脑健冲剂对AD大鼠神经原纤维影响的实验研究

目的 采用脑健冲剂治疗AD，观察脑健冲剂对AD大鼠海马神经原纤维的影响。方法 本实验采用D一半乳糖拟衰老，Aβ损害联合所致AD模型，用脑健冲剂治疗。结果 脑健冲剂可改善海马神经原纤维的扭曲和增粗。结论 脑健冲剂可治疗AD。     

脑健冲剂对AD模型大鼠行为学及线粒体结构影响的实验研究

目的：研究脑健冲剂对AD模型大鼠行为学及线粒体超微结构的影响。方法：采用D-半乳糖致衰老与β-淀粉样蛋白注射联合所致的AD大鼠模型，服用脑健冲剂，测试大鼠在迷宫中的学习及记忆能力和海马CAl区线粒体体密度、面数密度等形态学指标。结果：脑健冲剂能有效的改善AD模型大鼠的学习、记忆障碍，并能很好地改善线粒体结构的受损程度。结论：脑健冲剂对AD有较明显的治疗作用，为临床应用脑健冲剂治疗AD提供实验依据。     

脑健冲剂对AD大鼠行为学改变及海马区线粒体结构影响的光、电镜观察

通过行为学检测及光、电镜观察，观测脑健冲剂对D—半乳糖致衰老基础上β—淀粉样蛋白颅内注射所致AD大鼠的记亿功能改变及海马区线粒体结构的影响。实验证明脑健冲剂能改善AD大鼠的记亿功能及线粒体损伤程度。     

脑健冲剂对AD大鼠行为学改变及海马区线粒体结构影响的光、电镜观察

通过行为学检测及光、电镜观察,观测脑健冲剂对D-半乳糖致衰老基础上β-淀粉样蛋白颅内注射所致AD大鼠的记忆功能改变及海马区线粒体结构的影响。实验证明脑健冲剂能改善AD大鼠的记忆功能及线粒体损伤程度。     

脑灵汤对阿尔茨海默病模型大鼠TGF-β1表达的影响

目的 探讨脑灵汤对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠TGF-β1(转化生长因子β1)表达的影响.方法 采用向大鼠海马内注射Aβ1-42(β淀粉样蛋白)建立AD模型,通过Y-电迷宫实验检测各组大鼠学习记忆能力;行HE染色观察海马CA3区神经元形态;采用刚果红染色检测Aβ的沉积;用免疫组化SP法检测TGF-β1的表达情况.结果 脑灵汤能改善模型大鼠的学习记忆能力,减少Aβ的沉积,且脑灵汤组TGF-β1的表达较AD模型大鼠的表达增加,差异有统计学意义(P<0.05).HE染色结果,脑灵汤组大鼠海马CA3区细胞排列较整齐、均匀,结构较清晰,形态、排列、数目较模型组明显改善;刚果红染色结果,正常组、假手术组大鼠脑组织切片中未见A13沉积;模型组大鼠脑组织切片在CA1区与齿状回之问可见明显Aβ1沉积;脑灵汤组未发现明显的Aβ沉积.结论 脑灵汤能增强AD大鼠海马区域TGF-β1的表达,可能通过此机制减少海马AB蛋白的沉积,从而改善模型大鼠学习记忆能力.     

PS1/APP双转基因AD模型小鼠与Aβ1-40海马注射AD模型大鼠的组织病理学比较

目的 对PS1/APP双转基因阿尔茨海默病(alzheimer disease, AD)模型小鼠进行基因鉴定和组织学分析,探讨其与老化态Aβ1-40单侧海马注射AD模型大鼠之间的组织病理学差异.方法 对Tg小鼠和AD大鼠模型应用改进刚果红染色法、Nissl's染色结合免疫组织化学方法观察脑内Aβ沉积和星形胶质细胞的活化情况.结果 ①PS1/APP双转基因AD小鼠刚果红染色显示皮质和海马内广泛圆形Aβ沉积,周围绕以胶质细胞带,免疫组化显示GFAP阳性细胞活化呈团块聚集.②AD大鼠刚果红染色显示单侧海马齿回区有Aβ斑块状沉积,Nissl's染色显示注射针道附近海马锥体层细胞丢失,注射侧海马GFAP阳性细胞增多.结论 Aβ1-40单侧海马注射AD模型大鼠尽管可以模拟人类AD疾病的部分特征病理改变,但是不能模拟疾病渐进性的病理学改变.PS1/APP双转基因小鼠能够模拟AD病人脑内的主要病理改变与渐进性过程,是较为理想的实验动物模型,但该模型未发现细胞丢失.     

丁苯酞对AD大鼠模型认知及海马Aβ、NR2b表达的影响

目的观察丁苯酞对AD大鼠模型的学习记忆能力及海马Aβ、NR2b表达的影响。方法采用大鼠海马立体定向注射凝聚态Aβ1-40诱导AD模型。采用Morris水迷宫评价大鼠学习记忆能力,采用免疫组织化学染色法测定海马区Aβ、NR2b蛋白的表达。结果丁苯酞低剂量组和高剂量组能明显减少海马Aβ的沉积,有效促进海马CA1区NR2b的表达（P〈0.01）;对AD大鼠模型的学习、空间记忆能力有明显的改善（P〈0.01）;而高剂量组和低剂量组对AD大鼠模型的改善作用没有明显差异。结论 AD大鼠模型学习记忆的改变与海马Aβ、NR2b变化相关,丁苯酞可能通过减少海马Aβ的沉积、促进CA1区NR2b的表达从而改善AD大鼠模型的学习和空间记忆能力。     

姜黄素调控β-分泌酶基因表达抑制老年性痴呆大鼠Aβ蛋白生成的机制

目的：探讨姜黄素对老年性痴呆（ Alzhelmer＇s disease,AD）大鼠海马区β-淀粉样前体蛋白（β-amyloid protein precursor,β-APP）和β-分泌酶（amyloidβ secretase1,BACE1）基因表达的影响。方法：采用Aβ1-40右侧海马区注射,制备AD大鼠模型,腹腔注射姜黄素给予治疗,采用ELISA法检测血清与海马组织中Aβ的含量,免疫组织化学法检测海马区神经元中β-APP蛋白表达,RT-PCR法检测海马组织中β-APP和BACE1 mRNA表达。结果：造模后大鼠血清和脑组织海马中Aβ含量显著升高,脑组织海马区神经元中β-APP蛋白表达、β-APP mRNA和BACE1 mRNA表达明显增加。与模型组比较,姜黄素高剂量组、低剂量组β-APP蛋白表达、β-APP mRNA和BACE1 mRNA明显降低,差异均有统计学意义（ P<0.05）。结论：姜黄素可通过对BACE1 mRNA调控作用,阻断β-APP裂解进程,抑制Aβ在脑内生成与沉积,从而减少Aβ对神经元的毒性作用。     

脑益康对阿尔茨海默病大鼠tau蛋白过度磷酸化及其相关酶类表达的影响

目的探讨脑益康对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠海马神经元tau蛋白过度磷酸化及其相关酶类表达的影响。方法采用β-淀粉样蛋白1-40（Aβ1-40）右侧海马注射制备AD大鼠模型,免疫组化法和Western blot法检测大鼠海马神经元tau蛋白在Ser404位点的磷酸化水平、蛋白磷酸酯酶2A（PP-2A）的表达情况,ELISA法检测糖原合酶激酶-3β（GSK-3β）蛋白的水平。结果AD模型组大鼠海马组织p-tau（Ser404）、GSK-3β表达增加,PP-2A表达减少,与假手术组的差异有高度统计学意义（P〈0.01）;脑益康治疗组大鼠的p-tau（Ser404）、GSK-3β表达显著减少,PP-2A表达显著增加,差异均有高度统计学意义（均P〈0.01）。结论脑益康可通过增加PP-2A的表达和抑制GSK-3β的表达减轻AD模型大鼠tau蛋白的过度磷酸化。     

脑室注射Aβ1—40对海马NAPOR基因表达的影响

目的：研究脑室注射Aβ1－40对海马NAPOR基因表达的影响。方法：利用立体定向仪将Aβ1－40注射脑室，建立大鼠AD模型，采用逆转录PCR方法研究NAPOR在海马的差异表达，结果：通过莫氏水迷宫实验及胆碱乙酰转移酶的基因表达验证AD模型成功，NAPOR的RT－PCR结果表明该基因片段的AD鼠海马高表达，结论：NAPOR为RNA结合蛋白，其表达的时空模式与神经元凋亡密切相关，结果提示Aβ1－40对海马神经元的毒性可能通过改变NAPOR基因的表达，促进神经元凋亡而实现。     

脑健胶囊防治老年性痴呆神经递质改变实验研究

在腹腔注射D－半乳糖造成大鼠衰老的基础上，双侧海马注射喹啉酸造成拟老年性痴呆学习记忆损害模型。观察AchE MAO 5-HT的活性，检测脑健胶囊对老年性痴呆大鼠神经递质的影响。结果：脑健胶囊能够降低AchE MAO活性，增加5－羟色胺含量，证明脑健胶囊对AD有保护和治疗作用。     

脑灵颗粒对AD模型大鼠行为学及海马内Aβ蛋白的影响

目的观察脑灵颗粒对Alzheimer病(AD)模型大鼠行为学及脑内海马区域老年斑的影响。方法以D-半乳糖致亚急性衰老并铝盐注射制作AD大鼠模型,行γ-电迷宫实验检测学习记忆能力,免疫组化SP法观察海马部位Aβ的变化。结果脑灵颗粒能改善模型大鼠的学习记忆能力,显著降低海马CA区、齿状回Aβ免疫阳性神经元的细胞数、平均灰度值(P<0.05,P<0.01)。结论脑灵颗粒抑制和清除海马结构中Aβ的沉积,是改善模型大鼠学习记忆障碍的作用机制之一。     

脑室注射Aβ1—40对大鼠皮质和海马纤连蛋白基因表达的影响

目的：研究脑室注射Aβ1-40对大鼠皮质、海马纤连蛋白基因表达的影响。方法：通过脑室注射Aβ1－40，建立大鼠AD模型，采用逆转录PCR方法研究纤连蛋白在皮质、海马的表达情况。结果：通过Morris氏水迷宫实验、脑片刚果红染色及胆碱乙酰转移酶表达水平等方面验证AD模型成功，在AD鼠皮质、海马纤连蛋白基因高表达。结论：纤连蛋白为整合素的配体，Aβ1-40诱导基基因高表达可能介导Aβ1-40与小胶质细胞的结合，激活小胶质细胞促进神经元死亡。     

Z_n~(2+)对AD大鼠海马微管相关蛋白-2表达的影响

目的研究锌离子（Zn^2＋）对阿尔茨海默病（AD）大鼠海马微管相关蛋白-2（MAP-2）表达的影响。方法大鼠60只分4组：正常组、模型组和AD前补锌组、AD后补锌组。采用β-淀粉样肽（amyloid，Aβ）大鼠侧脑室注射制作AD动物模型，行为学检测和大鼠海马组织电镜切片观察检测动物模型。用免疫荧光染色和Westem blot法检测大鼠海马组织MAP-2的表达。结果Aβ脑室内灌注造成Aβ沉积的AD模型在行为学和病理改变上一定程度地模拟了AD。模型组和AD后补锌组大鼠海马区MAP-2蛋白表达与正常组大鼠相比显著下降，MAP-2蛋白荧光检测发现模型组和AD后补锌组大鼠海马区MAP-2阳性神经元数量明显减少，AD前补锌组大鼠海马区MAP-2蛋白表达和MAP-2阳性神经元数量与正常组相比差异无显著性。结论在AD形成期间适量补锌可显著改善海马受损神经元细胞结构和细胞骨架蛋白的结构及含量。而在AD形成之后，补锌已不能引起细胞结构的改善。     

丹参酮对阿尔茨海黩病样大鼠海马内乙酰胆碱酯酶和一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨丹参酮治疗阿尔茨海黩病（Alzheimer‘s disease,AD)样大鼠的神经化学机制。方法 应用凝聚态β-淀粉样肽1-40片段（Aβ1-40）在大鼠海马齿状回背侧进行微量注射以建立AD样记忆障碍的动物模型；利用改良的乙酰胆碱酯酶（AChE)组织化学方法观察大鼠海马内各亚区胆碱能纤维的变化；用免疫组织化学方法检测大鼠海马内神经元型一氧化氮合酶（nNOS)、诱导型一氧化氮合酶（iNOS)的表达。结果 大鼠双侧海马内注射Aβ1-40（μg）14d后，海马内各亚区AChe阳性纤维面积百分比显著低于对照组；海马内iNOS的表达上调，而nNOS的表达则明显降低。此外，大鼠海马各亚区内AChE阳性纤维面积百分比与iNOS细胞数存在显著负相关，丹参酮50mg/kg连续灌胃14d后，分别对上述变化有不同程度的改善作用。结论 丹参酮治疗AD样大鼠的作用机制可能民保护脑内胆碱能系统和调节NOS的表达有关。     

AD模型小鼠海马和小脑Aβ的沉积与相关miRNAs表达的变化

目的通过对比观察AD模型小鼠海马与小脑Aβ沉积和相关miRNAs表达的变化,探讨AD模型小鼠小脑是否存在Aβ沉
积和相关miRNAs的差异表达。方法选择12月龄大小的APPswe/PS△E9双转基因AD小鼠作为实验组（EG）,同月龄的同种
系的野生型小鼠C57为对照组（CG）,每组各12只。将小鼠脑组织分为左右两部分,右侧脑组织行刚果红染色检测淀粉样物质
在海马及小脑的沉积;左侧脑组织分别用于提取海马及小脑的miRNA,应用实时荧光定量PCR方法分别检测两组小鼠海马及
小脑组织的miRNA-135a-5p、miRNA-298-5p、miRNA-466b-3p和miR-669f-3p的表达情况。结果刚果红染色：实验组小鼠海马
及小脑均可见橘红色的Aβ沉积,对照组小鼠海马及小脑均未见橘红色的Aβ沉积。实时荧光定量PCR：四种miRNAs在实验组
海马的表达均低于对照组（P<0.05）;miRNA-135a-5p、miRNA-298-5p 和miR-669f-3p 在实验组小脑的表达低于对照组（P<
0.05）;miRNA-298-5p和miR-669f-3p在实验组海马的表达低于小脑（P<0.05）。结论APPswe/PS△E9双转基因AD小鼠小脑中
也存在Aβ沉积,其形成可能与miRNA-135a-5p、miRNA-298-5p和miR-669f-3p的表达下调有关。
     

β-淀粉样蛋白致大鼠Alzheimer病模型的研究

目的 :模拟人类Alzheimer病 (AD)的大鼠病理模型 ,观察其学习记忆及病理性改变。方法 :大鼠双侧海马微量注射聚合态Aβ1 40 制备AD动物模型 ,Y 型迷宫测定大鼠学习记忆能力 ,HE染色、刚果红染色和银染检测病理变化。结果 :海马内注射Aβ1 40 可引起大鼠学习记忆能力下降 ,注射区Aβ沉积 ,神经元丢失及胶质细胞增生 ,神经原纤维缠结。结论 :Aβ1 40 海马内注射能较好的模拟AD的学习记忆障碍、神经元损伤等行为学和病理学等方面的特征 ,作为AD研究较好的动物模型。     

脑健冲剂对AD大鼠海马CA1区BDNF和5-HT影响的实验研究

目前,对AD的研究相当深入,机理比较清楚。新药繁多,但疗效不很理想,中医中药复方治疗AD,具有一定优势。所以我们采用脑健冲剂治疗AD。一、材料与方法 1.药物与试剂:D-半乳糖:上海试剂二厂,批号990131。Aβ:Sigma公司提供。BDNF蛋白试剂盒:Sigma公司。5-HT检测试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司) 2.试验动物与分组:108只Wistar雄性大鼠,随机分成6组:中药保护组、中药治疗组、西药对照组、模型组、假损     

补元聪脑汤对AD大鼠胆碱能系统的影响

目的:以补肾祛痰化瘀立法组方(补元聪脑汤)治疗阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)模型大鼠,并观察其海马区胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性变化。方法:在大鼠海马区内注入鹅膏蕈氨酸(IBO)和β样淀粉蛋白1-42肽段(Aβ1-42)混合液造成AD模型,以补元聪脑汤和西药脑复康混悬液分别灌胃治疗。通过比色法测定大鼠海马内ChAT和AchE活性。结果:补元聪脑汤能增加AD大鼠海马内的ChAT和AChE活性。结论:补元聪脑汤对AD模型大鼠海马区ChAT和AChE活性变化有明显改善。     

脑室注射Aβ1—40对海马MAO—B、ChAT、TH基因表达的影响

目的 研究脑室注射Aβ1－40对海马单胺氧化酶B（MAO－B）、胆碱乙酰转移酶（ChAT）、酪氨酸羟化酶（TH）基因表达的影响。方法 利用立体定向仪将Aβ1－40注射脑室，建立大鼠阿尔采海默病（AD）模型，采用逆转录PCR技术研究MAO－B、ChAT、TH在海马的差异表达。结果 通过莫氏水迷宫实验及胆碱乙酰转移酶的基因表达验证AD模型成功，MAO－B、ChAT、TH的RT－PCR结果表明表明该基因片段在AD鼠海马低表达。结论 MAO－B、ChAT、TH低表达，使神经递质Ach、DA合成减少，参与AD病理过程。