SGLT2抑制剂恩格列净调控Nrf2信号及氧化应激减轻心肌缺血再灌注损伤

目的 观察恩格列净(EMPA)对大鼠心肌缺血再灌注(MI/R)损伤的保护作用，并从核转录因子E2相关因子2(Nrf2)信号探讨其可能的机制。方法 40只成年SD大鼠随机分为4组：对照组(control)、MI/R组、EMPA(2.5μmol/L)处理MI/R组(EMPA+MI/R)以及EMPA联合Nrf2抑制剂ML385(10μmol/L)处理MI/R组(EMPA+ML385+MI/R)。采用大鼠离体心脏缺血40 min再灌注2 h建立缺血再灌注模型，用氯化三苯基四氮唑(TTC)、苏木素-伊红(HE)染色、乳酸脱氢酶(LDH)活性和肌钙蛋白I含量(cTnI)检测心脏损伤程度，以左室收缩峰压(LVSP)和左室舒张末压(LVEDP)评价心脏功能，超氧化物阴离子荧光探针(DHE)观察活性氧(ROS)含量，ELISA检测心肌中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性，Western blot检测cytochrome C、cleaved Caspase-3、Nrf2、HO-1和NQO-1蛋白表达。结果 与control组比较，MI/R组心肌梗死面积、LDH活性和c...     

SIRT1信号通路介导紫檀芪抗内皮细胞抗缺血再灌注损伤的机制研究

目的研究不同浓度紫檀芪(PTE)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺血再灌注损伤的保护作用及其可能的机制。方法 HUVECs经1μM/L和2μM/L的PTE处理后,接受模拟缺氧复氧(SIR)损伤(缺氧70 min,复氧4 h),采用CCK-8法检测细胞活力,使用酶活性测定法检测细胞培养液中丙二醛(MDA)的释放量和超氧化物歧化酶(SOD)的水平,使用westernblot法检测SIRT1、Ac-FOXO1、Bax和Bcl-2的表达情况,使用SIRT1阻断剂EX527观察SIRT信号通路在这一过程中发挥的作用。结果 SIR处理可以抑制HUVECs活性,抑制SIRT1表达,上调Ac-FOXO1表达,下调Bcl-2/Bax比例(与Control组比较,P0.05)。细胞培养基中MDA含量上升,SOD水平下降(与Control组比较,P0.05)。1μM/L和2μM/L的PTE处理均可以发挥细胞保护作用,提高细胞活力,降低了MDA水平,提高了SOD水平(与SIR组比较,P0.05)。此外,PTE处理上调了SIRT1表达,抑制了Ac-FOXO1表达,并且提高Bcl-2/Bax比例(与SIR组比较,P0.05)。EX527处理后细胞活力下降,凋亡增加(与SIR+PTE组比较,P0.05)。结论 PTE可以保护HUVECs抵抗缺血再灌注损伤,其机制是激活SIRT1/FOXO1保护性信号通路,抑制HUVECs凋亡。     

EX527对热量限制保护SH-SY5Y细胞的影响

目的 观察SIRT1抑制剂EX527对热量限制处理的人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞的影响。方法 体外培养SH-SY5Y细胞,分为正常对照组(NC组)、热量限制组(CR组)和热量限制加SIRT1抑制剂组(CR+EX527组),光镜下观察细胞形态学改变,测定各组细胞噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide, MTT)代谢率及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出率,应用蛋白免疫印迹(Western blotting)法测定SIRT1表达量。结果 与NC组相比,CR组细胞形态好,表现为细胞胞体饱满、突起伸展、贴壁牢固,MTT代谢率升高(P<0.05),LDH漏出率有降低趋势,CR组和CR+EX527组SIRT1表达均增加(P<0.05);与CR组相比,CR+EX527组细胞形态较差,突起回缩,贴壁性不好,MTT代谢率降低(P<0.05),LDH漏出率有升高趋势,SIRT1表达略减少。结论 热量限制对神经细胞具有保护作用,而SIRT1抑制剂EX527能够减弱热量限制的神经保护作用,提示热量限制对SH-SY5Y细胞的保护作用可能是由SIRT1介导的。     

七叶皂苷钠通过p38MAPK通路减少大鼠心肌梗死面积和无复流面积的研究

目的研究七叶皂苷钠(SA)通过p38MAPK通路减少大鼠心肌梗死面积和无复流面积的作用。方法成年雄性SD大鼠随机分为对照组、缺血再灌注(I/R)组、I/R+SA组、空白腺病毒+I/R组、p38MAPK腺病毒+I/R组、空白腺病毒+I/R+SA组、p38MAPK腺病毒+I/R+SA组,采用左冠状动脉前降支结扎的方式建立心肌I/R模型,给予腹腔注射SA或心肌局部多点注射腺病毒干预,硫黄素S染色检测心肌无复流面积、氯化硝基四氮唑蓝染色检测心肌梗死面积、TUNEL染色检测心肌细胞凋亡率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的含量,Western blot检测bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase-3)、p-p38MPAK的表达量。结果与I/R组比较,I/R+SA组大鼠心肌无复流面积、梗死面积明显缩小,细胞凋亡率、IL-1β、TNF-α、ICAM-1的含量、Bax、Cleaved caspase-3、pp38MPAK的表达量明显减少(P<0.05);与空白腺病毒+I/R组比较,p38MAPK腺病毒+I/R组大鼠心肌无复流面积、梗死面积明显增加,细胞凋亡率、IL-1β、TNF-α、ICAM-1的含量、Bax、Cleaved caspase-3、p-p38MPAK的表达量明显增加(P<0.05);与空白腺病毒+I/R+SA组比较,p38MAPK腺病毒+I/R+SA组大鼠心肌无复流面积、梗死面积明显增加,细胞凋亡率、IL-1β、TNF-α、ICAM-1的含量、Bax、Cleaved caspase-3、p-p38MPAK的表达量明显增加(P<0.05)。结论 SA能够减少大鼠心肌I/R后梗死面积和无复流面积,抑制p38MAPK通路介导的炎症反应及细胞凋亡是SA发挥上述改善作用相关的分子机制。     

SIRT1通路介导紫檀芪减轻大鼠急性心肌梗死损伤研究

目的:探讨紫檀芪对大鼠急性心肌梗死损伤的保护作用及SIRT1/NF-κb信号通路在该过程中的作用机制.方法:选取SD大鼠40只,随机分成4组:假手术组、急性心梗组(AMI)、紫檀芪(PTE)预处理+AMI、PTE预处理+SIRT1抑制剂+AMI.结扎大鼠心脏左前降支根部血管,制作急性心肌梗死模型(AMI),TTC法测定心肌梗死面积,ELISA法测定血清CK-MB、LDH含量,试剂盒测定心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)水平,western blot法检测各组SIRT1、NF-κB蛋白表达情况.结果:心肌梗死时,SIRT1、SOD表达下降,NF-κB升高,心肌损伤标记物CK-MB、LDH增加(与假手术组比,P<0.05);紫檀芪预处理后,SIRT1、SOD表达上升,NF-κB下降,梗死面积减少(与心梗组比,P<0.05);加入SIRT1抑制剂后,心肌梗死面积扩大,NF-κB升高(与紫檀芪预处理组比,P<0.05).结论:紫檀芪能减轻大鼠急性心肌梗死损伤,可能与SIRT1/NF-κB通路有关.     

载脂蛋白J对缺氧/复氧诱导的乳鼠心肌细胞损伤的影响

目的 观察载脂蛋白J(ApoJ)对缺氧/复氧(H/R)诱导的乳鼠心室肌细胞损伤的影响及其相关的信号传导通路.方法 用携带ApoJ基因的重组腺病毒感染乳鼠心肌细胞使ApoJ高表达.利用三气培养箱建立H/R模型,SOD类似物Mn(Ⅲ)TBAP和真核细胞翻译起始因子2α(eIF2α)去磷酸化抑制剂Salubrinal提前预处理,将心肌细胞分成对照组、H/R组、ApoJ组、ApoJ+ H/R组、Mn(Ⅲ)TBAP+H/R组、Salubrinal+ H/R组.利用MTT法检测细胞的存活率;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞乳酸脱氢酶(LDH)的漏出量、凋亡蛋白酶半胱天冬酶-3/7 (caspase-3/7)及细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性;Westernblot检测ApoJ、氧化酶Nox2 /gp91 phox、内质网特异性凋亡蛋白caspase12、CHOP的表达及eIF2α的磷酸化水平.结果 ApoJ基因重组腺病毒转染后,心肌细胞ApoJ蛋白高表达.与对照组相比,H/R组细胞存活率和SOD的活性明显下降,LDH的漏出量及caspase-3/7的活性升高,Nox2/gp91phox、caspase-12、CHOP蛋白的表达明显升高,eIF2α的磷酸化水平升高.与H/R组相比,ApoJ组、Mn(Ⅲ)TBAP组及Salubirnal组LDH的漏出量及caspase3/7的活性明显降低,ApoJ高表达使细胞存活率和SOD的活性显著升高,Nox2/gp91 phox、caspase-12、CHOP蛋白的表达明显下降,而eIF2α的磷酸化水平显著升高.结论 ApoJ通过抗氧化应激及内质网应激的作用,减轻H/R诱导的心肌细胞损伤.     

脂联素受体1结合蛋白表达抑制对脂联素抗小鼠心肌缺血/再灌注损伤作用的影响

目的观察脂联素(APN)受体1结合蛋白(APPL1)表达抑制对APN抗小鼠心肌缺血/再灌注(MI/R)保护作用的影响。方法采用小鼠在体MI/R动物模型,APPL1表达抑制采用心肌内注射特异性小干扰RNA(APPL1 SiRNA)1μg/g体重方法实现,再灌注前10 min经腹腔注射给予APN蛋白球状片段(gAPN)2μg/g体重或等量生理盐水。70只实验小鼠随机分为5组:假手术组(Control),MI/R+Scramble SiRNA(无关对照SiRNA)组,MI/R+APPL1 SiRNA组,MI/R+Scramble SiRNA+gAPN组,MI/R+APPL1 SiRNA+gAPN组。再灌注3 h后(n=6),取心肌组织进行Western Blot分析APPL1含量,再灌注24 h后(n=8)对小鼠进行超声心动图心功能检测和心肌梗死面积测定。结果再灌注3 h后,APPL1 SiRNA注射小鼠的心肌组织中APLL1表达量较Control组及无关对照SiRNA组注射小鼠明显降低(P0.01)。MI/R+APPL1 SiRNA组与MI/R+Scramble SiRNA组比较,左室射血分数和心肌梗死面积无显著差异。与MI/R+Scramble SiRNA组相比,MI/R+Scramble SiRNA+gAPN组和MI/R+APPL1 SiRNA+gAPN组的左室射血分数明显升高(P0.01),心肌梗死面积明显降低(P0.01)。与MI/R+Scramble SiRNA+gAPN组相比,MI/R+APPL1 SiRNA+gAPN组的左室射血分数明显降低(P0.01),心肌梗死面积明显增加(P0.01)。结论 APPL1表达抑制可导致APN抗小鼠MI/R损伤保护作用的明显减弱。     

VitaePro抑制线粒体通路对心肌细胞缺氧损伤的保护作用

目的：探讨VitaePro对心肌细胞缺氧损伤的保护作用及其机制。方法将大鼠心肌细胞H9c2分为四组：正常对照组(H9c2)、缺氧损伤模型组(Hypoxia+H9c2)、红花油组(Safflower oil+hypoxia+H9c2)和VitaePro组(VitaePro+hypoxia+H9c2)。MTT和流式细胞术分别检测心肌细胞增殖和凋亡情况;Western blot检测线粒体凋亡通路相关蛋白的表达,包括B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白X (BAX)、凋亡蛋白-3(Caspase-3)和裂解后的Caspase-3(Cleaved caspase-3);试剂盒检测各组心肌细胞硫代巴比妥酸反应物(TBARS)水平、丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。最后,Western blot检测心血管损伤标志蛋白的表达,包括心肌肌钙蛋白T (cTnT)、肌红蛋白(Mb)、肌酸激酶同工酶MB (CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)。结果缺氧损伤模型组与对照组比较,细胞增殖显著下降,凋亡率显著增高(4.2%~14.6%,P<0.05),Bcl-2蛋白的表达明显降低,Bax和Cleaved caspase-3的表达显著升高(P<0.05),TBARS水平和MDA含量升高(P<0.05),SOD活性从44.9 U/mg降低到13.2 U/mg,心血管损伤标志蛋白cTnT、Mb、CK-MB和LDH的表达显著升高(P<0.05)。VitaePro组与缺氧组相比,细胞的增殖升高(P<0.05),凋亡率降低到6.4%,Bcl-2的表达升高,Bax和Cleaved caspase-3的表达明显降低(P<0.05),TBARS水平和MDA含量明显降低(P<0.05),SOD活性增大到41.0 U/mg,cTnT、Mb、CK-MB和LDH的表达显著降低(P<0.05)。结论 VitaePro可以通过抑制线粒体凋亡通路和通过抗氧化作用减轻缺氧诱导的大鼠心肌细胞损伤。     

褪黑素对大鼠缺血再灌注后心脏功能的影响

目的探讨外源性褪黑素(MLT)对急性缺血再灌注后在体大鼠心脏功能的影响及机理。方法36只大鼠随机分为对照组、缺血再灌注(I/R)组及缺血再灌注+褪黑素(I/R+MLT)组,I/R组及I/R+MLT组在体大鼠心脏左冠状动脉前降支完全阻断10min,再灌15min,术中监测记录心电及血流动力学的变化,随后测定局部受损心肌中MDA(丙二醛)的含量和SOD(超氧化物歧化酶)的活性。结果心脏血流动力学指标I/R+MLT组好于I/R组(P<0.01);I/R组MDA的含量明显高于对照组及I/R+MLT组(P<0.01),SOD活性明显低于对照组及I/R+MLT组(P<0.01),I/R+MLT组MDA含量及SOD活性与对照组差异无显著性(P>0.05)。结论褪黑素对急性缺血再灌注后在体大鼠心脏功能具有保护作用,其机理可能与其清除自由基抗氧化作用有关。     

MicroRNA-451对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响

目的:探讨MicroRNA(miR)-451在大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤中的作用及其作用机制。方法:将70只SD大鼠随机分为5组:假手术组(SO)、缺血再灌注组(I/R)、腺病毒空载体组(I/R+Ad-GFP)、miR-451上调组(I/R+Ad-miR-451)、miR-451下调组(I/R+Ad-asmiR-451)。心肌注射病毒液(1×1010 pfu/只)或PBS液(150μl/只)后3d建立缺血30min再灌注24h的心肌I/R模型。应用TTC+伊文思蓝双染法测定各组心肌梗死面积百分比,TUNEL法检测凋亡率,Western Blot法测定HMGB1和Caspase 3活化片段含量,应用试剂盒检测血清CK、LDH含量以及心肌组织SOD、MDA含量。结果:再灌注24h后,与SO组相比,I/R组和I/R+Ad-GFP组血清CK、LDH含量明显升高,心肌组织SOD活性降低、MDA含量升高,心肌组织HMGB1及Caspase-3活化片段蛋白含量显著上升,心肌细胞凋亡指数明显增加(以上P<0.05);与I/R组、I/R+Ad-GFP组相比,I/R+Ad-miR-451组血清CK、LDH含量显著下降,心肌组织SOD活性上升、MDA含量下降,心肌组织HMGB1和Caspase-3活化片段蛋白含量下降,心肌梗死面积百分比降低,心肌细胞凋亡指数降低(以上P<0.05);与I/R组、I/R+Ad-GFP组相比,I/R+Ad-asmiR-451组血清CK、LDH含量无明显上升,心肌组织MDA含量及SOD活性无明显变化,心肌组织HMGB1表达含量无明显上升,心肌梗死面积百分比及心肌细胞凋亡指数无显著升高(以上P>0.05),Caspase-3活化片段蛋白含量上升(P<0.05)。结论:MicroRNA-451通过调控HMGB1的表达,减轻凋亡和氧化应激进而减轻心肌I/R损伤。     

MRL-45696 减轻2 型糖尿病大鼠心肌缺血再灌注后的DNA损伤

目的研究摄食二磷酸腺苷核糖聚合酶抑制剂MRL-45696是否减轻2型糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注后DNA的损伤。方 法大鼠高糖高脂饲料喂食8 周后腹腔注射链脲佐菌素（STZ）（30 mg/kg）,构建2型糖尿病大鼠模型,选取2型糖尿病大鼠40 只,随机分为糖尿病组（DM）、假手术组（S）、MRL-45696治疗+假手术组（NO）、缺血再灌注损伤模型组（MI/R）、MRL-45696治 疗+缺血再灌注损伤组（MRL）,每组各8只。灌胃给予2型糖尿病大鼠MRL-45696 (50 mg/kg·d),1周后以大鼠冠状动脉左前降 支结扎30 min 再灌注120 min 的方法制作心肌缺血再灌注损伤模型。检测大鼠血浆心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnI）、血清肌酸激酶 （CK）、血清乳酸脱氢酶（LDH）活性和心肌梗死范围、细胞凋亡比例、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶活性（SOD）。Western blot 检测γ-H2AX、cleaved caspase-3、PARP-1、PAR;比色法检测大鼠心肌组织中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）水平（以NAD+/ NADH比例代表）。结果MRL组心肌梗死面积显著小于MI/R 组（P<0.05）,MI/R 组cTnI、CK、LDH、MDA、γ-H2AX、cleaved caspase-3表达水平及细胞凋亡较其它组显著升高（P<0.05）,而SOD水平明显降低（P<0.05）;与MI/R组相比,MRL组大鼠cTnI、 CK、LDH、MDA、γ-H2AX、cleaved caspase-3、PARP-1、PAR表达水平及细胞凋亡明显降低,SOD及NAD表达水平明显升高,差 异有统计学意义（P<0.05）。结论糖尿病加重大鼠心肌细胞缺血再灌注后DNA损伤,MRL-45696 可能通过抑制糖尿病大鼠 PARP-1的过度激活,减轻心肌细胞缺血再灌注损伤,减少心肌梗死面积。     

沉默信息调节因子3在丹酚酸A抗紫外线诱导视网膜色素上皮细胞氧化应激性损伤中的作用及机制

目的：探讨SIRT3在丹酚酸A（Sal A）抗紫外线诱导视网膜色素上皮细胞损伤中的作用及其机制。方法：将ARPE-19细胞分为对照（Sal A）组、UV组、Sal A+UV组、Sal A+UV+阴性si-RNA组、Sal A+UV+si-SIRT3组,UV照射剂量为30 mJ/cm2,Sal A浓度为50 μmol/L,采用MTT法检测细胞存活,DCFH-DA法分析细胞内ROS水平,CuZn/Mn-SOD活性检测试剂盒（WST-8法）检测SOD2活性,Western blot分析SIRT3、SOD2、Bcl-2、Bax、cleaved-Caspase3、Cyt c的表达,RT-qPCR法检测细胞内SIRT3和SOD2的mRNA表达情况。结果：UV处理后,ARPE-19细胞内SIRT3蛋白和mRNA表达量降低,经5、25、50 μmol/L预处理后,SIRT3表达量明显增加。与对照组相比,UV组细胞凋亡率,ROS含量,Bax、cleaved-Caspase3、Cyt c表达量明显增加,细胞存活率、SOD2表达量和活性明显降低。与UV组相比,Sal A+UV组细胞凋亡率,ROS水平,SIRT3、cleaved-Caspase3、Cyt c表达量明显降低,细胞存活率、SOD2表达量和活性明显增加。与Sal A+UV相比,Sal A+UV+si-SIRT3组细胞凋亡率,ROS水平,SIRT3、cleaved-Caspase3、Cyt c表达量明显增加,细胞存活率、SOD2表达量和活性明显降低。结论：Sal A可增加SIRT3的表达,恢复SOD2活性,降低UV诱导细胞损伤作用。     

白芷乙素通过抑制ERK1/2和NF-κB p65的活化缓解心肌缺血再灌注大鼠心肌损伤和氧化应激

目的 探讨白芷乙素通过抑制细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和核转录因子-κB(NF-kappaB p65)的活化,减轻心肌缺血再灌注(MI/R)大鼠心肌损伤和氧化应激的作用机制.方法 将SD大鼠随机分为五组:健康对照组(Con-trol组),心肌缺血再灌注模型组(MI/R组),低、中、高剂量白芷乙素组(6.25、12.50、25.00 mg/kg).小动物超声仪检测大鼠心率(HR)、左心室缩短分数(FS);酶联免疫吸附法(ELISA)检测心脏损伤指标肌酸激酶同工酶(CK-MB)和心肌肌钙蛋白(cTnI)水平;HE染色观察心肌组织损伤情况;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP镍端标记(TUNEL)检测心肌细胞凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和caspase-3及通路蛋白ERK1/2和p65的表达情况;试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醇(MDA)含量.结果 与Control组比较,MI/R组的HR、FS降低(P<0.05);CK-MB和cTnI浓度升高(P<0.05);心肌组织损伤严重;凋亡细胞及Bax/Bcl-2表达比值增加(P<0.05);SOD活性降低(P<0.05),而MDA含量升高(P<0.05);ERK1/2和p65蛋白磷酸化升高(P<0.05).白芷乙素给药后,逆转了MI/R大鼠的上述结果 .与MI/R组比较,中、高剂量白芷乙素组的HR、FS回升(P<0.05);CK-MB和cTnI浓度回降(P<0.05);心肌组织损伤改善;凋亡细胞及Bax/Bcl-2表达比值回降(P<0.05);SOD活性回升(P<0.05),而MDA含量回降(P<0.05);ERK1/2和p65蛋白磷酸化回降(P<0.05).结论 白芷乙素可通过抑制ERK1/2和NF-κBp65通路蛋白活化,缓解MI/R大鼠心肌损伤及氧化应激.     

氧化应激介导的DNA损伤在大鼠心肌H9C2细胞缺氧/复氧损伤中的作用

目的 探讨氧化应激介导的DNA损伤在大鼠心肌H 9 C2细胞缺氧/复氧损伤中的作用.方法 采用大鼠心肌H9C2细胞制备缺氧/复氧损伤模型.实验分为对照组(Con组)、缺氧/复氧模型组(H/R组)、抗氧化剂NAC组(NAC组)、抗氧化剂+模型组(NAC+H/R组).Western blot检测细胞凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2)表达;细胞免疫荧光法检测活性氧(ROS)水平,DNA损伤相关蛋白(p-γH2ax、8-OHdG)、细胞损伤指标[细胞色素c(Cytochrome c)]表达.结果 与Con组比较,H/R组细胞内ROS水平升高,p-γH2ax、8-OHdG、Cytochrome c、Bax/Bcl-2表达增加,差异有统计学意义(P<0.05);与H/R组比较,NAC+H/R组ROS水平降低,p-γH2ax、8-OHdG、Cytochrome c、Bax/Bcl-2表达降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 抑制心肌细胞氧化应激,可明显改善心肌细胞DNA损伤和凋亡.     

维生素D3对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠氧化应激的保护作用研究

目的 探究维生素D₃对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)大鼠氧化应激的保护作用。方法 建立EAT大鼠模型,设立正常对照组、模型对照组、维生素D₃低剂量组[0.2μg/(kg·d)]和维生素D₃高剂量组[2.0μg/(kg·d)],造模完成后给予维生素D₃治疗5周,另设维生素D₃预防组[(2.0μg/(kg·d)]自造模开始即给予维生素D₃治疗,共9周。检测各组大鼠血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)等血清指标;采用qRT-PCR法和Western blot法测定大鼠甲状腺组织中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶亚基p22^phox、gp91^phox的mRNA和蛋白表达水平。结果 与正常对照组比,模型对照组TgAb、TPOAb、MDA、p22^phox、gp91^pho...     

表没食子儿茶素没食子酸酯预处理对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤保护及相关机制的研究

目的 建立乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤模型,探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及相关机制.方法 分离培养SD乳鼠心肌细胞,心肌细胞在培养48 h后随机分为3组(每次取18只乳鼠,每组实验重复6次):正常对照组、A/R组、EGCG预处理组(EGCG+A/R组).采用MTT比色法测定各组心肌细胞存活率,比色法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量,黄嘌呤氧化酶法测定各组心肌细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的含量,硫代巴比妥酸法测定各组心肌细胞内丙二醛(MDA)的含量,流式细胞分析仪检测各组心肌细胞内活性氧(ROS)的含量.结果 与对照组比较,A/R 组心肌细胞存活率、细胞内SOD含量均明显降低(均P<0.01),而心肌细胞内MDA、ROS以及细胞释放的LDH均明显增加(均P<0.01).与A/R组比较,EGCG+A/R组心肌细胞存活率、细胞内SOD含量均明显增加(均P<0.01),同时心肌细胞内MDA、ROS及细胞释放的LDH均明显降低(均P<0.01).结论 EGCG预处理可减轻心肌细胞A/R损伤,其机制可能为EGCG增加了细胞的内源性抗氧化剂活性,降低心肌细胞A/R后氧自由基的生成.     

七氟醚可能通过调控SIRT1-FOXO1介导的自噬对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的:本研究探讨七氟醚对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响以及机制研究.方法:将SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血再灌注损伤组(I/R)、缺血再灌注损伤组+七氟醚组(I/R+Sev)、缺血再灌注损伤组+七氟醚组+EX527组(I/R+Sev+EX527).使用Morris水迷宫实验和TTC染色观察脑缺血再灌注后损伤情况...     

右美托咪定可能通过SIRT1信号通路减轻老龄大鼠的术后认知功能障碍

目的评价沉默信息调节因子1（SIRT1）信号通路在右美托咪定（DEX）减轻老龄大鼠术后认知功能障碍（POCD）中的作 用。方法取清洁健康的雄性SD大鼠72只,18~20月龄,体质量500~700 g,采用随机数字表法分为4组。正常对照组（Control 组）：未经处理的正常老龄大鼠;POCD组：手术处理建立的POCD模型大鼠;DEX组：术前DEX预处理的POCD模型大鼠;SIRT1 抑制剂组（EX527组）：术前DEX和EX527预处理的POCD模型大鼠,18只/组。DEX组和EX527组术前30 min腹腔注射右美托 咪定25 μg/kg,Control组和POCD组腹腔注射等量的生理盐水。30 min后POCD组、DEX组及EX527组行剖腹探查术,维持手 术时间30 min。EX527组术前5 min静脉注射EX527 1 μg/kg。Control组不做任何处理。分别于术后1 d（T1）、3 d（T2）和5 d（T3） 时每组随机选取6只大鼠进行Morris水迷宫实验,记录逃避潜伏期和穿越平台次数以测定认知功能,之后立即处死大鼠并取其 海马,采用ELISA法测定各组大鼠海马组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）的含量,Western blot法分别检测海 马神经元SIRT1和NF-κB的表达。结果与Control组相比,POCD组和EX527组逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,TNF-α、 IL-6含量升高,海马神经元SIRT1表达下调,NF-κB表达升高（P<0.05）;与POCD组相比,DEX组逃避潜伏期缩短,穿越平台次数 增加,TNF-α、IL-6含量降低,海马神经元SIRT1表达上调,NF-κB表达降低（P<0.05）,EX527组与POCD组相比上述指标差异无 统计学意义（P>0.05）;与DEX组相比,EX527组逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,TNF-α、IL-6含量升高,海马神经元SIRT1 表达下调,NF-κB表达升高（P<0.05）。结论右美托咪定减轻老龄大鼠术后认知功能障碍可能通过SIRT1信号通路发挥作用。     

SIRT1/NF-kB通路参与白藜芦醇改善大鼠脑缺血再灌注损伤炎性反应

目的 研究大鼠脑缺血再灌注损伤后沉默信息调节因子1(SIRT1)对缺血脑组织周边炎性反应的影响及其与核转录因子-KB(NF-kB)通路的关系.方法 选择健康雄性 SD大鼠40只,随机均分为4组:假手术组、模型组、白藜芦醇组、EX527组.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blot法检测各组大鼠脑组织匀浆中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、SIRT1及NF-kB mR-NA含量及蛋白表达变化.于1、3、7、14 d对大鼠进行神经功能缺损评分.结果 白藜芦醇组3、7、14 d神经功能缺损评分明显低于模型组和EX527组(P＜0. 01).白藜芦醇组 NF-KB、IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA及蛋白表达量明显低于模型组和EX527组(P＜0.01);SIRT1明显高于模型组和 EX527组(P＜0.01).结论 SIRT1的激活可促进脑缺血再灌注大鼠的神经功能缺损恢复,减轻炎性反应,其机制可能与NF-KB通路有关.