内生真菌对刺五加种子萌发过程激素及酶含量变化的影响

目的研究内生真菌破除刺五加种子休眠的方法及其内源激素和酶的变化规律。方法用内生真菌侵染刺五加种子后对种子进行变温层积处理,利用高效液相色谱法测定刺五加种子中内源激素赤霉素(GA3)、脱落酸(ABA)、吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)及水杨酸(SA)的含量,并且检测体内酶[过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、丙二醛(MDA)]活力变化。结果 5株刺五加内生真菌对种子萌发有明显的促进作用,在变温层积过程中,GA3、IAA、IBA、SA均有不同程度的上升,ABA呈现明显的下降趋势。POD活力和MDA水平显著下降,CAT和SOD的酶活力显著上升。结论内生真菌可调控刺五加种子激素和酶的含量,促进种子萌发。     

基于灰色关联度法分析刺五加种子中胚率、内源激素和酶活力的相关性

目的:研究刺五加种子在层积过程中的内源激素含量、相关酶活力与胚率的相关性研究,为生产和科研中应用内源激素和相关生理指标来调控刺五加种子萌发提供理论依据。方法:采用刺五加内生真菌,不同浓度的一氧化氮和过氧化氢溶液进行浸种处理后对刺五加种子进行变温层积处理,利用高效液相色谱法测定刺五加种子中内源激素[赤霉素(GA3),脱落酸(ABA),吲哚乙酸(IAA),吲哚丁酸(IBA)及水杨酸(SA)]的含量,并且检测体内酶[过氧化氢酶(CAT),超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD),丙二醛(MDA)]活力变化。通过灰色关联度法探讨胚率和刺五加种子中激素和其酶活力的相关性。结果:胚率与IAA,GA3,CAT有显著正相关联,关联系数分别为1.086,0.935,1.067,IAA,GA3,CAT,IBA,SA之间存在显著的正相关性,与ABA,MDA,POD之间具有明显的负相关性,SOD的活性与其他含量之间无显著的相关性。关联度大小比较为IAA>CAT>GA3>IBA>SA>SOD>ABA>POD>MDA。结论:IAA,GA3,CAT对胚率有明显促进作用,激素含量与酶活力之间有明显的相关性,可为探讨刺五加种子萌发机制提供理论依据。     

外源激素处理对远志种子萌发及幼苗生长的影响

目的:研究不同浓度吲哚乙酸(IAA),吲哚丁酸(IBA),6-苄氨基嘌呤(6-BA)和赤霉素(GA_3)4种外源激素对药用植物远志种子萌发和幼苗生长的影响。方法:采用不同浓度的4种外源激素对远志种子进行适度浸泡处理,以蒸馏水为对照,测定其发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数,发芽结束后测量株高、根长、鲜重及干重。结果:不同浓度GA_3溶液处理与蒸馏水对照组相比对远志种子的萌发及幼苗生长均具有促进作用;10,20,30 mg·L~(-1)IAA,20,30 mg·L~(-1)IBA和20,30 mg·L~(-1)6-BA对远志种子的萌发有不同程度的促进作用;当IAA,IBA,6-BA≥40 mg·L~(-1)及IBA,6-BA≤10 mg·L~(-1)时,对远志种子的发芽率有不同程度的抑制作用;对外源激素处理后的远志种子幼苗生长状况中,IAA,IBA和6-BA表现出不同程度的抑制。总体效果为GA_3IAAIBA6-BA。其中以150 mg·L~(-1)GA_3处理效果最好,发芽率、活力指数分别是对照组的1.17倍和2.13倍,并对种子的幼苗根伸长、幼苗鲜重增加等早期生长有明显影响,种子发芽整齐,出苗一致。结论:通过研究不同外源激素浸种对远志种子萌发及幼苗生长的影响,筛选出对其有促进作用的外源激素,可为远志的种苗培育、人工栽培提供一定的理论基础及数据参考。     

低温沙藏对桃儿七种子破眠及其内源激素变化的影响

目的研究解除桃儿七种子休眠的方法及其内源激素水平变化的规律。方法以低温沙藏处理的桃儿七种子为材料,利用高效液相色谱法(HPLC)测定低温层积过程中植物内源激素吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA)以及脱落酸(ABA)含量的变化与种子萌发率的关系。结果低温沙藏处理3个月可有效打破桃儿七种子休眠,随着层积时间的增加,GA、IAA含量显著升高,ABA含量显著下降,GA/ABA和GA/ABA+IAA比值增大。结论内源激素IAA、ABA和GA在桃儿七种子休眠与萌发过程中起着重要的调节作用。     

七叶一枝花种子萌发不同阶段生理生化变化研究

目的探讨七叶一枝花Paris polyphylla var.chinensis种子萌发不同阶段的酶和内源激素调控机制,为其种子解除休眠、萌发不同阶段采取有效处理措施,提高出苗率提供科学依据。方法通过观察和测定变温层积处理后七叶一枝花种子萌发不同阶段形态差异,采用常规的生理生化方法测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、苹果酸脱氧酶(MDH)、6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G-6-PDH)5种酶活性,采用质谱定量方法测定吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA3)、脱落酸(ABA)、水杨酸(SA)、反玉米素(TZ)、茉莉酸(JA)量;研究种子萌发过程中胚率与酶活性和内源激素量变化之间的相关性。结果七叶一枝花种子从未萌动、上胚轴休眠到即将出苗阶段,种子质量和胚率逐步上升;SOD和POD活性逐步升高;CAT和MDH活性逐步减弱,G-6-PDH活性出现双峰,未萌动阶段和萌动后上胚轴未伸长阶段显著高于其他阶段;IAA、GA3、ABA、JA的量逐步升高,IAA和JA量在即将出苗阶段显著高于其他阶段(P0.01);TZ和SA的量先升高后降低,TZ的量在子叶分化形成期和胚乳成熟期显著高于其他阶段(P0.01),SA出苗前期量最高,已萌动胚根刚突破种皮阶段和胚乳形成阶段量次之;CAT酶活性变化与胚率呈显著负相关,IAA和JA的量变化与胚率呈显著正相关。结论CAT对种胚的生长有抑制作用,IAA与JA对种胚的生长有正向促进作用。     

三七种子后熟过程中内源激素的动态变化

目的通过对三七种子后熟过程中内源激素变化规律的研究,探索内源激素在种胚发育进程和休眠解除中的作用机制,为三七种子的处理和种源保存奠定基础。方法采用酶联免疫法(ELISA)对三七种子后熟过程中的内源激素赤霉素(GA)、吲哚乙酸(IAA)、玉米素核苷(ZR)和脱落酸(ABA)进行动态测定。结果三七种子后熟过程中,内源GA、IAA和ZR的量随种胚的发育进程而增加,而ABA的量则减少。结论激素平衡的变化是解除三七种子休眠、促进萌发的决定因素之一。     

外源水杨酸对艾纳香活性成分、抗氧化酶活力及内源激素含量的影响

目的:探索艾纳香植株不同部位叶片中活性成分L-龙脑含量、四种内源激素含量以及三种抗氧化酶活力对诱导剂浓度、采样时间的响应规律。方法:以浓度为0.01、0.1、1、10 mmol/L的水杨酸(SA)作为外源诱导剂,进行全株叶面均匀喷施处理,诱导后在24、48、72 h分别采集艾纳香植株不同叶位的叶片(嫩叶、成熟叶、老叶)样品,采用气相色谱法测定叶片中L-龙脑含量,通过分光光度法测定叶片中过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)及超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用酶联免疫法测定叶片中的生长素(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZT)四种内源激素含量。结果:0.01 mmol/L SA诱导对艾纳香三个叶位叶片中L-龙脑积累效果较好;低浓度SA(0.01 mmol/L)能增强艾纳香三个叶位叶片中三种抗氧化酶的活力,其中POD和SOD随着时间的推移酶活力逐渐增强,在72 h时达到最高,而CAT在三个叶位中的活力变化复杂,无此规律;高浓度SA(≥0.1 mmol/L)减弱了三个叶位叶片中三种抗氧化物酶活力,浓度越高,减弱的现象越明显;低浓度SA(0.01 mmol/L)可促进艾纳香叶片中IAA、GA3和ZT的积累,这种现象在嫩叶和成熟叶中比较明显,而高浓度SA(≥1 mmol/L)对艾纳香三个叶位叶片中ABA的积累有明显的促进作用。结论:0.01 mmol/L水杨酸诱导既能够促进艾纳香叶片中L-龙脑的积累,又可以确保艾纳香植株正常生长。     

桃儿七种子休眠机制及萌发特性研究

目的 通过对桃儿七离体胚培养、生物鉴定以及GA浸种、低温层积等处理,研究桃儿七种子萌发特性及其在不同破休眠过程中植物内源激素的变化规律,为桃儿七种子的处理和种源保存奠定基础.方法 采用HPLC对桃儿七种子破休眠过程中内源激素吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA)以及脱落酸(ABA)含量变化进行动态测定.结果 胚乳限制、萌发抑制物和生理后熟是引起桃儿七种子休眠的主要原因,去除胚乳以及提高GA/ABA值可有效促进种子萌发.结论 激素平衡的变化是解除桃儿七种子休眠、促进萌发的决定因素之一.     

变温层积对解除滇重楼种子休眠及其内源激素变化的研究

目的研究滇重楼种子破休眠的方法及其内源激素水平变化规律。方法以变温层积处理的滇重楼种子为材料,利用高效液相色谱法(HPLC)测定种胚发育过程中植物激素赤霉素(GA)、吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)量的变化与种子胚率的关系。结果变温层积处理可在3个月内打破滇重楼种子休眠,其GA量显著升高,ABA量显著下降。结论内源激素ABA和GA在滇重楼种子休眠与萌发过程中起着重要的作用。     

茉莉酸甲酯对艾纳香活性成分、抗氧化酶活力以及内源激素含量的影响

目的研究艾纳香植株不同叶位叶片中4种内源激素含量和3种抗氧化酶活性以及L-龙脑的含量与诱导剂的浓度、采样时间之间的规律。方法以0.01、0.10、1.00、10.00mmol/L的茉莉酸甲酯(MeJA)作为外源诱导剂,艾纳香不同叶位的叶片(嫩叶、成熟叶、老叶)为实验对象,以生长素(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZT)4种内源激素含量和过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)3种抗氧化酶的活力以及活性成分L-龙脑的含量作为检测指标。结果 1.00 mmol/L的MeJA对L-龙脑的积累效果较好;不同浓度的MeJA诱导下,抗氧化酶的变化比较复杂。对于POD来说,除了10.00 mmol/L MeJA浓度处理下的艾纳香3个叶位的叶片中其含量低于对照外,其他浓度处理下,POD在72 h均显著高于对照(P0.05)。对于CAT来说,10.00 mmol/L MeJA诱导下,艾纳香3个叶位叶片其含量在24 h时达到最高,之后随着时间的推移,CAT活力极速下降。在其他浓度处理下,嫩叶和老叶中的CAT酶活力在72 h,显著低于对照,而在成熟叶中除了0.10 mmol/L MeJA处理,均在72 h时高于对照。对于SOD来说,除了1.00 mmol/L MeJA处理的3个叶位的叶片在48 h之后,SOD含量均高于对照,且与对照组有显著差异(P0.05)外,其余浓度处理下的SOD均低于对照。低浓度的MeJA(≤0.10 mmol/L)可以促进艾纳香叶片中的IAA、GA3和ZT的积累,而高浓度的MeJA(≥10.00 mmol/L)促进ABA的积累。结论艾纳香植株在外源MeJA(1.00 mmol/L)诱导下可以促进活性成分积累,为其栽培生产提供理论依据。     

植物源烟水及生长调节剂对5种常用中药材种子萌发的影响

目的:优质的种苗是保证药材产量和质量的基础,寻求绿色、安全、有效的措施缩短萌发时间、提高萌发率和发芽整齐度具有重要的意义。本文以5常用种中药材种子为研究材料,比较烟水与常用生长调节剂对种子萌发的影响。方法:烟水母液由悬铃木干燥植物材料闷燃产烟入水制得;利用TTC测定种子活力;测定种子含水量;检测种子吸水率;分别用水(空白组),烟水(0.2%母液)和植物生长调节剂,如赤霉素(150 mg·L-1),氯化镧(0.6 mg·L-1),硝酸钙(30 mg·L-1)和水杨酸(0.028 mg·L-1)处理种子,比较植物源烟水和4种生长调节剂对5种常用中药材(菘蓝、桔梗、知母、黄芩、黄芪)种子发芽率、平均萌发时间和发芽指数的影响。结果:烟水对菘蓝、桔梗、黄芩种子的发芽率均有显著的提升效果,其中使黄芩种子发芽率提高27.27%;对5种种子的平均萌发时间没有显著影响;显著提高桔梗和黄芩的发芽指数,分别提高30.97%和27.49%;具有类似赤霉素的促进种子萌发的作用。结论:烟水的无毒性和易于取得性使其更易于应用于农业实践,综合来看,烟水技术在促进中药材种子萌发方面存在着巨大的潜力。     

外源5-氨基乙酰丙酸对盐胁迫下黄连种子萌发及幼苗生理特性的影响

目的 本研究通过对黄连种子萌发及幼苗生理特性的研究,旨在寻找提高黄连种子及幼苗在盐胁迫条件下抗性能力的途径.方法 用100 mmol/L的NaCl模拟盐胁迫,在外源5-氨基乙酰丙酸(ALA)处理后,对黄连种子的各萌发指标及黄连幼苗叶片细胞质膜透性、超氧阴离子产生速率,过氧化氢(H₂O₂)量,可溶性糖、可溶性蛋白、游离脯氨酸及丙二醛(MDA)量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性进行测定.结果 NaCl胁迫下的黄连种子萌发受到显著抑制,但是在经过不同浓度的ALA处理后,发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数等萌发指标均有升高.外源ALA处理显著提高了盐胁迫下黄连幼苗叶片可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸量,不同程度的提高了叶片超SOD、POD和CAT活性,显著降低了MDA量、质膜透性、超氧阴离子产生速率及H₂O₂量.结论 外源ALA通过提高黄连种子的萌发指数,提高渗透调节物质含量及抗氧化酶活性,降低细胞质膜氧化程度,有效地减缓NaCl 胁迫对黄连种子及幼苗产生的伤害,提高了种子及幼苗的抗盐能力.     

菟丝子种子休眠原因及解除方法初探

目的:陈年菟丝子干种子常因进入次生休眠而影响发芽率,本实验探讨导致中药菟丝子休眠的主要原因,并寻求最佳处理方法.方法:单独处理与复配处理结合,运用正交设计,分析发芽实验结果.结果:陈年菟丝子干种子吸水能力良好;水浸液与甲醇提取物均有发芽抑制物,后者抑制作用较强;单独处理效果普遍不如复配处理.结论:种子抑制物的存在是种子休眠的主导因素,最佳的处理方法分别为:①浓硫酸处理2 min后,用500 mg·L~(-1)的GA_3溶液处理60 min;②100 mg·L~(-1)的NaOH溶液处理20 min后,用500 mg·L~(-1)的GA_3溶液处理120 min.与空白对照15.3%的发芽率相比,最高萌发率分别达到了43.3%,41.7%.     

外源一氧化氮对干旱胁迫下白花蛇舌草种子萌发的影响

目的 探索外源一氧化氮（NO）对干旱胁迫下白花蛇舌草Oldenlandia diffusa种子萌发的影响,并确定缓解干旱胁迫的硝普钠（SNP,NO外源供体）最适浓度。方法 用15% PEG 6000模拟干旱胁迫,测定不同浓度梯度SNP处理后干旱胁迫下白花蛇舌草种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数。结果 干旱胁迫显著抑制了白花蛇舌草种子的萌发过程。SNP能显著促进干旱胁迫下白花蛇舌草种子的萌发,0.3 mmol/L SNP处理可提高发芽率和活力指数2.78倍和7.77倍;从发芽势和发芽指数来看,0.1 mmol/L和0.3 mmol/L SNP处理效果最佳且二者差异不显著。结论 SNP可显著缓解干旱胁迫对白花蛇舌草种子萌发的不利影响,提高白花蛇舌草种子的抗旱能力,其中以0.3 mmol/L SNP效果最佳。     

刺五加与短梗五加种子的蛋白质电泳分析

目的:建立适用于刺五加和短梗五加种子的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴别方法,为二者种子的鉴别及质量评价提供参考。方法:采用15%分离胶的SDS-PAGE电泳对15个产地的刺五加种子和2个产地的短梗五加种子中可溶性蛋白进行电泳分析,利用Band Scan 5.0软件对蛋白谱带蛋数目、谱带强度和相对分子质量等方面的差异进行比较。结果:17个种子样品共分离出31条清晰的蛋白谱带,其中2种种子的10条共有特征谱带和各自的1条标准特征谱带可作为刺五加和短梗五加种子的标准蛋白图谱。不同产地的刺五加种子蛋白电泳图谱具有一定的种内差异性。结论:该电泳方法和标准蛋白图谱可作为刺五加及短梗五加种子的鉴别依据。     

胶束电动毛细管电泳法快速分离测定南、北五味子中木脂素类成分

目的：建立胶束电动毛细管电泳法测定五味子中6种木脂素类成分的方法。方法：探讨了缓冲溶液、添加剂、分离电压、温度和进样条件等因素对分离检测的影响。在10 mmol·L^-1 NaH₂PO₄-Na₂HPO₄缓冲溶液（35%乙腈,37.5 mmol·L^-1 SDS,pH 8.0）、分离电压为28.0 kV的优化条件下,9 min内可实现五味子样品溶液的分析。结果：线性范围分别为25.5~1 020,25.75~1 030,12.0~480,25.5~1 020,24.25~970,19.75~790 mg·L^-1;检出限为0.5,0.8,1.0,1.0,1.0,1.5 mg·L^-1。结论：该方法与高效液相色谱法比较,在分离效果、柱效和分析速度方面具有明显优势。     

乌头块根浸提液对3种牧草的化感效应

乌头Aconitum carmichaeli是传统的大宗中药材之一,广泛种植于四川省江油市,所释放的化感物质严重影响周围和后茬作物的生长发育。试验以当地种植乌头的后茬牧草白三叶、黑麦草和紫花苜蓿为材料,研究了乌头块根浸提液(ETR)浸种对种子萌发和幼苗生长的化感效应。结果表明,牧草品种不同,种子发芽和幼苗生长对ETR浓度的响应也不一样。低浓度的ETR(0.01 g·L^-1)促进紫花苜蓿种子发芽,ETR 1.00 g·L^-1对3种牧草的种子发芽率均有抑制作用。用高浓度的ETR (1.00 g·L^-1)浸种,苗高的最大降幅为:紫花苜蓿(42.05%) ≥白三叶(40.21%)>黑麦草(10.64%)。因此,在乌头-牧草种植体系中,选择对ETR相对不敏感的黑麦草有益于减轻乌头产生的化感效应,提高土地整体生产力。随ETR浸种浓度提高,抑制牧草种子中的蛋白质、淀粉和肌醇磷酸盐水解,降低游离氨基酸、可溶性糖和可溶性磷含量,进而影响种子发芽。此外,高浓度的ETR还显著降低牧草幼苗的根系活力、硝酸还原酶活性和叶绿素含量,说明ETR中的化感成分可抑制养分吸收,硝酸盐同化和光合作用,妨碍幼苗生长。