芍药甘草汤对支气管哮喘作用机理的研究

目的探讨芍药甘草汤防治支气管哮喘小鼠的作用机制。方法采用卵蛋白（OVA）致敏制备小鼠哮喘模型,随机分正常对照组、模型对照组、地塞米松组、芍药甘草汤低、中、高剂量组,观测MDA的含量,观察肺组织形态学的改变,肺组织匀浆中SOD、MDA含量,肺泡灌洗液（BLAF）中的细胞计数及分类。结果病理学组织观察示芍药甘草汤中剂量组、地塞米松组炎症性变化较芍药甘草汤高、低剂量组即模型组明显减轻。芍药甘草汤中、高剂量组肺组织中SOD活力显著增高、MDA含量显著降低。芍药甘草汤中、高剂量组与模型对照组相比较,细胞总数及EOS、Lym比例均降低。结论芍药甘草汤可以抑制OVA致敏支气管哮喘小鼠各类炎性细胞的增生,调节肺组织中氧化/抗氧化系统的平衡,减轻氧自由基对肺组织结构的氧化损伤程度,芍药甘草汤对支气管哮喘有一定的预防治疗作用。     

经典名方大秦艽汤HPLC指纹图谱及含量测定方法研究

目的制备10批大秦艽汤标准煎液,建立其HPLC指纹图谱并计算指标成分含量、转移率等数据,为建立大秦艽汤的质量控制标准提供参考。方法依据古方要求还原至现代煎煮方式制备大秦艽汤标准煎液。采用岛津Inertsil ODS-3 C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;体积流量为1.0 m L/min;柱温为30℃;检测波长为237 nm;进样量为10μL。建立10批大秦艽汤HPLC指纹图谱,使用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2012A版)进行相似度分析,最后对共有峰进行鉴定和药材归属,并定量测定大秦艽汤中马钱苷酸、龙胆苦苷、升麻素苷的含量。结果建立了10批大秦艽汤的指纹图谱,相似度介于0.902～0.953,确认36个共有峰,指认出7、15、18～21、23、27、31、33、35号峰分别为马钱苷酸、龙胆苦苷、芍药苷、升麻素苷、阿魏酸、甘草苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、黄芩苷、黄芩素、甘草酸、汉黄芩素共11个成分;其中4～8、10～12、15号峰归属于秦艽,19、23号峰归属于防风,17、18号峰归属白芍,30号峰归属于独活,21、25、33号峰归属于甘草,22、27～29、35号峰归属于黄芩,1号峰归属于当归和独活,2号峰归属于秦艽、当归和细辛,3号峰归属于川芎和白芍,13号峰归属于甘草和独活,16号峰归属于秦艽和白芍,20号峰归属于川芎、当归和羌活;以马钱苷酸、龙胆苦苷、升麻素苷3项指标建立其质量控制标准,10批次样品中马钱苷酸、龙胆苦苷、升麻素苷质量分数分别为0.158～0.103、0.475～0.373、0.029～0.012mg/g。结论所建立的汤剂制备方法稳定可行,质量控制方法简单、专属性强,结果准确,可用于大秦艽汤的质量评价。     

安痫宁冲剂对小鼠癫痫模型脑组织中MDA、SOD、ATP酶的影响

目的：通过安痫宁冲剂对青霉素诱导的小鼠癫痫模型脑组织中MDA，SOD，ATP酶影响的实验研究，探讨安痫宁冲剂的抗癫痫作用，方法：采用青霉素诱导小鼠癫痫模型，利用化学比色法测定小鼠癫痫模型脑组织中MDA，SOD，ATP酶的含量，结果：模型组小鼠腹腔注射青霉素，均能成功致痫，其痫性发作程度较重，均为Ⅲ-Ⅴ级；安痫宁冲剂能降低癫痫小鼠脑中MDA的含量，提高SOD，ATP酶的活性，结论：安痫宁冲剂具有一定的抗癫痫作用，与其镇静安神，抗惊厥，清除自由基和维持N ^ ,K^ ,Mg^2 ,Ca^2 离子的动态平衡有关。     

贞芪扶正颗粒HPLC指纹图谱与其增强免疫功能的谱效关系分析

目的 通过谱效相关性分析探究贞芪扶正颗粒增强免疫功能的药效物质成分，为提升其质量标准提供实验依据。方法 收集6个厂家18批贞芪扶正颗粒产品，采用高效液相色谱法（HPLC）建立其指纹图谱，流动相乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）梯度洗脱（0~15 min，5%A；15~23 min，5%~8%A；23~30 min，8%~11%A；30~45 min，11%~18%A；45~60 min，18%~21%A；60~67 min，21%~23%A；67~90 min，23%~37%A），检测波长220 nm，通过相似度分析及层次聚类分析评价不同厂家产品的质量差异性，采用环磷酰胺诱导小鼠免疫低下模型考察不同厂家产品的免疫增强药效，采用Spearman双变量相关性分析进行指纹图谱与免疫增强功能的谱效学研究，利用高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MSⁿ）对谱效相关色谱峰进行鉴定，采用电喷雾离子源，正、负离子模式，扫描范围m/z 100~1 500。结果 建立了贞芪扶正颗粒的HPLC指纹图谱，确定了20个共有峰。质量分析及药效考察结果显示，不同厂家产品共有峰峰面积及药效作用差异明显；谱效相关性分析结果显示，指纹谱图中的12个色谱峰与该制剂具有免疫增强功能呈明显正相关，鉴定了其中8个色谱峰，分别为2号峰（红景天苷）、5号峰（松果菊苷）、6号峰（毛蕊异黄酮葡萄糖苷）、7号峰（特女贞苷异构体）、9号峰（异女贞苷）、11号峰（毛蕊异黄酮）、14号峰（女贞苷G₁₃或oleonuezhenide）和18号峰（刺芒柄花素）。结论 不同厂家生产的贞芪扶正颗粒产品质量及药效存在一定差异，通过谱效相关性分析阐明了该制剂具有免疫增强功能的主要药效物质基础，可为其质量标准提升提供有益借鉴。     

戊己胃漂浮缓释片抗家兔胃溃疡谱效关系

目的研究戊己胃漂浮缓释片抗家兔胃溃疡谱效关系。方法采用HPLC法建立戊己胃漂浮缓释片指纹图谱,以酸-乙醇致家兔胃溃疡模型考察抗胃溃疡作用,ELISA法测定抗胃溃疡药效指标表皮生长因子的含有量,灰色关联度分析法建立谱效关系模型。结果指纹图谱中共有峰对药效指标表皮生长因子EGF促进作用的贡献依次为峰号13681015791241416151132,其中13号峰(盐酸小檗碱)、6号峰(芍药苷)、8号峰(表小檗碱)、10号峰(黄连碱)、15号峰(吴茱萸碱)对戊己胃漂浮缓释片药效指标贡献最大,关联度均在0.750 0以上。结论戊己胃漂浮缓释片抗胃溃疡作用是多种成分共同作用的结果,可为探索其药效物质基础提供思路。     

经典名方芍药甘草汤古代与现代煎煮方法的差异性分析

目的:对比研究经典名方芍药甘草汤古代煎煮方法与现代煎煮方法的差异,为其复方制剂研究提供参考。方法:按照古代《伤寒论》和现代《医疗机构中药煎药室管理规范》记载的煎煮方法,分别进行芍药甘草汤复方煎煮,采用超高效液相色谱法建立指纹图谱和含量测定方法,以干膏率、指纹图谱,以及芍药苷、甘草苷、甘草酸含量作为评价指标,对古代煎煮方法和现代煎煮方法制得的煎液进行分析。结果:2种煎煮方法制得的煎液指纹图谱色谱峰数目基本一致,无明显差异,匹配出10个共有峰,相似度均大于0.99,并指认出没食子酸、芍药内酯苷、芍药苷、芹糖甘草苷、甘草苷、苯甲酸、异甘草苷、甘草素、苯甲酰芍药苷、甘草酸10个已知峰。2种煎液的相对保留时间和相对峰面积差异较小,提示2种煎煮方法对多数成分的提取效率基本一致。按现代方法煎煮的煎液中芍药苷、甘草苷和甘草酸含量明显高于古代煎煮方法,干膏率也明显高于古代煎煮方法。结论:芍药甘草汤的煎煮方法对其干膏率和芍药苷、甘草苷和甘草酸含量影响较为明显,但对指纹图谱的影响较小。     

甘草附子汤合煎液与分煎液对小鼠镇痛作用影响研究

目的：借助小鼠痛模型研究不同煎煮方法对方剂药效学的影响。方法：采用热板法、电刺激法等反应甘草附子汤的镇痛作用。结果：甘草附子汤合煎液与分煎液均能起到镇痛作用。二者药效较无统计学意义（P〉0．05）。     

柴胡加龙骨牡蛎汤抗癫痫作用及对癫痫大鼠脑组织内MDA、SOD、ATP酶的影响

目的:通过柴胡加龙骨牡蛎汤对青霉素诱导的大鼠癫痫模型的实验研究,探讨柴胡加龙骨牡蛎汤的抗癫痫作用及其机制。方法:以大鼠腹腔注射青霉素600万U/kg制作癫痫模型,观察柴胡加龙骨牡蛎汤对模型大鼠痫性发作行为的影响。同时利用化学比色法测定大鼠癫痫模型脑组织内SOD、MDA、ATP酶的含量。结果:成功用青霉素诱导大鼠癫痫模型,其痫性发作程度较重,为Ⅲ～Ⅴ;柴胡加龙骨牡蛎汤能降低大鼠脑中MDA的含量,提高SOD、ATP酶的活性。结论:柴胡加龙骨牡蛎汤具有抗癫痫作用,其机制可能与减轻氧自由基的损伤程度,改善脑组织ATP酶的活性有关。     

芍药甘草复方效应组分对大鼠胃底环行肌条作用的研究

目的:确定芍药甘草复方效应组分对大鼠胃底肌条作用的配比关系。方法:以大鼠胃底环行肌条收缩强度为指标,运用血清药理学方法采用正交设计观察芍药甘草复方效应组分对乙酰胆碱(ACh)下的离体大鼠胃底环行肌条的影响,由结果分析得出最佳配比。在此基础上进一步做确证性实验。同时,采用HPLC法测定含药血清图谱。结果:芍药甘草复方效应组分的最佳配比即含芍药苷效应组分、含甘草酸效应组分与含甘草总黄酮效应组分的配比为A3B3C3,含芍药苷效应组分和含甘草总黄酮效应组分均系影响药效的主要因素。在灌胃给予芍药甘草复方效应组分后120min所采血清的指纹谱中出现一些新的峰。结论:芍药甘草复方效应组分能抑制大鼠胃底环行肌条的收缩,含芍药苷效应组分、含甘草酸效应组分与含甘草总黄酮效应组分最佳组方配比为1∶1∶2。     

基于HPLC,PCA与相似度评价的芍药甘草汤传统汤剂与配方颗粒汤剂的差异规律分析

目的: 比较芍药甘草汤传统汤剂与配方颗粒汤剂的成分差异. 方法: 制备传统汤剂(TD)、自制配方颗粒汤剂(DGD-S)、市售A厂和B厂配方颗粒汤剂(DGD-A,DGD-B)共4类11批芍药甘草汤,采用HPLC建立指纹图谱,流动相乙腈(A)-0.05%磷酸水溶液(B,pH 2.42)梯度洗脱(0~8 min,16%A;8~35 min,16%~50%A;35~36 min,50%~100%A;36~38 min,100%~16%A;38~40 min,16%A),检测波长250 nm.以3批TD的平均信息为标准汤剂信息,从成分的出现或消失、指标性成分含量、共有峰面积、主成分分析及指纹图谱相似度共5个方面全面对比芍药甘草汤不同剂型的差异信息. 结果: DGD与TD比较,未见有紫外吸收的化学成分的出现与消失.指标性成分含量差别较大,其中DGD中甘草酸铵含量均与TD存在极显著差异.DGD-A中23个共有峰峰面积的总和与TD无显著差异,而DGD-S,DGD-B的共有峰面积之和与TD存在极显著差异,二者分别相当于TD的2.5,3.2倍.在PCA中,DGD-A更接近于TD,表明其各单体成分的绝对量更接近于TD,而DGD-S,DGD-B的绝对量远大于TD.DGD-A与标准汤剂的相似度最小,表明DGD-A中各成分间的比例与标准汤剂相差较大. 结论: 芍药甘草汤DGD与TD间仅有成分比例的明显差异,并无成分本身的明显差异;应按比例调整某些DGD的用量以使其与汤剂等效.     

当归芍药散含药血浆UPLC-UV指纹图谱研究

目的建立当归芍药散含药血浆指纹图谱并分析给药后血中移行成分。方法大鼠ig给予当归芍药散提取液,制备11组含药血浆,采用超高效液相色谱-紫外(UPLC-UV)法构建11组当归芍药散含药血浆的指纹图谱,运用指纹图谱参数共有峰、相似度进行分析。超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q/TOF-MS)法分析大鼠ig当归芍药散后血中移行成分。结果建立了当归芍药散含药血浆指纹图谱,通过对含药血浆、空白血浆图谱进行比对,指定了15个共有峰,相似度在0.933以上。初步鉴定了当归芍药散入血的15个成分,其中原型成分10个和代谢产物5个。结论当归芍药散含药血浆指纹图谱研究为进一步血中移行成分的研究提供了基础。     

基于灰色关联分析探索艾纳香非挥发性部位的抗炎活性谱效关系

目的:研究艾纳香非挥发性部位UPLC指纹图谱与抗炎药效之间的相关性,为明确艾纳香抗炎药效物质基础提供实验依据。方法:采用UPLC建立12批艾纳香非挥发性部位的指纹图谱,运用UPLC-Q-TOF-MS对艾纳香非挥发性部位的共有指纹峰进行指认,通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀炎症模型获取相应的药效数据,通过灰色关联分析建立其谱效关系。结果:UPLC指纹图谱显示艾纳香非挥发性部位有14个共有峰,与抗炎药效的关联度处于0.717 1~0.550 5,各特征峰所代表的化学成分对其抗炎药效贡献的大小顺序为3号峰 9号峰 4号峰 11号峰 2号峰 1号峰 14号峰 7号峰 6号峰 5号峰 12号峰 8号峰 10号峰 13号峰,并指认了其中9个共有峰,对抗炎药效贡献较大的前2个共有峰(3号和9号)对应的化学成分分别为3-O-咖啡酰基奎宁酸和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸。结论:通过谱效关系研究获得了艾纳香非挥发性部位的抗炎药效物质群,其抗炎药效是多种成分共同作用的结果,明确咖啡酰基奎宁酸类化合物为艾纳香非挥发性部位发挥抗炎药效的主要物质基础。     

基于酶活性的丹参茎叶活血活性谱-效模型

目的:以12批丹参茎叶为研究对象,为究其HPLC指纹图谱中色谱峰和活血活性的相关性,建立其基于酶活性的活血活性谱-效模型并进行验证。方法:采用高效液相色谱法和纤维蛋白原平板法,测定6批丹参茎叶的指纹图谱和体外活血活性值,用对照品对指纹图谱特征峰进行指认,并对指纹图谱特征峰成分与其活血活性进行相关分析;运用SPSS软件,采用主成分分析-相关性分析-多重线性回归的分析方法建立其谱-效模型,采用6批丹参茎叶对该模型进行验证。结果:丹参茎叶指纹图谱中得到7个特征峰,由Kendalls tau-b相关性分析可证明丹参茎叶活血活性与7个色谱峰峰面积有相关性,陡坡图分析得该模型的最优主成分数为5,经指认分别为原儿茶醛,咖啡酸,共有峰5(未指认),迷迭香酸和丹酚酸B。其中原儿茶醛、共有峰5和丹酚酸B对活血作用显正相关,咖啡酸(CA)和迷迭香酸(PCA)对活血作用显负相关,预测值和实测值的平均相对误差较小。结论:该实验建立的基于酶活性的活血活性谱-效模型可较好地预测丹参茎叶的活血活性。     

基于UPLC指纹图谱与抗氧化谱效关系的枸杞子质量标志物研究

目的 建立基于超高效液相色谱法（UPLC）指纹图谱与抗氧化谱效关系的枸杞子质量标志物研究方法,为其质量评价提供依据。方法 采用UPLC建立31批枸杞子指纹图谱,基于指纹图谱共有峰峰面积结果,采用聚类分析、主成分分析（PCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）方法评价枸杞子整体质量并筛选出主要质量标志物。以多功能氧化酶（MFO）、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、总抗氧化能力（T-AOC）的测定值评价枸杞子的抗氧化能力,利用双变量相关性分析法与正交偏最小二乘法-回归分析研究指纹图谱共有峰与抗氧化活性指标的谱效关系,综合分析筛选质量标志物。结果 枸杞子UPLC指纹图谱共确定34个共有峰,31批枸杞子聚为3类,可区分不同产地的枸杞子;PCA得到4个影响枸杞子分类的主要因子;OPLS-DA显示共有峰2、7、17、19、33的化合物可作为鉴别和区分枸杞子的主要质量标志物;双变量相关性分析表明峰8、11、15、20、23、34的化合物与MFO、DPPH、T-AOC的测定值呈极显著相关,正交偏最小二乘法-回归分析表明峰11、15、23、25、31、33、34的化合物是主要的活性成分群,此类成分可作为枸杞子抗氧化活性的质量标志物。结论 研究结果阐明了枸杞子抗氧化活性的物质基础,筛选出的质量标志物可为枸杞子的质量控制与评价提供依据。     

木香HPLC指纹图谱的建立及其抗氧化、抗辐射作用谱效关系研究

目的 建立木香Aucklandia lappa的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱并对特征峰进行液相色谱串联三重四级杆质谱仪（LC-MS）分析,考察木香抗氧化、抗辐射的谱效关系。方法 对12批不同产地的木香药材进行HPLC分析,建立指纹图谱。采用LC-MS技术对指纹图谱中的共有特征峰进行结构分析。以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率为抗氧化作用的药效指标,研究其抗氧化作用。采用MTT法检测辐射后的UC-MSC细胞活性,以细胞活力值为抗辐射作用的药效指标,研究其抗辐射作用。采用灰色关联分析法建立谱效关系,研究木香抗氧化与抗辐射的物质基础。结果 通过指纹图谱的建立,共标定了12个共有峰,其中12批药材相似度均大于0.971。通过文献比对和LC-MS数据解析,确定了3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、东莨菪内酯、木香烃内脂和去氢木香内酯等12个特征峰成分。通过清除DPPH自由基结果发现,12批木香均有抗氧化能力,谱效分析结果显示,去氢木香内酯同分异构体和去氢木香内酯与抗氧化能力有密切关系。通过细胞活力值显示,12批木香部分批次具有抗辐射能力。根据谱效关系分析,发现木香抗辐射与诱导...     

紫苏叶HPLC指纹图谱建立及其抗流感病毒活性谱效关系研究

目的 研究紫苏叶Perillae Folium的化学成分,化学模式识别法建立紫苏叶HPLC指纹图谱,并研究其抗流感病毒活性,为其进一步开发利用提供依据。方法 采用超高效液相色谱-三重四级杆飞行时间质谱联用（UPLC-Q-TOF-MS/MS）技术,鉴定紫苏叶的主要化学成分,建立HPLC指纹图谱,匹配共有峰并进行归属,通过对照品比对指认6种化学成分,使用SPSS 22.0、SIMCA 14.1软件进行聚类分析和主成分分析（principal component analysis,PCA）,测定其抗流感病毒生物效价,并通过灰色关联分析（gray correlation analysis,GCA）建立其谱效关系。结果 从紫苏叶中鉴定出47个化合物;选取了19个色谱峰作为指纹图谱的共有峰,通过聚类分析可将15批紫苏叶分为2类,PCA与聚类分析结果基本一致;15批不同产地的紫苏叶样品均具有抗流感病毒活性,其生物效价为6.21、5.58、4.19、8.19、6.09、5.82、6.10、5.36、5.54、10.86、4.74、5.78、3.78、7.98、5.65 U/mg。19个共有峰与抗病毒活...     

牛蒡子-甘草药对指纹图谱的建立及其抗炎活性谱效关系研究

目的 建立牛蒡子-甘草药对的HPLC指纹图谱,研究探讨牛蒡子-甘草药对抗炎活性的谱效关系。方法 采用HPLC法建立牛蒡子-甘草药对的指纹图谱,结合聚类分析与主成分分析（principal component analysis,PCA）对收集到的18批牛蒡子-甘草药对进行质量评价;以脂多糖刺激RAW264.7细胞制备炎性细胞模型,以一氧化氮分泌量为指标考察18批牛蒡子-甘草药对的抗炎活性,采用灰色关联度分析（gray correlation analysis,GCA）和偏最小二乘法回归（partial least squares regression,PLSR）分析HPLC共有峰与炎性指标间的谱效相关性。结果 指纹图谱研究共标定38个共有峰,经混合对照品指认出13个成分,聚类分析与PCA结果一致,综合评价结果显示,样品S7质量最佳。GCA结果显示,牛蒡子-甘草药对HPLC指纹图谱各共有峰抗炎活性关联度为F5（甘草苷）＞F17（甘草酸）＞F1＞F3＞F4＞F9＞F11（异甘草苷）＞F13（牛蒡子苷）＞F19＞F23＞F21（牛蒡苷元）＞F14;通过PLSR分析发现,牛蒡子-甘草药对38个共有峰中17个特征峰（VIP＞1）与其抗炎作用显著相关,且F21（VIP＞1.5）贡献较大。结论 建立的牛蒡子-甘草药对HPLC指纹图谱可用于其质量评价,谱效相关性研究初步筛选出的17个成分可作为其抗炎作用有效成分群,为牛蒡子-甘草药对抗炎活性物质基础与作用机制的阐释提供研究基础和科学依据。     

基于UPLC-Q-Exactive Plus-Orbitrap MS的丹参提取物成分表征及其抗血栓作用谱效相关药效物质基础解析

目的 研究不同产地丹参Salvia miltiorrhiza提取物化学成分与其抗血栓作用的谱效关系,分析丹参提取物的抗血栓活性成分。方法 采用超高效液相色谱-四极杆-静电轨道阱-高分辨质谱（UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS）法建立丹参提取物的指纹图谱;结合层次聚类分析（hierarchical cluster analysis,HCA）、正交偏最小二乘-判别分析（orthogonal partial least squares-discrimination analysis,OPLS-DA）探讨不同产地丹参的成分差异;以斑马鱼为模式生物测定不同产地丹参提取物的抗血栓活性;利用偏最小二乘回归（partial least squares regression,PLSR）分析进行谱-效相关研究,筛选出药效贡献较大成分。结果 通过聚类分析,60批丹参样品聚为2类;OPLS-DA筛选出2组间的15个差异共有峰;PLSR分析提示在标定的39个共有峰中,与丹参抗血栓活性最相关的化合物可能为峰1（二糖）、峰31（新隐丹参酮）、峰26（丹参醛）、峰34（隐丹参酮）、峰39（二氢隐丹...     

虎杖提取物指纹图谱与其体外抗氧化作用的灰关联度分析

目的： 探索虎杖总提取物及不同极性部位指纹图谱各特征峰所代表的化学成分对其体外抗氧化作用贡献大小。 方法： 采用DPPH测定虎杖总提取物及不同极性部位的体外抗氧化活性;采用HPLC法测定其特征指纹图谱;采用灰关联度分析法研究其谱效关系。 结果： 虎杖体外抗氧化活性是其内部多种成分共同作用的结果,各成分对抗氧化作用贡献大小顺序（按特征峰编号）为8>1>12（蒽苷B）>4（虎杖苷）>2>6（白藜芦醇）>3>7>5>10>9>13>14（大黄素）>11>15（大黄素甲醚）。结合文献报道,初步确定在本实验参数条件下,关联度值低于0.6的11,14,15号色谱峰所代表的化学成分无贡献作用。 结论： 本试验对虎杖总提取物及不同极性部位抗氧化活性的谱效关系进行了初步探索,为中药药效物质基础和谱效关系研究提供了一定参考。