与B组比较, 加入肾康注射液后, C、 D、 E组培养上清液中由高糖诱导的TNF-α、 TGF-β1、 VEGF、 CTGF浓度及相应mRNA水平均出现不同程度下降 （P＜0.05）, 并呈现一定的剂量依赖性。结论 一定浓度的肾康注射液可抑制高糖诱导的小鼠PMCs中TNF-α、 TGF-β1、 VEGF、 CTGF的表达和转录。     

五味子乙素对HK-2细胞缺氧损伤的保护作用

卢爱龙 1, 谭小月 2, 张勉之 3△, 吴银娜摘要： 目的 探讨五味子乙素 （Sch B） 对氯化钴 （CoCl2） 诱导的人类近端肾小管上皮 （HK-2） 细胞缺氧损伤的保护作用及其可能机制。方法 取离体培养 HK-2 细胞, 随机分为 4 组。对照 （C） 组： 细胞未经任何处理。CoCl2组 （化学乏氧组）： 加入 600 μmol/L 的 CoCl2 处理 24 h。Sch B 预保护（CoCl2+ Sch B）组： 分别加入终浓度为 1 μmol/L 和 10 μmol/L Sch B 预处理 2 h 后, 其余操作同 CoCl2 组。Sch B 组： 分别加入终浓度 1 μmol/L 和 10 μmol/L Sch B 处理 2 h。CCK-8 试剂盒检测各组细胞活性; AnnexinV-FITC/PI 双标记流式细胞仪检测各组细胞凋亡率; Western Blot 检测各组缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）蛋白表达; RT-PCR 检测各组 HIF-1α和诱导型一氧化氮合酶（iNOS） mRNA 表达。结果 与对照组相比, CoCl2组细胞活性明显降低, 细胞凋亡率、 HIF-1α蛋白表达量和 iNOS mRNA 表达量显著增加, HIF-1α mRNA 表达量差异无统计学意义; Sch B 预保护组较 CoCl2组细胞活性显著增加, 细胞凋亡率、 HIF-1α蛋白表达量、 HIF-1α及 iNOS mRNA 表达量均显著减少; Sch B 组与对照组细胞活性、 细胞凋亡率差异无统计学意义, Sch B 组几乎不表达 HIF-1α蛋白。结论 Sch B 可能通过抑制 HIF-1α蛋白和 iNOS mRNA 的表达减少 HK-2 细胞的凋亡, 从而对 HK-2 细胞缺氧损伤起保护作用。     

TGF-β1对结直肠癌细胞株侵袭转移及IL-22表达的影响

目的 探讨转化生长因子β1（TGF-β1）对结直肠癌细胞株侵袭转移及白细胞介素22（IL-22）蛋白表达的 影响。方法 以结直肠癌HCT116细胞株为研究对象,以不同浓度（0、5、10、15、20、30、50 μg/L）TGF-β1处理24、48 h 后,CCK-8法检测结直肠癌HCT116细胞体外增殖情况;将结直肠癌HCT116细胞株分为对照组和10 μg/L TGF-β1 处理组。Transwell侵袭迁移实验和划痕实验检测TGF-β1对HCT116细胞侵袭迁移能力的影响;采用RT-PCR检测 TGF-β1对HCT116细胞TGF-β1、IL-22 mRNA表达的影响;免疫细胞化学染色和Western blot 检测HCT116细胞中 TGF-β1、IL-22、信号转导和转录激活因子3（STAT3）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达水平。结果 CCK-8结果显示, 0、5、10、15、20、30、50 μg/L TGF-β1 溶液刺激 24、48 h 后,不同 TGF-β1 浓度处理组结直肠癌 HCT116 细胞光密度 （OD）值差异均无统计学意义（均P＞0.05）。10 μg/L TGF-β1处理HCT116细胞48 h后,细胞侵袭能力、迁移能力和 迁移距离均明显升高（均P＜0.01）;TGF-β1处理组TGF-β1 mRNA表达水平明显高于对照组,而IL-22 mRNA表达水 平明显低于对照组（均P＜0.01）;免疫细胞化学染色和Western blot结果显示,TGF-β1处理组TGF-β1、STAT3蛋白表 达水平明显高于对照组,而IL-22、E-cadherin蛋白表达水平明显低于对照组（均P＜0.05）。结论 TGF-β1可能促进 HCT116细胞侵袭和迁移,但对HCT116细胞的增殖影响不明显,结直肠癌HCT116细胞中TGF-β1可能抑制IL-22蛋 白的表达。     

Ski在全反式维甲酸抑制TGF-β1诱导的系膜细胞增殖中的作用

【摘要】目的 探讨全反式维甲酸（ATRA）对转化生长因子(TGF)-β1诱导的大鼠系膜细胞增殖及Ski表达的影响。方法 不同浓度ATRA预处理大鼠HBZY-1系膜细胞（为各剂量ATRA组）24 h后再加TGF-β1 (10 μg/L)培养24 h。 CCK-8法检测细胞增殖情况;Real-time PCR法检测Ski mRNA的表达;Western blot检测Ski蛋白的表达;激光共聚焦荧光显微镜检测Ski蛋白的亚细胞定位。并与正常对照组及TGF-β1组比较。结果 与正常对照组相比,TGF-β1组系膜细胞增殖明显,且Ski mRNA及蛋白表达升高(P < 0.05);与TGF-β1 组相比,ATRA能够呈剂量依赖性地抑制 TGF-β1的促增殖作用,ATRA 10 μmol/L组Ski mRNA及蛋白表达量明显增高。ATRA组Ski蛋白主要定位于大鼠系膜细胞核,其细胞核荧光信号强度较TGF-β1组明显增强,细胞浆中荧光信号强度较TGF-β1组减弱。结论 ATRA可通过上调大鼠系膜细胞Ski表达,抑制其向核外转位,从而抑制TGF-β1诱导的系膜细胞增殖。     

白细胞介素-4负调控NF-κB通路抑制炎症反应的机制研究

摘要：目的 探讨白细胞介素（IL）-4 对于脂多糖（LPS）诱导的 Ana-1 细胞髓样分化因子 88（MyD88）/核因子 （NF）-κB信号通路的影响。方法 将小鼠巨噬细胞Ana-1分为LPS组（给予50 μg/L LPS刺激）和LPS+IL-4组（10 μg/L IL-4预培养1 h后,给予LPS 刺激）。在0、0.5、1和2 h时收集细胞培养上清液。采用RT-PCR 检测MyD88和 NF-κB mRNA的相对表达水平;Western blot法检测MyD88、NF-κB总蛋白、NF-κB p65蛋白表达水平;ELISA法检测 NF-κB p65胞核/胞浆比例,以及细胞培养上清液中IL-6和肿瘤坏死因子（TNF）-α含量。结果 随着细胞培养时间 的延长,LPS组MyD88、NF-κB mRNA和蛋白表达水平,NF-κB p65胞核/胞浆比例,IL-6和TNF-α水平均呈逐渐升高 的趋势（P＜0.05）;而 LPS+IL-4 组 MyD88 mRNA 表达水平无明显变化（P＞0.05）,MyD88 蛋白表达水平、NF-κB mRNA和蛋白表达水平、NF-κB p65胞核/胞浆比例、IL-6和TNF-α水平则均呈先升高后降低的趋势（P＜0.05）;LPS+ IL-4组MyD88 mRNA和蛋白表达水平、NF-κB p65胞核/胞浆比例、IL-6和TNF-α水平在1 h和2 h时显著低于LPS组 （P＜0.05）,而2组不同时间点NF-κB mRNA和蛋白表达水平比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 IL-4发挥 抗炎作用可能与抑制MyD88/NF-κB信号通路活化有关,IL-4可下调促炎细胞因子IL-6和TNF-α的表达。     

丹酚酸B对转化生长因子β1诱导人肺成纤维细胞增殖和分化的影响

目的：观察丹酚酸B（Sal B）对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的人肺成纤维细胞增殖及分化的影响。方法：将人胚肺成纤维细胞（MRC-5）随机分为6组：对照组（未加入TGF-β1或Sal B）;1μmol/L Sal B组;10μmol/L Sal B组;10ng/mL TGF-β1组;TGF-β1（10ng/mL）＋1μmol/L Sal B组;TGF-β1（10ng/mL）＋10μmol/L Sal B组。采用MTT法观察各组细胞增殖情况;RT-PCR和Western blot方法分别检测各组细胞α-SMA mRNA和蛋白的表达情况;免疫荧光方法检测细胞内纤维形肌动蛋白（Factin,Fibrous Actin）重组及观察细胞形态变化。结果：与对照组比较,TGF-β1组细胞增殖率、α-SMA mRNA和蛋白的表达水平均明显增加,细胞形态发生明显改变,胞内可见大量F-actin聚合形成的应力纤维（stress fiber）（P〈0.01）;与对照组比较,单纯加入Sal B对细胞增殖、α-SMA表达、细胞形态和F-actin重组均未产生影响（P〉0.05）;与单纯TGF-β1组比较,TGF-β1＋Sal B两组细胞增殖率、α-SMA mRNA和蛋白表达水平均下降,发生形态改变的细胞减少,胞内F-actin聚合形成的stress fibers减少（P〈0.05）,且10μmol/L Sal B对TGF-β1抑制效应优于1μmol/L Sal B,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：Sal B体外能够抑制TGF-β1诱导的人肺成纤维细胞增殖和向肌纤维母细胞分化。     

Effects and mechanisms of Artemisia argyi essential oil on monocrotaline-induced pulmonary hypertension in rats

In the present study, we aimed to investigate the effects of Artemisia argyi essential oil (AO) on pulmonary hypertension (PH)inducedbymonocrotaline(MCT)andtoexploretheunderlying mechanism.A total of 80 Sprague-Dawley ratswererandomlydividedintofourgroups as follows:controlgroup, modelgroup,bosentan(0.1g/kg)groupandAO(0.1g/kg)group.After30dofexperiment, hemodynamicparameters,lungandrightventricle hypertrophy indexweredetermined. HEand Immunohistochemistrystainingoflungs were performedto detectthe injuriesandprotein expressions. Theresultsshowedthatlevels of mPAP,mRVP,maxRVP,wW,LI,RV and RVHI as well asthe expressionsofNF-κBp65andα-SMA were increased,smallpulmonaryarterythickened, the cavity of the arteriole narrowed, and there was marked infiltration of inflammatory cells in lungs of rats receiving MCT compared with the normal group. After the administration of AO, the levels of mPAP and mRVP were significantly decreased,and the wW, LI, LV+S and pulmonary arterial remodeling were markedly improved. The expression levels of NF-κB p65 and α-SMAwerereduced by AOcomparedwiththe modelgroup.Ourresultssuggestedthat AOreduced the progressionof PH induced byMCTthroughinhibiting the expressions of NF-κB p65 and α-SMA.     

有氧运动对自发性高血压大鼠心肌纤维化的影响及机制

摘要：目的 观察长期有氧运动对自发性高血压大鼠（SHR）心肌纤维化的影响,并探讨调控胶原代谢的信号分 子——转化生长因子-β（1 TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）和组织金属蛋白酶抑制 物-2（TIMP-2）在其中的作用机制。方法 30只雄性SHR随机分为安静对照（SHR-RC）组和有氧运动（SHR-AT） 组,同时将15只Wistar-Kyoto大鼠作为正常血压对照（NC）组。NC组和SHR-RC组动物在鼠笼安静饲养,SHR-AT组 进行24周跑台训练。实验结束后利用无创血压仪测定尾动脉血压,超声心动术检测心脏结构与功能,Masson染色获 取心脏胶原容积分数（CVF）,实时荧光定量 PCR 检测心钠素（ANP）、脑钠素（BNP）和 β-肌球蛋白重链（β-MHC） mRNA表达量,Western blotting检测TGF-β1、CTGF、MMP-2［包括总MMP-2（72 ku）和活化型MMP-2（64 ku）］、TIMP- 2和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）蛋白表达量。结果 与NC组比较,SHR-RC组大鼠心腔扩张同时室壁变薄,心脏 CVF 增加,心功能下降,ANP、BNP 和 β-MHC mRNA 以及 TGF-β1、CTGF、TIMP-2 和 α-SMA 蛋白表达量上调（P＜ 0.05）,活化型MMP-2蛋白表达量以及活化型MMP-2/TIMP-2比值下降（P＜0.05）;与SHR-RC组比较,SHR-AT组心 脏扩张减轻,心脏CVF下降,心功能增强,ANP、BNP和β-MHC mRNA以及α-SMA蛋白表达量下调,活化型MMP-2 蛋白表达量以及活化型 MMP-2/TIMP-2 比值增加（P＜0.05）,而 TGF-β1、CTGF 和 TIMP-2 蛋白表达量无明显变化 （P＞0.05）。结论 长期规律有氧运动能够改善SHR心肌纤维化,并延缓心脏重塑和心力衰竭进程,其机制与胶原 降解增加（但对胶原合成无影响）以及抑制成纤维细胞向成肌纤维细胞分化有关     

青蒿琥酯抗大鼠免疫性肝纤维化的作用及机制研究

目的研究青蒿琥酯抗实验性肝纤维化的作用及其可能机制。方法制备牛血清白蛋白免疫性大鼠肝纤维化模型。动物随机分为6组:正常对照组、模型对照组、Art组(5、15、45 mg.kg-1)、阳性对照Col组(0.1 mg.kg-1)。Masson染色观察肝组织病理变化,Jamall法测定肝组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量,RT-PCR技术检测肝组织转化生长因子β1(TGF-β1),α-肌动蛋白(α-SMA)mRNA的表达。体外培养大鼠肝星状细胞株(HSC-T6),用TGF-β1(5μg.L-1)刺激,与Art(终浓度6.25、25、50 mg.L-1)共培养后,检测HSC-T6中Ⅰ型前胶原(procollagenⅠ)mRNA及Ⅰ型胶原(collagenⅠ)蛋白的表达。结果与模型组相比,Art各组能减轻肝组织纤维增生的程度,降低肝组织Hyp含量,使肝组织α-SMA、TGF-β1 mRNA和HSC-T6中procollagenⅠmRNA和collagenⅠ蛋白的表达水平下降。结论 Art有明显的抗肝纤维化作用,其机制可能与抑制HSC活化,降低TGF-β1 mR-NA及collagenⅠ蛋白的表达有关。     

桑叶多糖对糖尿病小鼠肾病的影响

目的: 研究桑叶多糖对链脲佐菌素所致的糖尿病小鼠肾病的作用及其机制。方法: 建立糖尿病小鼠模型,随机分为:模型组,二甲双胍0.032 g·kg^-1组,桑叶多糖0.25,0.5,1 g·kg^-1组。连续灌胃给药35 d,末次给药后,检查小鼠空腹血糖;于给药第28天,将各组小鼠给药后置于代谢笼中收集24 h尿液,检查尿量,检测24 h尿微量白蛋白含量;HE染色法观察肾脏病理学变化。通过电子显微镜观察肾组织中细胞结构的变化。测定血清中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)和总胆固醇(TC)的含量。蛋白免疫印迹法检测肾脏组织中转录因子(NF-κB)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果: 与模型对照组比较,桑叶多糖1 g·kg^-1组中糖尿病小鼠的血糖明显降低,并显著降低尿微量白蛋白含量、尿量及血清中Cr、BUN、TC(P<0.05)。桑叶多糖1 g·kg^-1组的小鼠肾组织的病变得到缓解。下调肾脏组织中NF-κB及TGF-β1的蛋白水平(P<0.05)。结论: 桑叶多糖对链脲佐菌素所致糖尿病小鼠肾脏损害有一定的保护作用,机制可能与其通过抑制肾脏组织中NF-κB及TGF-β1的蛋白表达有关。     

虎杖苷通过TLR4/NF-κB信号通路调控糖尿病肾病大鼠肾脏炎症作用的研究

目的：研究虎杖苷通过TLR4/NF-κB信号通路调控糖尿病肾病大鼠肾脏炎症作用的影响。方法：通过尾静脉注射链脲佐菌素,高脂饲料喂养建立糖尿病肾病大鼠模型。将成模的大鼠随机分为模型组、缬沙坦组（20 mg·kg^-1）、虎杖苷组（75 mg·kg^-1）、虎杖苷组（150 mg·kg^-1）,每组10只,日常进行高脂饮食喂养,连续灌胃给药90 d,每日1次。于第90天采集尿液,测量尿量及终点法测24 h尿白蛋白（UP）含量。通过HE染色观察大鼠肾脏组织的病理学变化。采用ELISA法检测肾组织中TGF-β1、FN纤维化指标表达及肾脏组织中炎症因子肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）的含量。Western blot法检测肾组织中Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子（Myd88）、核转录因子kappa B（NF-κB）的表达。结果：与模型组相比,虎杖苷组大鼠Scr、BUN、UP含量显著降低（P<0.05）。TGF-β1、FN纤维化指标明及炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量显减少（P<0.05）,TLR4、Myd88、NF-κB蛋白表达显著降低（P<0.05）。结论：虎杖苷对糖尿病肾病所引起的肾脏炎症有一定的保护作用,其作用机制可能与调节TLR4/NF-κB信号通路,降低肾脏组织的炎症因子含量,而起到抗炎的保护作用有关。     

玫瑰花总黄酮对乳腺增生大鼠上皮-间质转换的影响

目的： 探讨玫瑰花总黄酮对实验性乳腺增生大鼠上皮-间质转换（EMT）的影响。方法： 通过注射雌激素和孕激素诱导大鼠乳腺增生,观察玫瑰花总黄酮（200和100 mg·kg^-1·d^-1）给药干预对乳腺组织形态学变化、乳腺fibronectin、α-SMA、E-cadherin、collagen-I和TGF-β1表达情况,以及微小RNA（miR）-21和miR-29a/b水平的影响。结果： 玫瑰花总黄酮给药能显著改善模型动物乳腺增生的趋势,抑制乳腺组织collagen-I沉积和TGF-β1表达,缓解EMT上皮标记物E-cadherin的缺失以及间质标记物fibronectin和α-SMA等的过度表达,降低miR-21并一定程度恢复miR-29a/b的水平。结论： 玫瑰花总黄酮对乳腺EMT发生的程度具有潜在的抑制作用。