miRNA表达谱改变与儿童急性淋巴细胞白血病复发的相关性

摘 要: 【目的】 筛选与儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)预后相关的microRNA(miRNA),旨在寻找与ALL预后相关的分子标记物,为临床ALL患儿分层治疗提供实验室依据? 【方法】 采用基因芯片技术检测10例初发-缓解配对的ALL患儿骨髓细胞的miRNA表达谱(基因芯片组),定量RT-PCR(qRT-PCR)方法验证异常miRNA在ALL患儿骨髓细胞内的表达(qRT-PCR组),结合患儿临床资料分析异常表达的miRNA与ALL预后的关系?【结果】 基因芯片结果显示:初发患儿miR-708?miR-181b?miR-199a-3p?miR-320a和miR-145表达上调最为明显,而miR-223?miR-1244?miR-494?miR-124?miR-23a?miR-27a?miR-181a*和miR-23b表达下调最明显;qRT-PCR结果显示:miR-708?miR-223和miR-27a在ALL患儿骨髓细胞内表达与基因芯片结果一致.;无复发生存分析提示ALL初发时高表达miR-708?miR-223?miR-27a者,3年无复发生存率较高,反之预后较差?【结论】 miRNA是预测ALL预后的有效分子标记物,初发患儿miR-708?miR-27a和miR-223高表达提示预后良好,在指导临床ALL患儿分层治疗方面具有重要意义?     

急性淋巴细胞白血病患者血清碱性成纤维细胞生长因子水平的检测

目的:探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者血清碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平及其临床意义.方法:应用酶联免疫法(ELISA)检测31例ALL初发未治患者及6例复发患者化疗前后血清bFGF的水平,并与正常对照组比较.结果与结论:ALL患者存在bFGF的异常高表达,检测血清bFGF对ALL的疗效观察和预后判断有一定的临床价值.     

髓系抗原表达在成人急性淋巴细胞白血病中的临床意义

【目的】 探讨成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者髓系抗原表达与临床特征及疗效的相关性,比较不同诱导方案治疗MyAg+ALL的疗效?【方法】 回顾性分析2006年1月至2011年5月我院收治的159例初治ALL患者资料,中位年龄26 (14 ~ 76) 岁?根据流式细胞术免疫分型分为髓系抗原阳性表达MyAg+ALL 73例和阴性表达MyAg- ALL 86例?分析髓系抗原表达与临床特征?近期疗效及5年总生存率的关系?【结果】 159例ALL患者中,髓系抗原表达占45.9%,以CD13?CD33为主,分别为34.2%和21.4%;CD34在MyAg+ALL中表达阳性率高于MyAg-ALL组(75.3% vs 60.5%,P = 0.046);T-ALL髓系抗原表达阳性率高于B-ALL(66.7% vs 42.8%,P = 0.04);MyAg+ALL患者形态学分型与免疫学分型不相符率(12.3%)明显高于MyAg-ALL(0%)?VDLP?VDCP?MA不同诱导方案治疗MyAg+ALL的完全缓解率(CR)分别为84.2%?75%及62.5%,三组间CR率无显著差别?MyAg+ALL组CR率低于MyAg-ALL组 (74.5% vs 88%,P = 0.047),但两组5年总体生存率差异无统计学意义(32.8% vs 25.8%,P = 0.803)?【结论】 成人ALL髓系抗原表达与大多数临床特征及疗效无明显相关性?采用米托蒽醌联合阿糖胞苷(MA)诱导方案治疗MyAg+ALL的CR率并不高于VDLP?VDCP方案?     

miR-708在儿童急性淋巴细胞白血病中的诊断及预后

目的 探讨miR-708对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的治愈率和存活率的提高作用以及预后标志物.方法 采集90例已确诊为ALL的儿童血液样本和20例健康儿童血液样本;qRT-PCR检测技术检测所有血液样本中miR-708的表达水平;非配对t检验分析两组之间的相关性;采用利用接受者操作特征(ROC)曲线分析miR-708在儿童ALL患者中的诊断价值;以Kaplan-Meier生存曲线法评估miR-708表达水平对儿童ALL的预后生存情况.结果 与健康儿童血样相比,miR-708在儿童ALL血样中表达显著上调(P<0.001);ROC曲线显示曲线下面积(AUC)为0.882,说明miR-708在儿童ALL中具有良好的诊断潜力;Kaplan-Meier生存曲线提示过表达的miR-708与患者不良预后相关.结论 miR-708在儿童ALL患者血液中显著上调,并可以作为儿童ALL的诊断及预后的有效标志物.     

急性淋巴细胞白血病伴髓系抗原表达的免疫分型特点

目的:探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)伴髓系抗原(My)表达的免疫表型特点及进行相关分析.方法:对85例初诊ALL患者进行免疫学分型,以My阳性/阴性( /-)对B细胞ALL(B-ALL)和T细胞ALL(T-ALL)进行组间分析.结果:My B-ALL和My T-ALL患者的CD13及CD33的中位数均高于My-B-ALL和My-T-ALL患者,其表达率均显著高于My-B-ALL和My-T-ALL患者(P＜0.01,P＜0.05).My B-ALL患者的CD15的中位数高于My-B-ALL患者,表达率显著高于My-B-ALL患者(P＜0.01).CD13、CD15、CD33的相关性在组间具有显著性差异(P＜0.01).结论:ALL中My的表达与mAb克隆、细胞染色技术、样本来源、阳性界值等多种因素有关.     

儿童急性淋巴细胞白血病128例免疫分型

目的:分析儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)免疫表型特点,探讨不同表型ALL缓解率及预后的差别.方法:采用流式细胞仪CD45/侧散射(SSC)双参数散点图设门方法对128例形态学分型为ALL的患儿幼稚细胞表面分化抗原进行分析,并与细胞组织化学(FAB分型)进行比较.对所有ALL患儿进行化疗,比较完全缓解率的差异.结果:128例患儿形态学与免疫学检查符合率为81.25%,有16例形态学误诊被免疫分型纠正.128例ALL患儿中104例表达淋系抗原,纯B系抗原表达52例,纯T系抗原表达22例.淋系中可合并髓系抗原表达,30例伴有髓系抗原表达,主要表达CD33、CD13,4例ALL-L2为纯髓系表达,8例诊断为急性髓细胞白血病伴淋系表达,8例为未分化型,4例急性混合型白血病同时表达2种以上淋系和髓系抗原标志,其中在B-ALL中CD19敏感性最高,在T-ALL中CD7敏感性最高,HLA-DR、CD34等非系列相关抗原在儿童ALL中均有较高表达.伴髓系表达的ALL完全缓解率低于无髓系表达者(X2=17.26,P=0.028).结论:免疫分型能助诊一些特殊类型的白血病,是对白血病细胞形态学诊断的重要补充.儿童ALL采用形态学结合免疫学分型可获得T、B细胞来源、肿瘤细胞分化阶段和异常抗原表达等参数,有助于临床预后的判断.     

儿童急性淋巴细胞白血病p73基因表达及临床意义

目的 探讨p73基因在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达及临床意义。方法 RT—PCR法检测了45例儿童ALL患儿骨髓单个核细胞内p73 mRNA的表达，并分析了p73 mRNA阴性表达与影响儿童ALL预后的临床特点的关系。结果 儿童ALL患者中存在较高频率的p73 mRNA阴性表达，且与高危年龄、高白细胞数、高肿瘤负荷、髓外浸润、高危临床分型显著相关。结论 p73 mRNA阴性表达在儿童ALL的发病过程中可能起着重要作用，p73 mRNA阴性表达者与预后不良因素相关，p73 mRNA检测可能对评估儿童ALL预后、指导临床治疗有重要意义。     

儿童急性淋巴细胞白血病单个核细胞转铁蛋白受体2表达及其意义

目的 研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿单个核细胞转铁蛋白受体2(TFR2)基因表达情况,分析其与儿童ALL不同预后因素的相关性.方法 采用荧光定量逆转录聚合酶链反应法测定56例新发ALL患儿和15例对照患儿骨髓或外周血单个核细胞TFR2相对表达量.结果 泼尼松敏感组患儿TFR2相对表达量(中位数为0.0848)显著高于泼尼松不敏感组(中位数为0.0126,P=0.038).低危组、中危组和高危组TFR2相对表达量的中位数分别为0.1677、0.0728和0.0125.差异具有统计学意义(P=0.003).初诊时外周血白细胞(WBC)计数WBC<50×109/L、(50～100)×103/L和≥loo×103/L 3组患儿TFR2相对表达量的中位数分别为0.0974、0.0294和0.0078,差异也具有统计学意义(P=0.013).另外,B细胞ALL,和T细胞ALL患儿TFR2相对表达量的中位数分别为0.0636和0.0065,B细胞型TFR2表达水平显著高于T细胞型(P=0.004).秩相关统计分析表明,ALL患儿单个核细胞TFR2表达量与初始外周WBC总数、外周血幼稚细胞比例、幼稚细胞绝对计数的秩相关系数分别为-0.398、-0.307、-0.421,具有负相关关系(P分别为0.003、0.022、0.001).结论 TFR2可能为儿童ALL一个新的分子生物学预后因素,在ALL患儿预后评估和指导个体化治疗方面可能具有临床应用价值.     

儿童急性淋巴细胞白血病β-arrestin1表达升高的临床意义

目的探讨β-arrestin1在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达及临床意义。方法收集155例初发ALL患儿的骨髓样本(ALL组),分离单个核细胞,以51例非恶性血液疾病患者作为对照(Ctrl组),将ALL患者分成高危、中危和标危组,采用实时荧光定量RT-PCR法检测β-arrestin1 mRNA的表达,采用蛋白质印迹法和免疫荧光法检测β-arrestin1蛋白表达的变化。用Spearman统计分析β-arrestin1表达与ALL患者临床和生物学特点之间的相关性。结果 ALL组β-arrestin1 mRNA和蛋白表达均高于Ctrl组(P值均<0.01)。高危组和中危组β-arrestin1 mRNA表达高于标危组,且高危组β-arrestin1 mRNA表达高于中危组,差异具有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析显示,β-arrestin1表达与外周血白细胞数(r=0.458,P=0.002)和危险分级(r=0.344,P=0.022)正相关。结论儿童ALL患者骨髓β-arrestin1表达水平与患者的危险分级密切相关,对ALL诊断、治疗策略和预后具有重要意义。     

急性淋巴细胞白血病髓系分化抗原的异常表达

目的:探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)髓系分化抗原(MyAg)的表达情况.方法:选择480例ALL患者,其中T细胞-ALL(T-ALL)92例,B细胞-ALL(B-ALL)388例,经血常规和骨髓细胞学检查确诊.抽取肝素抗凝骨髓,加入荧光标记的单克隆抗体,采用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术免疫表型分析.结果:在480例ALL患者中,39.17%伴有MyAg的表达,最常见为CD13(25.42%),其在B-ALL各亚型中表达依次为B-前体ALL(40.00%)、前B-ALL(29.93%)、普通B-ALL(22.22%)、B-ALL(20.98%);CD13在T-ALL的阳性表达率为20.65%.CD33(16.04%)在B-ALL阳性表达率(17.27%)与T-ALL(10.87%)比较,差异无统计学意义.CD117也表达于ALL(4.17%),尤其是T-ALL(14.13%),而B-ALL阳性表达率为1.80%(P<0.01).结论:ALL最常表达的MyAg为CD13和CD33,CD117表达于T-ALL.