榄香烯对淋巴细胞辐射抗性效应的研究

目的　观察榄香烯对淋巴细胞的辐射抗性效应。方法　采用人外周血体外培养法 ,应用3 H -TdR(3 H-胸腺嘧啶核苷 )和14 C -UR(14 C -尿嘧啶核苷 )作掺入实验。分别用 0 .5、1、2Gy 60 Coγ射线照射样品 ,榄香烯药物剂量为每 0 .1ml血液 0 .2 5 μl、0 .5 μl、1μl、2 μl。结果表明 :0 .5Gy和 1Gy照射 ,药物剂量 0 .5 μl和 1μl榄香烯显著提高淋巴细胞DNA的辐射抗性 (P <0 .0 5和P <0 .0 1) ,而 0 .2 5 μl和 2 μl效应不显著 (P >0 .0 5 )。榄香烯同样表现出对 0 .5Gy和 1Gy照射的淋巴细胞RNA的保护作用 (P <0 .0 1)。未见榄香烯对离体淋巴细胞显著的毒性作用和免疫增强效应 (P >0 .0 5 )。结论　榄香烯对淋巴细胞DNA和RNA合成有一定辐射保护作用     

榄香烯对受分次γ线照射小鼠的防护效应

用3H－TdR掺入法，测定受分次γ线照射的小鼠脾淋巴细胞转化功能，同时测定受照小鼠胞、肺、肝、脾SOD活力和LPO含量。结果表明，榄香烯提高了小鼠T、B淋巴细胞的辐射抗性（P＜0．05），以及脾、肝、肺SOD活力（p＜0．01、P＜0．05），降低脾LPO含量（p＜0．01）。提示榄香烯的辐射免疫保护机理之一，是由于增强组织SOD活力，降低LPO含量，从而减少自由基及有害物质对淋巴细胞的损伤。     

四生汤口服液对体外辐射人淋巴细胞的保护作用

目的观察四生汤口服液对受辐射的人体外周血淋巴细胞的防护作用。方法采用人外周血体外培养法,设对照组和3个不同浓度四生汤口服液组（1%、2%和4%）,通过流式细胞仪检测辐射后淋巴细胞凋亡率,应用3H-胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）掺入实验观察受辐射淋巴细胞DNA的辐射抗性,MTT法检测不同照射剂量以及不同时间给药后,对照组及不同浓度实验组淋巴细胞增殖活性。结果照射后2h,各浓度四生汤组淋巴细胞的活性均高于对照组（P〈0.05）,且随浓度升高而增强;照射后5h加入四生汤口服液,只有高浓度组可以增强细胞活性（P〈0.05）,照射后10h加入四生汤口服液,均无保护作用（P〉0.05）。先向培养的淋巴细胞中加入不同浓度的四生汤口服液,再以1Gy和3Gy 60Co照射,1%、2%组3H-TdR掺入量明显高于对照组（P〈0.01）;照射剂量超过6Gy时,各浓度组3H-TdR掺入量与对照组差异无统计学意义。3Gy照射后,各浓度组淋巴细胞凋亡率均显著低于对照组（P〈0.01）。结论四生汤口服液对人淋巴细胞有一定抗辐射作用,这种作用受辐射剂量和辐照时间的影响。     

持续阴道超声辐射后人胚早孕绒毛细胞超微结构的变化研究

目的探究持续阴道超声辐射后人胚早孕绒毛细胞超微结构的变化。方法选取我院2010年9月至2012年3月期间进行人流的早孕患者80例,将其均分为两组,试验组患者阴道超声照射10min,而对照组患者则照射5min,然后在照射后24-30h进行人流并取绒毛组织进行检测,比较两组患者照射后绒毛组织DNA及其超微结构的变化情况。结果经过检测得到,试验组患者的绒毛组织单链DNA量为（0．19±0．06）μg／μl,双链DNA量为（0．15±0．09）μg／μl,明显低于对照组患者的（0．23±0．07）μg／μl和（0．19±0．07）μg／μl,差异均具有统计学意义（P〈0．05）,试验组患者的绒毛组织超微结构发生异常者40．00％,对照组为10．00％,差异也具有统计学意义（P〈0．05）。结论降低患者进行阴道超声辐射的时间可以减少患者绒毛细胞超微结构的改变。     

天山雪莲水提取物对小鼠辐射损伤的保护作用

目的 观察天山雪莲水提取物(ES)对电离辐射损伤小鼠的保护作用。方法 小鼠ig ES0．75，1．5，3．0g/kg，14d后接受8和2．5Gy的照射，观察8Gy照射小鼠的平均生存时间和生存率及2．5Gy照射小鼠的脾T淋巴细胞转化能力和骨髓DNA含量。结果 ES能显著延长8Gy照射小鼠的平均生存时间(P＜0．05)，并提高生存率；显著提高2．5Gy照射小鼠的脾T淋巴细胞转化能力和骨髓DNA含量(P＜0．05，0．01)，改善免疫功能。结论ES具有抗辐射损伤作用。     

辐射抗性食管癌细胞亚系TE-1R的建立及其辐射抗拒机制的研究

目的建立辐射抗性食管癌细胞亚系TE-1R,并探讨其辐射诱导的凋亡性及辐射抗性机制。方法采用分次、间歇照射的方法（2Gy,5次）诱导人食管癌细胞系TE-1产生具有稳定辐射抗性的细胞亚系TE-1R,显微镜下观察细胞形态学差异。以TE-1和TE-1R细胞为实验对象,给予6MVX射线单次照射（2Gy）,流式细胞仪分析细胞照射后的凋亡情况,RT—PCR法和Western Blot法分别检测食管癌TE-1、TE-1R细胞中复制蛋白AI（RPA1）mRNA和蛋白的表达情况。结果筛选出辐射抗性食管癌细胞亚系TE—1R。2Gy射线照射后12、24和48hTE-1R细胞的凋亡率低于TE—1细胞（P〈0．05）。RPA1 mRNA和蛋白在TE—1R细胞中的表达高于TE-1细胞（P〈0．05）。结论成功建立了辐射抗性的食管癌细胞亚系TE-1R,新的细胞亚系TE-1R比其亲本细胞系TE-1对射线更加抗拒,RPA1可能在食管癌细胞辐射抗性的修复中起着重要作用。     

电离辐射致小鼠骨髓基质细胞凋亡的研究

目的：探讨电离辐射致骨基质细胞（BMSC）凋亡的规律，方法：采用流式细胞仪，电镜技术观察不同剂量60Coγ射线照射后BMSC的凋亡变化。结果：经50Gy剂量照射后，BMSC未见有明显的形态学改变，而经100和200Gy照射后BMSC出现了明显的凋亡改变，流式细胞检测显示，经50Gy 剂量照射后，BMSC的凋亡率与正常对照组相比变化不明显（P＞0．05），100Gy照射后BMSC的亡率出现了明显改变（P＜0．01），而且这种变化始于照射后4h，至照后24h到达高峰，随后凋亡率慢慢下降，200Gy照射组的凋亡率高于100Gy组，但差异不明显（P＞0．05），结论；体外培养的BMSC受一定剂量的60Coγ射线照射后可发生凋亡，并具有较强的辐射抗性。     

林蛙油复方冲剂对X线辐射大鼠抗氧化功能的影响

目的：研究林蛙油复方冲剂对X射线辐射所致大鼠氧化损伤能力的影响。方法 Wistar大鼠50只,随机分为5组：分别为空白对照组、单纯照射组、照射给药组（高、中、低剂量林蛙油灌胃）,除空白对照组其余各组6 Gy全身一次性照射建立辐射模型,照射给药组分别按200、100、50 mg/（ kg＆#183; d）林蛙油进行灌胃,每天1次,连续灌胃7 d。称重后动物处理,从腹主动脉抽血对动物外周血及血清丙二醛（ MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活力进行检测。结果与空白对照组比较,单纯照射组大鼠的WBC、RBC数明显降低（P＜0．01）,大鼠的MDA含量明显增高（P＜0．01）,血清SOD、GSH-Px活力显著降低（ P＜0．01）;与单纯照射组比较,给药组大鼠的WBC、RBC数均明显增高,差异有统计学意义（ P＜0．01, P＜0．05）。大鼠MDA含量无明显差异（ P＞0．05）,但有降低趋势;林蛙油100 mg组、林蛙油200 mg组的血清T-SOD、GSH-Px活力明显升高（ P＜0．01）。结论林蛙油复方冲剂可以通过拟制MDA含量,调节T-SOD、GSH-Px活力有效的提高机体的抗氧化能力,发挥对机体的保护作用。     

低剂量辐射诱导适应性反应的研究进展

NSCEAR（联合国原子辐射效应科学委员会）1986年规定，就人体照射而言，低水平辐射指剂量在0．2Gy以内的低LET辐射或0．05Gy以内的高LET辐射，同时剂量率在0．05mGy／min以内。实际研究中把照射剂量符合上述条件而剂量率高于0．05mGy／min者称低剂量辐射（LDR）。近年来，许多实验证实低剂量照射预处理细胞或机体后可产生对随后相对高剂量照射诱发损伤的抗性，称低剂量辐射诱导的适应性反应。     

14-3-3/Raf-1复合体介导的榄香烯抗胶质瘤作用

目的：探讨莪术提取物榄香烯在体外抗胶质瘤作用及相关机制。方法采用细胞计数、免疫共沉淀、Western印迹等方法分别检测经不同浓度、不同作用时间榄香烯对U87胶质瘤细胞的增殖影响、对U87细胞中与Raf-1结合形成分子复合体的14-3-3表达水平的影响、对U87细胞14-3-3、Raf-1、ERK蛋白质表达的影响。结果榄香烯在体外具有浓度、时间依赖的抗胶质瘤效应,其IC50约为（83．2±4．3）μg/mL。分子机制研究表明：榄香烯对总14-3-3蛋白表达无明显影响（ P＞0．05）,能明显抑制14-3-3/Raf-1复合体的形成;榄香烯明显下调ERK-1/2信号通路中关键蛋白P-Raf -1、P-ERK-1/2的表达（P＜0．05）,对非磷酸化的ERK-1/2和Raf-1无明显影响（P＞0．05）。结论榄香烯在体外通过破坏14-3-3的分子伴侣功能,阻碍14-3-3/Raf-1复合体的形成,使Raf-1不能被活化,进一步抑制Raf/MEK/ERK通路,达到抗胶质瘤细胞作用。     

γ射线对人淋巴细胞Cx43和Egr-1基因转录表达影响

目的研究γ射线对人外周血淋巴细胞Cx43和Egr-1基因转录表达的影响。方法对数生长期的淋巴细胞,分别给予2、4和6Gy的60^Coγ射线照射,并于照射前（对照组）和2Gy照射后4、8、12、24、48和72h及不同剂量照射后12h,分别提取总RNA,反转录成cDNA。利用实时荧光定量PCR技术,检测各组Cx43和Egr-1基因表达改变。结果人外周血淋巴细胞Cx43 mRNA表达水平在2Gy照射后4～12h明显增高,为对照组的6．74倍以上（P〈0．05）;24～72h,其表达水平与对照组相比没有明显变化。不同剂量照射后12h,2Gy和6Gy时表达水平高,是对照组的10．52倍以上（P〈0．05）。Egr-1 mRNA表达水平在2Gy照射后的8h和24h增高,但没有统计学意义;4、12、48和72h,Egr-1 mRNA表达水平比对照组显著降低（P〈0．05）。不同剂量照射后12h,2Gy时,Egr-1 mRNA表达水平比对照组降低（P〈0．05）,4Gy时,其表达水平接近对照组,6Gy时,表达水平增高,为正常对照组的7．94倍（P〈0．05）。结论γ射线照射后能够明显上调Cx43基因表达。Egr-1要达到表达水平增高倍数和Cx43倍数相同,所需剂量比Cx43大。     

231例乳腺癌术后放疗疗效相关因素分析

分析231例乳腺癌术后放疗疗效与临床分期、转移情况、放疗剂量的关系,认为：临床分期Ⅰ、Ⅱ期5、10年生存率显著高于Ⅲ、Ⅳ期（P＜0.05）,放疗与放疗加化疗生存率无显著差异（P＞0.05）,腋淋巴结转移者的生存率明显低（P＜0．05）,照射剂量50~55Gy的5、10年生存率显著高于＜50Gy者（P＜0．05）。     

裸鼠造血微环境损伤实验动物模型的建立

目的建立适合移植实验使用的裸鼠造血微环境损伤动物模型。方法分别用3．5Gy、5Gy、6．5Gy、8Gy4个^60Coγ辐射剂量照射裸鼠，检测经过辐照后各组裸鼠1、3、5、7、14、21d血象变化，检测辐射后1、7、14、21d裸鼠骨髓基质CFU—F形成情况，用流式细胞仪检测辐射后1、7、14、21d骨髓基质细胞VCAM-1的表达。结果8．0Gy辐射剂量裸鼠死亡率100%；3．5Gy、5Gy、6．5Gy辐射剂量组裸鼠的造血损伤均能在辐射后21天之内自我恢复；6．5Gy组骨髓CFU—F于移植后7d（22±6）、14d（33±6）较3．5Gy、5Gy组均具有显著降低（P〈0．01），VCAM-1表达于7d（21．67±7．45）、14d（22．33±9．07）、21d（23．33±4．51）较对照组显著降低（P〈0．01）、较3．5Gy组差异有显著性（P〈0．05），21d（23．33±4．51）较5Gy组（34．00±4．36）差异有显著性（P〈0．05）。结论6．5Gy是裸鼠造血微环境损伤实验动物模型的适宜辐射剂量。     

Adaptive response of thymocyte apoptosis induced by X-irradiation with 75 mGy

目的：本研究观察胸腺细胞凋亡小体（TAB）以评价低剂量辐射诱导的胸腺细胞凋亡的适应性反应。方法：实验用X射线全身照射Kunmin雄性小鼠，诱导剂量75mGy（D1），攻击剂量1．5或2．0Gy（D2），D1和D2间隔6h，D2照后20h检测TAB百分数。结果：D1+D2组TAB百分数明显低于D2组（P＜0．05）。此外，将75mGy照射的脾细胞外液加入2Gy照射的胸腺细胞悬液中，在培养72h明显低于2Gy照射组（P<0．05）。结论：低剂量辐射（75mGy）可改变免疫细胞的外环境，降低其凋亡，并且可诱导其后大剂量（1．5或2．Gy）照射的小鼠胸腺细胞凋亡的适应性反应。     

1800MHz电磁波辐射对大鼠外周血细胞DNA的损伤作用

目的探测1800MHz电磁波照射大鼠后对其外周血细胞DNA的损伤效应．方法72只Wistar大鼠随机分为4组（2个实验组和各自的对照组）．实验组大鼠在功率密度分别为0．5mW／cm^2（实验Ⅰ组）和1．0mW／cm：（实验Ⅱ组）的1800MHz连续电磁场条件下照射，对照组进行虚拟暴露，每天12h，连续21d后，用单细胞凝胶电泳试验检测大鼠外周血细胞DNA的损伤情况．结果照射后，两个实验组大鼠外周血细胞拖尾面积均高于对照组（P〈0．05）．结论大鼠经模拟手机辐射强度1800MHz辐射后，大鼠外周血细胞DNA有一定的损伤．     

榄香烯和PD98059诱导人胃癌SCG-7901细胞株凋亡及其机制的探讨

目的：探讨榄香烯及PD98059对人胃癌SCG-7901细胞株凋亡的影响,及其与ERK1／2、P38MAPK信号通路的关系。方法：用不同浓度的榄香烯和PD98059处理人胃癌SCG-7901细胞,体外细胞增殖抑制实验（MTT）法检测细胞增殖情况;Western—blot法检测ERKl／2、磷酸化ERKl／2（p-ERK1／2）和磷酸化P38（p-P38）的表达;RT-PCR检测bcl-2mRNA及baxmRNA的表达;TUNEL法检测胃癌细胞凋亡并计算凋亡指数。结果：榄香烯和PD98059单独作用都有抑制胃癌细胞增殖的作用,前者呈浓度和时间依赖性,后者则呈时间依赖性但无浓度依赖性,两药联合作用时对胃癌细胞增殖的抑制作用显著大于单一用药时（P〈0．05）;随榄香烯的浓度增加p-ERK1／2蛋白的表达量增加（P〈0．05）,总FRK1／2无明显变化;榄香烯（0．08mg／mL）、PD98059（50μmol／L）及榄香烯＋PD98059组作用胃癌细胞24h,p-P38的表达均高于对照组（P〈0．05）,且榄香烯＋PD98059组较榄香烯组或PD98059组更高（P〈0．05）;随榄香烯浓度的增加,baxmRNA的表达增加,bcl-2mRNA的表达降低,且榄香烯＋PD98059组表现最显著;实验组细胞凋亡率均高于对照组（P〈0．05）,具有浓度依赖性（P〈0．05）,且榄香烯＋PD98059组的凋亡率明显高于单一作用组（P〈0．05）。结论：榄香烯及PD98059可以抑制胃癌细胞增殖,前者具有时间和浓度依赖性;榄香烯及PD98059还可以促进胃癌细胞凋亡。榄香烯抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的机制包括促进ERKl／2磷酸化和上调P-P38MAPK信号通路的表达;PD98059抑制ERKl／2的磷酸化,但通过上调p-P38MAPK信号通路的表达而发挥其细胞调节作用。     

紫外线辐射对小鼠分泌肿瘤坏死因子α的影响

目的：研究紫外线辐射对小鼠血清肿瘤坏死因子α（TNFα）水平和脾细胞TNFα mRNA表达的影响,从而探讨紫外线辐射所致免疫抑制的作用机制。方法：用酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中TNFα含量。一步法提取脾细胞RNA,逆转录聚合酶链反应检测其TNFα mRNA表达。结果：一定剂量的紫外线辐射不能使小鼠血清中出现可检测的TNFα（P＞0．05）,但可使诱生的TNFα水平下降（P＜0．01）,辐射剂量与TNFα的浓度呈直线负相关（P＜0．01）。脾细胞TNFαmRNA表达被抑制（Ｐ＜０．００１）２。结论：紫外线辐射可能是通过抑制具有分泌TNFα功能的淋巴细胞和（或）单核巨噬细胞的TNFα mRNA转录,进而抑制TNFα的分泌,调节机体的免疫反应。     

青紫薯色素对 60Co辐射小鼠胸腺淋巴细胞的保护作用及其机制

①目的探讨青紫薯色素对^60Coγ-射线单次辐射小鼠胸腺淋巴细胞辐射损伤的保护作用及其体外抗氧化作用机制。②方法建立^60Co辐射（强度为3 Gy）对体外培养的小鼠胸腺淋巴细胞损伤病理模型,分为6组：对照组、^600Co模型组、0．625g／L青紫薯色素组、1.250g／L青紫薯色素组、2．500g／L青紫薯色素组、^60Co＋1 g／L Vit C组。琼脂糖凝胶电泳观察DNA Ladder;流式细胞仪PI染色测定细胞凋亡率;Fluo-3-AM荧光染色测定细胞内游离Ca^2＋浓度;免疫细胞化学法测定P53蛋白的表达;原位杂交检测细胞p21 mRNA的表达;化学发光法和电子自旋共振（ESR）捕集技术检测青紫薯色素对超氧阴离子（O2^-）、羟自由基（OH^＋）、过氧化亚硝基（ONOO^-）和脂类自由基的清除作用。③结果0．625～2．500g／L浓度范围内青紫薯色素能抑制^60Co辐射所致淋巴细胞DNA梯状带的出现,降低淋巴细胞凋亡率,降低淋巴细胞内游离Ca^2＋浓度,抑制^60Co辐射后小鼠胸腺淋巴细胞P53蛋白在胞浆的表达,抑制^60Co辐射后小鼠胸腺淋巴细胞p21 mRNA的表达,同时青紫薯色素还可有效清除O2^-、OH^＋、ONOO^-和脂类自由基。④结论青紫薯色素能抑制^60Co辐射诱导的淋巴细胞凋亡,对^60Co辐射损伤的小鼠胸腺淋巴细胞具有保护作用。其作用机制与青紫薯色素能清除氧自由基、降低细胞内游离Ca^2＋浓度、减少DNA的断裂、抑制突变型P53蛋白的表达、抑制p21基因的表达,影响淋巴细胞凋亡的信号转导中的基因调控有关。     

β─榄香烯对大鼠血液流变学的影响

观察β─榄香烯对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响。β─榄香烯6．25～25mg／kg·d－1，ip×8d，可使高低切变率、全血粘度、血浆粘度、血沉、红细胞聚集指数、纤维蛋白原及红细胞电泳时间显著降低（P＜0．05，P＜0．01），提示β─榄香烯有活血化瘀作用。     

Influence of low dose radiation on the pulmonary metastasis of Lewis lung carcinoma in mice

探讨低剂量全身照射对肿瘤转移的影响。方法：采用荷有Lewis肺癌的C57BL／6J小鼠作为实验动物模型。在肿瘤移植后10d，分别给予以下处理：①假照组；②2次75mGyX射线全身照射，间隔3d；③4次75mGyX射线全身照射，间隔3d；④3．0mg／kgMMC腹腔注射化疗；⑤3．0mg／kgMMC腹腔注射化疗前6h预先给予75mGyX射线全身照射。化疗后12h断头处死①、④和⑤组各6只小鼠，测定腹腔巨噬细胞（Mφ）吞噬功能和脾脏自然杀伤细胞（NK）的细胞毒效应。在肿瘤移植后21d，处死全部小鼠取双肺，计数肺转移瘤结节数。结果：单纯MMC腹腔注射化疗组小鼠肺转移瘤结节数（33．8）与假照组（41．7）无明显差异（P＞0．05），而化疗前预先给予75mGyX射线全身照射组小鼠肺转移瘤结节数（20．3）较单纯化疗组明显减少（P＜0．01）;4次75mGyX射线全身照射组小鼠肺转移瘤结节数（23．5）较假照组明显减少（P＜0．05）;2次75mGyX射线全身照射组小鼠肺转移瘤结节数（39．4）较仅照组有减少趋势，但无统计学意义（P＞0．05）；预先给予75mGyX射线全身照射组小鼠的腹腔Mφ吞噬功能和脾脏NK细胞的细胞毒效应较单纯化疗组明显提高（P＜0．01）。结论：低剂量全身照射可增强（MMC）对Lewis肺癌肺转移的抑制作用及荷瘤小鼠免疫功能，多次低剂量?