响应面法优化航天杂交构树叶总黄酮提取工艺及体外抗弧菌活性研究

【目的】优化航天杂交构树叶总黄酮提取工艺,测定其体外抗弧菌活性。【方法】以总黄酮得率为指标,采用加热回流提取法,通过单因素试验结合Box-Behnken响应面法优化航天杂交构树叶总黄酮的最佳提取工艺。同时采用纸片扩散法和微量稀释法测定航天杂交构树叶总黄酮提取物及不同极性有机溶剂萃取物对哈维氏弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、创伤弧菌、非01霍乱弧菌、嗜水气单胞菌的抑菌圈直径和最低抑菌浓度(MIC)。【结果】(1)最佳提取工艺:乙醇浓度70%、料液比1∶20[(m/g)∶(V/mL)]、2 h/次、100℃加热回流提取3次,航天杂交构树叶总黄酮得率为(6.02±0.14)%。(2)抑菌环直径:哈维氏弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌、嗜水气单胞菌,>17 mm;溶藻弧菌、非01霍乱弧菌,>12 mm。较不同极性有机溶剂萃取物敏感。(3)MIC值:航天杂交构树叶总黄酮提取物对不同弧菌的MIC值由低至高依次为嗜水气单胞菌<副溶血弧菌<哈维弧菌=溶藻弧菌=创伤弧菌<非01霍乱弧菌,较不同极性有机溶剂萃取物的抗菌活性强。【结论】该工艺条件适用于航天杂交构树叶总黄酮的制备,得率较高。航天杂交构树叶总黄酮提取物具有较强的抗弧菌活性,是不同极性成分间协同作用的结果。     

查尔酮化合物Butein-0908对5种水产动物病原菌的抑菌作用

目的 研究查尔酮化合物Butein-0908对5种水产动物病原菌的抑菌活性.方法 采用纸片扩散法和二倍稀释法,测定化合物Butein-0908对副溶血弧菌、嗜水气单胞菌、鳗弧菌、哈维氏弧菌和温和气单胞菌的最低抑菌质量浓度和最低杀菌浓度.并检测化合物Butein-0908对病原菌菌体生长曲线的影响.结果 试验结果 表明,化合物Butein-0908对副溶血弧菌、鳗弧菌和嗜水气单胞菌有较强的抑菌效果,最低抑菌质量浓度均为8.87、13.43、16.48 mg/L,最低杀菌质量浓度分别为18.48、27.69、34.15 mg/L;对温和气单胞菌和哈维氏弧菌的抑菌效果弱于副溶血弧菌、嗜水气单胞菌和鳗弧菌.其中对副溶血弧菌的抑制效果最佳.使致病菌的迟缓期延长2~7 h,提示Butein-0908可能通过影响致病菌生长繁殖来达到抑菌的效果.结论 Butein-0908可通过影响致病菌生长繁殖来达到抑菌的效果     

富含生物碱的7种中草药提取液抑菌活性观察

目的：研究富含生物碱的7种中草药的抑菌活性方法。95％乙醇提取其有效成分后用滤纸片扩散法检测其抑菌活性．等倍稀释法检测其最小抑菌浓度(MIC)．滤纸条法观察协同作用,并测定各提取液生物碱含量。结果：7种中草药均有不同程度的抑菌作用,尤以益母草和苦参效果更强、更普遍;马兜铃与黄芪、马兜铃与益母草、益母草与黄芪对抑制金黄色葡萄球菌,马兜铃与苦参对抑制枯草杆菌分别有协同作用。苦参、山豆根及益母草提取液中生物碱浓度较高。结论：富含生物碱的7种中草药有抑菌活性,作为抗菌资源极具应用前景。     

七组美容祛斑复方药的体外抑菌实验

采用琼脂平板扩散法测定七组美客祛斑复方药对16种病原细菌、植物病原真菌和皮肤致病真菌的杀菌活性.并采用稀释倍数法检测七组纯中药提取物的最低抑菌浓度(MIC,mg/mL).结果表明:组方一和组方三对16种试验菌株均有较强的抑制活性;组方五和组方七对15种拱试菌株有不同程度的抑菌作用;而其他三组组方抑菌作用效果差.     

厚朴不同部位的体外抑菌试验研究

目的探讨厚朴不同部位的体外抑菌活性。方法制备厚朴不同部位的水提物溶液;利用试管稀释法测定上述溶液对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果厚朴(皮)作用最好,厚朴果实活性较低,厚朴叶居两者之间。其中厚朴(皮)对大肠埃希菌作用最强,MIC=0.125g/m L,对金黄色葡萄球菌MIC=0.25g/m L,对铜绿假单胞菌MIC=1g/m L;厚朴果实水提物在1g/m L的浓度下对金黄色葡萄球菌有一定的抑菌作用;厚朴叶水提物在1g/m L的浓度下对3种供试菌均有抑制作用。结论厚朴不同部位都有一定的抑菌活性。     

藤茶总黄酮抗炎及抑菌作用的实验研究

目的:探讨藤茶总黄酮的抗炎及抑菌作用,以验证该药材的相关药效。方法:采用二甲苯致小鼠耳廓急性炎症法对藤茶总黄酮的抗炎作用进行研究;采用平板打孔法测定藤茶总黄酮的抑菌效果,以试管两倍稀释法测定藤茶总黄酮的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果:藤茶总黄酮高剂量组抗炎效果显著,低、中剂量组抑制效果不明显;藤茶总黄酮对5种供试菌均有抑菌效果,且抑制志贺氏菌效果最显著,抑制大肠杆菌效果最不显著。结论:藤茶总黄酮具有较好的抗炎及抑菌作用。     

固公果根提取物对肠道致病菌的体外抑菌活性研究

【目的】测定固公果根提取物不同极性萃取部位对5种肠道致病菌的体外抑菌活性。【方法】采用试管稀释法测定固公果根提取物不同极性萃取部位对肠产毒性大肠埃希菌、福氏志贺菌、鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌和肠产毒素金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)。【结果】水饱和正丁醇层对受试菌株的抑菌作用最强,MIC为39～156μg/ml;乙酸乙酯萃取层抑菌活性较强,MIC为156～625μg/ml;氯仿萃取层抑菌活性较差,MIC>1 250μg/ml;水萃取层抑菌活性最差,MIC>2500μg/ml。【结论】固公果根提取物乙酸乙酯萃取层和水饱和正丁醇层对受试菌株有较好的抑菌活性。     

两面针叶抗菌活性部位研究

目的研究两面针叶不同溶剂萃取部位对6种菌株的抗菌活性,为评价两面针叶抗菌活性部位提供实验依据。方法应用液体试管两倍稀释法测定两面针叶不同提取部位对大肠埃希菌、乙型副伤寒沙门菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、副溶血性弧菌等菌株进行最低抑菌浓度和最低杀菌浓度测定。结果乙酸乙酯部位对其中的4个菌株有抑菌活性,它们的抑菌活性依次为：副溶血性弧菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌;正丁醇部位对白色念珠菌的抑菌活性最好,其最低杀菌浓度（MBC）和最低抑菌浓度（MIC）分别为750μg/mL和375μg/mL;水层对副溶血性弧菌抗菌活性最强;其MBC和MIC分别为750μg/mL和375μg/mL。结论乙酸乙酯部位、正丁醇部位及水层对白色念珠菌、副溶血性弧菌均有较好的抗菌活性,可考虑综合应用两面针叶在抗菌活性方面的应用与研究。     

九香止泻肠溶片对副溶血弧菌活性及小鼠小肠功能亢进模型的影响

目的探讨九香止泻肠溶片对副溶血弧菌活性以及对新斯的明所致的小鼠小肠功能亢进的影响。方法采用琼脂扩散法测定抑菌圈直径,液体培基测定法与平皿倾注法测定最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);给小鼠皮下注射甲硫酸新斯的明0.15 mg/kg造成小肠功能亢进造模,灌胃10%炭末生理盐水,测定小肠推进率。结果九香止泻肠溶片在50 mg/mL浓度对副溶血弧菌表现出较强的抗菌作用,其作用优于肠康片,MIC为50 mg/mL,MBC为500 mg/mL;与模型组比较,九香止泻肠溶片各剂量组小肠推进率显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);其中高剂量组明显优于肠康组差异有统计学意义(P<0.05)。结论九香止泻肠溶片具有显著的抗副溶血弧菌活性、抑制小肠功能亢进作用。     

金叶女贞内生真菌分离及抑菌活性

［摘要］目的　探讨金叶女贞内生真菌的多样性及其次生代谢产物抑制细菌活性．方法　采用植物组织块培养分离法从金叶女贞茎和叶中分离内生真菌,分别进行YPD液体培养,将培养物过滤后用丙酮萃取次生代谢产物,以大肠杆菌（Escherichia coli）、绿脓杆菌（Pseudomonas aeruginosa）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）为试验指示菌株,用滤纸片法分别测定次生代谢产物对3种供试菌的抑菌活性．结果　从金叶女贞茎和叶中共分离得到29株内生真菌,有25株内生真菌对试验菌株有一定的抑制作用,占总分离菌株的86.2%．不具抗菌活性的菌株为4株,占总分离菌株的13.8%．结论　金叶女贞茎、叶中均存在丰富的内生真菌资源,其次生代谢产物具有良好的抑菌活性．     

酸角的化学成分及生物活性研究现状

酸角（Tamarindus indica Linn.）为苏木科酸角属的亚热带常绿大乔木经济植物。酸角各部位中不仅含有丰富的营养成分,还在传统医学中广泛应用。迄今的研究证明,酸角叶、果肉、籽及根皮提取物具有较好的抗菌、抗炎、解毒、止痛、降血糖及降血脂等生物活性。人们在对酸角提取物的化学成分进行研究中分离鉴定了多种类型的次生代谢产物,引起广泛的关注。作者以近年来有关酸角化学成分及生物活性的研究成果进行综述,旨在为酸角的深入研究和应用开发提供有益的参考依据。     

融合表达的副溶血弧菌不耐热性溶血毒素包涵体复性的研究

目的 构建融合表达载体,获得具有生物活性的副溶血弧菌不耐热性溶血毒素。方法 克隆tlh基因,构建表达载体pET32a+/tlh,融合表达副溶血弧菌不耐热性溶血毒素,用8 mol/L的尿素溶解包涵体,亲和层析纯化目的蛋白,采取逐步透析、降低蛋白浓度、加入氧化还原剂等复性方法。结果 复性蛋白具有溶血活性及免疫原性。结论 通过克隆tlh基因,构建融合表达载体pET32a+-tlh,采取纯化、复性方法,获得具有融血活性及免疫原性的副溶血弧菌不耐热性溶血毒素。     

Screening for anti-pancreatic lipase properties of 28 traditional Thai medicinal herbs

Objective:To screen the effect of 28 medicinal plants on inhibition of pancreatic lipase and evaluate the phytochemical contents of extracts.Methods:The ethanolic extracts of 28 traditional Thai herbal medicines were assayed for their in vitro activities against porcine pancreatic lipase using p-nitrophenyl butyrate as a substrate.Quantitative estimation of flavonoids,phenolics,and alkaloids was done.Results:Extracts from four herbs,Memecylon edule Roxb.,Garcinia vilersiana Pierre,Cryptolepis elegans Wall.and Phyllanthus chamaepeuce Ridl.,at a concentration of100 mg/m L,strongly inhibited porcine pancreatic lipase by 90.97%,92.04%,94.64%and95.38%,respectively.There was a significant positive correlation between phenolic content and inhibition activity.Inhibition activity was significantly correlated with flavonoid and with alkaloid contents.Conclusions:From this result,it could be concluded that herbs represent a rich of antipancreatic lipase compounds,in particular,Cryptolepis elegans Wall.and Phyllanthus chamaepeuce Ridl.It is suggested that the phytochemical compounds from these plants may be applied for the prevention and treatment of obesity or hyperlipidemia.     

融合表达的副溶血弧菌不耐热性溶血毒素包涵体复性的研究

目的 构建融合表达载体，获得具有生物活性的副溶血弧菌不耐热性溶血毒素。方法 克隆tlh基因，构建表达载体pET32a ／tlh，融合表达副溶血弧菌不耐热性溶血毒素，用8mol／L的尿素溶解包涵体．亲和层析纯化目的蛋白．采取逐步透析、降低蛋白浓度、加人氧化还原剂等复性方法。结果 复性蛋白具有溶血活性及免疫原性。结论 通过克隆tlh基因，构建融合表达载体pET32a -tlh，采取纯化、复性方法，获得具有融血活性及免疫原性的副溶血弧菌不耐热性溶血毒素。     

Screening of anti-SIV drugs from Chinese medicinal herbs

The inhibitory activities of more than 40 species of Chinese medicinal herbs or their single chemical components against simian immunodeficiency virus (SIV) have been studied. The study revealed that four species of medicinal herbs and a single chemical component had a more than 50% inhibition effect on SIV antigen expression, and the inhibitory rate of five other herbs on SIV antigen expression was between 30%～50%. The results suggest Chinese medicinal herbs could inhibit SIV activity.     

3种闽产中药体外对大鼠血小板聚集的影响

为观察闽产巴戟天、养心草、龙须藤85%乙醇提取物对体外ADP诱导的SD大鼠血小板聚集的影响,采用大鼠血小板加中药孵育,比浊法测定血小板聚集率.结果:巴戟天、养心草、龙须藤均具有抗血小板聚集作用,其中巴戟天、养心草、龙须藤的85%乙醇提取物在体外具有抗血小板聚集作用,巴戟天、养心草优于阿司匹林;龙须藤与阿司匹林相当.     

食物中毒中分离的副溶血性弧菌的分子分型研究

目的运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术研究深圳市罗湖区2005-2007年食物中毒事件中分离获得的49株副溶血性弧菌的分子流行情况。方法样品采用荧光PCR与传统分离培养同时检测,对分离获得的副溶血性弧菌阳性菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE),BioNumerics软件对图谱进行聚类分析。结果 49株副溶血性弧菌中,有12株不能分型,其余36株副溶血性弧菌分离株大致可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3个群,相同血清型的菌株其PFGE型大致相同,同一起食物中毒的菌株间有较高的相关性。结论罗湖区副溶血性弧菌食物中毒存在流行克隆株,PFGE分子分型技术在食物中毒追踪溯源方面有重要提示性作用。     

副溶血性弧菌耐药检测和分子生物学分型

目的 了解福州市副溶血性弧菌耐药情况及PFGE分型,为副溶血性弧菌污染引起的食物中毒防控提供科学依据。方法 收集福州市2018—2020年分离自福州市超市的海产品、养殖场所的水产品、养殖水、闽江水及食源性疾病暴发事件病例的副溶血性弧菌150株,采用Not I限制性内切酶对进行副溶血性弧菌酶切,以脉冲场凝胶电泳进行PFGE分型,并对对其中128株副溶血性弧菌进行耐药检测。结果 128株副溶血性弧菌对氨苄西林和头孢唑啉耐药率分别为82.6%和3.1%,对大部分抗生素敏感。150株副溶血性弧菌经酶切电泳后形成分子量在20~1 100 kb不同的12~18个条带,显示明显的遗传多样性,以85%相似度为标准,共分成120种PFGE型别。5起食源性疾病暴发事件菌株之间相似率在84.8%~97.2%,1起找到中毒食品,4起未找到。分离自同一养殖场同一池塘白鲢鱼和养殖场水2株副溶血性弧菌同源性达97.8%。结论 福州市副溶血性弧菌对于氨苄西林耐药率高,对大部分抗生素敏感,显示福州市沿海及江河湖抗生素污染可能较低。福州市同一起暴发病例菌株间具有同源性,不同海产品和海产品和闽江水之间环境分离菌株相似率低,亲缘关系相对较远, 可能和样品采集数量和质量有关,提示在暴发事件流行病学调查中应采集更多的环境样本,以准确找到病原菌污染源头。     

深圳市2010年食品中副溶血弧菌检测分析

目的了解深圳地区2010年食品中副溶血弧菌血清型及在食品中的分布状况、生物学特征。方法对食品中检出的159株副溶血弧菌进行血清学分型,并对14株O4群副溶血弧菌进行脉冲场凝胶电泳分子分型和毒力基因TLH、TDH、TRH检测。结果 159株副溶血弧菌共分46个血清型,血清型以O2：K28最多,占6.67%,14株O4群副溶血弧菌分子分型相似性均在80%以下,菌株谱型差异较大。其毒力基因TLH＋、TDH-、TRH-。结论食品中分离出的副溶血弧菌菌型非常分散,食品之间存在严重交叉污染,应加强食品卫生监督及流通环节的规范化管理。