体外诱导培养健康成人外周血单核细胞源树突状细胞及鉴定

目的：建立体外从健康成人外周血单核细胞（Mo）诱导培养成熟的树突状细胞（DE）的方法。方法：采用连续贴壁法分离正常人外周血单核细胞,在GM-CSF和IL-4的完全培养基中培养。培养5天后收集细胞,重新铺板后继续在TNF-α的完全培养基中培养48小时后,收集细胞和上清液,采用流式细胞术检测DC表型CD80、CD83、CD40的表达;用ELISA法检测上清液中细胞因子IL-12的浓度;用倒置显微镜动态观察DC形态变化。结果：采用连续贴壁法和用GM—CSF、IL-4和TNF—α联合培养可以从人外周血诱导培养出大量的树突状细胞,且高表达CD80、CD83、CD40,表达率分别为84．29％、90．73％、92．38％。DC分泌的细胞因子IL-12浓度为38．52±11．34pg／ml。结论：采用连续贴壁法和用GM．CSF、IL-4和TNF-α联合培养可以从人外周血诱导培养大量的树突状细胞,检测表型CD80、CD83、CD40的表达率和细胞因子IL-12浓度可以鉴定树突状细胞。     

人外周血单核细胞和脐血CD34+细胞来源的树突细胞比较

目的比较从人外周血单核细胞及脐血CD34+细胞诱导树突细胞(DC)的方法及其特性.方法用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞,贴壁法获得单核细胞;经GM-CSF及IL-4诱导获得DC.磁性活化细胞分选系统(MACS)分选脐血CD34+细胞,以GM-CSF、IL-4、TNF-α、SCF、FL、TPO等细胞因子诱导获得DC.用电镜、普通显微镜观察DC形态;流式细胞仪分析DC表型;同种混合淋巴细胞反应(allo-MLR)观察DC刺激T淋巴细胞增殖的能力.结果外周血单核细胞在因子GM-CSF、IL-4、TNF-α,脐血CD34+细胞在GM-CSF、IL-4、TNF-α、SCF、FL、TPO等因子作用下,可生成DC,并表达相应的DC分化抗原CD14、CD80、CD83、CD86、HLA-DR.脐血CD34+细胞具有较强的扩增能力,经2周诱导,体系细胞数可增加173.8士26.7倍,两种来源的DC均能刺激同种异体淋巴细胞的增殖反应.结论外周血单核细胞与脐血CD34+细胞,在体外均可诱导成DC,并具有相应的DC分化抗原和功能.     

人外周血树突状细胞的诱导与鉴定

目的：体外诱导、培养人外周血单核细胞获得不同成熟阶段的树突状细胞（DCs）。方法：用贴壁法从健康人外周血浓缩白细胞获取单核细胞,第一阶段在GM-CSF+IL-4存在的条件下培养7 d,获得未成熟DCs;第二阶段在GM-CSF+TNF-α联合诱导下培养至14 d,获得成熟的DCs。对DCs的形态进行显微镜下观察,用流式细胞仪检测其表型,用MTT的方法对DCs的功能进行检测。结果：获得的未成熟DCs中度表达CD1a、共刺激分子,高表达HLA-DR分子,在DCs的成熟期共刺激分子、HLA-DR及CD83、CD25分子均高度表达,刺激同种异型T淋巴细胞增殖的能力强。结论：成功地建立了诱导人外周血单核细胞获得不同发育阶段DCs的方法,并获得了大量纯度较高的DCs。     

乳腺癌患者外周血中树突状细胞表面标记CD1a、CD83的研究

目的：对乳腺癌患者外周血中培养的树突状细胞（dendritic cells,DC)表面分子CD1a,CD83的表达进行研究。方法：采用密度梯度离心的方法分离人外周血中的单个核细胞，用粒细胞-单核细胞集落刺激因子（GM-CSF），白细胞介素-4（IL-4），肿瘤坏死因子α（TNF-α）细胞因子组合，刺激DC增殖，分化，用标有荧光素的单抗标记培养细胞，在流式细胞仪上分析所培养的细胞。结果：该细胞表达CD1a,CD83分子，但CD1a,CD83在CD3^ T,CD19^ B淋巴细胞上也表达，CD1a,CD83在活化的淋巴细胞上表达水平比未活化的高，CD19^ B细胞上表达水平比CD3^ T细胞高。结论：CD1a,CD83等分子并非DC特有的标记，目前鉴定DC仍然要靠细胞形态，细胞表达CD1a,CD83以及共刺激分子等综合因素来确定DC。     

白介素-2对慢性乙肝患者外周树突状细胞的影响

目的 通过白介素-2刺激体外培养的慢性乙肝患者外周血树突状细胞,检测树突状细胞白介素-2的表达和培养液中IL-12的浓度,以探讨白介素-2对慢性乙肝患者外周血树突状细胞(DC)的影响,进而探讨白介素-2治疗慢性乙肝的作用机理.方法 抽取慢性乙肝患者外周血分离培养树突状细胞,对照组加入GM-CSF和IL-4,试验组加入GM-CSF、IL-4和白介素-2,培养第9天时收集细胞,应用流式细胞仪检测CD,第12天时收集上清,用ELISA法检测IL-12的浓度.结果 应用白介素-2的试验组树突状细胞CD40、CD86、CD80、CD83的表达有所增加,上清中IL-12的浓度也较高.结论 白介素-2促进慢性乙肝患者外周树突状细胞表型成熟和功能增强.     

宫颈癌患者外周血来源的树突状细胞的生物学特性观察

【目的】探讨宫颈癌患者外周血来源的树突状细胞(DC)的生物学特性。【方法】14例Ib期及以上的宫颈癌患者为研究组,24例健康女性为对照组。外周血经密度梯度离心得到单个核细胞,其中附壁成分在含GM-CSF/IL-4的完全淋巴细胞培养液培养。光镜和电镜观察培养细胞的形态变化。培养7d后,计算树突状细胞的产量,流式细胞术分析HLA-ABC、HLA-DR、CD40、CD80、CD1a和CD14的表达,同种异体淋巴细胞的混合淋巴反应(MLR)检测树突状细胞刺激淋巴细胞增殖能力。【结果】经过7d培养,两组均诱导出典型形态和表型的DC。宫颈癌患者单位体积外周血的未成熟DC(ImDC)的产量为67.3×106±33.8×106,较对照组低(P<0.05)。研究组的CD40、CD80和CD1a的平均荧光强度(MFI)分别为18±9,15±6和71±11,均较对照组低(P<0.05);而两组ImDC的HLA-ABC、HLA-DR表达强度相似(P>0.05)。相同PBL/DC比值,研究组ImDC刺激同种异体淋巴细胞增殖能力下降(P<0.05)。【结论】宫颈癌患者的外周血单个核细胞培养的树突状细胞(ImDC)和健康对照组的ImDC具有免疫学差异,提示在应用树突状细胞进行免疫治疗时应考虑这种差异。     

外源性IL-10对单核细胞定向分化为树突状细胞的影响

目的:研究外源性IL-10对单核来源的树突状细胞(dendritic cells,DCs)的影响,为进一步认识IL-10在系统性红斑狼疮(system lupus erythemacosus,SLE)发病机制中的作用提供线索。方法:应用GM-CSF IL-4 TNF-α体系诱导培养单核细胞来源的DCs,同时在该体系中加入与SLE患者血清浓度相当的外源性IL-10(30 pg/ml)。用流式细胞术检测DCs的表型(CD14、CD11c、CD1a、HLA-DR、CD80、CD86和CD83),CCK-8法检测Dcs刺激同种异体淋巴细胞增殖能力,ELISA法检测DCs分泌IL-12p40、IL-10和INF-γ水平。结果:30 pg/ml的外源性IL-10可使单核细胞来源的DCs(monocyte derived-DCs,MDDCs)HLA-DR、CD80、CD86和CD83的表达以及IL-12p40和IFN-γ的分泌水平受到抑制,并使其刺激同种异体T细胞增殖能力下降。结论:外源性IL-10对单核细胞定向分化为DCs产生了抑制作用。进一步证实IL-10在SLE发病机制中发挥了重要作用。     

慢性乙型肝炎患者树突状细胞与CD4+Th细胞分化的关系

目的 探讨慢性乙型肝炎患者树突状细胞(dendritic cells,DCs)与CD4+Th细胞亚群分化的关系.方法 分离慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞,以rhlL-4(50ng/mL)、rhGM-CSF(10ng/mL)和rhTNF-α(100μ/mL)诱导培养DC.以流式细胞仪检测DCs表面CD1a、CD83、CD80、CD和HLA-DR分子的表达情况.免疫磁珠分离外周血CD4+T细胞亚群,PMA+Ionomycin刺激后胞内荧光染色,流式细胞仪检测Th细胞内特征性细胞因子IFN-γ/IL-4以判断Th1/Th2分化.ELISA法检测DCs或Th细胞培养上清中IL-6、IL-12、IFN-γ和IL-4的含量.结果 慢性乙型肝炎患者的DCs表达CD1a、CD83、CD80、CD86和HLA-DR分子的水平明显低于正常人;培养至第7天.慢性乙型肝炎患者DCs分泌的IL-12水平低于正常人,而分泌的IL-6水平高于正常人.与正常人相比,慢性乙型肝炎患者外周血中Th1细胞占CD4+T细胞的百分比较低,Th细胞培养上清中IFN-γ的量也较低.患者DCs与同种异体的健康人Th细胞共培养,刺激Th1型细胞因子IFN-γ产生的能力低于正常人.结论 慢性乙肝患者体内DCs功能的异常可能导致了外周血Th1分化不足.     

小鼠骨髓干细胞体外诱导成熟的树突状细胞对T细胞增殖的影响

目的：研究小鼠骨髓干细胞体外诱导分化的树突状细胞对T细胞增殖的影响,为进一步研究树突状细胞的功能及临床肿瘤的治疗提供有效的实验方法。 方法：应用IL-4和GM-CSF培养小鼠骨髓细胞5~7 d,光镜下观察细胞形态学变化;培养至第5~6天,加入黑色素瘤（B16）冻融抗原继续培养1~2 d,流式细胞仪检测细胞表面分子CD83、CD86,并与同种异体T细胞混合培养72 h,终止培养前16 h加入³H-TdR（18.5 kBq/孔）,γ-液体闪烁仪测定cpm值。 结果：用IL-4和GM-CSF培养3 d可见细胞形态发生改变,细胞形状不规则,培养5~6 d时,有刺状突起、拉长,为典型树突状细胞形态学特征;抗原装载后流式细胞仪检测CD83、CD86表达,IL-4+GM-CSF+TNF-α组（61.68%、71.25%）及IL-4+GM-CSF+冻融抗原组（63.11%、76.88%）明显高于对照组（2.41%、3.88%）及单纯IL-4+GM-CSF培养组（21.86%、28.69%）（P<0.001）,IL-4+GM-CSF+TNF-α组与IL-4+GM-CSF+冻融抗原组比较,CD83和CD86表达差异无显著性;液闪仪检测结果显示,IL-4+GM-CSF+冻融抗原组刺激T细胞增殖的能力明显强于其他组,且差异具有显著性（P<0.001, P<0.05）。 结论：小鼠骨髓细胞体外培养成功地诱导扩增出足量树突状细胞,经肿瘤抗原刺激后绝大部分成熟,并能够刺激同种异体T细胞大量增殖,参与免疫应答。     

黄芪多糖对子宫内膜癌患者外周血单核细胞源性DCs成熟的影响

目的探讨黄芪多糖对子宫内膜癌患者外周血单核细胞源性树突状细胞（DCs）成熟的影响。方法从子宫内膜癌患者外周血中分离单核细胞,以加入IL-4、GM-CSF树突状细胞专用培养基培养5d后,以不同浓度的黄芪多糖（终浓度分别为0、50mg/L、100mg/L、150mg/L）刺激48h,镜下观察DCs形态变化,采用流式细胞术检测树突状细胞表型CD1α、CD83、CD86的表达,以及ELISA法检测细胞上清液中IL-12的含量。结果 150mg/L APS组细胞生长状态最好,具有典型的树枝状突起;150mg/L APS组、100mg/L APS组DCs表面CD1α、CD83及CD86的表达较对照组、50mg/L APS组明显上调（P〈0.05）;150mg/L APS组、100mg/L APS组细胞上清液中IL-12含量高于对照组、50mg/L APS组（P〈0.05）。结论黄芪多糖可促进子宫内膜癌患者外周血单核细胞源性DCs成熟以及IL-12的分泌。     

哮喘患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞与IL- 4,IL- 5的表达

目的:探讨哮喘患者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞与IL- 4,IL- 5的水平变化及其相互关系.方法:采用流式细胞技术检测40例哮喘患者和40例健康对照者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞的表达水平,采用ELISA法检测外周血中IL- 4,IL- 5水平.结果:哮喘患者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞低于健康对照者(P＜0.01);急性发作期哮喘患者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞低于非急性发作期(P＜0.01);哮喘患者IL- 4,IL- 5的表达水平高于健康对照者(P＜0.05);急性发作期患者IL- 4,IL- 5的表达水平高于非急性发作期(P＜0.05);急性发作期哮喘患者外周血CD4 CD25 T细胞与IL- 4,IL- 5的表达水平呈负相关(r分别为-0.675,-0.767,P＜0.01).结论:CD4 CD25 调节性T细胞在哮喘的疾病活动中起着重要作用,是导致哮喘患者细胞免疫失调的重要原因.     

体外培养恒河猴外周血单核巨噬细胞的研究

目的：建立一种简单、经济、高效地培养恒河猴外周血单核巨噬细胞（monocyte-derived macrophage,MDM）的方法。方法：用肝素钠抗凝管采集健康成年中国恒河猴（Macaca mulatta）全血,密度梯度离心法分离外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMCs）。同时用无抗凝剂采血管采集同一只猴外周血,自凝后分离血清。将猴PBMCs置于CELLBIND Surface的96孔（0.8×106个细胞/孔）或48孔培养板（3×106个细胞/孔）中,用含不同百分比的猴自体血清或胎牛血清（fetal calf serum,FCS）的RPMI 1640培养液培养24h后洗弃未贴壁细胞,加入含有猴自体血清或FCS的新鲜培养基继续培养7天后观察细胞形态学。分化良好的猴单核巨噬细胞贴壁能力强,占据板底大部分区域。胞体形态多样,多数呈长梭形。用巨噬细胞标记受体（CD14）抗体染色判断细胞纯度。并用细菌内毒素（LPS）刺激分化的巨噬细胞,检测巨噬细胞炎性因子的表达。此外,用猴艾滋病毒（SIVmac17E-Br、SIVmac251）和人-猴嵌合体艾滋病毒（SHIV KU-1）感染分化良好的猴巨噬细胞,检测病毒在猴巨噬细胞中的复制。结果：在含2%猴自体血清的RPMI 1640培养条件下,大多数（>85%）猴单核细胞能在24h内贴壁,体外分化5-7天后,猴巨噬细胞纯度大于96%。相比而言,含较高浓度（4%,8%或10%）猴自体血清或FCS的RPMI 1640 培养基对猴单核细胞的贴壁和分化作用较差。分化良好的猴巨噬细胞对LPS刺激敏感,可产生多种巨噬细胞炎性因子。此外,这些细胞对SIV或SHIV均易感,产生感染性病毒。结论：含2%猴自体血清的RPMI 1640培养基适于原代猴单核细胞的贴壁和分化。该方法简单、花费少,无需生长因子,且分化效果好,是培养猴艾滋病毒及开展相关免疫学实验的重要手段。     

T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3及IL-17与复发性流产关系的研究

目的:探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3（Tim-3）在复发性流产（RSA）发病机制中的作用。方法:选取2017年12月-2018年7月郑州市中心医院妇产科收治的复发性流产患者36例为RSA组,同期23例健康早孕妇女作为正常早孕组（NP组）,29例仅有少量阴道出血的早孕妇女为先兆性流产组（TA组）。提取分离外周血单核细胞,流式细胞术检测3组研究对象外周血中CD4+Tim-3+T细胞;ELISA检测3组研究对象血清中IL-17的表达;Pearson 相关分析TA组和RSA组患者CD4+Tim-3+T细胞与 IL-17 的相关性;Western blot检测RSA组和NP组自愿人工流产患者绒毛组织中滋养细胞Tim-3蛋白的含量。结果:与NP组相比,TA组和RSA组外周血单核细胞上Tim-3表达降低,外周血IL-17表达增高（P<0.05）;相关性分析提示TA组及RSA组外周血单核细胞上 Tim-3与IL-17之间呈负相关;NP组滋养细胞Tim-3蛋白的含量高于RSA组。结论:外周血单核细胞上 Tim-3可能通过调节 IL-17间接调节Th17/Treg细胞参与先兆流产和RSA的发生。     

IL-10对急性冠脉综合征患者外周血单核细胞LOX-1表达的影响

目的:检测急性冠脉综合征(acute coronary syndromes,ACS)患者外周血单核细胞血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(1ectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1,LOX-1)的表达水平,以及抗炎因子白介素-10(intedeuidn.10,IL-10)对其表达的影响.方法:收集28例健康体检者和28例ACS患者,用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)检测血清中IL-10和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α水平.分离外周血单核细胞进行培养,加或不加IL-10(20μg/L)进行体外干预,检测单核细胞LOX-1蛋白和mRNA表达的变化.结果:与健康对照组相比,ACS患者血清中IL-10和TNF-水平明显升高(P＜0.01).ACS患者外周血单核细胞LOX-1蛋白和mRNA表达明显高于对照组(P＜0.01),IL-10(20G/L,3 h)可明显下调单核细胞LOX-1的蛋白和mRNA表达(P＜0.01).结论:抗炎因子IL-10可能通过抑制ACS患者外周血单核细胞LOX-1的表达而起到稳定斑块的作用,这可能是IL-10抗动脉粥样硬化的又一新机制.     

IL-15诱导CD4+CD25- T细胞向CD4+CD25+调节性T细胞转化的机制探讨

目的初步探讨IL-15诱导CD4+CD25-T细胞向CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)转化的机制。方法采用免疫磁性细胞分离法分离人外周血中的CD4+CD25-T细胞,依据加入细胞因子不同分为4组:对照组、IL-15组、拮抗1组、拮抗2组,其中后3组均于培养的第1天加入IL-15,而拮抗1组和拮抗2组分别于培养第1、3天加入STAT5a封闭性肽。流式细胞仪检测细胞表型变化,3H-TdR掺入法检测IL-15诱导产生的Tregs抑制CD4+CD25-效应T细胞(Teff)增殖的免疫功能,Western blot法检测细胞内p-STAT5的变化。结果与对照组比较,IL-15能诱导CD4+CD25-T细胞中CD25和Foxp3表达上调,IL-15诱导生成的Tregs具有较天然Tregs稍弱的免疫抑制功能。Western blot检测结果显示,IL-15组p-STAT5表达较对照组明显上调。加入STAT5a封闭性肽后,拮抗1组和拮抗2组中CD4+CD25-T细胞中CD25和Foxp3表达下调,但拮抗2组[细胞表型分别为(47.9±6.0)%、(20.7±3.4)%]改变较拮抗1组[细胞表型分别为(30.7±8....     

类风湿关节炎患者外周血Treg细胞及其分泌IL-35水平检测与临床意义

目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血中调节性T细胞(Treg)的数量,以及其所分泌的白细胞介素(IL)-35表达水平与RA发病的相关性.方法 采集45例RA患者(RA组),22例骨关节炎(OA)患者(OA组),26例健康体检者(对照组)的外周血,流式细胞术检测CD4+ CD25+ foxp3+ Treg数量,ELISA检测血浆IL-35水平.分析Treg细胞及其表达的IL-35与临床指标间的相关性.结果 RA组外周血中Treg细胞占CD4+T细胞的百分率[(5.65±2.33)％]较对照组[(4.12±1.75)％]明显升高(P＜0.05);OA组与RA组比较,差异无统计学意义(P=0.086).3组对象foxp3平均荧光强度比较,差异无统计学意义(P＞0.05);DAS28评分越高的患者,其外周血Treg细胞数量和foxp3荧光强度越低.RA组血浆IL-35[(34.22±14.35)ng/L]水平明显低于OA组[(78.63±24.58)ng/L]和对照组[(67.56±25.43)ng/L],差异均有统计学意义(P＜0.05).RA患者Treg细胞数量与红细胞沉降率(ERS)、DAS28评分呈负相关(r=-0.223、-0.343,P=0.023、0.011),而与类风湿因子、C反应蛋白、抗CCP抗体无相关性.结论 RA患者外周血中Treg细胞数量增高,IL-35水平降低;Treg细胞功能缺陷致负调控能力减弱.     

HBsAg阳性孕妇IL-4的表达在HBV宫内传播中的作用

目的 探讨HBsAg阳性孕妇外周血IL-4水平在乙型肝炎病毒（HBV）宫内传播中的表达变化。方法 以陕西省西北妇女儿童医院住院分娩的306例HBsAg阳性孕妇为病例组,74例健康孕妇为对照组进行流行病学调查,采用ELISA法检测孕妇和新生儿外周血乙型肝炎5项指标,采用实时荧光定量PCR检测HBV DNA水平,采用流式液相芯片法检测细胞因子IL-4水平。结果 HBsAg阳性孕妇发生HBV宫内显性感染（DBI）、HBV宫内隐匿性感染（OBI）和HBV宫内传播(BIT)率为11.44%（35/306）、36.60%（112/306）、48.04%（147/306）。对照孕妇IL-4水平低于HBsAg阳性孕妇组、HBV宫内未传播组(NBIT)、显性感染组（DBI）和隐匿性感染组（OBI）,差异均有统计学意义（均有P<0.01）;HBeAg阴性组中DBI组的IL-4水平高于OBI组和HBIT组,差异有统计学意义（P<0.05）; 随着母血中HBV DNA载量的增高,DBI组IL-4水平呈下降趋势（P<0.05）,在HBV DNA载量小于10³ IU/mL时,DBI组IL-4水平高于OBI组（P<0.05）和NBIT组（P<0.01）,并且随着BIT程度的加重,母血中IL-4水平呈增高趋势（P<0.05）;多因素分析显示：孕妇HBeAg和HBV DNA 载量与其IL-4水平呈正相关;孕妇HBeAb与其IL-4水平呈负相关。结论 HBsAg阳性孕妇细胞免疫功能紊乱导致 IL-4水平升高,开展HBsAg阳性孕妇外周血IL-4监测对其新生儿是否发生HBV宫内传播可能具有一定预测作用。     

风湿性心脏病患者外周血 CD3+CD4+T 淋巴细胞与 hs-CRP、IL-6表达的变化及意义

目的：探讨风湿性心脏病患者外周血CD3+CD4+T淋巴细胞表达与超敏C反应蛋白(hs-CRP)及 IL-6的水平和意义。方法风湿性心脏病患者38例,健康者37例(对照),采用流式细胞术检测风湿性心脏病患者外周血 CD3+ CD4+ T 淋巴细胞表达水平,ELISA 测定 hs-CRP 和 IL-6的水平。结果风湿性心脏病患者外周血 CD3+ CD4+ T 淋巴细胞表达水平明显高于健康者(P <0.05)。风湿性心脏病患者外周血 hs-CRP 及 IL-6水平明显高于健康者(P <0.05)。风湿性心脏病患者外周血 CD3+CD4+ T 淋巴细胞表达水平与外周血 hs-CRP、IL-6呈正相关关系(P <0.01)。结论CD3+ CD4+ T 淋巴细胞表达增高与风湿性心脏病的发病有关;风湿性心脏病患者外周血 CD3+ CD4+ T 淋巴细胞表达增高影响 hs-CRP 及 IL-6,参与风湿性心脏病的发病。     

组胺H4受体在变应性鼻炎中的表达及临床意义

【目的】 探讨新型组胺H4受体(H4R)在变应性鼻炎(AR)中的表达及临床意义&#65377;【方法】 变应性鼻炎(AR)组73例,正常对照(N)组30例,用Western蛋白印迹法(Western blot)及实时定量荧光聚合酶链反应(Real-time PCR)检测两组对象外周血单个核细胞(PBMC)中H4R的蛋白及基因表达&#65377;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测AR组患者外周血血清白细胞介素4(IL-4)及白细胞介素12(IL-12)的含量,分析H4R mRNA表达含量与IL-4&#65380;IL-12以及二者比值的关系&#65377;【结果】 AR患者PBMC中H4R的蛋白表达和mRNA表达都显著高于正常对照组&#65377;AR患者H4R的mRNA表达量与IL-4的表达呈正相关(r = 0.71,P < 0.01),与IL-12的表达呈负相关(r = -0.50,P < 0.01),与IL-4/IL-12比值亦有显著的相关性(r = 0.75,P < 0.01)&#65377;【结论】 H4R的表达与AR的发病有相关关系,AR患者H4R的表达升高可能参与了Th1/Th2平衡失调的免疫过程&#65377;     

Risk of allergy development correlates with IL-4 receptor expression on newborns' monocytes and Th lymphocytes.

BACKGROUND: IL-4 receptor (IL-4R) overexpression on immunoregulatory/effector cells was found in allergic patients. However, its role in allergy development remains unclear. The aim of this study was to assess the correlation between IL-4R expression and allergy development within the first year of life. MATERIAL/METHODS: IL-4R expression on monocytes and Th lymphocytes of 43 newborns was analyzed using flow cytometry. Plasma levels of IL-4, -12 and IFN-gamma were also measured using ELISA. The same parameters were assessed one year later. Furthermore, clinical evaluation was performed every three months for one year. RESULTS: Mean IL-4R expression on monocytes and Th lymphocytes did not differ at birth. After one year it increased on Th-lymphocytes and decreased on monocytes. However, among 10 children with severe atopy during the observation period, 8 displayed IL-4R above the mean value for the group on both monocytes and Th cells at birth as well as one year later. No correlation was found between IL-4 or IFN-gamma and IL-4R expression at birth. After one year, significant IL-4 increases and IFN-gamma decreases were observed which correlated with IL-4R expression. IL-4R expression on the newborns' monocytes correlated negatively with IL-12 plasma level; however, it was statistically significant only in the children developing allergy. Moreover, only in these patients was a significant decrease in IL-12 found after one year. CONCLUSIONS: IL-4R-dependent over-signaling in newborns' monocytes and Th lymphocytes could contribute to Th1/Th2 imbalance. IL-4R overexpression on newborns' monocytes and lymphocytes could be an early risk marker of allergy development.