仙鹤草醋酸乙酯有效部位体外诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及其机制研究

目的 研究仙鹤草醋酸乙酯有效部位（总鞣质质量分数为19.91%）对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用及其机制。方法 以不同质量浓度的仙鹤草醋酸乙酯有效部位作用于体外培养的HepG2细胞,MTT法检测细胞生长抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡;Fluo-3/AM荧光探针观察肿瘤细胞内钙离子浓度的变化;流式细胞仪检测肿瘤细胞内活性氧（ROS）的变化。结果 仙鹤草醋酸乙酯有效部位可显著抑制HepG2细胞的生长,诱导细胞凋亡,其IC50为127.85 μg/mL。经该有效部位作用48 h后,HepG2细胞数量明显减少;在Fluo-3/AM荧光探针的作用下有较强的绿色荧光;同时检测出细胞内ROS有较明显的增加。结论 仙鹤草醋酸乙酯有效部位能抑制HepG2细胞的生长,诱导细胞发生凋亡。肿瘤细胞内钙离子的释放和细胞内ROS的增加可能是其作用机制。     

木犀草素通过逆转OPCML基因甲基化抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖

目的 观察木犀草素对MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖以及对OPCML基因表达的影响。方法 体外培养MDA-MB-231细 胞,加入终浓度为0（对照组）以及5、10和20 μmol/L的木犀草素处理孵育24 h或48 h后,MTT法检测细胞的增殖,流式细胞术检测细胞凋亡;并提取胞内总mRNA和蛋白,以实时定量PCR和Western blot检测OPCML的mRNA及蛋白变化;同时采用甲基化特异性PCR（MSP）检测OPCML启动子区域的甲基化水平,并分析细胞内甲基化酶的活性。结果 MTT结果显示,MDAMB-231细胞经5、10 以及20 μmol/L木犀草素孵育24 h后,随着浓度的递增,细胞活性逐渐降低（P<0.05）。流式细胞术结果也显示,不同浓度木犀草素可不同程度诱导MDA-MB-231细胞凋亡（P<0.05）。此外,木犀草素能以剂量依赖性方式诱导MDAMB-231细胞表达OPCML mRNA和蛋白（P<0.05）。MSP结果也显示,木犀草素可显著下调OPCML启动子的甲基化状态,上调非甲基化OPCML的水平,并能降低细胞内甲基化酶的活性（P<0.05）。结论 木犀草素可抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞的增殖,其机制可能与影响OPCML基因的表达以及甲基化水平有关。     

鹅掌草皂苷抗肿瘤作用研究简

目的 研究鹅掌草单体皂苷的抗肿瘤活性.方法 用MTT法检测鹅掌草单体皂苷I4a、flI对人宫颈癌HeLa细胞、HeLa细胞株加脂多糖（LPS）诱导模型、人肝癌HepG2细胞、人肝癌Bel-7402细胞生长抑制作用;用流式细胞术（FCM）检测鹅掌草单体皂苷对肿瘤细胞凋亡的影响;用Werstem blot蛋白印迹法检测鹅掌草单体皂苷对肿瘤细胞MAPK信号蛋白的影响.结果 鹅掌草皂苷对肝癌细胞Bel-7402、宫颈癌细胞HeLa等均有一定的抑制生长的作用,并有一定的剂量依赖关系,浓度在5.0μmol/L时有促进细胞凋亡的作用,对不同细胞株的结果相似.结论 鹅掌草皂苷具有抑制肿瘤细胞生长作用,诱导肿瘤细胞死亡的主要途径是凋亡,且可以通过影响MAPK信号通路,抑制磷酸化P-p38、P-ERK蛋白的表达,发挥抗肿瘤作用.     

蛇床子素抑制人肝癌细胞生长和TGF-β诱导的侵袭转移

目的：探讨蛇床子素对人肝癌细胞HepG2的杀伤及侵袭转移的抑制作用。方法：将人肝癌细胞HepG2用不同浓度的蛇床子素治疗后,采用MTT法检测蛇床子素对HepG2细胞增殖的抑制作用；PI染色流式细胞术检测细胞内DNA的含量测定蛇床子素对HepG2细胞细胞周期的影响；用transwell技术检测HepG2细胞在TGF-β培养体系中蛇床子素对细胞侵袭力的影响； Western blot检测肿瘤侵袭力相关蛋白MMP9和vimentin的表达。结果：蛇床子素可显著抑制HepG2细胞的增殖并使细胞进入G2/M阻滞；蛇床子素可显著抑制HepG2细胞TGF-β诱导的侵袭转移效应并降低MMP9和vimentin的表达。结论：蛇床子素抑制人肝癌细胞的生长和侵袭转移。     

木犀草素对人舌鳞状细胞癌Tca8113 细胞凋亡 及自噬的影响

目的 探究木犀草素对人舌鳞状细胞癌Tca8113 细胞体外凋亡和自噬作用的影响。方法 采 用MTT 法观察12.5、25.0、50.0 及100.0μmol/L 的木犀草素作用24 h 对细胞体外活性的影响;运用 Hoechst33342 染色法和流式细胞术观察体外细胞凋亡情况;Western blotting 检测Cleaved Caspase-3 蛋白、 B 细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、B 细胞淋巴瘤-2 相关X 蛋白（Bax）和Beclin1 蛋白、P62 蛋白及LC3B 蛋白。 结果 MTT 法实验结果显示,木犀草素抑制Tca8113 细胞增殖,IC50 为47μmol/L。Hoechst33342 染色结果 显示,木犀草素使Tca8113 细胞形态发生改变,与时间呈正相关（P <0.05）。流式细胞术结果表明,47μmol/L 的木犀草素作用Tca8113 细胞12、24 h 后,凋亡率高于空白对照组（P <0.05）。Western bloting 检测结果表明, 木犀草素抑制Bcl-2 以及增加Bax 表达,导致Cleaved Caspase-3 表达增加,促进Tca8113 细胞凋亡（P <0.05）; 同时还升高Beclin1、LC3B、P62 蛋白水平（P <0.05）。结论 木犀草素影响人舌鳞状细胞癌Tca8113 细胞凋 亡和自噬的发生。     

恒磁场对阿霉素杀伤人乳腺癌细胞的协同作用

目的：观察恒磁场联合阿霉素对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响及其机制.方法：MCF-7细胞经不同浓度的阿霉素和/或恒磁场（10mT）处理24h后,以MTT法检测不同条件下细胞生长受抑制情况; 流式细胞术检测各组细胞周期分布; 荧光显微镜检测细胞内活性氧变化情况; 蛋白电泳检测凋亡相关蛋白Caspase3表达情况.结果：恒磁场可明显增强阿霉素对MCF-7细胞生长的抑制效应（P〈0.01）,更强地抑制细胞DNA合成及有丝分裂（P〈0.05）,促使细胞内活性氧合成,并上调凋亡相关蛋白Caspase-3的表达.结论：恒磁场（10mT）对阿霉素杀伤人乳腺癌细胞具有较强的协同作用.     

木犀草素抑制microRNA-21的表达诱导乳腺癌细胞凋亡

目的研究植物黄酮化合物木犀草素(luteolin)对乳腺癌细胞的凋亡诱导效应,并探讨microRNA-21(miR-21)在其中的作用。方法以MTT法检测细胞活力变化;Annexin V/PI双染流式细胞仪分析细胞凋亡;Western blot法检测胞内细胞色素C(Cyt C)的水平;定量RT-PCR检测miR-21的表达水平;通过构建miR-21质粒表达载体并转染乳腺癌细胞上调miR-21的表达。结果细胞活力检测结果表明,木犀草素可显著降低乳腺癌细胞MDA-MB-453的增殖活力;流式细胞凋亡分析和Westernblot检测结果表明,木犀草素可显著诱导乳腺癌细胞凋亡,并呈现剂量-效应关系;进一步研究显示,木犀草素可显著降低乳腺癌细胞miR-21的表达,而胞内miR-21表达水平的上调可显著降低木犀草素对乳腺癌细胞的凋亡诱导作用和细胞毒性。结论木犀草素可显著抑制乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡,其机制涉及对miR-21表达的抑制。     

木犀草素对胃癌细胞MGC803增殖的抑制作用及其机制

目的 研究木犀草素对胃癌细胞MGC803的增殖抑制作用及其机制.方法 通过MTT法、克隆形成抑制实验观察木犀草素对胃癌细胞MGC803的增殖抑制作用,碘化丙啶(PI)单染色法检测细胞周期,AnnexinⅤ-PI双染法测定细胞凋亡,蛋白质印迹法检测Bcl-2家族蛋白、Caspase蛋白、周期及自噬相关蛋白的表达情况.结果 MTT法检测发现,木犀草素作用于MGC803细胞24、48和72 h后,IC50分别为127.37、76.12、16.84 μmol/L;木犀草素能抑制胃癌细胞MGC803的克隆形成.PI单染色法发现随着木犀草素浓度的增大,发生G2期阻滞的细胞比例增加.蛋白质印迹法的检测结果表明,随着木犀草素浓度的增加,CDK4、CDK6、CyclinE2表达减少,CyclinD1、CyclinD3和p-Wee1表达基本不变,CyclinA、CyclinB、Myt1、p-cdc2(Tyr15)表达增高.AnnexinⅤ-PI双染法发现随木犀草素浓度增加,细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率均增加.蛋白质印迹法的检测结果表明,Mcl-1、Bcl-xL、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达随木犀草素浓度增加而减少,Bcl-2蛋白表达量变化不大,Bax蛋白表达量增加,因而引起Bcl-2/Bax、Mcl-1/Bax和Bcl-xL/Bax的比例下降;同时可见到Caspase-3和PARP出现了切割的条带;P62表达下降,Beclin-1、LC3Ⅱ表达增加.结论 木犀草素使胃癌细胞MGC803发生G2期阻滞,诱导细胞自噬的发生并抑制细胞的生长,还通过线粒体途径诱导胃癌细胞MGC803凋亡.     

莫诺苷通过抗氧化应激保护雷公藤甲素所致肝细胞凋亡

目的观察具有抗氧化应激活性的环烯醚萜苷化合物莫诺苷对雷公藤甲素（TP）诱导的肝损伤的保护作用及其分子机制。 方法雷公藤甲素,莫诺苷分别单独及联合给药小鼠及人肝癌HepG2细胞后,血清学法测定各组小鼠肝生化指标的变化;MTT 法检测各实验组对HepG2细胞生长抑制率的影响;激光共聚焦显微镜观察各组细胞形态的变化;流式细胞术检测各组细胞凋亡 率;WB法检测氧化应激通路中关键蛋白的表达。结果动物实验表明雷公藤甲素具有很明显的肝脏损伤作用,小鼠血清中肝 生化指标及肝脏指数的水平显著升高（P<0.05）;细胞实验则表明其抑制了HepG2 细胞的生长,24 h 细胞的生长活性仅为 72.83%,并随时间增长而降低。细胞凋亡明显,细胞核破裂皱缩,24 h细胞凋亡率高达43.1%。此外,氧化应激通路相关蛋白 Nrf2,HO-1 的表达明显降低。而莫诺苷联合用药后逆转了以上实验指标,使得小鼠中肝生化指标及肝脏指数显著下降（P< 0.05）,肝细胞的凋亡率,细胞形态及氧化应激相关通路蛋白的表达都得到了明显改善（P<0.05）。结论莫诺苷可保护雷公藤甲 素诱导的肝损伤,其机制可能与抗氧化应激有关。     

鹅掌草皂苷抗肿瘤作用研究

目的研究鹅掌草单体皂苷的抗肿瘤活性。方法用MTT法检测鹅掌草单体皂苷I4a、fII对人宫颈癌HeLa细胞、HeLa细胞株加脂多糖(LPS)诱导模型、人肝癌HepG2细胞、人肝癌Bel-7402细胞生长抑制作用;用流式细胞术(FCM)检测鹅掌草单体皂苷对肿瘤细胞凋亡的影响;用Werstern blot蛋白印迹法检测鹅掌草单体皂苷对肿瘤细胞MAPK信号蛋白的影响。结果鹅掌草皂苷对肝癌细胞Bel-7402、宫颈癌细胞HeLa等均有一定的抑制生长的作用,并有一定的剂量依赖关系,浓度在5.0μmol/L时有促进细胞凋亡的作用,对不同细胞株的结果相似。结论鹅掌草皂苷具有抑制肿瘤细胞生长作用,诱导肿瘤细胞死亡的主要途径是凋亡,且可以通过影响MAPK信号通路,抑制磷酸化P-p38、P-ERK蛋白的表达,发挥抗肿瘤作用。     

木犀草素联合下调miR-425-5p对宫颈癌HeLa细胞生物学特性的影响

目的 探讨木犀草素联合下调miR-425-5p对宫颈癌HeLa细胞生物学特性的影响及可能机制。方法 将宫颈癌HeLa细胞（购自中国医学科学院肿瘤细胞库）分成Control组（不做任何处理）、Anti-NC组（在HeLa细胞中用Lipofectamine 2000转染inhibitor control）、Anti-miR-425-5p组（在HeLa细胞中用Lipofectamine 2000转染miR-425-5p inhibitor）、木犀草素+Anti-NC组（在HeLa细胞中用Lipofectamine 2000转染inhibitor control,经40 μmol/L木犀草素处理）、木犀草素+Anti-miR-425-5p组（在HeLa细胞中用Lipofectamine 2000转染miR-425-5p inhibitor,经40 μmol/L木犀草素处理）共5组,并对上述5组采用MTT测定细胞培养24 h后A值（以A值代表细胞增殖活性）,平板克隆实验测定细胞培养12 d后克隆形成率,流式细胞术检测细胞培养24 h后凋亡率,Transwell小室测定细胞培养24 h后侵袭和迁移数目,Western blot法检测细胞培养24 h后p-Akt、c-caspase-3、c-caspase-9、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、MMP-2、Bax、Bcl-2蛋白表达水平,比较5组上述指标差异。结果 与Anti-NC组比较,Anti-miR-425-5p组、木犀草素+Anti-NC组、木犀草素+Anti-miR-425-5p组细胞增殖活性、侵袭与迁移数目和MMP-9、MMP-2、p-Akt蛋白表达水平均明显降低,细胞凋亡率和c-caspase-3、c-caspase-9、Bax蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达减少,差异均有统计学意义（P<0.05）。与Anti-miR-425-5p组、木犀草素+Anti-NC组比较,木犀草素+Anti-miR-425-5p组细胞增殖活性、侵袭与迁移数目和MMP-9、MMP-2、p-Akt蛋白表达水平均明显降低,细胞凋亡率和c-caspase-3、c-caspase-9、Bax蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达减少,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 木犀草素联合下调miR-425-5p可抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭和迁移,诱导细胞凋亡,作用机制可能与抑制Akt信号通路的激活有关。     

木犀草素通过CTGF/EGFR通路对人结肠癌细胞LoVo增殖和凋亡的影响

目的探讨木犀草素通过结缔组织生长因子(CTGF)/表皮生长因子受体(EGFR)通路对人结肠癌细胞LoVo增殖和凋亡的影响。方法MTT法确定木犀草素半数抑制质量浓度、作用时间。将细胞实验分为阴性对照组、阳性对照组、木犀草素低、中、高剂量组。阴性对照组细胞不进行处理,阳性对照组用40 μg/L西妥昔单抗干预,木犀草素低、中、高剂量组分别用20、40、80 μg/L木犀草素干预。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,蛋白印迹法检测细胞CTGF、EGFR、蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase-3)蛋白水平。结果MTT法确定木犀草素半数抑制质量浓度40 μg/L,半数抑制时间24 h。随着木犀草素质量浓度增加,LoVo细胞增殖率降低(P＜0.05)。与阴性对照组比较,其余各组细胞凋亡率、Bax和Caspase-3蛋白均增加,细胞CTGF、p-EGFR/EGFR、Akt和Bcl-2蛋白均降低(P＜0.05)。与阳性对照组比较,木犀草素各剂量组细胞凋亡率、Bax和Caspase-3蛋白均降低,细胞CTGF、p-EGFR/EGFR、Akt和Bcl-2蛋白均增加,且随木犀草素剂量增加呈剂量效应关系(P＜0.05)。结论木犀草素抑制LoVo细胞增殖,诱导LoVo细胞凋亡,其机制可能与抑制CTGF/EGFR通路的激活有关。     

小檗碱通过ROS及caspase通路对肝癌HepG2细胞凋亡的作用

目的 探究小檗碱(BBR)对肝癌HepG2细胞的增殖抑制及作用机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度(0、10、20、40、80 μmol/L) BBR对肝癌HepG2细胞的抑制作用;采用Hoechst 33342染色观察处理后HepG2细胞形态学变化;用流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡率;间接荧光标记法检测BBR对细胞内活性氧簇(ROS)水平的影响;JC-1染色法检测细胞内线粒体膜电位的变化;应用Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax、caspase-3、Cleaved-caspase-3的表达变化.结果 MTT法显示BBR可呈剂量、时间依赖性抑制肝癌HepG2细胞活力(P＜0.05);Hoechst 33342染色发现细胞形态发生明显变化,0μmol/L BBR处理的细胞呈淡蓝色,处理组细胞核固缩,形成凋亡小体,细胞凋亡率与药物浓度呈正相关(P＜0.05).流式细胞术发现BBR能使细胞内ROS升高,线粒体膜电位水平下降.Western blot法显示随着药物浓度升高,Bax、Cleaved-caspase-3、cleaved-聚腺苷二磷酸核糖聚合酶表达增强,Bcl-2蛋白表达降低,凋亡相关蛋白caspase-3表达下降.结论 BBR在体外可能通过增加ROS、提高促凋亡蛋白Bax并激活caspase-3表达抑制肝癌HepG2细胞增殖并诱导细胞凋亡.     

木犀草素对癫痫持续状态幼鼠海马组织神经细胞保护作用的机制研究

目的探讨木犀草素对癫痫持续状态（SE）幼年大鼠（下称幼鼠）海马组织神经细胞保护作用的机制。方法将156只21日龄雄性SD幼鼠按随机数字表法分为对照组12只、模型组48只、木犀草素1组（低剂量20mg/kg）48只和木犀草素2组（高剂量50mg/kg）48只,其中模型组、木犀草素1组和木犀草素2组在癫痫发作后的1、2、3和7d分别处死12只幼鼠。采用氯化锂-匹罗卡品法制作幼鼠SE模型,木犀草素1组和木犀草素2组在造模成功后,腹腔注射相应剂量的木犀草素,此后每天重复注射1次,直至处死。采用qRT-PCR法检测幼鼠海马组织中NF-κB、Toll样受体4（TLR4）、半胱氨酸门冬氨酸特异性蛋白酶3（Caspase-3）、TNF-αmRNA表达水平,Westernblot法检测幼鼠海马组织中TLR4蛋白表达水平,TUNEL法观察幼鼠海马CA1区神经细胞凋亡情况。结果与对照组比较,癫痫发作后1、2、3和7d模型组幼鼠海马组织中TLR4、NF-κB、Caspase-3、TNF-αmRNA及TLR4蛋白表达水平均升高（均P＜0.01）;与模型组比较,癫痫发作后1、2、3和7d木犀草素2组幼鼠海马组织中TLR4、NF-κB、Caspase-3、TNF-αmRNA及TLR4蛋白表达水平均降低（均P＜0.05）,癫痫发作后3和7d木犀草素1组幼鼠海马组织中TLR4mRNA表达水平均降低（均P＜0.05）,癫痫发作后1和3d木犀草素1组幼鼠海马组织中Caspase-3mRNA表达水平均降低（均P＜0.05）,癫痫发作后3d木犀草素1组幼鼠海马组织中TNF-αmRNA表达水平降低（P＜0.01）,癫痫发作后7d木犀草素1组幼鼠海马组织中TLR4蛋白表达水平降低（P＜0.05）。与对照组比较,癫痫发作后1、2、3和7d模型组大鼠海马组织中神经细胞凋亡率均升高（均P＜0.01）;与模型组比较,癫痫发作后1、2、3和7d木犀草素2组幼鼠海马组织神经细胞凋亡率均降低（均P＜0.01）,癫痫发作后2、3和7d木犀草素1组幼鼠海马组织神经细胞凋亡率均降低（均P＜0.05）。结论木犀草素可减轻SE幼鼠海马组织的炎症反应和细胞凋亡,其机制可能是通过调控TLR4/NF-κB通路来达到神经保护作用。     

XIAP表达水平对5-Fu诱导肝癌细胞凋亡的影响

目的研究XIAP mRNA及蛋白表达水平对不同剂量5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-Fu）诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的影响。方法脂质体介导含XIAP基因全长的质粒pef-XIAP转染人肝癌细胞HepG2,采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）及western blotting检测XIAP基因和蛋白表达水平。通过不同剂量5-Fu诱导细胞凋亡,使用CCK-8试剂通过比色法分析检测5-Fu对转染pef-XIAP的HepG2细胞生长活性的抑制作用。结果各组HepG2细胞在不同剂量的5-Fu诱导下发生凋亡、与普通HepG2细胞组比较．转染XIAP基因的HepG2细胞组的凋亡率显著降低。结论XIAP基因在人肝癌细胞HepG2中的高表达可以明显降低化疗药物5-Fu诱导的细胞凋亡,其可能在肝癌化疗耐药中起一定作用。     

p-ERK1/2在一氧化氮诱导的HepG2细胞凋亡中的作用

探讨p-ERK1/2在一氧化氮诱导的人肝癌细胞HepG2凋亡中的作用。用不同浓度的硝普钠(sodium nitroprusside ,SNP)处理HepG2细胞12 h,通过运用荧光探针技术与Griess法检测细胞内一氧化氮浓度,流式细胞术测定肿瘤细胞的凋亡率,Western blot检测p-ERK1/2蛋白的表达水平。结果发现：一氧化氮通过上调p-ERK1/2的表达水平诱导HepG2细胞的凋亡,1 mmol/L SNP可以诱导HepG2细胞凋亡,胞内一氧化氮含量与p-ERK1/2蛋白表达量均高于对照组,转染ERK1过磷酸化质粒则明显促进肿瘤细胞的凋亡。实验结果显示,一氧化氮通过上调p-ERK1/2的表达水平诱导HepG2细胞的凋亡,此研究发现了p-ERK1/2在一氧化氮诱导肿瘤细胞凋亡过程中的新作用,可进一步深入探讨其相关机制。     

鱼藤素对乳腺癌细胞MDA-MB-231线粒体通透性转换孔的作用

目的研究鱼藤素对乳腺癌细胞MDA-MB-231线粒体通透性转换孔的作用。方法MTT法检测鱼藤素对MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用;AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;罗丹明123单染法观察线粒体膜电位变化;蛋白免疫印迹法检测细胞质中Cytc的表达;分光光度法检测caspase-3蛋白活性;Fluo-3/AM荧光指示剂检测细胞内钙离子浓度变化;RT-PCR和蛋白免疫印迹法检测Bcl-2和Bax mRNA及其蛋白表达。结果鱼藤素对MDA-MB-231细胞增殖具有明显的抑制作用,呈时效和量效依赖关系(P0.05);鱼藤素处理细胞后,细胞线粒体膜电位降低,细胞质内Cytc蛋白表达水平升高,caspase-3活性明显提高,与未处理组相比差异具有统计学意义(P0.01)。流式细胞术检测显示细胞凋亡率和细胞内钙离子浓度随鱼藤素浓度的增加而增多;RT-PCR和蛋白印迹检测结果发现鱼藤素能使Bcl-2 mRNA和蛋白表达减少,而Bax表达增加。结论鱼藤素对乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖抑制、诱导凋亡作用可能与细胞内钙超载,Bcl-2和Bax表达改变影响线粒体通透性转换孔开放,诱导线粒体膜电位降低及Cytc释放有关。     

欧前胡素通过下调Mcl-1蛋白的表达诱导人肝癌细胞HepG2凋亡

目的：探讨欧前胡素对人肝癌细胞的抑制作用及机制。方法：将人肝癌细胞系HepG2用欧前胡素治疗,MTT法检测欧前胡素治疗后HepG2细胞的增殖抑制情况;通过流式细胞术和western blot检测欧前胡素对HepG2细胞的凋亡诱导作用和Mcl-1(myeloid cell leukemia-1)的表达;在HepG2细胞中转染pcDNA-3.1-Mcl-1真核表达载体后再用欧前胡素治疗,检测欧前胡素对HepG2细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导效应。结果：欧前胡素呈剂量和时间依赖性显著抑制HepG2细胞的增殖;欧前胡素能显著诱导HepG2细胞的凋亡和PARP的切割;欧前胡素治疗后,HepG2细胞的Mcl-1表达水平显著下降,当用pcDNA-3.1-Mcl-1真核表达载体转染HepG2细胞后, 欧前胡素对HepG2细胞的凋亡诱导活性显著下降。结论： 欧前胡素具有体外抗肝肿瘤的生物活性,其抗肿瘤效应的机制可能是通过下调Mcl-1蛋白的表达从而诱导细胞凋亡。     

川芎嗪调控肝癌HepG2细胞凋亡及对相关蛋白表达的影响

目的 通过研究川芎嗪（Tetramethypyrazine,TMP）对肝癌HepG2细胞凋亡及相关蛋白表达的影响,探讨TMP抑制肝癌细胞增殖的作用机制。方法 通过实时细胞分析技术（Real-time cell analyzer,RTCA DP）检测TMP对HepG2细胞增殖的影响;应用流式细胞仪检测TMP对HepG2细胞凋亡及细胞周期的影响;通过全自动Western blot实验检测TMP对p53蛋白及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响。结果 TMP对肝癌HepG2细胞的增殖有明显抑制作用,并呈现时间剂量依赖关系;TMP可显著诱导肝癌HepG2细胞凋亡,显著增加G0/G1期细胞,且呈一定的时间相关性;TMP能够显著促进p53蛋白的表达（P<0.01）和降低Bcl-2/Bax表达比值（P<0.01）。结论 TMP具有抑制肝癌HepG2细胞增殖的作用,其机制可能与影响肝癌HepG2细胞周期,导致细胞周期阻滞有关;同时TMP可促进p53蛋白的表达,抑制Bcl-2蛋白的表达从而降低Bcl-2/Bax表达比值,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肝癌细胞的增殖。      

五味子提取物对HepG2细胞凋亡及Bcl-2、Bax基因转录的影响

目的观察五味子提取物（SCEs）对肝癌细胞HepG2生长的影响,考察Bcl-2、Bax基因表达的变化,探讨SCEs致HepG2细胞凋亡的可能机制。方法体外培养人肝癌HepG2细胞,并给予不同浓度SCEs进行干预,MTT法检测细胞生长抑制率;流式细胞术检测用药后HepG2细胞凋亡率变化,RT-PCR法检测细胞Bcl-2、Bax mRNA的表达。结果随着各药物浓度增加,细胞抑制率有增加的趋势;五味子甲素（SchA）、五味子乙素（SchB）、SCEs及DDP的IC50分别为41.91μmol/L、350.00μmol/L、236.52μg/mL、1 792μmol/L;流式细胞术结果显示SchA、SchB及顺铂（DDP）组均能有效地诱导或促进HepG2的凋亡,SCEs质量浓度≥200μg/mL可明显诱导或促进HepG2细胞凋亡。SchA、SchB及一定质量浓度的SCEs作用后细胞内Bcl-2及Bax mRNA表达水平均显著降低（P〈0.05）,DDP则可同时上调Bcl-2及Bax mRNA的表达。结论 SCEs能抑制HepG2细胞的增殖,诱导HepG2细胞凋亡,下调Bcl-2及Bax mRNA的表达,其诱导及促进HepG2细胞凋亡的分子机制尚需进一步研究。