苍耳子提取物对S180荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制及免疫功能的影响

目的探讨苍耳子提取物对S180株的抑制作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法建立小鼠种植性S180肉瘤模型,将低（5g/kg体重）、中（10g/kg体重）、高（20g/kg体重）浓度苍耳子提取物分别给予S180荷瘤小鼠,观察其抑瘤率、对荷瘤小鼠免疫器官重量及碳粒廓清指数、血清半数溶血素值（CH50）的影响;并设5-氟尿嘧啶（5-FU）组与对照组与之比较。结果对S180荷瘤小鼠分别给予低、中、高浓度苍耳子提取物和5-FU,结果发现对S180肉瘤的抑瘤率分别为13.41%、26.22%、44.51%和25.00%,抑瘤率随苍耳子提取物给药浓度的增加而升高（P〈0.01）;与对照组比较,差异均有统计学意义（P均〈0.01）。S180荷瘤小鼠胸腺和脾脏的重量随给药浓度的提高而增加（P〈0.01）;小鼠碳粒廓清指数、血清半数溶血素值均较对照组增高（P〈0.05或P〈0.01）。结论苍耳子提取物对S180肉瘤具有明显的毒性和抑制作用。     

苍耳子和辛夷配伍前后的急性毒性与抗炎实验研究

目的:比较苍耳子、辛夷配伍前后4种水煎液灌胃给予动物所产生的急性毒性反应与抗炎作用。方法:急性毒性实验,采用小鼠灌胃给药测定其最大耐受量(MTD);抗炎实验采用二甲苯致小鼠耳肿胀实验及大鼠棉球肉芽肿实验。结果:苍耳子单煎液小鼠灌胃给药的MTD大于60 g生药/kg、辛夷单煎液小鼠灌胃给药的MTD大于120 g生药/kg、苍耳子与辛夷配伍后水煎液小鼠灌胃的MTD大于180 g生药/kg;与对照组相比各给药组都具有一定的抗炎作用,作用强弱顺序为:吲哚美辛组样品3组样品2组样品4组样品1组。结论:本实验结果表明,苍耳子、辛夷配伍后合煎液的抗炎作用较苍耳子单煎液有所增强,且急性毒性小于苍耳子单煎液。     

苍耳子水提取液对小鼠肝毒性“量-时-毒”关系研究

目的:考察苍耳子水提物单次给予对小鼠肝毒性的"量-时-毒"关系。方法:将小鼠按不同时间点和不同剂量分组,观察小鼠急性肝毒性反应,检测血清谷氨酸氨基转移酶(ALT)、谷草氨酸氨基转移酶(AST)水平,计算肝体比值,光学显微镜下观察肝组织病理形态变化。结果:"时-毒"关系研究表明:制备4.0 g/m L苍耳子水提液,取小鼠按不同时间点分组,按101.14 g/kg剂量小鼠灌胃给药一次,分别于给药后各时间点取血,小鼠血清ALT,AST均在给药1 h后明显升高,给药后8 h达到高峰,24 h后恢复近正常值;肝体比值增大,肝组织病理损伤严重;"量-毒"关系研究表明:小鼠单次灌胃给药不同剂量(101.14 g/kg、83.312 g/kg、66.650 g/kg、53.320 g/kg、42.656 g/kg、空白组同体积蒸馏水)。苍耳子水提液对肝组织产生明显损伤,随剂量增大,血清ALT,AST值显著升高。肝体比值增大,肝组织病理损伤严重。结论:小鼠单次灌胃给药苍耳子水提取液可造成明显急性肝损伤,并呈现一定"量-时-毒"关系。     

巴戟天醇提物对骨髓基质细胞增殖影响的血清药理学实验方法的建立

探讨巴戟天醇提物对骨髓基质细胞增殖影响的血清药理学实验方法的建立。方法采用MTT法检测各组给药剂量、给药时间、采血时间、血清浓度的含巴戟天醇提物的血清培养大鼠BMSCs72小时后的OD值。结果等剂量组(给药剂量),4天组(给药时间),1小时组(采血时间)的OD值,与对照组比较有显著性差异(P<0.05),各组培养血清浓度的OD值20%组>10%组>5%组。结论巴戟天醇提物等剂量灌胃,给药4天,末次给药1小时后腹主动脉采血,制备血清后,以20%的浓度培养,为促进大鼠BMSCs增殖的优选方案。     

郁金含药血清对HSC-T6细胞增殖抑制作用的影响

目的:观察郁金含药血清对肝星状细胞-T6(hepatic stellate cell-T6,HSC-T6)细胞增殖抑制的研究。方法:25只SD大鼠随机分5组:郁金含药血清高剂量组、中剂量组、低剂量组(16.2 g·kg-1、8.1 g·kg-1、4.0 g·kg-1),秋水仙碱组(5g·kg-1)以及空白组(给予等体积生理盐水),连续灌胃给药4 d后,于第4天一次性给药1 h后,乙醚麻醉腹主动脉取血制备含药血清;将HSC-T6细胞分为6组,郁金含药血清高剂量组、中剂量组、低剂量组,空白组、秋水仙碱组、阴性对照组(加入等体积的PBS代替大鼠血清),分别取用体积分数5%、10%、20%的含药血清,同时作用于各组HSC-T6细胞24 h、48 h、72 h后,采用四氮噻唑蓝法在酶标仪(490 nm波长)上检测各组OD值,分别计算其增殖率和抑制率。结果:与阴性对照组比较,除作用24 h、体积分数5%组外,大鼠血清可以明显加速HSC-T6细胞的增殖速度,其增殖率与大鼠血清含量呈正相关。与空白组比较,除作用24 h、体积分数5%含药血清各剂量组、低剂量20%组以及秋水仙碱20%组没有明显抑制作用外,其余各郁金剂量组均有增殖抑制作用,其中体积分数10%组的抑制效果明显高于体积分数20%组(P0.05)。作用48 h后,各干预含药血清的3个浓度组均有明显抑制作用,其中郁金体积分数10%组的抑制效果明显高于其他体积分数组(P0.05);作用72 h后,除秋水仙碱组外,各郁金剂量组均有明显抑制作用,其中含药血清体积分数10%组的抑制效果明显高于其他体积分数组(P0.01)。结论:大鼠郁金含药血清可以明显加速HSC-T6细胞的增殖;郁金含药血清在体外可以有效抑制HSC-T6细胞的增殖,但抑制率与含药血清体积分数、作用时间呈非线性关系,抑制率最为显著的是含药血清体积分数10%,作用时间48 h。     

七叶灵方对紫杉醇耐药肺癌细胞A549/Taxol增殖和凋亡的影响

目的:观察七叶灵方对紫杉醇耐药肺癌细胞A549/Taxol增殖和凋亡的影响。方法:将10只SD大鼠随机分为中药组和空白组,每组5只。中药组大鼠灌胃给予18 g/kg七叶灵方药液,每日2次,连续给药3 d。空白组大鼠灌胃给予等体积0.9%NaCl溶液。分别制备含药血清和空白血清。采用浓度梯度诱导法构建紫杉醇耐药肺癌细胞株A549/Taxol。①将细胞分为空白组及不同浓度(5%、10%、20%)含药血清组,各组分别给予空白血清和相应浓度含药血清干预。药物干预前及细胞培养24、48 h后,CCK8法检测各组细胞增殖情况,筛选含药血清干预的最佳浓度。②将细胞分为空白组(常规培养基)、含药血清组(筛选的最佳浓度含药血清)、紫杉醇组(2 mg/L紫杉醇)、含药血清+紫杉醇组(最佳浓度含药血清+2 mg/L紫杉醇),各组予以相应干预。干预前及细胞培养24、48 h后,CCK8法检测各组细胞增殖情况。细胞培养48 h后,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,Western blot检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、剪切型Caspase-3(cleaved Caspase-3)、聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)、剪切型PARP (cleaved PARP)的蛋白表达。结果:①与干预前相比,各浓度含药血清作用24、48 h后,A549/Taxol细胞的增殖抑制率显著升高(P0.05,P0.01),具有浓度/时间依赖性。选取20%含药血清进行后续实验。②细胞培养48 h后,紫杉醇组的细胞增殖抑制率明显高于含药血清组(P0.05),含药血清+紫杉醇组对耐药细胞的生长抑制作用明显强于紫杉醇组(P0.01);与空白组相比,含药血清组、紫杉醇组及含药血清+紫杉醇组的细胞凋亡率均明显升高(P0.01),且含药血清+紫杉醇组的细胞凋亡率高于紫杉醇组(P0.01)。③与空白组相比,紫杉醇组、含药血清组和含药血清+紫杉醇组细胞Bcl-2、Caspase-3、PARP的蛋白表达量显著降低(P0.01),Bax、cleaved Caspase-3、cleaved PARP的蛋白表达量显著上调(P0.01)。与紫杉醇组相比,含药血清+紫杉醇组细胞Bcl-2、Caspase-3、PARP的蛋白表达量明显下降(P0.01),Bax、cleaved Caspase-3、cleaved PARP的蛋白表达量显著增加(P0.05,P0.01)。结论:七叶灵方含药血清可抑制紫杉醇耐药肺癌细胞A549/Taxol的增殖,诱导细胞凋亡,且与紫杉醇联合应用具有一定的协同效应,其机制可能与调控Bcl-2/Caspase-3/PARP通路有关。     

蛇黄肝炎汤含药血清对人肝癌细胞HepG-2增殖的抑制作用

目的探讨蛇黄肝炎汤含药血清对人肝癌细胞HepG-2增殖的影响。方法 25只大鼠随机分为1倍、2倍、4倍浓度含药血清组,复方环磷酰胺含药血清组(阳性药物血清组),空白血清组5个实验药物组,分别将不同浓度的蛇黄肝炎汤含药血清、阳性药物含药血清、空白血清与HepG-2细胞共同培养,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及细胞集落形成实验观察蛇黄肝炎汤含药血清体外对HepG-2细胞增殖、克隆形成能力的影响。结果与空白血清组相比较,2、4倍的蛇黄肝炎汤含药血清组吸光度值(OD值)均降低,差异均有统计学意义(P0.05)。4倍含药血清随作用时间的延长,对HepG-2细胞的抑制率逐渐增加(P0.05),当4倍浓度含药血清抑制时间为72 h时,抑制率达76.82%,与阳性药物血清组作用相当(抑制率达77.71%)。不同浓度的含药血清均能有效降低肿瘤细胞集落形成,与空白血清组相比差异均有统计学意义(P0.05),且随着含药血清浓度增大细胞集落形成数逐渐降低,集落形成抑制率随含药血清浓度的增加呈逐渐升高的趋势。结论蛇黄肝炎汤含药血清具有抑制人肝癌细胞HepG-2体外增殖、降低其克隆形成能力作用。     

鼻咽解毒颗粒含药血清对Raji细胞DNA复制的干预作用

目的探讨鼻咽解毒颗粒含药血清对Raji细胞DNA复制的干预作用。方法通过给新西兰白兔灌胃鼻咽解毒颗粒制备含药血清,以常规量灌胃制备低剂量组含药血清,以5倍常规量灌胃制备高剂量组含药血清;常规细胞培养Raji细胞,MTT法观察含药血清对Raji细胞作用,筛选含药血清作用浓度,选择非毒性浓度作用于Raji细胞,PCR检验其对Raji细胞DNA复制的影响。结果高剂量鼻咽解毒颗粒组含药血清对Raji细胞生长无明显毒性,浓度为1∶16,低剂量组为1∶8。含药血清处理Raji细胞后EBV-DNA拷贝数,高浓度组为(64.78±55.56)拷贝/5.0×104细胞,低浓度组为(42.80±8.93)拷贝/5.0×104细胞,而空白对照(无药物血清)组为(3.4±2.9)×107拷贝/5.0×104细胞。结论鼻咽解毒颗粒含药血清对Raji细胞DNA复制有明显的抑制作用。     

四君子汤与5-FU联用对结肠癌HT-29细胞生长的抑制效应

目的探索传统中药复方四君子汤与临床常用化疗药物氟尿嘧啶(5-FU)联用对体外培养的结肠癌HT-29细胞的生长抑制作用,为临床上应用四君子汤作为5-FU的增效剂联合治疗结肠癌提供实验依据。方法将体外培养的结肠癌HT-29细胞分成不含药血清对照组、5-FU组、高剂量四君子汤血清加5-FU组、中剂量四君子汤血清加5-FU组和低剂量四君子汤血清加5-FU组5组。将制备好的四君子汤含药血清和5-FU按所需的剂量分别加入到各组培养瓶中作用于细胞24h,应用基于酶标仪的MTT方法检测各组细胞的OD值,计算不同浓度药物处理对细胞生长的抑制率。结果四君子汤血清与5-FU联用能显著抑制结肠癌HT-29细胞的生长(均P0.01),且高剂量四君子汤血清与5-FU合用组细胞生长抑制率显著高于5-FU单用组(P0.01)。四君子汤血清与5-FU联用对结肠癌HT-29细胞周期的运行产生显著的影响。结论四君子汤可以增强5-FU对结肠癌HT-29细胞的生长作用和细胞周期的干扰作用。     

益胃汤对子宫内膜异位症模型大鼠Th1/Th2漂移的影响

目的:观察子宫内膜异位症模型大鼠血清IL-4,INF-γ水平和血浆IL-10的变化,研究益胃汤对子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)模型大鼠外周血Th1/Th2平衡的干预作用。方法:选择40只造模成功的自体移植EMs模型大鼠随机分成模型对照组、丹那唑组(0.02 g/kg)、益胃汤高(27.00 g/kg)、中(13.5 g/kg)、低(6.75 g/kg)三剂量组,并取8只建立假手术组,药物组和假手术组均采用灌胃给药方式给药,治疗组给予对应药物,给药体积10 m L/kg,一次/d,假手术组给予等体积蒸馏水,药物连续干预4 w,4 w后取异位子宫内膜观察其病理形态学以及观察大鼠血清IL-4,INF-γ水平和血浆IL-10,计算IL-4/INF-γ和IL-10/INF-γ比值并分析其变化。结果:与假手术组比较,模型对照组大鼠子宫内膜纤维组织增生,内膜呈乳头状增生,腺体呈囊性扩张明显,可见腺体及内膜间质浸及肌层,内膜间质变小;IL-10/INF-γ显著升高(P0.05)。与模型对照组比较,益胃汤各给药组大鼠子宫内膜病理形态学均显著改善,血清INF-γ显著增高(P0.05),IL-4/INF-γ和IL-10/INF-γ比值均明显变小(P0.05)。结论:益胃汤改善外周血炎症因子浓度,减轻临床症状,其作用机制之一EMs可与其调节Th1/Th2失衡有关。