泰山白花丹参对人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤的保护作用

目的研究泰山白花丹参对血管内皮细胞氧化损伤的保护作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞株ECV304,在培养液中预先加入不同浓度（0、0.3、0.6、0.9g/L）的白花丹参制剂后,以0.001%过氧化氢诱导内皮细胞损伤,通过光镜观察细胞形态,以四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞存活数量,用流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡变化。结果血管内皮细胞受到氧化损伤后,细胞存活率明显降低,而预先加入白花丹参制剂可改善上述结果,它能抑制H2O2引起的血管内皮细胞减少,降低凋亡细胞比例。结论泰山白花丹参对内皮细胞氧化应激损伤有保护作用。     

复方丹参注射液对氧化损伤血管内皮细胞的保护作用

[目的]探讨复方丹参注射液对氧化损伤血管内皮细胞的保护作用及其机制.[方法]用过氧化氢损伤内皮细胞,MTT法检测其存活率,分光光度法检测细胞培养上清液中的MDA含量,免疫细胞化学染色法检测细胞表面细胞间ICAM-1的表达.[结果]血管内皮细胞受到氧化损伤后,细胞存活率明显降低,MDA含量明显增加,细胞间ICAM-1表达明显增加,而预先加入复方丹参注射液可改善上述结果.[结论]复方丹参注射液通过其抗脂质过氧化作用,对氧化损伤的血管内皮细胞具有保护作用.     

白花丹参上调Bcl-2抑制内皮细胞凋亡

[摘要]目的研究白花丹参对过氧化氢(H2O2)诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)凋亡的抑制作用及对凋亡相关基因Bcl-2表达的调节。方法应用酶消化灌注法分离人脐静脉血管内皮细胞,采用形态学观察和Ⅷ因子抗体免疫荧光检测法进行鉴定。取对数生长期的细胞分组进行干预(白花丹参高剂量组0.10 g/ml, 白花丹参低剂量组0.01 g/ml),应用流式细胞技术观察细胞凋亡情况,应用免疫细胞荧光技术检测凋亡相关基因Bcl-2的表达。结果在白花丹参干预下,H2O2诱导的HUVEC凋亡率降低(高剂量组P<0.01,低剂量组P<0.05),高剂量组Bcl-2的表达增加(P<0.01)。结论白花丹参对H2O2诱导的HUVEC凋亡具有抑制作用,这种作用与Bcl-2表达上调有关。     

丹参水溶性成分对H_2O_2氧化损伤牛肝动脉内皮细胞的保护作用

目的 :研究丹参水溶性成分对H2O2氧化损伤牛肝动脉内皮细胞的保护作用。方法:体外培养牛肝动脉内皮细胞,建立H2O2氧化损伤模型,给予丹参水溶性成分治疗后,动态观察细胞的生长状态、形态变化和凋亡情况,检查细胞存活率,测定细胞培养上清液中组织型纤溶酶原激活物(PA)的含量。结果:牛肝动脉内皮细胞被H2O2氧化损伤后,随损伤程度出现不同形态变化,细胞边缘变圆、皱缩,凋亡;细胞培养上清液PA含量明显下降;给予丹参水溶性成分治疗后,细胞形态基本恢复正常,PA含量明显上升,基本接近正常组水平。结论:丹参水溶性成分对H2O2氧化损伤的牛肝动脉内皮细胞具有显著的保护作用。     

丹参麦冬煎剂对过氧化氢所致血管内皮细胞凋亡保护机制的研究

目的研究丹参与麦冬的水提浓缩液1部位（MD-1）对过氧化氢H2O2损伤人脐静脉血管内皮细胞株HUVEC凋亡的保护作用及机制。方at体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC）,以H2O2行内皮细胞凋亡造模后,再加入不同浓度的MD—1作用24h。用M1rr法检测细胞生长活力,流式细胞仪检测凋亡率,Westem Blot检测抗凋亡Bcl-2蛋白含量变化。结果H2O2造模后,细胞增殖明显受抑,流式细胞检测出明显凋亡峰,Bcl-2的表达量有明显的下降,而加药组的Bcl-2表达量一定程度回升与正常组相比P〈0．01,具有明显的统计学意义。结论丹参与麦冬的丹参与麦冬的水提浓缩液MD-1保护内皮细胞,抗内皮细胞凋亡。     

当归CO2超临界萃取物对氧化应激损伤血管内皮细胞的保护作用

目的 研究当归CO2超临界萃取物对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的保护作用.方法 采用过氧化氢(H2O2)建立体外培养的HUVEC细胞氧化应激损伤模型.将细胞分为正常对照组、损伤组、给药组,其中给药组给予当归CO2超临界萃取物预培养24 h后加入1.25mmol/L H2O2,继续培养2 h.MTT法检测细胞存活率;通过各种化学方法检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)的活性;用流式细胞仪检测细胞周期改变及凋亡.结果 当归CO2超临界萃取物能明显提高H2O2损伤的内皮细胞的存活率,提高细胞SOD和NO的活性,降低LDH和MDA水平,减少H2O2诱导的细胞凋亡率,恢复血管内皮细胞增殖.结论 当归CO2超临界萃取物具有较强的抗氧化能力及内皮细胞保护作用,可减轻血管内皮细胞的氧化损伤.     

白花丹参对大鼠局灶性脑缺血后神经元凋亡的影响及机制研究

目的探讨白花丹参制剂对大鼠局灶性脑缺血的保护作用。方法采用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型（MCAO），将动物随机分为假手术组、MCAO组、生理盐水组和白花丹参组，白花丹参组大鼠采用术前水提物灌胃，用免疫组化法检测bcl-2和bax的表达水平，TUNEL法检测凋亡水平，流式细胞术测凋亡率。结果白花丹参可有效提高大鼠局灶性脑缺血时脑组织中bcl-2的含量，并抑制bax的表达，降低凋亡细胞水平。结论白花丹参可抑制MCAO后神经元凋亡。     

灯盏乙素对过氧化氢致血管内皮细胞损伤的作用及其机制研究

目的:探讨灯盏乙素对过氧化氢(H2O2)损伤的血管内皮细胞的保护作用。方法:体外培养血管内皮细胞,将细胞分为6组,即正常对照组(control),氧化损伤组(H2O2组),氧化损伤加入维生素E对照组(VitE+H2O2),氧化损伤加入灯盏乙素组(scutellarin1+H2O2,scutellarin2+H2O2,scutellarin3+H2O2)。用VitE及不同浓度灯盏乙素预先培养血管内皮细胞24 h,然后加入1 mmol.L-1 H2O2继续培养24 h,MTT法检测细胞存活率;检测SOD,GSH-PX,CAT活力。结果:不同浓度灯盏乙素呈能够降低H2O2对抗氧化酶SOD,GSH-PX,CAT活力的影响,各指标差异有显著性(P<0.01)。结论:灯盏乙素可保护过氧化氢诱导的血管内皮细胞的损伤,其作用可能与抗氧化、增强抗氧化酶SOD、GSH-PX、CAT的活力有关。     

丹参麦冬配伍乙酸乙酯部位对血管内皮细胞（HUVEC）凋亡的保护机制研究

目的;探讨麦冬丹参配伍对过氧化氢(H₂O₂)引起的人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）凋亡具有的保护作用。方法;取HUVEC,用过氧化氢造成凋亡模型,麦冬丹参配伍乙酸乙酯部位（MD4）对损伤细胞进行干预,通过MTT、Hoechst染色观察细胞凋亡,流式细胞仪测定细胞凋亡率及胞内Ca2+来观察过氧化氢对HUVEC的损伤情况及丹参有效成分对细胞的影响,通过Western Blotting法测定药物作用前后细胞内CREB表达量的变化。结果;100 μmol/L H₂O₂24 h对细胞有明显的损伤作用,丹参与麦冬的乙酸乙酯部位（MD4）对损伤细胞有保护作用,并对CREB的表达有显著影响。结论;麦冬丹参配伍有效部位MD4对H₂O₂造成的HUVEC凋亡有保护作用。      

冠心康对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用

目的:探讨中药复方冠心康对氧化低密度脂蛋白(oxygenized low density lipoprotei,ox-LDL)损伤的血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)的保护作用。方法:以ox-LDL损伤的人脐静脉内皮细胞作为动脉粥样硬化内皮细胞病理模型,采用冠心康药物血清干预,并与空白血清形成对照。采用MTT法检测VECs存活率,Hoechst染色、FITC/PI双染及流式细胞术检测细胞凋亡,Ki67荧光抗体标记及流式细胞术检测细胞增殖,PI染色及流式细胞术检测细胞周期。结果:与正常VECs比较,ox-LDL损伤后血管内皮细胞存活率、增殖能力及处于S期、G2/M期细胞数均明显下降(P0.05),细胞凋亡率明显升高(P0.05);经冠心康血清干预后,VECs存活率、增殖能力及处于S期、G2/M期细胞数较空白血清组、模型组升高(P0.05),细胞凋亡率降低(P0.05)。结论:中药复方冠心康能抑制ox-LDL损伤的VECs凋亡,促进细胞增殖、分裂,对ox-LDL损伤的VECs具有一定的保护作用。     

白花丹参与紫花丹参微量元素分析比较

目的分析比较白花丹参与紫花丹参微量元素的含量。方法用原子吸收分光光度法分别测定两种丹参中锌、铜、铁等十三种微量元素的含量，对二者微量元素含量进行比较。结果白花丹参与紫花丹参中均含丰富的微量元素，白花丹参中铁、镁、锰等五种元素高于紫花丹参，而钴和镉含量低于紫花丹参，两种丹参中其它元素含量相近。结论从微量元素角度分析两种丹参均具有较高的药用价值，二者中部分微量元素含量存在，一定差异。     

复方丹参注射液对内皮前体细胞氧化应激损伤的保护作用

目的:观察复方丹参注射液对体外培养猪内皮前体细胞氧化应激损伤的保护作用。方法:建立猪内皮前体细胞体外培养模型,在培养液中加入100μm o l/L过氧化氢及不同浓度(1、2、5m g/L)复方丹参注射液,测定细胞增殖活力(MTT法)、乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)含量及细胞凋亡率。结果:过氧化氢使细胞增殖活力下降,使LDH、MDA含量增加,细胞凋亡率上升,复方丹参注射液可使上述结果改变并呈浓度依赖性。结论:复方丹参注射液对内皮前体细胞氧化应激损伤有保护作用。     

黑果枸杞对H2O2诱导的H9c2心肌细胞氧化应激损伤的保护作用研究

目的探讨黑果枸杞(Lrm)对H2O2诱导的H9c2心肌细胞氧化应激损伤的保护作用。方法建立H2O2诱导的H9c2心肌细胞氧化应激损伤模型,将H9c2心肌细胞分为空白组、模型组(H2O2400μmol/L)以及实验组(Lrm 1.00 g/L加H2O2400μmol/L)。实验组于H2O2刺激前加入Lrm预处理2 h,再加入H2O2干预6 h。观察各组细胞形态,MTT法测定细胞活力、TUNEL法测定细胞凋亡率、Western Blotting检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关x基因(Bax)蛋白表达。结果与空白组相比,模型组细胞形态明显异常、细胞活力降低、凋亡率显著升高,差异有统计学意义(P0.05),抑制凋亡蛋白Bcl-2表达减少,同时促凋亡蛋白Bax表达增加;与模型组相比,实验组细胞形态得到明显改善、细胞活力升高、凋亡率显著降低(P0.05),抑制凋亡蛋白Bcl-2表达增加,同时促凋亡蛋白Bax表达减少,差异具有统计学意义(P0.05)。结论 Lrm能够有效改善H2O2干预后的H9c2心肌细胞形态,提高细胞活力及降低凋亡率,其减轻氧化应激损伤作用机制与上调Bcl-2蛋白表达和下调Bax蛋白表达有关。     

泰山白花丹参不同部位微量元素的分析比较

目的分析比较泰山白花丹参不同部位微量元素含量。方法用电感耦合等离子发射光谱仪分别测定泰山白花丹参根、茎、叶、花四个部位16种微量元素的含量，对不同部位微量元素含量进行分析比较。结果白花丹参根中镁元素含量最高，其次为铜和钡；茎中只有铬元素含量略高于根，其他测定的16种微量矿质元素含量均低于其他三个部位；叶中锌、铬、硼、锶4种元素含量略高于其他三个部位；而花中镍、铁、钛等微量元素含量显著高于根、茎、叶三个部位。另外，花中的锰、钒、锡、铅、镉、锂等6种微量元素含量也均高于其他三个部位。结论从微量元素角度分析，白花丹参的花也具有一定的药用价值。     

BMSC-CM通过抑制Notch1信号通路减轻H2O2诱导的神经干细胞凋亡

目的 探讨骨髓间充质干细胞条件培养基( BMSC-CM)对氧化应激损伤的神经干细胞( NSCs)的保护作用,以及Notch1信号通路在其中所发挥的作用.方法 通过使用过氧化氢(H2O2)来模拟氧化应激环境,采用流式细胞仪检测NSCs的凋亡率. Western blot法检测Notch1蛋白、Hes1蛋白、含半胱氨酸的天冬氨酸水解酶 3 蛋白 ( Caspase-3 )、Caspase-9、Bcl-2相关蛋白(Bax)蛋白和B细胞淋巴瘤蛋白2 (Bcl-2)的表达量.结果 结果表明,BMSC-CM 可以降低H2O2引起的氧化应激环境的损害. BMSC-CM 可以抑制Notch1信号通路,提高神经干细胞的存活率.结论 BMSC-CM可以通过抑制Notch1 信号通路来中和氧化应激损伤对NSCs细胞凋亡的影响.     

Caspase-3 and its inhibitor Ac-DEVD-CHO in rat lens epithelial cell apoptosis induced by hydrogen in vitro

Objective To investigate the role of caspase-3 and its inhibitor Ac-DEVD-CHO in rat lens epitheli alcell apoptosis induced by hydrogen peroxide (H2O2 ) in vitro.Methods Rat lenses were incubated in modified Eagle‘s medium containing 2 mmol/L H2O2 to induce apoptosis in vitro. Apoptosis in lens epithelial cells was assessed by transmission electron microscopy and annexin V-propidium iodide (PI) double staining flow cytometry after 12, 24 and 48 h of incubation. The activity of caspase-3 was analyzed by western blotting.Results Observations under transmission electron microscopy revealed that 2 mmol/L H2O2 could effectively induce lens epithelial cell apoptosis in vitro. Caspase-3 activity increased during cell apoptosis and the peak measurement occurred at 24 h after treatment with H2O2. Cell apoptosis was blocked by caspase-3 inhibitor Ac-DEVD-CHO.Conclusions The activation of caspase-3 plays an important role in executing apoptosis in H2O2-treated lens epithelial cells and in the formation of cataract. The caspase-3 inhibitor Ac-DEVD-CHO may effectively prevent lens epithelial cell apoptosis caused by oxidative injury.     

过氧化氢诱导HUVECs氧化应激模型的构建

目的 利用过氧化氢 (H2O2) 诱导人脐静脉内皮细胞 (human umbilical vein endothelial cells, HUVECs) 构建体外氧化应激细胞模型.方法 H2O2分6个浓度梯度处理HUVECs不同时间, 倒置显微镜观察细胞形态变化, CCK-8法检测细胞存活率, 流式细胞术检测细胞凋亡率, DCFH-DA荧光探针和流式细胞仪检测细胞内活性氧水平, 筛选H2O2的最佳作用浓度和时间.结果 不同浓度H2O2处理细胞不同时间, 对HUVECs均有损伤作用;400、600、800μmol/L H2O2处理HUVECs 24 h, 细胞存活率显著降低 (P<0.05) , 800μmol/L H2O2作用HUVECs不同时间, 细胞存活率随处理时间延长逐渐降低 (P<0.01) ;各组H2O2处理HUVECs 24 h, 细胞凋亡率显著增加 (1 000μmol/L除外, P<0.05) , 坏死率亦显著增加 (100μmol/L除外, P<0.05) ;800μmol/L H2O2处理HUVECs不同时间, 细胞凋亡率随处理时间延长逐渐增加, 24 h时达到最高 (P<0.05) , 细胞坏死率亦逐渐增加, 48 h时达到最高 (P<0.05) ;各组H2O2作用HUVECs 24 h, 浓度400μmol/L时, 细胞内ROS水平达到最高 (P<0.01) , 800μmol/L H2O2处理HUVECs, 胞内ROS水平随处理时间延长而递增 (P<0.01) .结论800μmol/L H2O2与HUVECs作用24 h可构建体外细胞氧化应激模型.     

IL-6预处理保护H2O2致心肌细胞损伤作用机制初探

目的初步探讨IL-6预处理对H2O2致心肌细胞氧化应激损伤的作用机制。方法采用心肌细胞原代培养方法,以H2O2刺激心肌细胞,建立细胞氧化应激模型;采用MTT法检测细胞活力;AnnexinV-FITC染色法和流式细胞术检测细胞凋亡率;检测心肌细胞内谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的表达情况。结果 H2O2可降低心肌细胞存活率并能增加其凋亡,IL-6预处理后能显著改善细胞活力及凋亡情况,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05)。低浓度IL-6能明显增加细胞内GSH与SOD的水平,并降低MDA的含量,随着IL-6浓度的增加,这种效应逐渐消失。结论 IL-6预处理能保护H2O2致心肌细胞损伤作用,这可能与IL-6调节细胞GSH、SOD、MDA表达有关。     

维生素B12对氧化应激损伤下神经细胞的保护机制

目的：探索维生素B12预处理对H2O2诱导下的神经细胞损伤的保护作用及自噬和凋亡蛋白表达的影响。方法：将大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞（PC12）分为对照组（Control组）RPMI 1640培养、损伤组（H2O2组）RPMI 1640培养并加入200 μmol/L的H2O2刺激,维生素B12保护组（H2O2+VitB12组）RPMI 1640培养加入200 μmol/L维生素B12预处理和200 μmol/L的H2O2刺激。24 h后检测细胞的活性,Western blot和免疫荧光检测凋亡及自噬相关蛋白表达水平。结果：与Control组比较,H2O2组的细胞存活率、细胞DNA复制水平降低,Bcl-2和P62蛋白的表达量下降,Bax、ATG-5和LC3蛋白的表达量明显上升,胞浆内LC3的激活数量上升（均P＜0.05)。与H2O2组比较,H2O2+VitB12组细胞存活率和细胞DNA复制水平上升,Bcl-2和P62蛋白的表达量上升,Bax、ATG-5和LC3蛋白的表达量显著下降,胞浆内LC3的激活数量下降（均P＜0.05)。结论：维生素B12能通过调控自噬抑制氧化应激诱导下的细胞凋亡。