胃癌组织中细胞凋亡与PCNA,P16表达的研究

目的:对胃癌组织标本的细胞凋亡和PCNA、P16表达产物进行细胞生物学及临床病理学研究。方法:应用SP免疫组织化学方法及原位TUNEL法。结果:高/中分化癌组,凋亡指数为(10.4±2.1%),低分化癌组和粘液癌组分别为(4.1±2.3%)、(3.5±1.6%)。浸润深度不超过肌层(含肌层)组凋亡指数为(8.6±3.5%)全层浸润组为(4.3±2.1%)。伴淋巴结转移组凋亡指数为(3.7±1.5%),不伴有淋巴结转移组凋亡指数为(9.2±4.1%)。低分化癌组和粘液癌组中PCNA阳性率分别为60%、77.3%,高/中分化癌组为41.7%;浸润深度未超过肌层组(含肌层)中,阳性率为28.6%,全层浸润组阳性率77.2%。在PCNA阳性组凋亡指数为(3.4±1.2%),PCNA阴性组凋亡指数为(7.6±4.1%),二者呈显著性负相关,p<0.05。在高/中分化组P16表达阳性率为66.7%,在低分化组和粘液癌组分别为33.3%、44.4%。结论:胃癌中细胞凋亡与组织的分化程度正相关;与浸润深度和淋巴结转移负相关。PCNA表达与胃癌组织分化程度负相关;与浸润深度、淋巴结转移正相关。联合检测细胞凋亡与PCNA表达有助于对胃癌组织的生物学行为进行评定。p16;与胃癌组织的分化程度正相关。     

胃癌组织P53、PCNA蛋白表达及细胞凋亡的研究

目的探讨P53、PCNA蛋白表达和胃癌细胞凋亡关系及其它们在胃癌发生发展中的可能作用。方法采用TUNEL及流式细胞术分别检测60份胃癌、癌旁正常黏膜组织细胞凋亡和P53、PCNA蛋白表达。结果胃癌组织细胞凋亡率明显低于癌旁正常组织（〈0.01）;P53、PCNA蛋白在胃癌组织中的表达率明显高于癌旁正常组织（〈0.01）。胃癌P53阳性组细胞凋亡率低于P53阴性组,而PCNA平均荧光强度高于P53阴性组。低分化胃癌病例其P53、PCNA蛋白高于高中分化的病例。有淋巴结转移的胃癌病例其P53、PCNA蛋白高于无淋巴结转移的病例。结论胃癌组织中癌细胞凋亡明显受到抑制,胃癌组织中P53高表达及细胞增殖活跃状态在胃癌的发生发展过程中起重要作用。     

胃癌组织Fas基因表达与细胞凋亡和增殖的关系

目的: 探讨Fas基因表达水平与胃癌细胞增殖活性及细胞凋亡程度的关系.方法: 胃癌组织53例,用原位杂交及免疫组化染色法分别检测Fas mRNA,Fas蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,并采用凋亡细胞原位检测方法对组织切片中的凋亡细胞进行观察和比较.结果: 胃癌组织表达Fas mRNA 28例(52.8%),表达Fas蛋白24例(45.3%),两种方法检测结果一致性非常显著(P<0.01).胃癌53例增殖期细胞标记物PCNA表达及凋亡细胞的阳性率均为100%,细胞凋亡和细胞增殖指数呈显著性负相关(r=-0.982,P<0.01).随胃癌细胞Fas蛋白表达水平升高,PCNA阳性细胞指数相应减少,肿瘤凋亡细胞指数则相应增加.Fas蛋白组细胞凋亡指数显著高于-/ 组(P<0.01),Fas蛋白组PCNA指数显著高于 / 组(P<0.01).结论: 胃癌细胞Fas基因表达可引起细胞凋亡增加与增殖减少.     

胃癌组织COX-2的表达及其与细胞增殖和凋亡的关系

目的 :探讨环氧化酶 - 2 (cyclooxygenase - 2 ,COX - 2 )在胃癌组织中的表达与癌细胞增殖和凋亡的关系。 方法 :采用免疫组织化学的方法检测 4 3例胃癌患者COX - 2和增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达 ,用TUNEL法检测原位细胞凋亡的情况。分别计算细胞增殖指数 (MI)和凋亡指数 (AI)。结果 :胃癌组织COX - 2表达的阳性率为 6 0 .4 7% ,明显高于对照组 (P <0 .0 1)。COX - 2的高表达与胃癌淋巴结的转移和临床分期有关 ,与肿瘤大小、浸润深度、分化程度均无关。COX - 2阳性胃癌组中MI高于COX - 2阴性胃癌组 ,而AI却低于COX - 2阴性胃癌组 (P均 <0 .0 1)。结论 :COX - 2的过度表达可促进胃癌细胞增殖、抑制细胞凋亡 ,在胃癌的发生、发展过程中起着重要的作用。     

survivin和caspase-3在胃癌中的表达以及与凋亡的关系

目的 :评价胃癌组织中survivin和caspase 3的表达情况以及与细胞凋亡的关系。　方法 :采用免疫组化的方法 ,对 6 0例无术前放、化疗史的胃癌患者的手术标本进行survivin和caspase 3检测 ,并用原位末端标记法标记凋亡细胞。　结果 :survivin主要在癌组织中表达 ,caspase 3在正常粘膜的表达高于癌组织 ,survivin的表达强度与组织学分级及临床病理分期有关 (P <0 .0 1 )。caspase 3的表达强度随组织分化程度增高而增强 ;而在不同临床病理分期间无显著差异 (P >0 .75 )。胃癌组织中survivin与caspase 3的表达无直线相关关系 ,survivin阳性组凋亡指数明显低于阴性组 (P <0 .0 0 5 ) ,survivin阴性、caspase 3阳性组平均凋亡指数最高为 1 .5 3%。　结论 :survivin的表达与胃癌分化程度及病理分期密切相关 ,可作为提示预后的重要指标。survivin作为凋亡抑制蛋白显著抑制癌组织的细胞凋亡 ,但不能完全抑制caspase 3的表达     

p27kip1与肝癌细胞增殖和凋亡的关系

目的: 探讨p27kip1对肝细胞癌增殖和凋亡的影响. 方法: 利用DNA缺口末端标记技术(TUNEL)检测52例肝细胞肝癌(HCC)组织中的凋亡细胞,同时采用免疫组织化学方法检测p27kip1和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达. 结果: 在包膜受侵犯者及低分化的肝癌组织中p27kip1蛋白表达和凋亡指数明显降低,而PCNA的表达却明显增高(P<0.05). 进一步的观察显示,在p27kip1高表达的HCC中其凋亡指数(0.56±0.27)明显高于低表达组(0.39±0.21, P<0.05),而PCNA的阳性指数却显著降低(29±7 vs 33±5, P<0.05). 结论: 随着HCC恶性程度的增高,p27kip1基因的表达降低,提示p27kip1蛋白表达降低可能是导致肝癌细胞的过度增长和凋亡机制缺陷的因素之一.     

肝细胞癌细胞凋亡、增殖及其相关调控因子表达的研究

目的：探讨肝细胞癌细胞凋亡、增殖及其相关调控因子表达特征与HCC分化状态的关系。方法：分别以末端脱氧核苷酸转移酶（TdT)介导的d-UTP缺口末端标记技术（TUNEL）和SP免疫组化方法检测35例人HCC与其癌旁组织中凋亡细胞和增殖细胞核抗原（PCNA）及p53,Fas的表达特征，并结合临床资料进行分析。结果：凋亡细胞在HCC组织中呈散在分布，其凋亡细胞指数显著低于癌旁组织，而PCNA指数明显于癌旁组织，在HCCⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级中，凋亡细胞指数分别为0．53，0．42，0．20，0．21。PCNA指数分别为0．06，0．41，0．63，0．80，均存在显著差异；HCC组的p53表达随Edmondson分级呈递增现象。而Fas均呈低水平表达，结论：HCC的分化程度与细胞凋亡指数呈正相关，而与PCNA指数呈负相关，HCC细胞凋亡为p53依赖型，p53基因高突变，Fas表达的下调的肝癌组织其恶性程度较高，提示预后不佳。     

肺癌组织中bcl-2和Bax的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系

目的 :探讨bcl 2基因和Bax基因在肺癌中表达及其与细胞凋亡和增殖的关系。方法 :对 38例肺癌组织及 2 1例肺部良性组织 ,应用原位杂交技术检测了bcl 2mRNA表达 ;用TUNEL技术对细胞凋亡进行了检测 ,用免疫组织化学法对Bax蛋白和PCNA进行检测。结果 :肺癌组织bcl 2基因、Bax蛋白及PCNA的表达明显高于肺部良性组织 ,P <0 .0 1;肺癌组织中凋亡指数和增殖指数均高于肺部良性组织 ,P <0 .0 1;肺癌组织中bcl 2阳性凋亡指数明显低于bcl 2阴性 ,P <0 .0 1;而Bax阳性凋亡指数明显高于Bax阴性 ,P <0 .0 1;它们之间的增殖指数均无差异。肺癌组织中bcl 2 (+) Bax(- )的凋亡指数明显低于bcl 2 (- ) Bax(+) ,P <0 .0 1;它们之间的增殖指数无差异。bcl 2(- ) Bax(- )肺癌组织中的凋亡指数明显高于肺部良性组织 ,P <0 .0 1。结论 :bcl 2、Bax蛋白在肺癌中的表达率较高 ,同时在肺癌中细胞凋亡和细胞增殖亦较活跃 ;bcl 2基因过度表达抑制细胞凋亡 ,Bax蛋白过度表达促进细胞凋亡 ,而它们表达与细胞增殖无明显关系。bcl 2基因、Bax蛋白、细胞凋亡和PCNA很可能在肺癌的发生、发展、诊断、预后和治疗方面起着重要的作用     

TRAIL、Survivin mRNA表达与胃癌凋亡发生的相关关系

目的:检测肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)和SurvivinmRNA在胃癌中的表达及其与凋亡的相关关系。方法:利用原位杂交技术检测67例胃腺癌及对应的正常胃粘膜中TRAIL和SurvivinmRNA的表达,同时利用原位末端标记技术(TUNEL)检测癌组织中的凋亡指数(AI)。结果:①TRAILmRNA在正常胃粘膜中的阳性表达率高于癌组织中的阳性表达率。②胃癌组织中细胞凋亡指数为1.85+0.66。③TRAILmRNA阳性组与阴性组、SurvivinmRNA阳性组与阴性中凋亡指数分别存在着显著性差异(P<0.05)。④TRAILmRNA和SurvivinmRNA在胃癌中的阳性表达率呈明显的负相关(P<0.05)。⑤TRAILmRNA和SurvivinmRNA与胃癌组织中的患者的年龄、性别、肿瘤直径、部位、大体分型、侵润深度及有无淋巴结转移无明显的关系(P>0.05),与肿瘤的分化程度有关(P<0.05)。结论:TRAIL和Survivin在胃癌凋亡过程中起着重要的作用,TRAIL可诱导凋亡,Survivin则抑制凋亡发生。     

细胞凋亡、PCNA、p53和Fas与肝细胞癌临床病理特征关系的研究

目的探讨肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中细胞凋亡、增殖及其相关调控因子p53和Fas表达特征与HCC临床病理的关系.方法分别以末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的d-UTP缺口末端标记技术(TUNEL)和S-P免疫组化方法检测35例人HCC与其癌旁组织中凋亡细胞和增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen, PCNA)及p53、Fas的表达特征,并结合临床病理资料进行统计学分析.结果细胞凋亡指数(AI)、PCNA指数(LI)、p53和Fas表达与HCC的性别、年龄及肿瘤大小无显著性差异;AI、p53和Fas表达与HCC的组织学类型间也无显著差异(P＞0.05);LI与HCC组织学类型有关:实体型较梁状型和腺样型明显增高(P＜0.01);随Edmondson分级、TNM分期增加,AI逐渐减少,而LI及p53表达强度则逐级增高,Fas表达无显著变化(P＞0.05).结论 HCC的恶性程度与细胞凋亡指数呈负相关,而与PCNA指数呈正相关.HCC细胞凋亡为p53依赖型,p53基因高突变、Fas表达的下调的肝癌组织其分化程度较低,提示预后不佳.     

胃癌中生存素蛋白的表达及其与幽门螺杆菌的关系

目的 研究生存素(Survivin)蛋白在胃癌中的表达及其与细胞凋亡、临床病理因素及幽门螺杆菌感染的关系。方法应用免疫组织化学S-P法检测胃癌组织中Survivin的表达,TUNEL技术检测细胞凋亡,金标法检测幽门螺杆菌。结果 150例胃癌中73例Survivin表达阳性,阳性表达组的凋亡指数显著低于阴性表达组(P<0.05)。幽门螺杆菌感染阳性组Survivin的表达(59.8％)显著高于阴性组(35.3％)(P<0.05)。Survivin的表达在不同肿瘤大小、组织分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移及不同临床分期之间无显著性差异(P>0.05)。结论 Survivin在胃癌组织中的表达可抑制胃癌细胞凋亡,与幽门螺杆菌感染有关,两者在胃癌的发生中可能有协同作用;Survivin的表达对胃癌预后无明显影响。     

胃癌变过程中Hp感染与凋亡基因Bcl-2表达相关性研究

目的 研究胃癌变过程中幽门螺杆菌(Hp)感染与凋亡基因Bcl-2表达、细胞凋亡和临床意义.方法 用快速尿素酶法、W-S银染法和美蓝法联合检测62例慢性浅表性胃炎(CSG)、55例慢性萎缩性胃炎(CAG)、52例肠化生(IM)、46例不典型增生(AH)、65例胃癌(GC)组织中Hp的感染,并采用免疫组化及TUNEL法分别检测Bcl-2蛋白的表达及细胞凋亡水平.结果 Hp感染率、Bcl-2蛋白阳性表达率均随着胃癌形成中病变恶性程度的加重而明显上升.Hp感染率CAG、IM、AH和AC组较CSG,GC组较CAG组均明显升高 (P＜0.05);IM、AH、GC组阳性表达率明显高于CSG组(P＜0.01,P＜0.05);GC组的阳性表达率明显高于IM组(P＜0.01);AH、GC组Hp阳性患者Bcl-2蛋白表达率均高于Hp阴性患者(P＜0.05);IM、AH、GC组中Bcl-2阳性者凋亡指数均低于Bcl-2阴性者;Hp感染阳性胃癌患者组织中Bcl-2蛋白表达与组织分化程度有明显关系,低未分化胃癌Bcl-2蛋白表达明显高于高中分化胃癌(P＜0.01).结论 在胃黏膜癌变过程中,Hp感染可能通过逐渐上调Bcl-2基因的表达,抑制细胞凋亡和分化发挥致癌作用.     

骨肉瘤中细胞增殖和细胞凋亡的关系及临床意义

目的:探讨骨肉瘤组织中细胞凋亡与细胞增殖的关系及临床意义。方法:采用原位末端转移酶法和免疫组织化学技术分别检测骨肉瘤和良性骨瘤中凋亡细胞密度和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果:4种亚型骨肉瘤组织中凋亡细胞密度均明显低于良性骨肿瘤组织,而PCNA阳性细胞密度明显高于良性骨肿瘤组织;在骨肉瘤4种亚型中凋亡细胞密度和PCNA阳性细胞密度呈明显负相关,而在良性骨肿瘤中两者呈线性正相关。结论:在骨肉瘤的发生中可能普遍存在细胞凋亡机制的紊乱可能以低凋亡高增殖表现为多,并认为细胞凋亡检测尚难以作为一种独立的预后判断指标。     

宫颈鳞癌组织中细胞凋亡的表达与临床生物学行为的关系

目的 :探讨细胞凋亡在宫颈鳞癌组织中的表达及其与宫颈鳞癌组织学分级、盆腔淋巴结转移及临床分期的关系。方法 :采用DNA末端缺口标记技术和免疫组化技术 ,检测 15例正常宫颈组织 ,2 2例CINⅠ /Ⅱ ,16例CINⅢ和 5 2例浸润性宫颈鳞癌 (ISCC)组织中细胞凋亡标记指数 (A LI)、增殖细胞核抗原标记指数 (PCNA LI) ,并分析A LI与宫颈鳞癌组织学分级、盆腔淋巴结转移及临床分期的关系。结果 :在正常宫颈上皮未检测到凋亡细胞 ,随着CIN病变的进展 ,A LI增高 (P <0 0 5 ) ,但在ISCC ,A LI明显低于CIN(P <0 0 1) ;PCNA LI随宫颈鳞癌各级病变的进展逐渐增高 (P <0 0 5 ) ;A LI随宫颈鳞癌组织分化级别的增高而减少 (P <0 0 5 ) ,在临床Ⅱ期组低于I期组 (P <0 0 5 ) ,盆腔淋巴结转移组低于无转移组 (P <0 0 5 )。结论 :细胞凋亡在宫颈鳞癌发生发展过程中以抑制细胞增殖而发挥负调控作用 ,在ISCC阶段调控紊乱。细胞凋亡与宫颈鳞癌的临床生物学行为相关。检测细胞凋亡有助于宫颈鳞癌进展及预后的评估     

胃黏膜良恶性病变中增殖和凋亡的关系研究

目的 :探讨细胞凋亡和增殖在胃癌发生发展过程中的作用。方法 :对 115例胃癌及癌前病变患者和正常人采用原位末端标记法 (TUNEL)及免疫组化技术检测胃黏膜上皮细胞凋亡和增殖。结果 :正常人、浅表性胃炎、萎缩性胃炎伴肠上皮化生、不典型增生、胃癌患者的细胞凋亡指数分别为 (4 .6 2± 1.87) %、(10 .2 1± 2 .4 9) %、(2 4 .6 3± 35 .19) %、(19.32± 4 .0 7) %、(19.86± 4 .6 1) %。PCNA指数分别为 (3.9l± 1.0 4 ) %、(13.5 2± 4 .71) %、(2 0 ,2 2±4 .83) %、(39.81± 6 .35 ) %、(5 4 .77± 10 .8) %。胃黏膜癌变过程中 ,起初三个阶段细胞凋亡和PCNA同时增加 ,而至萎缩性胃炎伴肠化生 ,细胞凋亡指数显著减少 ,PCNA指数显著增加。结论 :在胃癌演变过程中细胞凋亡起重要作用 ,PCNA是反映胃癌细胞增殖活性的一项重要指标     

贲门癌组织中PCNA、p53和Bc1-2的表达及其意义

目的探讨细胞增殖与细胞凋亡在贲门癌发生发展中的作用。方法60例贲门癌按照病理类型及分化程度分为五组,观察PCNA、p53和Bcl-2在各组癌组织中的分布、表达并进行灰度值及凋亡指数的比较和研究。结果①贲门非黏液性腺癌:PCNA、p53显示随着癌组织分化程度的降低,其灰度值呈明显的降低趋势;Bcl-2在各组癌组织中呈现灰度值基本一致的阳性表达;凋亡指数在低、未分化癌组织中显著降低;②贲门黏液性腺癌:PCNA在大部分癌细胞中呈阳性表达;p53和Bcl-2在大部分癌细胞中呈阴性表达;凋亡指数在各组贲门癌组织中最低。结论贲门癌组织中PCNA,p53和Bcl-2的分布、表达与癌组织的病理类型及分化程度密切相关。贲门黏膜组织中细胞凋亡机制的抑制将可导致贲门癌的形成。     

胃癌组织P53、P63蛋白表达及细胞凋亡的研究

目的：探讨P53、P63蛋白表达及细胞凋亡在胃癌发生发展中的可能机制。方法：选择57例手术切除的胃癌及胃癌旁组织,用免疫组化方法检测组织中的P53、P63蛋白表达,同时用Tunel方法检测胃癌组织中的凋亡细胞。结果：胃癌组织P53、P63蛋白表达率显著高于胃癌旁组织（P〈0.05）;低、未分化型腺癌表达率显著高于高、中分化型腺癌（P〈0.05）;有淋巴转移显著高于无转移组（P〈0.05）;P53、P63高表达的癌组织,细胞凋亡指数减少,早期胃癌低于晚期胃癌（P〈0.05）。结论：胃癌组织P53、P63蛋白高表达,可能延缓细胞凋亡;细胞凋亡机制障碍可能是胃癌增生失控的基础。     

cFLIP蛋白在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞凋亡的影响

目的 检测cFLIP蛋白在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征和胃癌细胞凋亡的关系.方法 采用免疫组化(SP)法检测45例胃癌组织、23例癌旁非典型增生组织及21例正常胃黏膜组织中cFLIP蛋白的表达;原位末端标记(TUNEL)法检测胃癌细胞凋亡情况.结果 cFLIP蛋白在胃癌组织中的表达在癌旁非典型增生组织及正常胃黏膜组织中的表达差异有显著性(P＜0.05).胃癌组织中出现cFLIP蛋白的高表达和细胞凋亡的低表达,cFLIP蛋白的表达水平与细胞凋亡指数(AI)成负相关(r=-0.0016,P<0.01).进一步分析发现,在胃癌组织中,肿瘤细胞分化越差,临床分期越晚,以及伴有癌细胞转移淋巴结中,cFLIP蛋白高表达.cFLIP蛋白的表达与患者年龄、组织学分型无关.结论 cFLIP蛋白与胃癌的发生、发展和转移密切相关并可能在抑制胃癌细胞凋亡中发挥重要作用.     

TRAILmRNA与胃癌凋亡关系的研究

目的检测肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)mRNA在胃癌中的表达及其与凋亡的关系.方法利用原位杂交技术检测67例胃腺癌及对应的正常胃黏膜中TRAILmRNA的表达,同时利用原位末端标记技术(TUNEL)检测癌组织中的凋亡指数(AI),并分析它们之间的关系.结果①TRAILmRNA在正常胃黏膜中阳性表达率为95.52%,高于癌组织中的阳性表达率52.24%(P＜0.05);②胃癌组织中细胞凋亡指数为1.85±0.66;③TRAILmRNA阳性组与阴性组中凋亡指数分别为3.06±0.45、1.21±0.13,两组间存在着显著性差异(P＜0.05);④TRAILmRNA与胃癌组织中的患者的年龄、性别、肿瘤直径、部位、大体分型、浸润深度及有无淋巴结转移无明显的关系(P＞0.05);与肿瘤的分化程度有关,分化程度越低,TRAIL的表达率越低(P＜0.05).结论TRAIL可能在胃癌凋亡过程中起重要作用.     

低分化胃腺癌种植瘤Fas表达及细胞凋亡的实验研究

目的　研究低分化胃癌细胞Fas表达及细胞凋亡情况 ,以及两者之间的关系。方法　建立胃低分化腺癌细胞系SGC - 790 1的裸鼠原位种植瘤模型 ,采用免疫组化染色技术及TUNEL法 ,检测Fas表达状态及细胞凋亡。结果　胃癌组织的自发凋亡指数和Fas表达的标记指数均显著低于正常胃粘膜组织 (P <0 .0 1)。结论　低分化胃癌组织存在凋亡明显受抑现象 ,正常粘膜组织的Fas表达高于癌组织。胃癌组织中凋亡受抑制可能与Fas表达低下有关