人源化改形抗体研究进展

随着鼠源单克隆抗体在临床治疗中越来越广泛的应用，降低抗体免疫原性的要求也变得越来越迫切。目前已经发展了三种降低抗体免疫原性的技术，包括嵌合抗体、人源化改形抗体和人类噬菌体抗体库技术。构建人源化改形抗体需要先选定模板并确定需要保留的鼠源残基，可供选择的模板有两种形式，孰优孰劣尚无定论；但在确定保留残基方面已初现规律，现已可以脱离计算机分析而直接进行。随后的工作只是根据设计构建基因进行表达。本综述在选     

应用抗体"框架重塑"技术构建人源化抗体fSM03

目的：应用抗体“框架重塑”（framework-reengineering）技术构建人源化抗体iSM03。方法：互补决定区（CDRs）克隆来源于嵌台抗体SM03；VL框架FR1，FR2，FR3和FR4分别优选自人源基因JOH，Vd’CL，WES和RZ；VH框架FR1，FR2，FR3和FR4优选自人源基因WAS，WAS，GAL和DOB，无须涉及任何鼠源残基的回复突变。分别合成轻链表达载体pEk及重链表达载体pEγ，转染宿主细胞SP2／O。结果：fSM03保持了原有亲本抗体的功能特性，如CD22特异性和亲和力、细胞内化以及淋巴瘤细胞毒效应等。结论：应用框架重塑技术成功构建了人源化抗体fSM03，无须引入新的鼠源残基，较CDRs移植更为简便灵活。     

治疗性抗体药物研究与发展趋势

单克隆抗体技术的问世,使研究和生产治疗性单抗药物成为现实.随着基因工程技术的发展,新型的重组抗体技术也随之而生.人们可以利用DNA重组技术对鼠源抗体进行人源化改造、构建合成或半合成抗体库及噬菌体抗体库,从中筛选获得人源抗体,甚至利用转基因小鼠直接获得人源抗体.抗体药物发展的趋势也从鼠源、人一鼠嵌合、人源化到全人源.近年...     

鼠源抗体的基因改造工程的发展与未来

抗体技术发展经历了三个阶段,杂交瘤技术出现使第一 代抗体-血清多克隆抗体,发展到第二代抗体-单克隆抗体, 其在理论和实践上的应用成为解决生物学、医学等许多重大 问题的手段。由于异源蛋白会引起人抗鼠抗体反应,而人源性单抗的生产有许多技术问题,因此随着基因工程技术的发展人们开始对鼠源单抗的基因进行种种改造,目的在于尽量减少抗体中的鼠源成份,但保留原特异性。主要包括合抗体 片段的杂合分子、鼠源单克隆抗体的人源化和小分子抗体。 嵌合抗体(Chimeric　Antibodies) 嵌合抗体是抗体基因工程的早阶段产物,由于抗体的特异性决定于…     

单克隆抗体治疗制剂研究与应用

文本讨论了降低鼠单克隆抗体免疫原性的方法,采用嵌合抗体技术和互补决定区(CDR)稼接技术能使鼠源抗体部分人源化.此外,本文还介绍了治疗性单克隆抗体的研究现状.     

单克隆抗体治疗制剂研究与应用

文本讨论了降低鼠单克隆抗体免疫原性的方法，采用嵌合抗体技术和互补决定区(CDR)稼接技术能使鼠源抗体部分人源化。此外，本文还介绍了治疗性单克隆抗体的研究现状。     

基因工程抗体研究进展

基因工程抗体 (geneticallyengineeredantibod ies ,GEAb)是按人工设计所重新组装的新型抗体分子 ,它既保留或增加了天然抗体的特异性和生物学活性 ,又去除或减少了无关结构 ,降低或基本消除抗体的免疫原性 ,使抗体人源化 ,并改善抗体的药物动力学 ,具有生产简单 ,价格低廉 ,容     

嵌合抗体技术研究进展

综述基因工程抗体中的重要组成部分———嵌合抗体的研究进展。基因工程抗体是第三代抗体,其应用日益受到重视,但是在临床治疗中人抗鼠抗体(HAMA)反应导致鼠源性抗体的应用受到了极大的限制。利用基因工程技术对鼠源性抗体进行改造,保留或增加天然抗体的特异性和主要生物学活性、减少鼠源成分,从而克服鼠源性单克隆抗体在临床应用方面的缺陷。     

抗体人源化技术研究进展

人源化单克隆抗体已日益广泛地应用于治疗以肿瘤为主的多种疾病.重组DNA技术使鼠源抗体的人源化改造得以实现.此文对抗体人源化技术的发展及面临的问题进行综述.     

肿瘤人源单克隆抗体药物的研究进展及临床应用

自从杂交瘤技术诞生以来,单克隆抗体治疗临床疾病主要经历了鼠源单克隆抗体,人源化改造过的单克隆抗体和完全的人源单克隆抗体3个阶段,三者均能对肿瘤、自身免疫疾病和器官移植产生的排斥反应有效果[1],其中鼠源单克隆抗体的免疫原性和毒副作用最大[2],     

新一代治疗抗体的研究进展

单抗（mAbs）目前是一类公认的治疗药物,有许多产品经批准上市用于诊断和治疗多种疾病,包括自身免疫疾病、移植排异反应、心血管疾病、炎性疾病、感染性疾病和肿瘤等,并且还存在巨大的发展空间.尽管其作为治疗制剂有着明显的优势,但是,常规抗体也具有明显的局限性.第一,它是大的和结构复杂的蛋白.首先,按照分子量标准,抗体属超大分子的物质,每个分子含有两条重蛋白链和两条轻链,并与糖分子杂乱地重叠在一起.由于其大分子特性,难以达到深藏于组织或膜中的靶.其次,由于其结构复杂,合成单抗之前通常需要从大鼠体内分离出抗体,然后进行人源化.人源化的过程非常复杂,需向鼠源性抗体中嵌入人体基因,编译出与人抗体的氨基酸序列相同的蛋白质片段,部分或全部取代鼠源性抗体中的蛋白.     

抗肿瘤人源化抗体药物的研究进展

随着单克隆抗体技术的发展,治疗性抗体药物逐渐占据全球市场,主要应用于肿瘤治疗、抗移植排斥、自身免疫性疾病的治疗等。抗体药物可根据人源化程度不同,分为鼠源抗体、嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体。本文着眼于目前治疗性抗体药物研究热点,聚焦于抗肿瘤人源化抗体药物,结合已上市热点抗肿瘤人源化抗体药物实例,从抗体人源化技术以及人源化抗体生产的角度来阐述目前研究状况。同时,立足于国内外抗肿瘤人源化抗体药物的现状,分析未来发展趋势。     

嵌合抗体研究进展

单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防中发挥着重要作用,但是在临床治疗中人抗鼠抗体反应的出现使鼠源性单克隆抗体的应用受到了很大限制.随着分子生物学、分子免疫学技术的飞速发展,抗体技术已发展到第三代抗体——基因工程抗体阶段,可利用基因工程技术对鼠源性抗体进行改造,保留或增强天然抗体的特异性和主要生物学活性,同时减少鼠源成分,以避免鼠源性单克隆抗体在临床应用方面的缺陷.此文就基因工程抗体中的重要组成部分嵌合抗体的研究进展做一综述.     

单克隆抗体人源化研究进展

目前单克隆抗体大多数是鼠源的,在临床重复给药的治疗过程中有许多副作用。由于技术限制,最好的解决方法就是研制人源化抗体,以代替鼠源单抗用于临床。本文概述了几种常用的异源单抗人源化的方法。     

人源化抗体

杂交瘤技术使抗人病原体或细胞的啮齿动物单克隆抗体得以产生,但在临床上的应用有限。依靠啮齿动物抗体的“人源化”蛋白质工程技术现已能产生用于治疗传染病、自身免疫病和肿瘤的各种抗体。人源化抗体的药物动力学有所改善,免疫原性降低,有利于临床使用。     

人源化抗体

杂交瘤技术使抗人病原体或细胞的啮齿动物单克隆抗体得以产生，但在临床上的应用有限，依靠啮齿动物抗体的“人源化“蛋白质工程技术现已能产生用于治疗传染病，自身免疫病和肿瘤的各种抗体，人源化抗体的药物动力学有所改善，免疫原性降低，有利于临床使用。     

治疗性抗体:炎性免疫性疾病治疗的新选择

治疗性抗体经历数十年的发展已经成为治疗人类疾病包括炎性免疫性疾病的主要药物。利用人源化或全人化技术制备单克隆抗体,降低了鼠源抗体在人体中的免疫原性,提高了抗体的生物活性及半衰期,并成功获得多种治疗性抗体。目前,使用治疗性抗体治疗的炎性免疫性疾病包括移植排斥、自身免疫病、自身炎症病及过敏性疾病。预期与炎症免疫相关的治疗性抗体将会有广阔的应用前景。治疗性抗体通过阻断配体或受体、调控受体、清除靶细胞或激活受体等机制发挥靶向治疗作用。通过基因工程手段改造抗体的Fc段来优化抗体的生物学功能,以及改造与抗原结合的结构域,能够生成新的疗效更高、副作用更少的抗体药物。     

应用核糖体展示技术高效筛选人源抗IgE单链抗体

本研究从哮喘患者外周血分离淋巴细胞、提取总mRNA,采用RT-PCR技术分别构建重链可变区VH(variable region of heavy chain)和轻链可变区VL(variable region of light chain)cDNA库,然后通过连接肽(Gly4Ser)3和特定引物将VH和VL cDNA基因组装成人源单链抗体(scFv)核糖体展示模板基因库。应用兔网织红细胞核糖体展示技术,单引物原位反转录技术,经3轮展示富集并回收针对人源IgE蛋白(免疫球蛋白E)的目的单链抗体基因;回收的抗体基因经双酶切后与pET22b(+)载体连接,转化至E.coli Rosseta(DE3)宿主细胞,应用菌落PCR结合Dot blotting技术快速鉴定阳性克隆,抗原ELISA法进一步鉴定阳性克隆。VH和VL基因库得到正确的构建,长度分别为400和710 bp,库容为1013。核糖体展示模板构建正确,长度为1 100 bp。该基因库经过3轮针对IgE蛋白的核糖体展示,目的基因得到了有效富集和回收。经过高效克隆、表达和鉴定,确定1株针对人IgE蛋白显示最强亲和力的阳性克隆菌pET-IgE-6。经测序和序列分析证实该单链抗体为人源抗体,序列未见国内外报道。结果表明,采用患者外周血构建人源抗体基因库,结合核糖体展示技术,可以成功获得高亲和力的人源单链抗体分子。该技术路线为快速获得具有药用价值的人源抗体提供了参考。     

人源抗体的研究进程及其在控制病毒感染中的作用

多年来,研究人员一直在研究单克隆抗体在病毒性疾病中的临床应用。由于鼠源单克隆抗体可能会引发患者的免疫反应,降低其疗效,故研究人员相继开发了嵌合抗体、改型抗体、噬菌体抗体及利用基因工程方法改造植物和动物产生人源抗体以应用于临床治疗。人源抗体在控制多种病毒感染性疾病方面已取得一些进展,并将发挥重要作用。     

人源化肝癌抗体研制应用前景的分析

非手术治疗是肝癌治疗的重要方面 ,放疗与化疗由于治疗药物对肿瘤组织特异性差 ,对肿瘤外组织有很大的毒副作用 ,经放疗或化疗后的患者生活质量受到很大影响 ,甚至可能会危及生命。肝癌的生物治疗尤其是特异性抗体的针对性治疗成为人们日益关注的焦点。但是从 1975年开始研制了近 2 0年的鼠源性的抗体并不能有效的激发人类效应器的功能 ,却会引发人抗鼠抗体的形成 ,从而引起严重的副反应。DNA重组技术的应用为解决免疫导向存在的问题提供有效的技术手段。鼠单抗人源化与噬菌体人抗体库技术为肝癌治疗提供了新的方法和策略。而国内用于肿瘤治疗的单抗产品均为鼠源或人源化鼠抗体 ,人源抗体的研究还处于初期阶段 ,无相关产品问世 ,而美国FDA从 2 0 0 1年起已不再批准非人源抗体用于人体的临床试验。从发展趋势看 ,人源抗体的研制将会迅速占领市场 ,采用噬菌体抗体库技术研制人源肝癌治疗性抗体将会有良好的应用前景