蕲蛇等6种蛇类药材的粉末显微及鳞片表面电镜扫描鉴别

 本文对蕲蛇等6种蛇类药材进行了粉末鉴别和鳞片表面电镜鉴別研究，找到了重要的鉴别特征，为粉末状蛇类药材的鉴別提供了科学依据。     

蕲蛇药材及其市售混淆品的Cyt b基因序列与分析

目的分析蕲蛇药材正品及其市场收集样品的Cyt b基因序列,为蕲蛇药材分子鉴别提供依据。方法利用Cyt b基因,对蕲蛇药材及其市场收集样品进行了序列测定和分析。结果蕲蛇药材存在着混杂现象;蕲蛇药材正品与其市售混淆品的Cyt b基因序列有着显著差异,该序列在蕲蛇种内差异率为0%~0.91%,与混淆品间的差异率为18.57%~23.78%。结论Cyt b基因序列是一种鉴别蕲蛇药材与其混淆品较好的分子遗传标记。     

快速PCR方法在蛇类药材真伪鉴别中的应用

为优化获得一种准确、快速、高效鉴别药典所载蛇类药材(乌梢蛇,金钱白花蛇,蕲蛇)真伪品的方法。该研究以蛇类药材经典PCR鉴定方法为基础,采用碱裂解法提取基因组总DNA,加入特异性PCR引物,采用两步法进行PCR扩增,从而对蛇类药材及其混淆品进行鉴别。通过对影响PCR反应时间的退火温度、变性温度、退火时间、变性时间、循环次数等因素进行优化,并对不同型号PCR仪和Taq酶进行考察,分别获得乌梢蛇、金钱白花蛇、蕲蛇快速PCR反应程序。在PCR产物中加入SYBR Green I染料,正品显示出明亮绿色荧光,而混淆品不显示荧光。所建立的蛇类药材快速PCR真伪检测方法可在30~45 min完成,为蛇类药材现场快速鉴定提供技术支持。     

常用蛇类药材鉴别研究进展

蛇是人类宝贵的野生动物资源,也是我国重要的蛇类药材来源。它具有祛风、通络、定惊止痉等功效,在风湿痹证方面具有良好的治疗效果。近年来,在经济利益驱使下,加上我国蛇种类繁多,现有蛇类多达241种,且各自形态特征差异不明显,使得准确鉴定药材困难,容易导致市场用药品种混乱。文章就近10年来用于常用蛇类药材(主要以《中国药典》收载品种乌梢蛇、金钱白花蛇、蕲蛇为例)及其混伪品的鉴别方法进行了整理研究,综述了各类鉴别方法在蛇类药材中的研究进展,包括传统的性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别及近年来发展的微性状鉴别、色谱质谱技术和一些现代的分子鉴别方法如DNA条形码技术,并阐述了各种鉴别方法的适用对象及其优缺点,以期为蛇类药材或者动物类药材的鉴别研究提供思路和参考。发现目前药用蛇在现场快检、中成药的鉴别和优劣鉴别方面仍然面临着一些困难,提示对药用蛇品质进行客观评价时,还需将传统与现代鉴别方法相结合、真伪与优劣鉴别技术相联系。     

蛇类药材的性状鉴别

鉴于目前流通领域中蛇类药材的品种混乱情况比较严重，缺少简便而有效的鉴别手段。本语文对收集自全国１０个省区的２６３件蛇类药材及其伪、混品标本共１４种进行了生药性状描述，归纳了《中国药典》所载三咱正品蛇类药材的鉴别要点，并编制了蛇类药材及其常见伪、混品的性状鉴定检索表。     

蕲蛇的真伪鉴别和鉴别要点

目的：进行蕲蛇的真伪鉴别和总结鉴别要点,提高鉴别效率和准确性。方法：通过对正品蕲蛇的系统论述和对常见伪品、混淆品、掺假品的归纳比较,总结蕲蛇真伪品的鉴别方法,建立正品蕲蛇的鉴别要点。结果：正品蕲蛇的8个鉴别要点是其他常见伪品、混淆品、掺假品所不同时具备的特征。结论：正品蕲蛇的8个鉴别要点具备良好的鉴别实用性,有利于一般的中药质检人员对蕲蛇进行快速而准确地鉴别,结合现代鉴别技术,则可进行更准确、更复杂的质量鉴别。     

10种去皮蛇类药材的头骨鉴别法

本文报道了10种蛇类药材的头骨鉴别特征,为蛇类药材鉴别提供了一些新的依据。     

蛇类药材的性状鉴别

鉴于目前流通领域中蛇类药材的品种混乱情况比较严重,缺少简便而有效的鉴别手段,本文对收集自全国10个省区的263件蛇类药材及其伪、混品标本共14种进行了生药性状描述,归纳了《中国药典》(1995年版)所载三种正品蛇类药材的鉴别要点,并编制了蛇类药材及其常见伪、混品的性状鉴定检索表。     

蛇类药材的商品调查及鉴定

1993年对全国10个省区的蛇类药材商品进行了调查,共收集蛇类药材263件,鉴定出商品乌梢蛇药材原动物6种,商品金钱白花蛇药材原动物4种(其中广西产白花蛇1种),商品蕲蛇药材原动物4种。商品药材中金钱白花蛇伪品数量最多,乌梢蛇也时有混淆品可见,蕲蛇的混淆品较少。鉴于商品“白花蛇”一名十分混乱,建议将白花蛇名称规范化。     

一种蕲蛇伪造品的鉴别

蕲蛇是蝰科动物五步蛇Agkistrodonacutus（Guenther）的干燥体。由于它价格昂贵，因此伪品或掺伪品较多。近年来在部份省区的药材市场新出现一种蕲蛇的伪造品。货源主要来自江西鹰谭等地。经作下列鉴别发现它是用新蛇头、皮、尾和其它蛇类动物去皮身段伪造而成。现得这种伪造品的特征及鉴别方法介绍如下，供医药界同仁参考。1性状特征本品呈圆盘状，其头、皮、尾有正品蕲蛇特征即：头呈三角形而扁平。吻端向上，习称“翘鼻头”，背部两侧约有24个“V”形斑纹，习称“方胜纹”；腹部有黑色类圆形的斑点，习称“连珠斑”；尾部骤细，末端有…     

意大利牛舌草与其易混淆品的鉴定

目的:研究建立意大利牛舌草及其易混淆品的鉴别方法,为意大利牛舌草的质量控制提供依据。方法:采集不同产地的意大利牛舌草及其混淆品,采用药材显微鉴别、薄层色谱鉴别和DNA分子鉴别方法,对意大利牛舌草及其混淆品进行鉴别研究。结果:意大利牛舌草与琉璃苣、倒提壶在显微、薄层色谱有较为明显的差异,DNA分子鉴定表明,意大利牛舌草及其混淆品的最小种间K-2-P距离大于种内最大K-2-P距离,邻接法(NJ)树中意大利牛舌草的样品聚为一支,琉璃苣、倒提壶混淆品分别表现出单系性,可明显区分开。结论:该文在对意大利牛舌草及混淆品的茎、粉末显微特征比较研究的基础上,采用药材显微鉴别、薄层色谱鉴别与DNA分子鉴定手段相结合的综合鉴别模式,确定了意大利牛舌草及其混淆品的鉴别要点,DNA分子鉴定技术对于意大利牛舌草及其混淆品的鉴别有较大的优势,该法专属性强、灵敏度高,是传统鉴别技术的重要补充,具有较大的潜力和应用前景。建议进一步提高和完善意大利牛舌草的质量标准,加强意大利牛舌草的质量控制。     

中西医结合治疗五步蛇咬伤致DIC及溃疡1例

五步蛇咬伤是临床常见危急症,若得不到及时救治,可导致休克和DIC的发生,危及患者生命。五步蛇蛇毒中含有蛋白水解酶等多种毒性成分,可造成局部组织坏死,引起伤肢溃疡甚至导致截肢的发生。故五步蛇咬伤致残率高,中西医结合治疗五步蛇咬伤致DIC及蛇伤溃疡具有明显优势。现报道中西医结合治疗五步蛇咬伤致DIC及溃疡1例,疗效满意。     

基于基原效用差异的黄连品质辩识光谱化学表征模型构建

目的 中药多基原物种间的效用差异性受到历代医家的高度重视,联用傅里叶变换近红外光谱（fourier transform near infrared spectroscopy,FT-NIR）和傅里叶变换中红外光谱（fourier transform mid-infrared spectroscopy,FT-MIR）技术,考察光谱化学表征技术应用于多基原黄连共有物质基础测定和品质辨识的可行性。方法 以黄连的4种基原（黄连Coptis chinensis、三角叶黄连C. deltoidea、峨眉野连C. omeiensis和云南黄连C. teeta）的共有物质基础小檗碱、黄连碱、木兰花碱、非洲防己碱和巴马汀为研究对象,基于光谱矩阵的优化和特征学习算法,串联近红外和中红外光谱特征构建偏最小二乘回归（partial least squares regression,PLSR）和支持向量回归（support vector regression,SVR）光谱化学表征模型以测定药材中共有活性成分的含量,辨识其品质差异。结果SVR模型对小檗碱的测定效果最优,剩余预测偏差（residual predictive deviation,RPD）值高达4.842,模型对黄连碱、巴马汀和木兰花碱含量的预测RPD值均大于2;PCA结果表明所建立的模型能有效鉴别多基原黄连共有成分含量的差异,为其品质辨识提供依据。结论 多元光谱技术串联应用可有效表征多基原黄连药材中共有成分的含量差异,提高多基原中药品质辨识的效率。     

滇黄精研究进展及黄精研究现状

黄精Polygonati Rhizoma是百合科Liliaceae多年生草本植物,为我国传统药材,具有补气养阴,健脾,润肺,益肾的功效。迄今为止已发现40余种该属植物,我国约有31种。2010版《中华人民共和国药典》收载了3种黄精(黄精Polygonatum sibiricum,滇黄精P.kingianum和多花黄精P.cyrtonema)。黄精是传统补益类中药,集药用、食用、观赏和保健于一身,具有极高的经济价值和社会效益,有着巨大的开发潜力和广阔的市场前景。黄精化学成分多样,药理活性广泛,在增强免疫力、调节机体平衡、延缓衰老等保健方面,和治疗糖尿病、动脉粥样硬化、肿瘤等疾病方面,都极具开发价值。滇黄精是中药黄精的3个基源品种之一,分布于以云南为中心的西南地区,以块大、色黄、润泽、断面透明的品质著称。近年来,市场需求不断增大,野生资源却不断萎缩,相对需求量急剧上升。为合理开发云南的滇黄精资源,本文通过查阅上1960年代以来有关黄精的研究文献,总结和阐述黄精在历史记载、植物分类、资源分布、生物学特性、生药鉴定、品质评价、化学成分、药理作用、人工栽培和产品开发等各方面的研究进展和现状,为促进滇黄精的基础研究和综合利用提供有益的参考。     

《中国药典》收载中药海马的基原与性状探讨

海马为重要动物药材,用药历史悠久,市场混伪品众多。为正本清源,对历代海马本草文字记载、图片和照片进行考证,结合标本馆馆藏动物标本和药源调查,认为我国海马的基原应该是海龙科动物克氏海马Hippocampus kelloggi,1901、棘海马H.spinosissimus,1913、管海马H.kuda,1852、三斑海马H.trimaculatus,1814或日本海马H.mohnikei,1853的干燥体。《中国药典》收载的刺海马H.histrix,1856实为棘海马。并建议对海马性状进行修订,增加鉴别方法,以建立完善的海马质量控制标准。     

败酱草及其混伪品的显微鉴别特征与HPLC指纹图谱研究

目的 对败酱草Herba Patriniae及其市场常见混伪品的显微鉴别特征和HPLC指纹图谱进行研究,明确不同品种的败酱草及其混伪品间的差异,为败酱草的准确鉴定提供技术保障。方法 收集败酱草正品药材黄花败酱和白花败酱,市场常见败酱草混用品异叶败酱、菥蓂和苣荬菜,采用显微鉴别方法对5种药材粉末的显微特征进行研究;优化败酱草总皂苷的提取工艺,比较不同品种的总皂苷含量;建立败酱草及其混伪品的HPLC指纹图谱,基于指纹图谱相似度评价、聚类分析和主成分分析,对败酱草及其混伪品进行鉴别和药材质量的综合评价。结果 败酱草及其混伪品药材粉末的显微特征存在显著差异;优化了败酱草总皂苷的提取工艺,结果表明,败酱草及其混伪品总皂苷含量存在差异;建立了败酱草及其混伪品共26批的HPLC指纹图谱,共标定了11个共有峰,明确了败酱草及其混伪品指纹图谱的差异,通过相似度分析、聚类分析和主成分分析,可将败酱草及其混伪品进行准确区分;综合评价分析结果表明,败酱草及其混伪品的得分差异较大,其中正品白花败酱和黄花败酱的得分最高。结论 获得了败酱草及其市场常见混伪品在粉末的显微特征和HPLC指纹图谱的差异,为败酱草的准确鉴...     

女贞药用价值及其相关上市药品的研究进展

女贞Ligustrum lucidum是木犀科女贞属药用植物,其果实、叶、花等部位均可作为药用。女贞不同药用部位及单体成分具有多种功效,现已开发为多种制剂,既有中药单方制剂,也有以单体成分为主的化学药。大量研究表明,女贞相关药品被广泛用于治疗消化系统、免疫系统等疾病,且临床效果较好。通过对女贞不同药用部位的化学成分、临床应用及药理作用、女贞相关上市药品的工艺与质量、临床应用及基础研究进行综述,进而探讨女贞的潜在应用价值和开发前景,为女贞的综合开发与利用提供一定的参考。     

蕲蛇蛇毒对胶原诱导性关节炎大鼠血管生成的影响

目的： 研究蕲蛇蛇毒对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠血管生成的影响及其机制。 方法： 采用牛Ⅱ型胶原（1 g·L^-1）诱导大鼠CIA模型。建模21 d后,实验分正常组、模型组、美洛昔康组（0.72 mg·kg^-1, ig）、蕲蛇蛇毒低、中、高剂量组（0.1, 0.33, 1 mg·kg^-1, ip）,每天1次,连续治疗21 d。采用HE染色对大鼠踝关节滑膜组织进行病理学评分,免疫组化法检测滑膜微血管密度和血管内皮细胞生长因子（VEGF）的蛋白表达,ELISA法检测血清中血管生成素1（Ang-1）的含量。 结果： 与正常组比较,模型组大鼠踝关节滑膜病理评分和微血管密度显著增加（P<0.01）,滑膜组织VEGF表达量及血清Ang-1含量亦显著增加（P<0.01）;与模型组比较,蕲蛇蛇毒中、高剂量能显著降低大鼠踝关节滑膜的病理评分（P<0.05,P<0.01）,蕲蛇蛇毒高剂量能明显降低滑膜微血管密度、VEGF表达和血清Ang-1含量（P<0.05或P<0.01）。 结论： 蛇毒能减轻CIA大鼠的关节病理损伤和血管新生,其机制可能与降低VEGF表达和减少Ang-1含量有关。     

五步蛇酒制造新工艺

研究了酶技术生产五步蛇酒的新工艺，结果表明，该工艺可以缩短生产周期，提高原材料（五步蛇）利用率，改进产品质量。     

卷丹及主要食用百合EST-SSR鉴别体系的构建

目的开发卷丹Lilium lancifolium、兰州百合L. davidii var. willmottia、岷江百合L. regale、香水百合L. casa和龙牙百合L. brownie var. viridulum的EST-SSR分子鉴别体系,分析EST-SSR分子标记技术对百合近缘种的开发效率和鉴别能力。方法利用MISA.pl程序对NCBI公布的百合属EST基因序列进行SSR位点的识别,通过Primer3程序模块批量生成EST-SSR引物,经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳对引物进行初筛,用聚丙烯酰胺凝胶电泳验证初筛引物,标记并分析不同种质的特征泳带,构建鉴别体系。结果共设计了199对SSR引物,经过26对引物的筛选,获得了2对高效鉴别引物,其中引物JZ391构建的分子鉴别体系,可有效鉴别混掺的商品百合,具有一定的实用价值。结论基于研究材料具有极端的遗传特征,本实验鉴定标记开发非常高效,研究结果证实了物种的遗传基础是影响其EST-SSR分子标记开发效率的重要因素,同时,该案例可为其他类似百合遗传基础的中药材进行EST-SSR标记开发,提供参考尺度。