改良小口径人工血管的血液相容性研究

目的：研究改良小口径人工血管的血液相容性。方法：将丝素蛋白膜涂覆于聚四氟乙烯小口径人工血管内侧壁,采用等离子体技术对涂覆后的小口径人工血管磺酸化,制成改良小口径人工血管;改良小口径人工血管的溶血相关安全性以体外溶血实验检测,同时行动态凝血、复钙实验评价复合血管血液相容性。结果：溶血试验提示复合血管的溶血率为4．5％,符合材料溶血要求;动态凝血中根据各时间点吸光度平均值可见复合血管组吸光度整体位于普通血管之上,且下降趋势较缓,经历时间较长,与普通血管相比,其抗凝血性能较好;复钙实验中复合血管组平均时间为（450．00±32．18）s,小于对照组平均时间（610．06±37．65）8,两样本t检验提示P=0．000,提示两者差异有统计学意义。结论：改良小口径人工血管具有良好的血液相容性。     

聚乳酸/丝素蛋白复合组织工程支架的制备及生物学性能的评价

目的：研究聚乳酸（PLA）/丝素蛋白复合组织工程支架(简称PLA/丝素蛋白复合支架)的制备 方法,评价其生物学性能。方法：将PLA多孔支架材料放在丝素蛋白的水溶液中浸泡,经干燥后制备成PLA/丝素蛋白复合支架。实验分为PLA支架组(单纯聚乳酸支架组)与PLA/丝素蛋白复合支架。按ISO—10993标准,两组分别做溶血实验、动态凝血时间实验、细胞毒性实验、 刺激实验和热原实验,对其结果逐项进行比较。结果：刺激实验显示两种支架材料均未引起动物皮肤明显刺激,符合标准;热原实验显示两种支架材料引起动物体温升高均<0.2℃,并且体温升高总度数<1.0℃,两组比较差异均无显著性;溶血实验显示两种支架材料样品的溶血率均<5%（P=0.000）,且PLA/丝素蛋白复合支架抗溶血性优于PLA支架;动态凝血时间实验显示,PLA/丝素蛋白复合支架(37 min)长于PLA支架的动态凝血时间(26 min),即PLA/丝素蛋白复合支架的抗凝血性能明显优于PLA支架;细胞毒性实验中,PLA/丝素蛋白复合支架组的细胞生长情况明显优于PLA支架组,即PLA/丝素蛋白复合支架的细胞毒性明显小于PLA支架。结论：PLA/丝素蛋白复合支架材料具有比单纯PLA支架材料更优良的生物相容性, 可以作为支架材料植入体内。     

可降解性壳聚糖基小口径人工血管的生物安全性

目的对新型可降解的壳聚糖基小口径(内径为2mm)人工血管的安全性进行检测,探讨其意义。方法对壳聚糖基小口径人工血管的细胞毒性、急性全身毒性、皮下刺激反应、炎症反应、体外溶血率、血浆蛋白黏附等进行检测。结果可降解壳聚糖基小口径人工血管细胞毒性、体外溶血率、急性全身毒性、皮下刺激反应及炎症反应均符合临床要求,且含有肝素的人工血管的清蛋白吸附量显著高于无肝素成分的人工血管。结论可降解壳聚糖基小口径人工血管在细胞安全性、组织安全性方面均符合临床要求,为其临床应用提供充分的理论依据。     

聚氯乙烯表面共价键合肝素及抗凝血性的研究

采用Ar等离子体引发聚乙二醇(PEG)在聚氯乙烯(PVC)表面固定化，进一步对固定PEG后的PVC进行肝素化处理，以改善PVC材料的抗凝血性能。探讨了PEG浓度对Ar等离子体固定化反应效果的影响。通过X射线光电子能谱(XPS)、衰减全反射红外光谱(ATR-FTIR)、扫描电镜(SEM)和接触角测定研究了固定PEG前后PVC的表面性能和表面形貌的变化。XPS分析证实肝素已成功地共价键合于PVC表面。采用体外凝血时间测定和血小板粘附实验对材料的抗凝血性能进行评价，结果表明，被修饰PVC材料的抗凝血性能显著提高。     

聚硅氧烷/液晶复合膜的制备及其血液相容性研究

以含氢硅油和乙烯基硅油为基质,在氯铂酸催化下与胆甾醇油烯基碳酸酯液晶共混交联成一定强度的聚硅氧烷／液晶复合膜。借助偏光显微撞观察了不同液日含量在材料表面的状态,通过动态凝血实验、血小板粘附与变形实验、溶血实验等研究材料表面形态与血液相容性的关系。结果表明,含液晶２０％、３０％的液晶膜具有优良的抗凝血性能。     

CD133功能化肝素/胶原蛋白多层膜改性小口径膨胀体聚四氟乙烯人造血管

小口径膨胀体聚四氟乙烯（ePTFE）人造血管是血管移植手术中最常见的替代品之一,然而术后血栓的形成和血管内腔的再狭窄是导致手术失败的重要因素。采用静电层层自组装的方法构建CD133功能化肝素/胶原蛋白（HEP/COL）多层膜可以抑制血栓的形成,并且为血管的内皮化提供可能;通过扫描电镜、红外谱图跟踪HEP/COL多层膜的组装过程,利用激光共聚焦显微镜来证明抗体的接枝。结果发现,CD133功能化的HEP/COL多层膜成功地覆盖到了ePTFE人造血管表面;接触角从127°减小到106°,表明血管的浸润性得到提高;血小板吸附的实验结果表明,改性后的人造血管表面血小板吸附数量明显减少,具有良好的抗凝血性。     

钛合金表面聚乙烯亚胺/肝素聚电解质多层膜的体外和体内血液相容性研究

目的利用静电自组装技术在钛合金表面涂层聚电解质多层膜,评价其体外和体内血液相容性,探讨该技术在医用金属表面改性领域内的应用前景。方法利用静电自组装技术制备以肝素为最外层的聚乙烯亚胺/肝素聚电解质多层膜。并对该聚电解质多层膜进行物理表征分析,再进行体外溶血实验、凝血时间测定、蛋白吸附实验、血小板粘附实验和兔颈动脉腔内植入实验,对其进行血液相容性评价,与裸钛合金和(或)膨体聚四氟乙烯作平行对照。结果钛合金表面聚乙烯亚胺/肝素聚电解质多层膜的体外溶血率为0.690%,该涂层可以延长活化部分凝血酶原时间到(51.33±2.87)s,减少白蛋白的吸附量,尤其减少纤维蛋白原的吸附量,并且减少血小板的粘附与激活;体内动物实验中进一步证实聚乙烯亚胺/肝素聚电解质多层膜可以有效地减少材料表面血栓的形成。结论聚乙烯亚胺/肝素聚电解质多层膜为一种新型的生物化膜,可以使钛合金的血液相容性得到显著改善,显示了静电自组装技术在医用金属表面改性领域的广泛应用前景。     

表面纳米仿生改性的组织工程血管支架材料对猪血液相容性的影响

目的研究等离子体引发的小肠黏膜下层组织膜（SIS）表面纳米仿生改性对其血液相容性的影响。方法利用等离子体技术引发SIS膜表面纳米改性,通过扫描电镜检测SIS改性后表面纳米形态,并通过表面接触角和体外凝血时间检测,以及纳米改性后SIS管腔的长期通畅性和组织学检测来评价SIS膜的血液相容性。结果改性SIS膜表面呈现出“岛状”、“沟漕样”纳米仿生形态,水接触角降低,亲水性增强,表面自由能增大,凝血酶原时间胛、部分凝血活酶时间APTT以及凝血酶时间TT明显延长,SIS小口径血管支架在6周仍保持通畅,组织学检测显示管腔内壁有完整的内皮覆盖。结论SIS膜表面通过等离子体进行纳米仿生改性,具有良好而持久的抗凝血性,表现出良好的血液相容性。     

不同表面化学修饰金纳米棒的血液相容性

目的 采用化学修饰获得不同表面功能基团、不同电性质金纳米棒(GNR),考察其血液相容性差异.方法 采用“种子调制生长法”制备GNR,对其表面进行化学修饰得到电中性的聚乙二醇(PEG)修饰GNR(PEG-GNR)、带负电的巯基十一烷酸(MUA)修饰GNR(MUA-GNR)及带正电溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)修饰GNR(CTAB-GNR).采用透射电镜、表面等离子共振及zeta电位测量对修饰前后的GNR进行表征.通过溶血实验及血浆复钙实验评价3种不同电性质、不同化学修饰GNR的血液相容性.结果 3种不同化学修饰GNR对血液中红细胞的破坏程度依次为:PEG-GNR＜ CTAB-GNR＜ MUA-GNR.PEG-GNR在较高剂量1.7 g/L时,溶血率已小于5％.血浆复钙实验结果表明,相同剂量的3种修饰中,CTAB-GNR的复钙时间动力学曲线明显由陡峭趋于平缓,且复钙时间延长最多(33 min),其次为PEG-GNR(21 min).结合产生丝状不溶物的量可知,PEG修饰的GNR具有最佳的抗凝血性能.结论 综合溶血实验及血浆复钙实验结果可认为,表面PEG化能显著改善GNR材料的血液相容性.     

聚氨酯基纳米碳复合材料表面的血液相容性研究

目的研究聚氨酯基纳米碳复合材料表面的血液相容性。方法用溶液共混方法将经过表面处理后的纳米碳分散到聚氨酯体系中,制成聚氨酯/纳米碳复合薄膜。通过血小板荧光标记人全血灌注实验和羊全血体外循环实验,观察和测定血小板在材料表面的粘附以及血液中血红蛋白浓度、纤维蛋白原浓度的变化,并探讨纳米碳对聚氨酯抗凝血性能的影响。结果(1)全血灌注实验中,血小板的粘附数量从低到高顺序为:纤维蛋白原预处理的聚氨酯/纳米碳、聚氨酯/纳米碳、纤维蛋白原预处理的聚氨酯、聚氨酯;聚氨酯/纳米碳复合材料表面的血小板粘附数量显著减少。(2)体外循环4h后,与聚氨酯/纳米碳复合材料表面接触的血液中,血红蛋白浓度、纤维蛋白原浓度的变化均相对减小。结论将纳米碳引入到聚氨酯体系中,可以改善聚氨酯材料的血液相容性,是开发抗凝血材料的一个新途径。     

丝素蛋白壳聚糖三维支架的构建及其生物相容性

目的: 筛选出最适合用于骨组织工程的丝素蛋白壳聚糖三维支架比例。方法: 将提取的丝素蛋白溶液与壳聚糖溶液以不同质量比混合,冷冻干燥后构建以下各组丝素蛋白壳聚糖三维多孔支架：20%丝素蛋白 ∶80%壳聚糖（20%丝素蛋白组）、30%丝素蛋白 ∶70%壳聚糖（30%丝素蛋白组）、40%丝素蛋白 ∶60%壳聚糖（40%丝素蛋白组）、50%丝素蛋白 ∶50%壳聚糖（50%丝素蛋白组）、纯丝素蛋白组、纯壳聚糖组。采用扫描电镜观察各组三维支架表面形态;将MG-63细胞与丝素蛋白/壳聚糖三维支架共培养（对照组采用盖玻片培养MG-63细胞）,通过细胞计数计算细胞黏附率,通过MTT检测细胞增殖;通过扫描电镜观察MG-63细胞在40%丝素蛋白、50%丝素蛋白三维支架中的形态分布;采用pNPP显色液检测40%丝素蛋白、50%丝素蛋白三维支架中MG-63细胞碱性磷酸酶（ALP）含量。结果： 不同比例丝素蛋白/壳聚糖三维支架中,50%丝素蛋白、40%丝素蛋白支架表面孔隙结构相对规则;黏附率结果显示,三维支架中丝素蛋白含量最少时,支架的细胞黏附率也最低;MTT显示50%丝素蛋白组细胞增殖能力强于其他组支架;MG-63细胞与支架共培养时,50%丝素蛋白支架中细胞量多于40%丝素蛋白组;在共培养第5天,50%丝素蛋白组细胞分泌的ALP含量高于40%丝素蛋白组。结论： 质量比为1 ∶1的丝素蛋白壳聚糖支架孔隙结构规则,最适合成骨细胞MG-63的黏附、增殖。     

丝素纤维与海马神经元的生物相容性细胞培养研究

目的:研究丝素与体外培养的大鼠海马神经元的生物相容性。方法:采用制备丝素与SD大鼠胎鼠海马神经元共培养7天,每天倒置显微镜观察,免疫细胞化学染色激光共聚焦显微镜观察、分析。结果:通过光镜观察,发现大鼠海马神经元与丝素纤维共培养3天后,海马神经元附着于丝素纤维,神经突起沿丝素纤维向远处生长、延伸;培养7天后海马神经元形成神经元网络,包绕丝素纤维。免疫细胞化学染色显示附着于丝素上的细胞为神经元。结论:海马神经元沿着丝素纤维包裹生长,提示丝素纤维与海马神经元具有良好的生物相容性。     

蚕丝磷酸钙涂层支架的制备和性能

目的:通过对蚕丝表面进行磷酸钙涂层,从而增加其成骨效果。方法:将脱胶后的蚕丝放入磷酸钙溶液中,用水热法对蚕丝表面进行矿化,运用扫描电镜、能谱分析仪、X线衍射仪、傅立叶红外对表面改良的蚕丝进行理化性能检测。结果:磷酸钙表面改良处理后磷酸钙均匀涂布于蚕丝表面,矿化蚕丝初始形态并未发生明显改变,表面存在磷酸灰石成分。结论:蚕丝作为一种天然生物纤维,具有良好的生物相容性。经磷酸钙涂层的蚕丝,作为组织工程支架材料具有广阔的发展前景。     

再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞生长的影响

目的 研究再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞生长的影响。方法 采用静置贴壁培养法在再生丝素膜上体外培养鼠胚真皮层成纤维细胞，并用活细胞计数法及MTT比色法观察再生丝素膜对细胞的形态、功能和生长的影响。结果 再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞的贴壁能力和形态及其代谢功能未见明显改变，也未见明显毒性，并能支持细胞正常生长，呈现正常的生长繁殖曲线。结论 再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞具有良好的细胞相容性。     

新生大鼠嗅鞘细胞在再生丝素膜上的生长

目的 观察新生大鼠嗅鞘细胞在再生丝素膜上的生长情况，探讨再生丝素膜在嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤中成为细胞培养基质的可能性。方法 采用静置贴壁培养法体外培养分离的新生大鼠嗅鞘细胞，免疫酶和免疫荧光方法染色鉴定，观察在再生丝素膜上嗅鞘细胞的生长，并用MTT法测定细胞生长曲线。结果 再生丝素膜对新生大鼠嗅鞘细胞的贴壁能力和形态未见明显改变，也未见明显毒性，并能支持细胞正常生长，呈现正常的生长繁殖曲线。结论 再生丝素膜对新生大鼠嗅鞘细咆具有良好的细胞相容性。     

低温等离子射频消融治疗椎间盘源性腰痛 60例

目的:探讨椎间盘源性腰痛的简单、安全、有效、微创的现代治疗方法,并对其疗效进行观察分析.方法:对60例经MRI或椎间盘造影确诊采用低温等离子射频消融治疗,并对其疗效进行观察分析.结果:随访6～19月,平均13月.57例症状有不同程度改善,总有效率为95.5%.术中无1例出现脊髓神经及大血管损伤或术后感染等并发症.手术时间为12～30min,平均16min,术后腰痛减轻或消失.结论:低温等离子射频消融治疗椎间盘源性腰痛, 是一种先进、安全、有效的椎间盘微创手术.具有操作简单、安全、微创、疗效佳、恢复快、符合生物力学原理, 最大限度的恢复劳动力,使患者能够生活自理,提高生活质量,回归家庭和社会,有益于病人身心健康,创造更好的社会效益.临床实践证明该治疗值得推广应用.     

神经元在丝素蛋白材料上的生长发育

目的研究神经元在丝素蛋白材料上的生长发育,为神经干细胞结合丝素蛋白材料用于临床移植修复神经系统损伤提供实验依据。方法从新生大鼠脑室下区（SVZ）分离细胞,培养在柞蚕、家蚕两种丝素蛋白溶液制成的薄膜材料上,分别选取各时间段的细胞进行β-Ⅲ-tubulin特异性免疫荧光染色,并统计不同时间段神经元在丝素材料上的成活率及复杂度。结果神经元在柞蚕丝素薄膜上的成活率和复杂度明显比家蚕丝素薄膜高,差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论柞蚕、家蚕丝素薄膜支持神经元的生长,具有良好的生物相容性;柞蚕丝素薄膜比家蚕丝素薄膜更适合神经元的生长。     

丝素蛋白材料细胞相容性的研究

目的：研究再生丝素膜对大鼠真皮细胞生长和细胞遗传学的影响。方法：采用静置贴壁培养法在再生丝素膜上培养大鼠真皮细胞，并用活细胞计数法和常规染色体检测技术，观察再生丝素膜对细胞生长和染色体的影响。结果 再生丝素膜能支持细胞正常生长，呈现正常的生长繁殖曲线且染色体的形态和数目正常。结论 再生丝素膜对大鼠真皮细胞具有良好的细胞相容性。