LPS对小鼠巨噬细胞HIF-1α表达的影响

目的观察在体外常氧条件下，LPS的刺激是否影响巨噬细胞HIF-1α的表达及其机制。方法收集Balb／c小鼠的腹腔巨噬细胞并分组进行体外培养，刺激组给予LPS、对照组给予PBS并作用10h后。采用RT-PCR法检测HIF-1α、VEGF基因的表达水平，应用细胞免疫化学染色法检测HIF-1α蛋白的表达水平。结果LPS刺激组HIF-1α基因表达无明显改变，但HIF-1α蛋白表达显著增加且VEGF基因表达上调（均P〈0．01）。结论常氧条件下，LPS刺激下的巨噬细胞可以在转录后水平上调HIF-1α蛋白的表达，并可通过上调靶基因VEGF的表达参与急性炎症反应。     

N-乙酰半胱氨酸(NAC)对体外LPS刺激下小鼠巨噬细胞HIF-1α表达的影响

目的:探讨NF-κB抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞内HIF-1表达的影响及意义。方法:取健康Balb/c小鼠,分离腹腔巨噬细胞并将其分为正常对照组、LPS刺激组、不同剂量NAC加LPS组。采用RT-PCR检测各组HIF-1α、TNF-αmRNA表达,细胞免疫化学检测HIF-1α、VEGF的蛋白表达。结果:与LPS刺激组比较,NAC+LPS组HIF-1αmRNA表达无明显差异、TNF-αmRNA明显减少,HIF-1α、VEGF蛋白表达显著减少(P<0.01)。结论:NAC可降低LPS刺激下小鼠巨噬细胞TNF-αmRNA表达,TNF-α的降低可能通过HIF-1α转录后途径下调该蛋白的表达,进而下调VEGF表达。提示在急性炎性反应中,NF-κB可能通过增加TNF-α在转录后水平影响HIF-1α的表达。     

缺氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子在婴幼儿血管瘤的表达及意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)在婴幼儿血管瘤和婴幼儿正常皮肤的表达情况。方法:采用免疫组织化学S-P染色法,检测HIF-1α、VEGF在婴幼儿血管瘤及正常皮肤的表达。结果:HIF-1α、VEGF表达水平在血管瘤与正常皮肤之间差异有统计学意义(P<0.05)。血管瘤中HIF-1α与VEGF表达呈正相关。结论:HIF-1α与VEGF在血管瘤中呈阳性表达,可能参与促进血管瘤血管生成。     

晚期糖化终产物受体在小鼠急性肝损伤中的表达及意义

目的探讨晚期糖化终产物受体(RAGE)在刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠急性肝损伤中的表达及意义。方法将72只昆明种小鼠随机分为对照(NS)组、ConA组,分别于注射后2、6、12、18、24、48 h眼球取血并留取肝脏标本,用赖氏法检测血清中谷氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)活力;HE染色法检查肝组织病理学改变;RT-PCR技术检测肝组织高迁移率族蛋白1(HMGB1)、RAGE、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-lβ)mRNA的表达;免疫组化法检测肝组织HMGB1蛋白的表达;Westernblot法检测肝组织RAGE蛋白的表达;ELISA法检测血清中TNF-α、IL-lβ含量。结果成功构建ConA诱导小鼠肝损伤模型;注射ConA 2 h肝组织中HMGB1 mRNA表达即增加,至18 h达峰值(P<0.01);HMGB1蛋白表达明显聚集于坏死区域;肝组织RAGE mRNA于12 h表达上调;RAGE蛋白的表达于24 h达到峰值,与NS组相比差异有统计学意义(P<0.01);肝组织TNF-αmRNA表达分别在6、24 h出现2个峰值,血清TNF-α含量在注射ConA 2 h达峰值(455.25 ng/L),随后逐渐减低,至48 h与NS组相比无明显差异;注射ConA各时间点小鼠肝组织与血清中IL-1β水平均显著高于NS组(P<0.01)。结论在ConA诱导小鼠急性肝损伤模型中,损伤肝组织RAGE的表达显著增加,这可能与诱导肝组织损伤中炎症因子的进一步产生有关。     

橙皮苷对急性化学性肝损伤小鼠的保护作用及机制

目的 探讨橙皮苷(HDN)对D-氨基半乳糖胺(D-GalN)致小鼠急性化学性肝损伤的保护作用及可能机制.方法 建立D-GalN诱导小鼠急性化学性肝损伤模型,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,放射免疫分析法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)活性、肝匀浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量.RT-PCR法检测小鼠肝脏白细胞介素1β(IL-1β)mRNA表达水平,并作肝组织切片病理观察.结果 病理学切片显示HDN能明显改善模型组小鼠肝脏组织病变范围与程度,使炎细胞浸润减少;并且HDN能降低D-GalN急性肝损伤小鼠血清ALT、AST、TNF-α水平;降低肝组织匀浆MDA含量;提高SOD、GSH-Px活性;抑制IL-1β mRNA表达.结论 HDN对D-GalN致小鼠急性化学性肝损伤具有保护作用,可能与其降低小鼠血清中TNF-α的水平、抑制IL-1β mRNA表达及抗脂质过氧化有关.     

LPS对小鼠腹腔巨噬细胞HIF-1α表达的影响及其机制的研究

目的:探讨在体外常氧环境下脂多糖(LPS)对小鼠腹腔巨噬细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响及其可能的机制。方法:分别以LPS单独或联合NF-κB抑制剂柳氮磺胺吡啶、一氧化氮合酶抑制剂L-NMMA作用于BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HIF-1αmRNA的变化,用免疫细胞化学法检测HIF-1α蛋白和血管内皮生长因子蛋白(VEGF)的变化。结果:LPS作用于小鼠巨噬细胞10h后,HIF-1αmRNA无明显变化,HIF-1α蛋白和VEGF蛋白明显增加(P<0.01),NF-κB抑制剂柳氮磺胺吡啶和一氧化氮合酶抑制剂L-NMMA均可降低LPS对HIF-1α蛋白和VEGF蛋白表达的诱导作用(P<0.05)。结论:LPS可通过转录后途径上调HIF-1α的表达,HIF-1α蛋白的表达又可进一步诱导其靶基因VEGF的表达。     

HIF-1α、VEGF在疣状胃炎中的表达及意义

目的观察疣状胃炎胃黏膜组织中HIF-1α、VEGF的表达,探讨疣状胃炎的可能发生机制及其与癌前病变的关系。方法经胃镜及病理确诊的疣状胃炎94例,其中非成熟型46例,,成熟型48例,在隆起处近中心部位及距隆起病变边缘5cm的平坦胃黏膜处各取胃黏膜组织2块;设同期经胃镜和病理均确诊为慢性浅表性胃炎(慢性轻度、非活动型、Hp阴性)30例作为对照,取胃窦小弯处取胃黏膜组织2块;14C标记尿素呼气试验检测患者幽门螺旋杆菌(Hp)感染情况,免疫组化EnVision二步法检测患者胃黏膜组织中HIF-1α、VEGF的表达情况。结果疣状胃炎患者疣状病灶部位组织HIF-1α、VEGF的表达均较疣状旁5cm平坦处明显增高(P<0.01)。非成熟型和成熟型疣状胃炎患者其胃黏膜疣状病灶部位HIF-1α、VEGF的表达均较对照组明显增高(P<0.01,P<0.05);但两组之间HIF-1α、VEGF的表达差异无显著性(P>0.05)。疣状胃炎患者胃黏膜组织HIF-1α与VEGF的表达水平呈明显的正相关(r=0.729,P<0.01)。结论 HIF-1α及其下游因子VEGF在疣状胃炎患者疣状隆起病灶部位表达增强,可能参与了疣状胃炎的形成和发展。     

VEGF、HIF-1α在大鼠慢性哮喘模型中的表达及地塞米松的干预效应

目的 观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)在慢性哮喘大鼠中的表达水平,探讨其在慢性哮喘气道重塑中的作用.方法 以卵清清蛋白(OVA)致敏及反复激发建立大鼠慢性哮喘模型,激发前30 min胃内灌注地塞米松1 mg/kg,最后一次激发12 h内处死大鼠,常规病理切片观察大鼠肺内炎症情况、总气管壁厚度、气管内壁厚度及气道平滑肌厚度.免疫组化检测气道壁HIF-1α、VEGF蛋白的表达,RT-PCR观察大鼠肺部HIF-1α、VEGF mRNA的表达.结果 慢性哮喘模型组大鼠气道支气管及血管周围大量炎症细胞聚集,总气管壁、气管内壁及气道平滑肌增厚,肺组织HIF-1α、VEGF mRNA及HIF-1α、VEGF蛋白的表达增高(P＜0.01).哮喘大鼠致敏前使用地塞米松后气道炎症较轻,减轻总气管壁、气管内壁及气道平滑肌增厚.各组大鼠肺组织内HIF-1α、VEGF蛋白的表达与气道壁厚度呈正相关.结论 HIF-1α、VEGF可能参与了慢性哮喘大鼠的气道重塑,早期使用地塞米松可以预防气道重塑.     

伏立诺他对致死性烫伤大鼠生存率和心脏功能的影响及机制研究

目的 研究伏立诺他在无静脉补液条件下对致死性烫伤大鼠生存率和心脏功能的影响。方法　建立50%TBSAIII°烫伤大鼠模型,60只雄性SD大鼠随机分为假烫组（n=12）：37℃水浴浸泡,烫伤组（n=24）：伤后腹腔内注射0.25ml生理盐水,SAHA组(n=24)：伤后腹腔内注射SAHA（7.5mg/kg,溶于0.25ml 0.9%生理盐水）。伤后观察6h,各组取8只大鼠,取腹主动脉血测血浆CK-MB、TNF-α水平,处死动物取心肌组织,采用伊文斯蓝( EB) 染色法检测心脏组织血管通透性,caspase-3活性试剂盒测定心肌组织内caspase-3活性,Western blot测定心肌组织内HIF-1α、iNOS、BNIP3蛋白表达水平;各组剩余大鼠观察12h生存率。结果　烫伤组伤后12小时内全部死亡,给与SAHA处理后12h生存率为50%,大鼠存活时间明显延长,与烫伤组比较有统计学意义（P<0.05）;与假烫组比较,烫伤组伤后CK-MB水平、血管通透性、TNF-α含量、caspase-3活性明显升高,HIF-1α及iNOS、BNIP3蛋白表达明显增加（P均<0.05）;而给与SAHA处理后,CK-MB水平、血管通透性、TNF-α含量、caspase-3活性明显下降,HIF-1α及iNOS、BNIP3蛋白表达明显降低,比较均具有统计学意义（P均<0.05）。结论　在无液体复苏条件下,SAHA能延长致死性烫伤大鼠生存时间,保护心脏功能,降低心脏血管通透性,其作用机制可能与其减轻全身炎症反应、降低caspase-3活性,抑制HIF-1α及下游靶基因iNOS、BNIP3的表达有关。     

急性心肌梗死并全身炎性反应综合征TNF-α和CRP表达的临床研究

目的观察急性心肌梗死并全身炎性反应综合征肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和C反应蛋白(CRP)的表达情况。方法选择急性心肌梗死患者86例,其中合并全身炎性反应综合征患者32例,另选40例健康成人为对照组,分别检测其TNF-α和CRP水平。结果所有急性心肌梗死患者TNF-α和CRP水平都高于对照组(P<0.01),且合并全身炎性反应综合征患者TNF-α和CRP水平均明显高于单纯急性心肌梗死患者(P<0.01)。结论急性心肌梗死并全身炎性反应综合征患者炎症因子TNF-α和CRP表达强烈。     

低氧诱导因子1α在骨肉瘤中的表达及其与血管生成的相关性

目的:探讨低氧诱导因子1α(HIF-1α)在骨肉瘤中的表达及其与肿瘤血管生成的关系.方法:低氧及模拟低氧条件下体外培养MG-63骨肉瘤细胞,另外收集30例骨肉瘤组织石蜡标本及20例新鲜冷冻骨肉瘤组织标本,采用RT-PCR、Western印迹、ELISA及免疫组织化学等方法,分别检测骨肉瘤细胞及组织中HIF-1α及其靶基因血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA及蛋白表达,并计算微血管密度(MVD).结果:在低氧及模拟低氧条件下,MG-63骨肉瘤细胞HIF-1α的mRNA表达无明显变化,但蛋白表达明显增加,而VEGF的mRNA、蛋白表达都增加(P＜0.05).20例新鲜骨肉瘤组织中HIF-1α mRNA总表达率为90%,VEGF mRNA总表达率为100%,均明显高于瘤旁组织(P＜0.05).HIF-1α、VEGF蛋白在骨肉瘤石蜡组织中阳性表达率分别为86.7%、93.3%,明显高于瘤旁组织的6.7%、26.7%(P＜0.05).Spearman等级相关分析HIF-1α蛋白表达与MVD明显相关(P=0.005,r=0.767),VEGF蛋白表达与MVD正相关(P＜0.002,r=0.701).结论:骨肉瘤中存在HIF-1α的高表达,可能与肿瘤血管生成相关;HIF-1α高表达可能提示骨肉瘤患者预后不良.     

冬虫夏草对糖尿病肾病大鼠肾组织HIF-1α及VEGF表达的影响

目的：观察缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在大鼠糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾组织中的表达及冬虫夏草(Cordyceps sinensis,CS)干预后对其的影响,探讨冬虫夏草的抗缺氧损伤的肾保护机制。方法：健康雄性Wistar大鼠通过一次性腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)制作成糖尿病模型,4周时测定24 h尿蛋白>30 mg/d为DN模型大鼠(n=30),随机分为糖尿病肾病组(DN组,n=15)和冬虫夏草组(CS组,n=15),另取15只正常大鼠作为对照组(NC,n=15)。CS组予CS提取原液5.0 g/(kg?d)灌胃,NC和DN组均予以等量饮用水灌胃,分别于灌胃2,4,6周时随机处死三组大鼠各5只,检测24 h尿蛋白定量、尿β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(β-N-acetyl glucosaminidase,NAG酶)、血清肌酐水平;HE及MASSON染色观察肾脏组织形态学变化;反转录PCR方法检测HIF-1α和VEGF mRNA表达;免疫组织化学方法检测肾组织中HIF-1α及VEGF蛋白的表达。结果：与NC组相比较,DN组肾小管空泡变性明显,肾小球系膜区基质增多,24 h尿蛋白排泄量、尿NAG酶、血肌酐显著升高,肾组织HIF-1α和VEGF mRNA及其蛋白表达均显著增加(均P<0.05),两者的表达均随着病程延长而逐渐增强,且两组HIF-1α与VEGF表达呈正相关(r=0.850,r=0.887,均P<0.05);与DN组相比较,CS组大鼠肾小管病变程度减轻,24 h尿蛋白排泄量、尿NAG酶、血肌酐降低,肾组织HIF-1α和VEGF mRNA及其蛋白表达均下调(均P<0.05),但仍明显高于NC组(P<0.05),但CS治疗第4周、第6周HIF-1α的mRNA及蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论：DN病大鼠肾组织HIF-1α及VEGF表达上调,两者呈正相关,提示DN肾组织存在慢性缺氧。CS可通过下调DN肾组织HIF-1α及VEGF的表达起到抗慢性缺氧损伤的肾保护作用。     

低氧诱导因子-1α和VHL对小鼠软骨内成骨过程的调控机制

目的 研究低氧诱导因子1α (HIF-1α)和von Hippel-Lindau (VHL)在成骨细胞水平对小鼠软骨内成骨过程的调控机制.方法 以HIF-1α或VHL基因条件性敲除小鼠为实验对象,分别于4、8、12周龄时,采用组织化学染色观察、显微CT扫描、骨小梁面积测量、钙元素含量检测、四环素荧光双标记观察、Real-time PCR及Western blotting等方法,观察和比较基因敲除小鼠与野生型小鼠(对照组)软骨内成骨过程的差异.结果 与野生型对照小鼠比较,HIF-1α基因敲除组小鼠在软骨内成骨过程中血管内皮生长因子(VEGF)表达减少,新骨形成速度减慢,钙元素含量和骨小梁面积减少(P<0.05);而VHL基因敲除组小鼠在软骨内成骨过程中VEGF表达增加,新骨形成速度加快,钙元素含量和骨小梁面积增加(P<0.001).结论 在小鼠软骨内化骨过程中,VHL/HIF-1α信号通路对VEGF表达具有调控作用,通过调节血管形成,最终影响骨量形成.     

缺氧诱导因子抑制剂YC-1对口腔鳞癌Glut1、VEGF表达的抑制效应

目的 探讨缺氧诱导因子抑制剂YC-1对口腔鳞癌(OSCC)中葡萄糖转运蛋白-1(Glut1)、血管内皮生长因子(VEGF)基因的调控作用。方法 (1)应用免疫组织化学法检测60例OSCC患者和12例癌旁正常组织中的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、Glut1、VEGF的表达。(2)人舌癌Tca8113细胞在体外进行培养,将其分成缺氧组、常氧组。将浓度为0、10、100 μmmol/L的HIF-1α抑制剂YC-1分别加入二组后,通过RT-PCR技术检测OSCC细胞中HIF-1α、Glut1、VEGF mRNA的转录水平。结果 免疫组化发现:OSCC癌中HIF-1α、Glut1、VEGF的阳性表达明显多于正常组织,其中HIF-1α的阳性表达与Glut1的阳性表达、VEGF的阳性表达均呈正相关。RT-PCR结果表明,加入YC-1后,HIF-1α的表达在缺氧组和常氧组中均降低,差异有统计学意义(P＜0.05)。HIF-1α的表达在缺氧组随着YC-1浓度不同无剂量依从性,差异无统计学意义(P＞0.05)。在YC-1作用下,缺氧组和对照组Glut1、VEGF在人舌癌Tca8113细胞中的表达均显著(P＜0.05)降低,缺氧组内Glut1、VEGF的表达随着YC-1浓度增加有剂量依从性(P＜0.05)。结论 HIF-1α、Glut1、VEGF高表达于OSCC组织中。YC-1显著抑制人舌癌Tca8113细胞HIF-1α、Glut1、VEGF分子的表达;YC-1可能通过下调HIF-1α、Glut1、VEGF的表达来抑制OSCC的生长。     

病毒性心肌炎病程中肿瘤坏死因子α和Fas mRNA表达的变化

目的 观察病毒性心肌炎(VMC)的小鼠模型中肿瘤坏死因子(TNF)-α和Fas mRNA在心肌中表达的动态变化,探讨它们在VMC中的可能作用及其机制。方法 腹腔接种柯萨奇病毒B组3型(CVB3)建立VMC小鼠模型。在接种病毒后第7、14和28天,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测小鼠心肌中TNF-α和Fas mRNA表达水平,并观察心肌形态学改变的差别。结果 与正常对照组相比,VMC小鼠TNF-α和Fas mRNA表达明显增加。TNF-α mRNA表达高峰在接种后第7天,14d后仍有大量表达,28d后表达明显减少;Fas mRNA在接种第7天后明显增加,14d后达到高峰,28d后仍有一定量表达。结论VMC小鼠心肌中TNF-α和Fas mRNA表达明显增加。TNF-α参与炎症反应和心肌损伤,Fas是引起心肌细胞坏死的重要蛋白。     

Eag1钾离子通道、HIF-1α以及VEGF在子宫颈癌中的表达及其临床意义

目的:探讨Eag1钾离子通道、缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在不同病变宫颈组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化方法(S-P法)检测40例慢性宫颈炎、40例CIN和100例宫颈癌组织中Eag1、HIF-1α及VEGF表达情况,并分析其与宫颈癌临床病理因素的关系。结果:宫颈鳞癌组织内Eag1、HIF-1α与VEGF蛋白的表达明显高于宫颈上皮内瘤变组和慢性炎症组(P<0.01);非角化型宫颈鳞癌组织中Eag1、HIF-1α与VEGF的表达高于角化型宫颈鳞癌(均为P<0.05);Ⅱb期及以上期宫颈癌组织中Eag1、HIF-1α与VEGF表达高于Ⅰ^Ⅱa期(均为P<0.05);伴有淋巴结转移者三者的表达均高于无淋巴结转移(均为P<0.05);放疗前三者的表达高于放疗后(均为P<0.05);Eag1、HIF-1α与VEGF三种蛋白在宫颈鳞癌组织表达呈正相关(均为P<0.05)。结论:Eag1、HIF-1α和VEGF的表达在宫颈鳞癌发生发展过程中起重要作用,与宫颈鳞癌进展密切相关,是宫颈鳞癌早期诊断和治疗的潜在靶点。     

低分子肝素对COPD模型大鼠肺组织HIF-1α、HO-1及VEGF表达的影响

目的研究低分子肝素(LMWH)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响。方法将60只SPF级Wistar大鼠随机分为正常对照组、COPD模型组及LMWH干预组。采用烟熏联合气管内注入脂多糖的方法建立COPD动物模型;LMWH组在建立COPD模型同时皮下注射低分子肝素干预。观察3组大鼠肺组织病理变化,并应用免疫组化的方法检测LMWH干预前后肺组织中HIF-1α、VEGF、HO-1的表达情况。结果 COPD组及LMWH组大鼠肺组织中HIF-1α、VEGF及HO-1的表达均较正常对照组明显升高,差异有显著性(F=58.97～88.12,q=6.70～18.65,P<0.01);与COPD模型组相比,LMWH干预组大鼠肺组织的病理改变较轻,HIF-1α、VEGF及HO-1表达下降,差异有显著性(q=8.64～11.19,P<0.01)。结论 HIF-1α、VEGF和HO-1可能均参与COPD发生发展,参与气道炎症及气道重塑;LMWH可以减轻气道炎症及气道重塑。     

缺氧诱导因子-1α在宫颈癌组织中的表达及其与微血管生成的关系

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)在宫颈癌中的表达及其与微血管生成的关系.方法 应用免疫组织化学技术分别检测43例宫颈癌、32例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和43例正常宫颈组织中的HIF-1α、VEGF的表达及微血管密度(MVD).结果 HIF-1α、VEGF、MVD在正常宫颈组织、CIN、宫颈癌中的阳性表达率均依次升高,3组之间比较均有显著性差异(均P<0.01);HIF-1α的表达与VEGF呈正相关(P<0.05),VEGF的表达与MVD也呈正相关(P<0.05).结论 HIF-1α、VEGF及MVD在宫颈癌的发生、发展中起重要作用,HIF-1α在宫颈癌组织中呈高表达,并通过VEGF表达促进肿瘤血管形成.HIF-1α可能成为治疗宫颈癌新的靶基因.     

低氧诱导因子-1α和VHL对小鼠软骨内成骨过程的调控机制

目的 研究低氧诱导因子1α (HIF-1α)和von Hippel-Lindau (VHL)在成骨细胞水平对小鼠软骨内成骨过程的调控机制.方法 以HIF-1α或VHL基因条件性敲除小鼠为实验对象,分别于4、8、12周龄时,采用组织化学染色观察、显微CT扫描、骨小梁面积测量、钙元素含量检测、四环素荧光双标记观察、Real-time PCR及Western blotting等方法,观察和比较基因敲除小鼠与野生型小鼠(对照组)软骨内成骨过程的差异.结果 与野生型对照小鼠比较,HIF-1α基因敲除组小鼠在软骨内成骨过程中血管内皮生长因子(VEGF)表达减少,新骨形成速度减慢,钙元素含量和骨小梁面积减少(P<0.05);而VHL基因敲除组小鼠在软骨内成骨过程中VEGF表达增加,新骨形成速度加快,钙元素含量和骨小梁面积增加(P<0.001).结论 在小鼠软骨内化骨过程中,VHL/HIF-1α信号通路对VEGF表达具有调控作用,通过调节血管形成,最终影响骨量形成.     

HIF-1α与VEGF在乳腺癌组织中的表达及与放疗敏感性的相关性研究

目的探讨缺血诱导因子-1α(HIF-1α)与血管内皮生长因子(VEGF)蛋白在原发性乳腺癌组织中的表达及与放疗疗效的关系。方法采用SABC免疫组化方法,检测乳腺癌组织(88例)和正常乳腺组织(20例)中HIF-1α与VEGF蛋白的表达。并分析HIF-1α或VEGF蛋白表达与原发性乳腺癌组织临床病理学特征和预后的关系。结果 HIF-1α与VEGF蛋白在原发性乳腺癌组织中的阳性表达率分别为69.32%(61/88)、78.40%(69/88),两者存在显著正相关性(r=0.68,P=0.006)。二者均与癌组织的临床病理学特征有关;27例HIF-1α阴性表达患者的生存时间明显长于61例阳性表达患者(P=0.008);19例阴性VEGF患者的生存时间明显长于69例阳性VEGF患者(P=0.006)。HIF-1α阳性表达患者中,VEGF表达强度及放疗后局部未控率均高于HIF-1α阴性组(P=0.01);其中16例VEGF阴性表达患者的生存时间明显长于42例VEGF阳性表达患者的生存时间(P=0.01)。结论 HIF-1α与VEGF蛋白表达可能与原发性乳腺癌的发生、浸润、转移有关,二者高表达与乳腺癌放射抗拒性有密切关系。