HPLC-ESI-MS测定人血浆中多奈哌齐的浓度

目的 建立快速、灵敏的HPLC-MS检测方法测定人血浆中多奈哌齐浓度。方法 以马来酸氯苯那敏为内标,待测血浆经碱化处理后,经乙酸乙酯进行液-液萃取,采用Shim-pack ODS C₁₈柱(250 mm×2.0 mm,5 (m),以甲醇-0.1%醋酸溶液(60∶40)为流动相,流速0.2 mL·min^-1,柱温35 ℃。采用质谱电喷雾离子源正源(ESI⁺)将样品离子化,选择性离子监测(SIM)准分子离子峰。结果 多奈哌齐在0.1~16.0 ng·mL^-1内线性关系良好(r=0.999 8),最低定量限为0.1 ng·mL^-1。方法回收率为92.5%~105.3%,提取回收率均大于75%,批内与批间RSD均小于10%。结论 该方法简单,快速、灵敏度高、专属性强,适用于人血浆中多奈哌齐浓度的测定及药动学研究。     

HPLC-MS同时测定人血浆中卡马西平和苯妥英钠的血药浓度

目的 建立一种快速、灵敏并同时测定人血浆中卡马西平（CBZ）和苯妥英钠（PT）浓度的高效液相色谱-质谱联用检测方法。方法 以兰索拉唑为内标,血浆样品经乙腈沉淀后,经HPLC-MS分离分析。采用Diamonsil C18柱（2.1 mm×150 mm,5 μm）,流动相：甲醇-水（含0.1%甲酸）=0.20∶0.10;流速：0.3 mL·min^-1,采用电喷雾离子源（ESI）,以多反应监测方式（MRM）进行正离子监测,CBZ、PT和兰索拉唑的定量分析离子对分别为m/z 237.0/194.0,253.2/182.0,392.0/188.2。结果 CBZ在40.30-20 150.00 ng·mL^-1（r=0.993 7）内线性良好,为40.3 ng·mL^-1,低（66.08 ng·mL^-1）、中（660.8 ng·mL^-1）、高（16 120 ng·mL^-1）3个浓度的平均回收率RSD均〈15%。PT在80.1-40 050.0 ng·mL^-1（r=0.997 6）内线性良好,最低定量限为80.1 ng·mL^-1,低（133.5 ng·mL^-1）、中（1 335.00 ng·mL^-1）、高（32 040.00 ng·mL^-1）3个浓度的平均回收率RSD均〈15%。结论 该方法快速简便,灵敏准确,可用于CBZ和PT同时应用时两者的血药浓度监测及其药动学研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中多奈哌齐及其代谢物6-O-去甲基多奈哌齐浓度

目的:建立HPLC-MS/MS法测定血浆中多奈哌齐及其代谢物6-O-去甲基多奈哌齐浓度。方法:采用HPLC-MS/MS法,加入内标后,样品用二氯甲烷为萃取剂提取后进样,以Shisheido C18(100 mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,甲醇-5 mmol·L-1醋酸铵-甲酸(80∶20∶0.05)为流动相,流速为0.2 mL·min-1,柱温为室温。离子化方式为电喷雾离子化,多反应离子监测。结果:多奈哌齐及6-O-去甲基多奈哌齐标准曲线线性范围分别为0.05～15 ng·mL-1和0.008～2.4 ng·mL-1,定量下限分别为0.05和0.008 ng·mL-1,二者日内RSD及日间RSD均<9%,方法回收率在96%～103%之间。稳定性考察试验,二者血药浓度变化率均在±15%内。结论:该方法简单,快速,可满足多奈哌齐及6-O-去甲基多奈哌齐血药浓度的测定及多奈哌齐药代动力学研究。     

LC-MS/MS测定人血浆中哌甲酯

目的建立LC-MS/MS测定人血浆中盐酸哌甲酯的浓度。方法待测血浆1.0 mL,经1 mol.L-1的氢氧化钠40μL碱化后,用4 mL乙醚萃取处理,采用Eclipse XDB-C18（4.6 mm×150 mm,5μm）色谱柱,以甲醇和水为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1。以电喷雾正离子源离子化,检测离子对盐酸哌甲酯为234.0/84.0,内标卡马西平为237.0/194.0。结果血浆中内源性物质对测定无干扰,最低定量限为0.1 ng·mL^-1,在1-100 ng·mL^-1内盐酸哌甲酯线性关系良好（r=0.999 1）,日内、日间RSD均小于8%,样品分析时间为10 min。结论该法专属性强、灵敏度高,操作简便快速,测定结果可靠,适于进行盐酸哌甲酯血药浓度监测。     

UPLC-MS/MS快速测定大鼠血浆中的氯沙坦及其代谢产物

目的 建立快速测定大鼠体内氯沙坦及其代谢产物（E-3174）浓度的UPLC-MS/MS方法。方法 Waters XEVO TQD三重四级杆液质联用仪, 色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18柱（100 mm ×2.1 mm,1.7 μm）;流动相为乙腈-水（含0.1%甲酸和0.5%氨水）（60∶40）,流速为0.2 mL·min^-1,柱温30 ℃,内标为地西泮;质谱条件：电喷雾离子化源（ESI）,正离子检测模式;加入200 μL乙腈沉淀蛋白,13 000 r·min^-1离心10 min转移至1.5 mL EP管中取2 μL上样。结果 E-3174的保留时间为1.54 min,线性范围为6.25～800 ng·mL^-1（r=0.999 8）,最低定量限为0.5 ng·mL^-1,回收率为96.6%～98.37%;氯沙坦的保留时间为1.38 min,线性范围为12.5～1 600 ng·mL^-1（r=0.999 6）,最低定量限为1.0 ng·mL^-1,回收率为98.4%～100.6%。两者的日内、日间RSD均〈5%,孵育体系中的其他内源性物质不干扰测定。结论 该方法操作简便,重复性好,适于快速测定大鼠体内氯沙坦及其代谢产物浓度。     

LC-MS/MS法测定家兔血浆中多奈哌齐的浓度

目的建立测定家兔血浆中多奈哌齐浓度的LC-MS/MS法,并用该法研究多奈哌齐在家兔体内的药动学特征。方法色谱柱为Diamonsil C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-5 mmol·L^(-1)醋酸铵溶液-甲酸(体积比为50.0:50.0:0.1),采用沉淀蛋白法处理血浆样品,以多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)扫描方式检测,测定家兔给予多奈哌齐贴剂后血浆中的药物浓度。结果血浆中多奈哌齐质量浓度在1.0～500.0μg·L(-1)醋酸铵溶液-甲酸(体积比为50.0:50.0:0.1),采用沉淀蛋白法处理血浆样品,以多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)扫描方式检测,测定家兔给予多奈哌齐贴剂后血浆中的药物浓度。结果血浆中多奈哌齐质量浓度在1.0～500.0μg·L^(-1)内线性关系良好(r=0.996 5);日内精密度RSD≤7.9%,日间精密度RSD≤6.4%;平均提取回收率为(95.1±7.1)%(n=6),基质效应为(109.9±2.8)%(n=6)。多奈哌齐贴剂在家兔血浆中主要药物动力学参数如下:t_(1/2)为(28.2±11.4)h,ρ_(max)为(0.353±0.101)mg·L(-1)内线性关系良好(r=0.996 5);日内精密度RSD≤7.9%,日间精密度RSD≤6.4%;平均提取回收率为(95.1±7.1)%(n=6),基质效应为(109.9±2.8)%(n=6)。多奈哌齐贴剂在家兔血浆中主要药物动力学参数如下:t_(1/2)为(28.2±11.4)h,ρ_(max)为(0.353±0.101)mg·L^(-1),AUC_(0-168)和AUC_(0-∞)分别为(15.6±6.4)和(15.7±6.4)mg·h·L(-1),AUC_(0-168)和AUC_(0-∞)分别为(15.6±6.4)和(15.7±6.4)mg·h·L^(-1)。结论该方法适用于多奈哌齐在家兔体内药物动力学的研究。     

HPLC—MS／MS法测定人血浆中安非他酮及其代谢产物4-OH-安非他酮的浓度

目的建立HPLC-MS／MS法同时测定人血浆中的安非他酮及其代谢产物4-OH-安非他酮的浓度。方法血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,采用Hypurity C18柱（150mm×2．1mm,5μm）以乙腈-0．1％甲酸-10mm01．L。甲酸铵缓冲液（65：10：25）为流动相,流速为0．2mL·min,通过电喷雾离子化离子阱质谱,以二级质谱选择离子反应监测（SRM）方式进行检测。结果安非他酮线性范围为1．172～1200ng·mL^-1,4-OH-安非他酮线性范围为0．42-430ng·mL^-1,安非他酮和4-OH-安非他酮最低检测浓度分别低于1．0ng·mL^-1和0．21ng·mL^-1结论本法特异性强、灵敏度高,操作简便快速,测定结果可靠,可以准确地测定人体血浆安非他酮和4-OH-安非他酮的浓度。     

固相萃取反相高效液相色谱法测定人血浆中多奈哌齐浓度

目的:建立固相萃取反相高效液相色谱法测定人血浆中多奈哌齐浓度的方法。方法:血浆经碱化后,用OASIS固相萃取小柱提取血浆中多奈哌齐,紫外检测器检测,检测波长316nm。色谱柱:Sh im-Pack C18柱(150mm×4.6mm,5μm),保护柱:Sh im-Pack C18柱,流动相:0.5%三乙胺溶液(磷酸调pH3.0)-乙腈(65∶35),流速为1.0mL.m in-1。结果:标准曲线线性范围为5~100mg.L-1(r=0.999 3),萃取回收率在81.9%~90.7%之间。日内、日间RSD在5.4%~10.2%之间,最低检测浓度为2mg.L-1。结论:本测定方法快速、灵敏、准确,适用于临床治疗药物浓度检测的要求。     

UPLC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中多奈哌齐的质量浓度及其药动学研究

目的建立测定Beagle犬血浆中多奈哌齐的UPLC-MS/MS方法,并将其应用于盐酸多奈哌齐片在Beagle犬体内的药物动力学研究。方法采用沉淀蛋白法进行样品预处理,色谱柱为Acquity UPLC BEH C_(18)(50 mm×2.1 mm,1.7μm)柱,流动相采用乙腈(含体积分数0.3%甲酸)-水(含体积分数0.3%甲酸),梯度洗脱,以正离子扫描多反应监测(MRM)模式进行检测。结果血浆中多奈哌齐在质量浓度0.10~100.80μg·L~(-1)内线性关系良好,日内和日间精密度RSD均不超过10%,提取回收率为83.9%~88.1%,基质效应为95.5%~100.1%,多奈哌齐血浆样品在所考察的储存条件下均可保持稳定。结论该方法适用于盐酸多奈哌齐片在Beagle犬体内的药物动力学研究,国内研制的盐酸多奈哌齐片和国外参比制剂在Beagle犬体内的药物动力学行为具有一致性。     

HPLC-MS(TOF)法测定人血浆中多奈哌齐的浓度

目的建立测定人血浆中多奈哌齐的HPLC-MS(TOF)法。方法血浆中加入内标氯雷他定后经碱化以异丙醇-正己烷(3∶97)提取血浆样品,用LC/MS(TOF)联用技术,以电喷雾(ESI)作为接口技术,选择多奈哌齐的准分子离子(［M+H］⁺,m/z 380)和内标氯雷他定的准分子离子(［M+H］⁺,m/z 383)作为测定离子,测定人血浆中多奈哌齐的浓度。结果多奈哌齐的回归方程:As/Ai=0.0137+0.1056C,r=0.9998;线性范围为0.1～15 μg·L^-1,定量限为0.1 μg·L^-1,方法回收率和提取回收率均大于90%。结论该测定方法灵敏度高、专属性好、快速,可满足人体内药代动力学研究要求。     

LC-MS/MS法测定人血浆中白藜芦醇的浓度

目的:建立液相色谱-串联质谱法测定人血浆中白藜芦醇浓度的方法。方法:血浆样品经四硼酸钠溶液碱化后,经甲基叔丁基醚提取处理。分析柱为RestekC1(82.1mm×150mm,5.0μm),保护柱为GminiC1(84mm×3.0mm,10.0μm),流动相为乙腈-水(85∶15,V/V,其中含0.2mmol·L-1乙酸铵),流速为0.3mL·min-1,进样量为5μL,内标为3,5-二羟基-4-异丙基二苯乙烯,使用电喷雾离子源,以负离子多重反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量白藜芦醇和内标的MRM扫描离子通道分别为m/z227.0→143.0、253.2→211.0。每个样品的分析时间为5min。结果:白藜芦醇和内标的保留时间分别为1.43、2.55min。血浆中内源性物质对测定无干扰,白藜芦醇检测浓度在0.1～50.0ng·mL-1范围内同其与峰面积之比呈良好线性关系(r=0.9969),定量下限为0.1ng·mL-1。日内、日间RSD均低于11.25%,方法回收率为(91.70±3.81)%～(99.00±3.29)%。结论:本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于白藜芦醇的血药浓度测定。     

高效液相色谱法测定人血浆中奥卡西平活性代谢物利卡西平的浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定人血浆中奥卡西平(OXC)活性代谢物利卡西平(MHD)的浓度。方法以苯巴比妥为内标,血样用乙醚萃取;采用SHIMADZU VP-ODS(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-甲醇-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾缓冲液-四甲基乙二胺(20∶19∶61∶0.1,用磷酸调pH=6.0),流速0.8 mL.min-1,柱温为30℃,二极管阵列检测器检测波长232 nm。结果血浆中内源性杂质对样品测定无干扰,MHD在1.0~80.0μg.mL-1线性关系良好。MHD日内、日间RSD均<9%,平均萃取回收率均>66%,方法回收率为87%~98%。结论本法简便、灵敏、准确,适用于人体内奥卡西平活性代谢物MHD的血药浓度监测。     

高效液相色谱串联质谱法测定人体血浆中阿那曲唑的浓度

目的建立液质联用法来检测人体血浆中阿那曲唑的浓度。方法血浆样品经MTBE萃取后,选用来曲唑为内标。色谱柱为Thermo Hypurity C18柱(2.1 mm×150 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸(60∶40);流速为0.20 mL.min-1;采用ESI+MRM进行离子方式监测;源电压:3.6 kV;源温度:100℃;阿那曲唑和来曲唑的离子选择通道分别为:m/z294.69→225.41,286.25→217.60。结果阿那曲唑的线性范围为0.214~214 ng.mL-1,最低检测浓度为0.214 ng.mL-1,方法回收率在80%~120%,日内、日间RSD均<15%。结论本方法简单、灵敏,可以准确检测人体血浆中阿那曲唑的浓度。     

HPLC-MS法测定那格列奈的血药浓度

目的建立高效液相色谱-质谱（HPLC-MS）法测定那格列奈血药浓度。方法血浆样品采用乙腈沉淀后,以地西泮为内标。色谱柱为AgilentZorbaxSB-C18（100mm×2.1mm,5μm）柱,流动相为5mmoL·L^-1醋酸铵-乙腈（45∶55,v/v）,流速为0.3mL·min^-1,离子检测方式设为选择性离子检测（SIM）,检测离子极性为正离子,采用气动辅助电喷雾离子化（ESI）的离子化方式,检测对象为那格列奈（M＋H离子,m/z318.43）,内标地西泮（M＋H离子,m/z285.30）。结果线性范围：0.05～15mg·mL^-1（r=0.9997）,定量限为10μg·L^-1。方法回收率90.1%～95.8%,日内、日间精密度分别小于4.9%和6.1%。结论该方法选择性好,灵敏度高,简便易行,适用于那格列奈药物动力学和生物等效性研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中雷喏嗪的质量浓度

目的建立HPLC-MS/MS法测定人血浆中雷喏嗪的质量浓度。方法以伏立康唑为内标,采用乙腈-体积分数0.1%甲酸水溶液(90∶10)为流动相,以Agilent-ZORBAX-C18柱(150 mm×2.1 mm,5.0μm)色谱柱为分析柱,通过电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式进行检测。雷喏嗪和伏立康唑用于定量分析的离子对分别为[M+H]+m/z428.5→m/z279.3和[M+H]+m/z350.2→m/z281.3。结果雷喏嗪线性范围为20~5 000 ng·mL-1,定量下限为20 ng·mL-1。日内和日间的RSD均小于15%,平均回收率大于75%。结论该方法专属性强,样品处理方便,灵敏度高,适用于雷喏嗪的临床药动学研究。     

LC-MS法测定人尿液中依非巴特的浓度

目的：建立测定人尿液中依非巴特浓度的方法。方法：尿液样品经蛋白沉淀后,采用液-质联用法进样测定,以甲醇-0.008mol·L-1甲酸铵水溶液（含0.1%甲酸）（35∶65）为流动相,AgilentZorbaxEclipseXDB-C18为色谱柱进行分离;采用电喷雾电离源,以多反应监测（MRM）方式进行正离子检测,用于定量分析的离子对依非巴特为m/z832.6→m/z646.4,内标为m/z931.6→m/z745.6。结果：依非巴特尿药浓度在5.0～5000.0ng·mL-1范围内线性关系良好（r=0.9996）,最低定量限（LLOQ）为5.0ng·mL-1;日内和日间RSD均〈7%,方法回收率为99.4%～103.1%,绝对回收率≥93%。结论：本方法选择性强、灵敏度高、重现性好,能快速、准确测定人尿液中依非巴特的浓度,并且成功用于依非巴特尿药排泄的研究。     

LC-MS/MS法定量测定人血浆中普罗布考的浓度

目的：建立一种特异、灵敏的液质联用方法定量测定人体血浆中普罗布考的浓度。方法：在25.0μL含待测药物的血浆中加入内标Pr-1312及萃取液混匀沉淀蛋白。采用X-Terra RPC（82.1mm×50mm,3.5μm）色谱柱;柱温50℃;流动相为10mmol·L-1碳酸氢铵水溶液-乙腈（20：80）;进样量5μL;流速0.2mL·min-1。质谱检测方式为ESI-,MRM扫描,监测普罗布考m/z515.3→236.1,内标Pr-1312m/z382.2→161.0,分析时间3.3min。结果：普罗布考在10.0～5000.0ng·mL-1的浓度范围内线性关系良好（r〉0.99）,日内与日间精密度（RSD）〈10.2%,准确度（RE）〈±15.0%。所有稳定性考察项目结果均符合要求。结论：本文采用蛋白沉淀样品前处理以及液质联用定量测定人体血浆中普罗布考的浓度方法,能够满足临床试验中生物样品分析的需要。     

UPLC-MS-MS法测定健康人血浆中阿托伐他汀浓度及药物代谢动力学研究

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法测定健康人血浆中阿托伐他汀浓度，用于药动学研究。方法采用Acquity UPIC^TM BEH C18色谱柱（2．1mm×50mm，1．7μm），柱温：40℃，以乙腈0．05％甲酸（60：40，v／v）为流动相，流速：0．25mL·min^-1；质谱采用电喷雾电离源正源（ESI^＋），选择离子监测（SIR），m／z 440．0（ATV），m／z 129．6（格列齐特）血浆样品经磷酸酸化后，采用叔丁基甲醚提取，氮气挥干，内标法定量，并用于24名健康男性志愿者单剂量口服10mg阿托伐他汀钙片的药动学研究。结果阿托伐他汀浓度在0．385～15．400ng·mL^-1线性关系良好，r^2为0．9974。日内、日间RSD符合方法学要求，单次服用10mg阿托伐他汀钙片后药动学参数AUC0-48、AUC0-∞、Cmax、f1／2分别为（49．6±40．6）ng·h·mL^-1、（54．7±42．0）ng·h·mL^-1、（5．8±3．4）ng·mL^-1、（1．4±0．7）h、（14．8±6．5）h。结论该方法稳定、灵敏度高、专属性强、操作简单，适用于阿托伐他汀血药浓度测定及药动学研究。     

LC-MS／MS法测定人血浆中利培酮及其代谢物9-羟基利培酮的浓度

目的建立LC-MS／MS法测定人血浆中利培酮及其代谢物9-羟基利培酮浓度的方法。方法血浆经特丁基甲醚提取,采用同位素内标（氘4-利培酮、氘4-9-羟基利培酮）进行测定。色谱柱：CAPCELL PACK C18Ⅲ（100mm×2．0mm,5μm）,流动相为乙腈-5mmol·L^-1醋酸铵氨水缓冲液（pH=8）（50：50,11／V）,等度洗脱;流速0．4mL·min^-1;进样体积lO皿;电喷雾离子化,正离子MRM扫描。结果利培酮及9-羟基利培酮线性范围均为0．1—50μg·L^-1（r〉0．9999）,定量下限均为0．1μg·L^-1,平均提取回收率均〉80％,批内、批间精密度RSD均〈10％。结论本方法灵敏度高、专一性好、操作简单,适用于利培酮的药动学研究。     

HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中3种抗结核药物的浓度

目的 建立快速、灵敏的高效液相色谱-质谱/质谱联用（HPLC-MS/MS）法测定人血浆中异烟肼、利福平和左氧氟沙星的浓度.方法 血浆样品以加替沙星为内标采用甲醇沉淀蛋白法萃取,采用C4色谱柱（250 mm×4.6 mm,5.0 μm,Welch materials,USA）,流动相为0.05%甲酸溶液-甲醇（v/v）梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温25℃,进样量20μL,采用ESI＋多反应选择离子检测（MRM）.结果 异烟肼在0.18～9.0μg·mL-1与峰面积线性关系良好（r=0.999 8）,利福平在0.8～40μg·ml-1与峰面积线性关系良好（r=0.999 6）,左氧氟沙星在0,09～4,5μg·mL-1与峰面积线性关系良好（r=0.999 0）,萃取回收率均〉70%,方法回收率在85%～115%,日内、日间精密度RSD均〈9.3%（n=5）.结论 该方法专属性强、灵敏准确,适用于同时测定人血浆样品中异烟肼、利福平和左氧氟沙星的浓度.