独活寄生汤含药血清对膝骨性关节炎大鼠软骨细胞代谢，BMP-7及SIRT1表达的影响

目的:观察独活寄生汤含药血清对膝骨性关节炎(KOA)大鼠关节软骨细胞代谢、骨形成蛋白-7(BMP-7)及沉默信息调节因子相关酶1(SIRT1)的影响,为独活寄生汤的临床应用补充理论依据。方法:采用Hulth法建立KOA模型大鼠,模型成功后采用酶原消化法培养KOA软骨细胞;另将40只大鼠分为独活寄生汤低、中、高剂量组(0.85,1.7,3.4 g·kg~(-1))及硫酸氨基葡萄糖组(硫酸氨基葡萄糖胶囊0.3 g·kg~(-1)),灌胃14 d后处死取血清;将培养细胞分为正常组、模型组、独活寄生汤含药血清低、中、高剂量组(对应剂量组大鼠血清培养)及硫酸氨基葡萄糖胶囊组(硫酸氨基葡萄糖组大鼠血清培养);采用结晶紫法检测各组软骨细胞增殖能力;采用荧光原位末端转移酶标记法(TUNEL)法检测各组软骨细胞凋亡情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组软骨细胞中基质金属蛋白酶-13(MMP-13),MMP-3,Ⅱ型胶原蛋白(ColⅡ),聚集蛋白聚糖(Aggrecan),BMP-7及SIRT1 mRNA的表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测各组软骨细胞中MMP-13,MMP-3,ColⅡ,Aggrecan,BMP-7及SIRT1的表达。结果:(1)与正常组软骨细胞比较,模型组细胞增殖能力明显降低,与模型组细胞比较,独活寄生汤含药血清低、中、高剂量组及硫酸氨基葡萄糖组软骨细胞增殖能力提高(P0.01);(2)与正常组软骨细胞比较,模型组细胞凋亡数量明显增加,与模型组软骨细胞比较,独活寄生汤低、中、高剂量组及硫酸氨基葡萄糖组细胞凋亡数量明显降低(P0.01);(3)与正常组软骨细胞比较,模型组细胞MMP-13,MMP-3表达升高,ColⅡ,Aggrecan,BMP-7及SIRT1下降(P0.01);与模型组比较,低剂量组细胞中MMP-13,MMP-3 mRNA及蛋白表达无明显变化;硫酸氨基葡萄糖组及中、高剂量组细胞中MMP-13,MMP-3 mRNA及蛋白表达明显下降,且剂量越高上述蛋白及mRNA表达越低;硫酸氨基葡萄糖组及低、中、高剂量组细胞中ColⅡ,Aggrecan,BMP-7及SIRT1表达升高,且随剂量的增高而升高(P0.01)。结论:独活寄生汤含药血清可通过增加KOA软骨细胞内BMP-7及SIRT1的表达,增加KOA软骨细胞合成代谢、抑制分解代谢,从而起到抑制KOA软骨细胞凋亡,促进软骨细胞再生的作用,进而起到治疗KOA的目的。     

参芪益心方抑制阿霉素诱导大鼠H9c2细胞凋亡的机制研究

目的?基于心肌细胞内质网应激观察参芪益心方对大鼠H9c2心肌细胞内Ca2+及半胱氨酸天冬氨酸酶（Caspase）-3、Caspase-12、葡萄糖调节蛋白-78（GRP78）、增强型蛋白同源蛋白（CHOP）、肌质网钙离子ATP酶（SERCa2a）蛋白和mRNA表达的影响。方法?SD大鼠制备参芪益心方含药血清。体外培养H9c2心肌细胞，用阿霉素诱导凋亡建立模型，将细胞分为模型组（8%空白血清）、高剂量组（8%含药血清）、中剂量组（4%含药血清+4%空白血清）、低剂量组（2%含药血清+6%空白血清）和卡托普利（1×10-5 mol/L）组，另设空白组（8%空白血清）。Real-time PCR及Western Blot分别检测Caspase-3、Caspase-12、GRP78、CHOP、SERCa2a mRNA及蛋白的表达，Fluo-3AM流式细胞仪检测H9c2细胞内Ca2+荧光强度。结果?与空白组比较，模型组Caspase-3、Caspase-12、GRP78、CHOP的蛋白、mRNA表达及Ca2+荧光强度增加，SERCa2a 蛋白及mRNA表达下降（均P<0.01）。与模型组比较，各干预组Caspase-3、Caspase-12、GRP78、CHOP蛋白及mRNA表达降低，Ca2+荧光强度降低，SERCa2a蛋白及mRNA表达增加（P<0.01）。与卡托普利组比较，中药高剂量组SERCa2a蛋白及mRNA表达升高，Ca2+荧光强度升高（P<0.01）。结论?参芪益心方可通过降低Ca2+浓度，下调Caspase-3、Caspase-12、GRP78、CHOP的表达，上调SERCa2a的表达，减轻内质网的过度应激，抑制心肌细胞凋亡。     

独活寄生汤含药血清对佐剂性关节炎大鼠滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨独活寄生汤含药血清对佐剂性关节炎大鼠滑膜成纤维细胞(FLS)增殖和凋亡的影响。方法:采用SD大鼠制备独活寄生汤含药血清,弗氏完全佐剂诱导大鼠佐剂性关节炎,分离提取原代滑膜成纤维细胞。滑膜成纤维细胞分为6组,分别是空白组、模型组、甲氨喋呤组、独活寄生汤高、中、低剂量组,每组5个复孔,分别加入相应的药物。CCK8法检测各组细胞增殖率;荧光定量PCR和ELISA分别检测细胞Bax、Bcl-2、caspase3 m RNA和蛋白水平的表达变化。结果:空白组细胞在各时间点未见明显的变化;模型组细胞随时间延长,增殖抑制率升高(P0.05);甲氨喋呤组和独活寄生汤高、中、低剂量组细胞随干预时间的延长,增殖抑制率降低(P0.05)。与空白组比较,模型组细胞在各时间点的增殖抑制率均升高(P0.05);与模型组比较,甲氨喋呤组和独活寄生汤各剂量组细胞在各时间点的增殖抑制率均降低(P0.05),尤以高剂量组的抑制率更为明显。与空白组比较,模型组细胞Bax、caspase3 m RNA和蛋白水平降低,Bcl-2 m RNA和蛋白水平升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,甲氨喋呤组和独活寄生汤中、高剂量组细胞Bax、caspase3 m RNA和蛋白水平升高,Bcl-2 m RNA和蛋白水平降低(P0.05,P0.01),高剂量组的作用更为明显。结论:独活寄生汤能抑制佐剂性关节炎大鼠滑膜成纤维细胞的增殖,其作用机制与下调抗凋亡蛋白Bcl-2,上调促凋亡蛋白Bax和caspase3的表达有关。     

龙蛭汤对衣霉素诱导人脐静脉内皮细胞内GRP78和CHOP的影响

目的探讨龙蛭汤对衣霉素(TM)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)内质网应激及其标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和特异性蛋白C增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达的影响。方法制备龙蛭汤含药血清,体外培养HUVEC细胞株,分为对照组(10%空白血清),TM组(10%空白血清+3μg/mL TM),TM+龙蛭汤组(10%含药血清+3μg/mL TM),龙蛭汤组(10%含药血清),继续培养6 h。使用CCK-8法比较各组细胞活力,细胞免疫荧光法和Western Blot比较各组GRP78和CHOP蛋白表达,RT-PCR法比较各组GRP78和CHOP mRNA表达。结果与对照组比较,TM组HUVEC细胞活力下降,GRP78、CHOP蛋白及mRNA表达增加(均P0.05);与TM组比较,TM+龙蛭汤组、龙蛭汤组HUVEC细胞活力升高,GRP78、CHOP蛋白及mRNA表达降低(均P0.05)。结论龙蛭汤可通过下调GRP78、CHOP表达,减轻细胞过度的内质网应激反应,提高HUVEC细胞活力。     

独活寄生汤含药血清对大鼠退变软骨细胞TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的:观察独活寄生汤含药血清对大鼠退变软骨细胞TLR4/NF-κB信号通路相关调节因子的影响,探讨独活寄生汤治疗骨关节炎的作用机制。方法:建立体外退变软骨细胞模型,分别采用独活寄生汤含药血清(治疗组)和空白血清(模型组),干预24 h后,收集软骨细胞,采用ELISA法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)含量变化;Real-time PCR法检测TLR4、MyD88、TRAF6和NF-κB p65基因表达;Western blot法检测TLR4、MyD88、TRAF6和NF-κB p65蛋白表达。结果:与模型组相比,ELISA结果表明独活寄生汤含药血清可有效降低iNOS、TNF-α和IL-6含量(P0.01);Real-time PCR结果表明独活寄生汤含药血清能抑制TLR4、MyD88、TRAF6和NF-κB p65基因表达(P0.05);Western blot结果与Real-time PCR结果趋势一致,即独活寄生汤含药血清能抑制TLR4、MyD88、TRAF6和NF-κB p65蛋白表达(P0.05)。结论:独活寄生汤可通过调控TLR4/NF-κB信号通路,抑制骨关节炎炎症反应,从而起到治疗骨关节炎作用。     

基于Zinc/ZIP8信号通路的独活寄生汤对膝骨关节炎作用影响的研究

目的探寻独活寄生汤含药血清对小鼠软骨细胞内锌离子及其转运蛋白ZIP8(Znic/ZIP8)的影响。方法将软骨细胞随机分为:空白对照组(Control)、模型对照组(Model/ZnCl_2)、Ad-Zip8组(Ad-Zip8)、Zip8-siRNA组(Zip8-siRNA)。分组后,培养体系内加入1ng/mL IL-1β,培养24 h后,除空白对照组,其余各组加入100μmol/LZnCl_2,同时给予不同剂量(体积分数10%、5%、2.5%)独活寄生汤含药血清;继续培养48 h后采用荧光染色技术检测软骨细胞内Zn~(2+)浓度,提取细胞总RNA,去除gDNA,合成cDNA,采用qRT-PCR检测软骨细胞ZIP8基因的表达,采用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)结合图像分析ZIP8蛋白表达。结果独活寄生汤含药血清可以降低由IL-1β诱导的炎症状态下软骨细胞内Zn~(2+)的浓度,并呈量-效关系;独活寄生汤含药血清对可降低Zip8mRNA/ZIP8蛋白的表达水平,但其作用强度不及Zip8-siRNA,但其无法抑制由Ad-Zip8引发的Zip8m RNA/ZIP8蛋白表达水平升高。结论独活寄生汤含药血清可通过降低炎性状态的软骨细胞内Zn~(2+)浓度,下调ZIP8的转录和蛋白水平,以维持关节软骨细胞Zn~(2+)的稳态。     

独活寄生汤含药血清抑制白细胞介素1β诱导的软骨细胞炎症反应的作用机制研究

目的:探讨独活寄生汤含药血清抑制白细胞介素1β(interleukin-1 beta,IL-1β)诱导的软骨细胞炎症反应的作用机制。方法:将10只2月龄雄性SD大鼠随机分为正常组和独活寄生汤组,独活寄生汤组以9.3 g·kg~(-1)剂量的独活寄生汤灌胃,正常组给予等量生理盐水灌胃;每日灌胃2次,连续1周;末次灌胃后,经腹主动脉取血,分别制备独活寄生汤含药血清及空白血清,低温保存备用。截取6只4周龄SD大鼠膝关节软骨,采用酶消化法分离并培养软骨细胞,光学显微镜下观察软骨细胞形态,并用Ⅱ型胶原酶免疫组化鉴定。取生长良好的第2代软骨细胞,采用MTT法检测含药血清培养24 h、36 h、48 h、72 h后的软骨细胞活性,采用酶联免疫吸附法测定不同浓度IL-1β干预后软骨细胞的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-13含量。将培养好的第2代软骨细胞随机分为空白血清组、模型组、独活寄生汤含药血清组,其中空白血清组以含10%空白血清的培养基(dulbecco modified eagle medium,DMEM)培养;模型组加入浓度为15 ng·m L~(-1)的IL-1β干预24 h后,采用含10%空白血清的DMEM培养;独活寄生汤含药血清组加入浓度为15 ng·m L~(-1)的IL-1β干预24 h后,采用含10%独活寄生汤含药血清的DMEM培养;3组均连续培养48 h,采用Western blot法检测软骨细胞中G蛋白偶联信号传导系统关键调控因子的蛋白表达情况。结果:(1)软骨细胞形态及免疫组化鉴定结果。第2代软骨细胞胞浆丰富,细胞周围可见具有折光性的细胞外基质,细胞长势呈"铺路石"状,胞浆呈棕黄色阳性染色。(2)独活寄生汤含药血清培养不同时间后的软骨细胞活性。含药血清培养24 h、36 h、48 h、72 h后的软骨细胞活性比较,差异有统计学意义(1.01±0.01,1.03±0.02,1.07±0.01,1.02±0.02,F=8.300,P=0.008)。含药血清培养24 h时的软骨细胞活性低于培养48 h时的软骨细胞活性(t=-4.648,P=0.002);与培养36 h、72 h时的软骨细胞活性比较,差异无统计学意义(t=-1.549,P=0.160;t=-0.775,P=0.461)。(3)不同浓度IL-1β干预后的MMP-13含量。在含IL-1β浓度为0 ng·m L~(-1)、5 ng·m L~(-1)、10 ng·m L~(-1)、15 ng·m L~(-1)、20 ng·m L~(-1)、25 ng·m L~(-1)的DMEM中培养24 h后软骨细胞MMP-13含量比较,差异有统计学意义[(0.07±0.01)ng·m L~(-1),(0.08±0.01)ng·m L~(-1),(0.09±0.01)ng·m L~(-1),(0.10±0.01)ng·m L~(-1),(0.08±0.01)ng·m L~(-1),(0.06±0.01)ng·m L~(-1),F=6.823,P=0.001]。未经IL-1β干预时的软骨细胞MMP-13含量与浓度为5 ng·m L~(-1)、20 ng·m L~(-1)、25 ng·m L~(-1)的IL-1β干预后软骨细胞MMP-13含量比较,差异均无统计学意义(LSD-t=-2.049,P=0.055;LSD-t=-2.083,P=0.052;LSD-t=0.496,P=0.626);浓度为10 ng·m L~(-1)、15 ng·m L~(-1)的IL-1β干预后软骨细胞MMP-13含量高于未经IL-1β干预时的软骨细胞MMP-13含量(LSD-t=-3.412,P=0.003;LSD-t=-4.216,P=0.001);浓度为10 ng·m L~(-1)的IL-1β干预后软骨细胞MMP-13含量与浓度为15 ng·m L~(-1)的IL-1β干预后软骨细胞MMP-13含量比较,差异无统计学意义(LSD-t=-0.804,P=0.432)。(4)软骨细胞中G蛋白偶联信号传导系统关键调控因子的蛋白表达。空白血清组、模型组和独活寄生汤含药血清组的Gαs、Gαq、Gαo和Gαi蛋白表达量比较,组间差异均有统计学意义[(0.81±0.09)k Da,(0.31±0.07)k Da,(0.78±0.13)k Da,F=23.669,P=0.001;(0.22±0.04)k Da,(0.14±0.02)k Da,(0.20±0.02)k Da,F=6.500,P=0.031;(0.25±0.02)k Da,(0.12±0.01)k Da,(0.18±0.03)k Da,F=27.214,P=0.001;(0.21±0.02)k Da,(0.26±0.02)k Da,(0.19±0.03)k Da,F=6.882,P=0.028];空白血清组Gαs、Gαq、Gαo蛋白表达量高于模型组(LSD-t=6.134,P=0.001;LSD-t=7.370,P=0.000;LSD-t=3.465,P=0.013),Gαi蛋白表达量低于模型组(LSD-t=2.572,P=0.042);模型组Gαs、Gαq、Gαo蛋白表达量低于独活寄生汤含药血清组(LSD-t=5.766,P=0.001;LSD-t=3.401,P=0.014;LSD-t=2.599,P=0.041),Gαi蛋白表达量高于独活寄生汤含药血清组(LSD-t=3.609,P=0.011)。结论:独活寄生汤含药血清可以抑制IL-1β诱导的软骨细胞炎症反应,其作用机制可能与G蛋白偶联信号传导系统的调控有关,但其具体作用靶点有待进一步深入研究。     

独活寄生汤含药血清对成骨细胞OPG/RANKL蛋白表达的影响

目的:检测独活寄生汤含药血清对成骨细胞0PG/RANKL蛋白表达的影响,从分子生物学层面探究独活寄生汤治疗骨质疏松症的机理,为独活寄生汤治疗骨质疏松症提供理论及实验依据.方法:体外培养原代SD新生24h大鼠成骨细胞,分别用生理盐水血清对照组、独活寄生汤含药血清低浓度,中浓度,高浓度作用于成骨细胞,采用MIT法检测独活寄生汤含药血清对成骨细胞生长的影响,Western Blot检测独活寄生汤含药血清对成骨细胞OPG、RANKL蛋白表达的影响.结果:独活寄生汤含药血清以浓度及时间的依赖方式促进成骨细胞生长;Western Blot结果显示不同浓度的独活寄生汤含药血清能促进成骨细胞OPG蛋白的表达,并且抑制成骨细胞RANKL蛋白的表达.结论:独活寄生汤含药血清可以通过OPG、RANKL系统促进成骨细胞的增殖并且影响成骨细胞的分化.     

温针灸配合独活寄生汤治疗风寒湿痹型膝骨关节炎患者的临床随机对照研究及体液中ASF1a、SIRT1水平变化

目的:观察温针灸配合独活寄生汤治疗风寒湿痹型膝骨关节炎(KOA)的临床疗效及关节液、血清中ASF1a、SIRT1 mRNA表达水平变化,为临床应用提供参考。方法:将102例风寒湿痹型KOA患者随机分为独活寄生汤组(n=34)、温针灸组(n=38)及联合组(n=30),独活寄生汤组给予独活寄生汤150 mL/次,2次/d口服,温针灸组给予温针灸治疗,联合组在独活寄生汤组治疗基础上给予温针灸治疗,疗程均为4周;观察入组患者治疗前后膝关节视觉模拟评分(VAS)、西安大略麦马斯特大学骨关节炎指数评分(WOMAC)、中医症状积分、自制膝关节肿胀评分及总有效率变化;采用Real-time PCR检测入组患者治疗前后血清、关节液中ASF1a、SIRT1表达。结果:3组患者治疗后VAS、WOMAC、中医症状积分、自制膝关节肿胀评分均较治疗前降低,联合组疗效最为明显(P0.01);3组患者治疗后较治疗前血清SIRT1 mRNA表达增加、ASF1a mRNA表达减少,联合组患者血清中ASF1a、SIRT1改变趋势最为明显(P0.01);3组患者治疗后较治疗前关节液ASF1a mRNA表达上升、SIRT1 mRN表达下降(P0.01)。结论:温针灸配合独活寄生汤治疗风寒湿痹型KOA有良好的疗效,其机制可能与抗软骨细胞衰,促进软骨细胞合成有关。     

基于ERK-Calpain2通路探讨黄连素对冠心病大鼠心肌细胞凋亡的影响

[目的]研究黄连素(BBR)对冠心病大鼠心肌细胞凋亡的影响及ERK-Calpain2信号通路在其中的作用。[方法]以高脂饮食喂养并注射脑垂体后叶素建立冠心病大鼠模型。大鼠分为实验组(模型大鼠)、对照组(模型大鼠)和空白组(正常大鼠),实验组大鼠予以BBR 80 mg/(kg·d)灌胃,对照组和空白组予以等量双蒸水灌胃,治疗周期为12周。采用TUNEL免疫荧光检测心肌细胞凋亡情况。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测心肌组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及钙蛋白酶2(Calpain2)m RNA水平。采用蛋白质印迹法检测心肌组织GRP78、CHOP、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-3)、Caspase-12及Calpain2蛋白表达水平。[结果]心肌TUNEL染色后发现,与对照组比较,实验组细胞凋亡显著减少(P0.01)。与对照组比较,实验组大鼠Caspase-12、Caspase-3、GRP78和CHOP蛋白均有不同程度下调(P0.01),p-ERK和Calpain2蛋白表达下调,Capastatin蛋白表达升高(P0.01)。与对照组比较,实验组大鼠GRP78、CHOP、Calpain2 mRNA表达下降(P0.01)。[结论] BBR能抑制冠心病大鼠心肌细胞发生内质网应激凋亡,该作用可能与抑制ERK-Calpain2信号通路有关。     

独活寄生汤配合膝四针治疗风寒湿痹型膝骨关节炎的临床观察

目的:观察独活寄生汤配合膝四针治疗风寒湿痹型膝骨关节炎(KOA)的临床疗效及部分作用机制,为临床应用提供参考。方法:将91例KOA患者随机分为观察组(49例)和对照组(42例),对照组给予硫酸氨基葡萄糖胶囊0.5 g/次,3次/d,口服,观察组给予独活寄生汤150 mL/次,口服,2次/d,配合膝四针进行针刺治疗,疗程均为4周;观察两组患者治疗前后膝关节视觉模拟评分(VAS),西安大略麦马斯特大学骨关节炎指数评分(WOMAC),中医证候积分,自制膝关节肿胀评分,总有效率及综合疗效治疗反应评分变化;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测两组患者治疗前后关节液中Toll样受体-4(TLR-4),髓系分化因子(MyD 88)mRNA的表达;并比较两组患者治疗后3,6个月复发率。结果:两组患者治疗后VAS,WOMAC,中医证候积分,自制膝关节肿胀评分及综合疗效治疗反应评分均较本组治疗前降低,且观察组较对照组治疗后上述评分更低(P0.05);两组患者较本组治疗前关节液中TLR-4,MyD 88 mRNA表达降低,且观察组治疗后较对照组更低(P0.05);观察组患者总体有效率,3,6个月复发率均低于对照组(P0.05)。结论:观察独活寄生汤配合膝四针治疗风寒湿痹型KOA有较好疗效,且复发率低,其作用机制可能阻断TLR-4/MyD 88信号通路,抑制下游软骨细胞分解代谢因子与炎性因子表达有关。     

独活寄生合剂对老年膝骨关节炎核磁共振成像积分和血清软骨代谢标志物的影响

目的:探讨独活寄生合剂对老年膝骨关节炎(KOA)患者全膝关节核磁共振成像积分(WORMS)和血清中软骨代谢标志物的影响,观察独活寄生合剂治疗老年KOA的临床疗效。方法:选取KOA患者80例,随机分成对照组和治疗组,各40例。对照组予以盐酸氨基葡萄糖胶囊口服;治疗组加用独活寄生合剂口服,均治疗8周。观察治疗前后Western Ontario and Mc Master Universities(WOMAC)量表评分变化;用WORMS积分进行放射学疗效评估;酶联免疫吸附(ELISA)法检测治疗前后血清中软骨代谢标志物软骨寡聚基质蛋白(COMP)和蛋白聚糖水平。结果:治疗组总有效率(86.84%)明显高于对照组(71.79%)(P0.05);与治疗前比较,两组WOMAC评分改善,膝关节WORMS积分减少,COMP和蛋白聚糖含量降低,差异均具有统计学意义(P0.05);且治疗组优于对照组(P0.05)。结论:独活寄生合剂可有效缓解老年性KOA临床症状,改善膝关节影像学损害,降低软骨代谢标志物含量而保护KOA软骨。     

独活寄生汤对佐剂性关节炎大鼠的抗炎镇痛作用及血清中5-HTP，5-HIAA的影响

目的:观察独活寄生汤对佐剂性关节炎模型大鼠免疫器官脏器系数和血清中5-羟色氨酸(5-HTP)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的影响。方法:实验设对照组、模型组、阿司匹林组(0.20 g·kg-1)、独活寄生汤低、中、高剂量组(0.85,1.7,3.4 g·kg-1);除对照组外,其余各组左后肢踝关节腔注射完全弗氏佐剂(FCA)制作佐剂性关节炎模型。ig给药14 d,对照组及模型组灌服羧甲基纤维素钠(CMC-Na)。ELISA法测定血清中5-HTP和5-HIAA的含量。结果:独活寄生汤能显著增加大鼠胸腺质量,明显降低佐剂性关节炎大鼠血清中5-HTP和5-HIAA的含量,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:独活寄生汤对大鼠起到抗炎镇痛的作用,其作用机制可能与降低大鼠血清5-HTP和5-HIAA有关。     

独活寄生汤水提物对软骨细胞G1期调控因子mRNA表达的影响

目的: 探讨独活寄生汤水提物对软骨细胞G₁期的影响。 方法: 取4周龄雄性SD大鼠,建立软骨细胞体外培养体系,第3代软骨细胞进行干预,采用MTT法检测不同浓度的独活寄生汤水提物对软骨细胞活性的影响;RT-PCR检测空白组、独活寄生汤水提物低、中、高剂量组(100,200,400 mg·L^-1)软骨细胞Cyclin D1,CDK4,CDK6及P21 mRNA的表达。 结果: MTT法检测显示,在一定的药物质量浓度范围内(50~800 mg·L^-1),软骨细胞活性显著上升(P<0.01);干预24 h后,Cyclin D1,CDK4及CDK6 mRNA表达量各剂量组明显增加(P<0.05),200 mg·L^-1表达量最大(P<0.01);P21 mRNA表达量降低,且200 mg·L^-1抑制作用最明显(P<0.01)。 结论: 独活寄生汤水提物通过影响软骨细胞G₁期调控因子mRNA的表达,促进软骨细胞的增殖。     

独活寄生汤对气虚血瘀型糖尿病周围神经病变患者一氧化氮和内皮素的影响

目的:观察应用独活寄生汤治疗气虚血瘀型糖尿病周围神经病变患者时血清一氧化氮(NO)和血浆内皮素-1(ET-1)水平变化及其临床意义。方法:选取石家庄市第二医院门诊和住院治疗的气虚血瘀型糖尿病周围神经病变患者128例,在常规降糖治疗的基础上,按随机数字表法将患者分为中药口服治疗组和中药熏蒸治疗组,中药口服治疗组62例给予独活寄生汤口服治疗,每日1剂,水煎取汁400 m L,2次/日温服;中药熏蒸治疗组66例给予独活寄生汤熏蒸治疗,每日1剂,水煎取汁1 L,2次/日外用熏蒸治疗。两组均以10 d为1个疗程,3个疗程后观察并比较两组治疗前后血清NO和ET-1水平变化,应用临床症状积分有效率及感觉神经电流阈值(CPT)定量检测判定临床疗效,同时监测不良反应发生状况。结果:与本组治疗前比较,独活寄生汤口服治疗或熏蒸治疗均可明显升高气虚血瘀型糖尿病周围神经病变患者血清NO水平(P0.05),降低其血浆ET-1水平(P0.05)。中药口服治疗组与中药熏蒸治疗组临床症状积分降低的总有效率分别为83.9%,86.4%;双侧正中神经及腓肠神经的电流阈值(CPT)均明显降低(P0.05);两组疗效比较无显著性差异。结论:独活寄生汤可明显升高血清NO水平并降低血浆ET-1水平,这可能是其治疗糖尿病周围神经病变有效的机制之一,为临床治疗气虚血瘀型糖尿病周围神经病变提供新的方法。     

独活寄生汤加减结合透明质酸钠针关节腔注射治疗膝骨性关节炎

目的:探讨独活寄生汤加减结合透明质酸钠针关节腔注射膝骨性关节炎的疗效.方法对本院收治的150例膝骨性关节炎患者根据随机原则分为3组,每组50例.独活寄生汤组单独给予独活寄生汤加减进行治疗,透明质酸钠组单独给予透明质酸钠注射治疗,联合组注射透明质酸钠的同时服用独活寄生汤.对3组患者的疗效、VAS疼痛评分、血清C-反应蛋白水平以及不良反应进行比较.结果联合组的总有效率为94％,显著高于独活寄生汤组(80％)和透明质酸钠组(78％),差异具有统计学意义(P＜0.05);治疗后联合组的VAS评分显著低于独活寄生汤组和透明质酸钠组,差异具有统计学意义(P＜0.05);治疗后联合组的CRP水平相比较独活寄生汤组和透明质酸钠组均显著下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论独活寄生汤加减结合透明质酸钠针关节腔注射治疗膝骨性关节炎疗效确切,能迅速缓解疼痛,改善功能,值得临床推广使用.     

水针刀联合骶管注射及口服独活寄生汤治疗腰椎间盘突出症临床研究

目的：探讨水针刀联合骶管注射及口服独活寄生汤治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法：将腰椎间盘突出症患者随机分两组,各28例。对照组采用骶管注射治疗联合口服独活寄生汤。治疗组采用水针刀联合骶管注射及口服独活寄生汤治疗。结果：治疗组有效率96.4%,对照组有效率82.0%。两组比较差异有统计学意义（P＆lt;0.05）。结论：水针刀联合骶管注射及口服独活寄生汤治疗腰椎间盘突出症,疗效佳。     

加味独活寄生汤对胶原诱导性关节炎大鼠关节炎症的影响

目的:观察加味独活寄生汤对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节炎症的影响。方法:SPF级雄性SD大鼠90只,随机分为正常对照组、模型对照组、来氟米特治疗组、加味独活寄生汤高、中、低剂量组共6组。除正常对照组6只,于大鼠尾根部每只0.2mg im胶原乳剂制成关节炎大鼠模型,造模后,每组选择造模成功的大鼠分别6只,来氟米特组按10 mL·kg-1给予来氟米特ig,加味独活寄生汤高、中、低剂量组按44,22,11 g·kg-1给予加味独活寄生汤ig,对照组ig相同体积的蒸馏水,每天1次,连续12周。分别观察治疗后0,2,4,6,8,10,12周大鼠体质量、关节炎症指数(AI)、足爪指标、关节病理变化情况。结果:与模型组比较,加味独活寄生汤高、中、低剂量组与来氟米特组对关节炎大鼠AI有显著改善作用,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);各治疗组较模型组体质量、足爪均有显著改善(P<0.05,P<0.01);对踝关节软骨病理改善方面,高剂量组与模型组比较有改善。结论:加味独活寄生汤对CIA大鼠关节炎症有明显改善作用,是治疗类风湿关节炎的有效方剂。     

独活寄生汤对膝骨关节炎大鼠IL-17/NF-κB通路的影响

目的:探讨独活寄生汤通过调控IL-17/NF-κB信号通路治疗膝骨关节炎(KOA)的作用机制。方法:将大鼠随机分为正常组、模型组、独活寄生汤组和双醋瑞因组,采用关节腔注射碘乙酸钠溶液建立KOA模型。确认造模成功后,分别采用药物干预30 d,观察大鼠膝关节软骨病理形态变化。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素17(IL-17)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。Real-time PCR和免疫组化法检测软骨核因子κB p65(NF-κB p65)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、NF-κB激活剂1(ACT1)mRNA和蛋白表达水平。结果:独活寄生汤组大鼠膝关节软骨表面稍不平整,软骨细胞数量减少,排列较规则,软骨基质轻染。与正常组比较,模型组大鼠血清IL-17、TNF-α表达水平升高(均P<0.01)。与模型组比较,独活寄生汤组大鼠血清IL-17、TNF-α表达下降(均P<0.05)。与正常组比较,模型组TRAF6 mRNA表达升高,NF-κB p65、ACT1 mRNA表达升高(均P<0.01)。与模型组比较,独活寄生汤组NF-κB p65、ACT1、TRAF6 mRNA表达降低(均P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠软骨NF-κB p65、TRAF6和ACT1蛋白表达水平升高(均P<0.01)。与模型组比较,独活寄生汤组大鼠软骨NF-κB p65、TRAF6、ACT1的蛋白表达降低(均P<0.01)。结论:独活寄生汤通过调节IL-17/NF-κB信号通路,降低IL-17、TNF-α促炎因子表达,有效缓解KOA模型大鼠症状。     

独活寄生汤治疗膝骨关节炎临床观察

目的: 观察独活寄生汤治疗膝骨关节炎(OA)的疗效。 方法: 选择符合纳入标准患者113例,随机分为治疗组和对照组,治疗组56例给予独活寄生汤治疗,对照组57例给予硫酸氨基葡萄糖(GS)治疗,疗程均为4周。采用 Lequesne的OA疼痛功能指数对膝关节的症状体征和功能活动进行评分。 结果: 总有效率治疗组为96.43%,对照组为82.45%,两组比较差异有显著性(P<0.05),治疗组优于对照组。治疗后两组疼痛功能指数评分均有显著降低,治疗前后比较,差异非常显著(P<0.001),治疗组评分降低优于对照组(P<0.001)。停药4周后对照组疗效明显降低(与疗程结束时比较P<0.01),而治疗组疗效降低不明显(与疗程结束时比较P>0.05)。 结论: 独活寄生汤治疗膝OA疗效明显优于GS组的疗效,且具有较好的安全性。