LC-MS/MS测定大鼠血浆中咖啡酸、绿原酸及其药代动力学研究

该研究建立大鼠血浆中咖啡酸、绿原酸的LC-MS/MS测定方法,并用于大鼠体内的药代动力学研究。6只SD大鼠,单剂量静脉注射(4 mL·kg^-1)灯盏细辛注射液,以替硝唑为内标,用LC-MS/MS测定给药后血浆中的药物浓度,并用DAS 1.0软件计算药动学参数。咖啡酸、绿原酸的线性范围分别为2~128 μg·L^-1(r = 0.998 1),3~384 μg·L^-1(r = 0.998 7)。方法学考察均符合要求。日内、日间变异系数(RSD)均小于10%,精密度和准确度等均符合生物样品分析的要求。大鼠体中咖啡酸药代动力学参数:t_1/2β为(130.91±38.77) min,AUC_0-t为(4.89±0.96) mg·min·L^-1,CL为(0.12±0.02) L·min^-1·kg^-1;绿原酸药代动力学参数:t_1/2β为(49.38±8.85) min,AUC_0-t为(9.54±0.95) mg·min·L^-1,CL为(0.09±0.003) L·min^-1·kg^-1。该研究建立的LC-MS/MS分析方法准确灵敏,适于咖啡酸、绿原酸的药代动力学研究。     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中莫诺苷血药浓度

莫诺苷是从中药山茱萸Cornus officinalis Sieb. & Zucc.中提取分离获得的环烯醚萜苷类化合物,具有神经保护等多种药理活性.本研究首次采用LC-MS/MS技术建立了大鼠血浆中莫诺苷浓度的测定方法.血浆样品采用蛋白沉淀法,以金丝桃苷作为内标,色谱柱为Inertsil C8-3色谱柱(2.1 mm×50 mm,5 μm),流动相为水(含1 mmol·L^-1甲酸钠)-乙腈梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1.采用电喷雾离子源(ESI),正离子模式,多反应监测(MRM).莫诺苷在2~5 000 μg·L^-1 (r= 0.995 7)线性关系良好,最低定量限为2 μg·L^-1.方法精密度、准确度、回收率和基质效应均符合生物样品测定的要求,适合大鼠血浆中莫诺苷浓度的测定.应用该方法进行莫诺苷在大鼠体内的药代动力学研究,给药剂量为20 mg·kg^-1,绘制血药浓度-时间曲线,并采用DAS 2.0 计算得主要药代动力学参数:AUC_0-∞为(587.6±290.7) μg·min·L^-1,C_max为(334.2±148.0) μg·L^-1,T_max为(0.6±0.3) h,t_1/2为(0.7±0.3) h.     

广痛消泡沫气雾剂在人体血浆中的药代动力学研究

目的: 考察广痛消泡沫气雾剂中主要成分延胡索乙素(THP)和盐酸小檗碱(Ber)在人体内的药代动力学过程。方法: 采用血药浓度法,LC-MS/MS 测定健康志愿者肛门给广痛消泡沫气雾剂后不同时间点的血药浓度,Win Nonlin药动学数据处理软件计算药动学参数。结果: THP和Ber分别在0.000 594~1.188,0.000 536~1.072 μg·L^-1表现出良好的线性关系,高、中、低 3 个剂量的回收率、日内和日间精密度均符合要求。THP和Ber的主要药代动力学参数T_max分别为(132.5±25.5),(132.5±30.1)min,C_max分别为(0.55±0.30),(0.31±0.32)μg·L^-1。结论: LC-MS/MS 选择性好,灵敏度高,适用于血浆样品成分含量的测定,可成功用于广痛消泡沫气雾剂的健康人体血浆的动力学研究,为进一步的复方药代动力学的研究奠定了基础。     

补肾通络方中马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷的体内药代动力学研究

研究灌胃补肾通络方后大鼠血浆中马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷药代动力学特征。采用液-液萃取法处理血浆样品;HPLC-UV检测含量,色谱柱为Johnson spherigel C₁₈(4.6 mm×250 mm, 5 μm),流动相为甲醇-0.01%冰醋酸水溶液,梯度洗脱,流速为1 mL·min^-1,柱温为30 ℃,检测波长:马钱苷为235 nm,阿魏酸和二苯乙烯苷为320 nm,进样量为10 μL。采用DAS 2.0软件对所测数据进行处理,得到大鼠血浆中马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷的主要药动学参数如下:C_max分别为(0.369±0.042),(0.387±0.071),(0.233±0.044) mg·L^-1;t_max分别为(0.226±0.022),(0.282±0.031),(0.233±0.044) h;t_1/2β分别为(6.89±0.20),(10.7±0.11),(6.93±0.090) h;AUC_0-∞分别为(1.91±0.36),(3.22±0.52),(1.52±0.33) mg·h·L^-1;AUC_0-t分别为(1.62±0.33),(2.58±0.43),(1.30±0.30) mg·h·L^-1;CL分别为(20.2±4.0),(1.39±0.23),(31.7±6.9) L·h^-1·kg^-1。药代动力学研究结果表明,灌胃补肾通络方后马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷药动学曲线均符合血管外给药二室模型,且3种成分吸收快,马钱苷和二苯乙烯苷消除速度中等,阿魏酸消除慢(但生物利用度为最高),每天给药3次能维持血药浓度,适合制成普通口服制剂。     

新型乌贝速释片的生物等效性研究

目的: 制备一种新型乌贝速释片,并研究该剂型与乌贝散在Beagle犬体内的药代动力学和生物等效性。方法: 采取粉末直接压片法制备乌贝速释片,将6只Beagle犬随机分为2组,分别口服给予乌贝速释片和乌贝散,采用LC-MS/MS测定给药后不同时刻血浆中贝母素甲的浓度,采用DAS 2.0软件按非房室模型处理得药动学参数,评价速释片剂与散剂的生物等效性。结果: 乌贝速释片中贝母素甲的主要药动学参数为C_max(7.4±2.3) μg·L^-1,AUC_0-t (59.13±15.25) μg·L^-1·h^-1,T_max(1.5±0.0) h,乌贝散中贝母素甲的主要药动学参数为C_max(8.0±1.7) μg·L^-1,AUC_0-t (68.78±16.27) μg·L^-1·h^-1,T_max(1.5±0.0) h,乌贝速释片中贝母素甲的lnAUC_0-t和lnC_max的90%置信区间分别为乌贝散相应参数的95.4%~104.6%,90.9%~109.1%。结论: 自制的乌贝速释片与乌贝散具有生物等效性,且生产工艺简单,服用方便。     

灯盏乙素及其衍生物灯盏乙素乙酯在大鼠体内的药代动力学的比较

该文建立了测定大鼠血浆中灯盏乙素及灯盏乙素乙酯的反高效液相色谱方法,比较灯盏乙素及其衍生物在大鼠体内的药代动力学特点.大鼠分别灌胃给予104 mg·kg^-1灯盏乙素和114.5 mg·kg^-1灯盏乙素乙酯,颈静脉采血,HPLC测定血浆中灯盏乙素及灯盏乙素乙酯的浓度,经Winnonlin软件拟合房室模型,计算药代动力学参数.结果表明,灯盏乙素和灯盏乙素乙酯口服后在体内均呈非房室模型,药时曲线有双峰现象.主要药代动力学参数:灯盏乙素的T_max为(6±1.26) h,C_max为(321.55±48.31) μg·L^-1,AUC_0-t为(2 974±753) h·μg·L^-1;灯盏乙素乙酯的T_max为0.5 h,C_max为(1 550.82±219.75) μg·L^-1,AUC_0-t为(6 407±399) h·μg·L^-1.灯盏乙素乙酯比灯盏乙素入血速度快,且生物利用度是灯盏乙素的2倍以上.     

银杏内酯类化合物在大鼠体内的绝对生物利用度研究

研究银杏内酯A(GA)、银杏内酯B(GB)和白果内酯(BB)在大鼠体内的药动学特征及其绝对生物利用度。该实验建立了检测大鼠血浆中GA,GB,BB的LC-MS/MS分析方法,考察大鼠经口服(ig)和静脉注射(iv)给药后血浆中3种银杏内酯类化合物的血药浓度,采用DAS 2.0药动学处理软件,计算GA,GB,BB的药动学参数及其绝对生物利用度。结果显示,GA,GB,BB经大鼠注射给药后的C_max分别为(513.9±116.9),(701.3±76.0),(5 255.6±476.8) μg·L^-1,AUC_0-t分别为 (960.9±268.5),(779.5±140.6),(7 409.3±1 181.1) μg·h·L^-1;灌胃给药后的C_max分别为(522.9±39.9),(146.8±31.6), (2 711 .9±588.9) μg·L^-1,AUC_0-t分别为(1 760.4±300.7),(636.6±180.3),(16 651.4±1 306.5) μg·h·L^-1。GA,GB,BB在大鼠体内的的绝对生物利用度分别为(61.1±10.4)%,(27.2±7.7)%,(56.2±4.4)%。该实验所建立的方法专属性好,灵敏度高,可用于GA,GB,BB在大鼠体内的药代动力学和生物利用度研究。     

脉络宁注射液中5种酚酸类成分血药浓度的LC-MS/MS测定及大鼠体内药代动力学研究

通过建立准确灵敏的LC-MS/MS法,测定8只SD大鼠,单剂量尾静脉注射（4 mL·kg^-1）脉络宁注射液后,血浆中绿原酸、咖啡酸、3,4-二咖啡酰基奎宁酸（3,4-DCQA）、阿魏酸、肉桂酸的浓度,所测数据使用DASver 1.0软件进行处理,计算主要药动学参数。结果显示,绿原酸、咖啡酸、3,4-DCQA、阿魏酸、肉桂酸的线性范围分别为2.006~1 027 μg·L^-1（r=0.999 6）,1.953~1 000 μg·L^-1（r=0.999 7）,28.51~1.459×10⁴ μg·L^-1（r=0.998 9）,1.836~940.0 μg·L^-1（r=0.997 7）,4.780~2 447 μg·L^-1（r=0.998 6）。方法学考察5种酚酸类成分血浆样品反复冻融3次、-75 ℃放置20 d、室温放置4 h以及血浆样品处理后的分析物放置24 h的稳定性均良好,日内、日间变异系数（RSD）小于5.0%,精密度和准确度等均符合生物样品分析的要求。大鼠体中绿原酸药代参数：t_1/2为（49.78±12.81） min,AUC_0-t为（123.55±14.82） mg·min·L^-1, CL为（0.004 3±0.000 5） L·min^-1;咖啡酸药代参数t_1/2为（36.65±10.59） min,AUC_0-t为（91.67±11.77） mg·min·L^-1,CL为（0.005 7±0.000 7） L·min^-1;3,4-DCQA药代参数：t_1/2为（50.08±13.78） min,AUC_0-t为（278.34±31.82） mg·min·L^-1,CL为（0.001 6±0.000 2） L·min^-1;阿魏酸药代参数t_1/2为（51.39±15.52） min,AUC_0-t为（34.72±4.67） mg·min·L^-1,CL为（0.000 4±0.000 1） L·min^-1;肉桂酸药代参数t_1/2为（74.42±18.32） min,AUC_0-t为（34.63±4.82） mg·min·L^-1,CL为（0.007 7±0.001 1） L·min^-1。该文所建立的LC-MS/MS适用于绿原酸等5种酚酸类成分的药代动力学研究。     

黑果枸杞含片体内抗氧化作用

目的: 研究黑果枸杞含片的体内抗氧化作用. 方法: 40 只小鼠随机分为4组:正常组、黑果枸杞含片低、高剂量组(0.08,0.16 mg·g^-1)和阳性药组(维生素C, 0.02 mg·g^-1).各组分别连续ig给药28 d后眼眶采血及取肝组织,试剂盒测定小鼠血清和肝脏中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和过氧化氢酶(CAT)活性. 结果: 与正常组比较,黑果枸杞含片低、高剂量组小鼠的体重没有明显变化,小鼠血清和肝组织中MDA分别为(5.97±2.53),(11.08±3.72) μmol·L^-1和(5.84±1.44),(10.79±2.06) μmol·L^-1与正常组(8.69±2.85) μmol·L^-1,(14.49±1.56) μmol·L^-1相比显著降低(P<0.05,P<0.01),T-AOC,SOD,GSH-Px和CAT 活性明显提高(P<0.05,P<0.01),尤其是高剂量组T-AOC,SOD,GSH-Px和CAT活性显著提高. 结论: 黑果枸杞含片具有显著的体内抗氧化活性.     

柴胡疏肝散对免疫损伤性肝纤维化的防治作用

目的: 探讨柴胡疏肝散对肝纤维化的防治作用. 方法: 70只Wistar大鼠随机分为7组:正常组、病理模型组、秋水仙碱治疗组、柴胡疏肝散低、中、高剂量组、柴胡疏肝散预防组.除正常组外,其余各组均采用猪血清腹腔注射诱发肝纤维化,0.5 mL/只,2次/周,连续10周,5周后即可形成肝纤维化.预防组于造模同时给药(以柴胡疏肝散6.3 g·kg^-1),各治疗组于造模第6周给药,持续至第10周.秋水仙碱治疗组剂量0.5 mL·kg^-1·d^-1,柴胡疏肝散低、中、高剂量组(3.5,6.3,12.6 g·kg^-1·d^-1).用全自动分析法测定各组血清肝功能、放射免疫法测定肝纤维化指标,采用酸性水解法检测肝组织羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量,并观察病理变化. 结果: 与模型组比较,柴胡疏肝散中剂量组血清丙氨酸转氨酶(ALT),(156.5±3.2) U·L^-1 VS (78.4±4.6) U·L^-1(P<0.01);天冬氨酸转氨酶(AST),(387.4±12.7) U·L^-1 VS (232.5±13.5) U·L^-1(P<0.01);r-谷氨酰转肽酶(GGT),(128.2±4.0) U·L^-1 VS (78.5±4.2) U·L^-1(P<0.01);碱性磷酸酶(ALP),(152.75±5.01) U·L^-1 VS(42.51±4.67) U·L^-1(P<0.01);透明质酸(HA),(337.2±22.1)VS(140.6±21.2) μg·L^-1(P<0.01);PCⅢ(145.31±17.14) μg·L^-1VS(85.5±19.7)μg·L^-1(P<0.05);Ⅳ型胶原(135.1±22.4)VS(88.37±21.09)(P<0.05);层黏连蛋白(LN),(317.5±21.3)VS(148.4±18.4),(P<0.05)含量均显著下降, 肝组织(HYP)(527.2±34.2)VS(346.2±43.1)(P<0.01)含量显著降低. 结论: 柴胡疏肝散有明显的抗肝纤维化作用.     

丹参药材中铅、镉、砷、汞、铜的含量测定

[目的]对不同产地的丹参药材中铅、镉、砷、汞、铜的含量进行测定,为高品质丹参药材的筛选提供某种依据,并为中药材质量标准的建立提供一定的参考价值.[方法]样品经湿法消解后,用原子吸收分光光度法进行检测.[结果]超标率为:铅6.25%;镉100%;砷0;汞0;铜31.25%.[结论]不同产地的丹参药材中砷、汞含量较低,铅和铜的含量个别超标,镉含量严重超标.     

Isolation and hypoglycemic activity of eleutherans A, B, C, D, E, F, and G: glycans of Eleutherococcus senticosus roots

Intraperitoneal injection of an aqueous extract of the crude drug "shigoka" (Siberian ginseng), Eleutherococcus senticosus roots, remarkably diminished plasma-sugar level in mice. Fractionation of the extract by monitoring the activity yielded seven glycans, eleutherans A, B, C, D, E, F, and G, which exerted marked hypoglycemic effects in normal and alloxan-induced hyperglycemic mice.     

反相高效液相色谱同时测定苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱和槐胺碱的含量

目的 :建立同时测定苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱和槐胺碱的 HPL C方法。方法 :用 VP-ODS150 mm× 4.6mm,5μm色谱柱 ,柱温 50℃ ,以甲醇 -水 -三乙胺 (55∶ 45∶ 0 .2 )为流动相 ,紫外检测波长 2 15nm,流速 0 .8ml/ min。结果 :在所确立的色谱条件下 4种生物碱得到很好地分离 ,标准曲线显示在 0 .1～ 0 .7μg范围内具有良好的线性关系 ,平均回收率为98.5%～ 10 1.0 %。结论 :该方法简便、快速、准确 ,可用于生药及制剂中苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱和槐胺碱的同时测定     

Antimicrobial, anti-inflammatory, antiparasitic, and cytotoxic activities of Galium mexicanum

Ethnopharmacological relevance

To study the potential benefit of the traditional Mexican medicinal plant Galium mexicanum Kunth (Rubiaceae). Hexane, chloroform, and methanol extracts as well as various fractions from these extracts were tested to determine antibacterial, antifungal, antiparasitic or anti-inflammatory activities in vitro.

Materials and methods

Aerial parts of the plant were extracted with various solvents and fractionated accordingly. Their antibacterial and antifungal activities were assessed on nine bacterial and four fungal strains. Leishmania donovani was used as a protozoan strain for antiparasitic activity. The anti-inflammatory activity of the compounds was investigated by measuring the secretion of interleukin-6 when macrophages were exposed to lipopolysaccharide.

Results

Various extracts and fractions obtained from this plant exhibit antibacterial, antifungal, antiparasitic, and anti-inflammatory activities. Of special interest was the hexane fraction HE 14b, which show antibacterial (ranging between 67 and 666 μg/ml) and antifungal (at concentrations of 333 μg/ml) activities. Also the hexane fraction HE 5 exhibited antiparasitic activity (at concentrations of 260 μg/ml), whereas the methanol fraction ME 13-15 showed a potent anti-inflammatory activity when compared to dexamethasone. Chemical analyses of the chloroform extract show the presence of triterpenes, saponins, flavonoids, sesquiterpene lactones, and glucosides, but no tannins were detected in the assayed extract.

Conclusions

The benefit of Galium mexicanum as a traditional medicinal plant was confirmed using antibacterial and antifungal assays in vitro. We also report for the first time, and to the best of our knowledge, antiparasitic and anti-inflammatory activities of this plant.     

电感耦合等离子质谱法测定热毒宁注射液中有害元素铅砷镉汞铜的含量

目的: 建立电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS) 测定热毒宁注射液中铅(Pb),砷(As),镉(Cd),汞(Hg),铜(Cu)5 种元素同时的方法。 方法: 样品经微波消解后,以ICP-MS同时测定上述5种元素,其中Cu,As以铬(Ge)作为内标, Cd以铟(In)作为内标,Hg,Pb以铋(Bi)作为内标进行定量以改善基体效应和干扰。 结果: 各元素的检出限在0.009~0.113 μg ·L^-1; 各元素的线性关系良好,Pb,As,Cd,Cu,Hg线性范围分别为0~20,0~20,0~10,0~200,0~5 μg ·L^-1。r均≥ 0.999;精密度RSD<1.9%;重复性良好,回收率在97.8%~110.9%,RSD<4.3%。20批样品中5种元素的含量均符合规定。 结论: 该方法操作简便,分析速度快,灵敏度高,各项分析性能指标均达到要求,适用于热毒宁注射液中Pb,As,Cd,Hg,Cu元素的测定。     

从热毒湿瘀虚辨治小儿IgA肾病

IgA肾病病理机制复杂,热邪为IgA肾病诱发和加重的始动因素,湿毒内蕴是IgA肾病关键病机,瘀血为IgA肾病病理基础,气阴两虚为IgA肾病的根本病机。设立总治则为祛邪扶正,常用治疗方法有清热解毒、清热利湿、活血化瘀、益气养阴。     

中医综合康复护理气虚血瘀中风后肢体障碍

[目的]观察中医综合康复护理中风后肢体障碍疗效。[方法]使用前瞻性设计方法,对100例住院患者使用中医综合康复护理方法;上肢瘫痪按摩合谷、内关、曲池、少海等穴,托住患者肘关节将上肢托起,使肱骨外旋让肩关节依次做外展、内收、外旋、内旋等动作,托起前臂,使前臂分别做前旋和后旋动作,握住患侧手掌,使腕关节依次做内旋、外旋、腕屈、背伸等动作,握住指尖,使指关节依次做外展、内收、屈伸等动作,每个动作重复50~100次;下肢瘫痪按压双膝眼,照海,昆仑,承山,涌泉等穴,双手握抬起瘫痪下肢,使髋关节依次做内旋、外旋、内收、外展等动作,使下肢屈膝、屈髋,踝关节做左旋、右旋、背屈、跖屈,每个动作重复50~100次。连续护理2周为1疗程。观测临床症状、满意度、MBI指数评分、不良反应。连续护理2疗程(4周),判定疗效。[结果]治愈52例,好转18例,无效30例,总有效率70.00%;MBI指数评分(P0.01)。[结论]中医综合康复护理中风后肢体障碍,疗效满意,可显著提高生活质量,值得推广。     

血竭含药血清对雪旺氏细胞NGF,BDNF,CNTF,LNGFR,TrkA,GDNF,GAP-43和NF-H表达的影响

目的:观察血竭含药血清对雪旺氏细胞NGF,BDNF,CNTF,LNGFR,TrkA,GDNF,GAP43和NF-H表达的影响,探讨其促进周围神经再生的可能机制.方法:SD大鼠随机分为血竭给药组(灌服血竭的香油溶液)和空白对照组(等体积香油),制备血竭含药血清和空白对照血清.选取出生3 dSD大鼠双侧坐骨神经制备雪旺氏细胞;将培养的雪旺氏细胞分为血竭组和空白对照组,分别用10％血竭含药血清和空白对照血清干预培养.48 h后应用RT-PCR法检测各组雪旺氏细胞NGF,BDNF等基因mRNA表达水平.结果:镜下观察到大部分雪旺氏细胞呈双极梭形,细胞呈肩对肩或端对端排列,免疫细胞化学鉴定均呈阳性;与空白组比较,血竭组NGF,LNGFR,GDNF和GAP43 mRNA表达上调(P＜0.01),BDNF mRNA表达下调(P＜0.05),CNTF和TrkA的mRNA均下调(P＜0.01),NF-H mRNA无显著差异.结论:中药血竭可能是通过上调NGF,LNGFR,GDNF,GAP-43的mRNA的表达,同时下调BDNF,CNTF,TrkA mRNA来发挥其促进神经修复作用.     

分离性上肢运动障碍型颈椎病中西医结合治疗

目的:探讨分离性上肢运动障碍型颈椎病的诊断、治疗。方法:综合分析2例病人的临床症状、体征、影像学资料和诊治过程及预后。结果:经综合的中西医结合治疗后,2例均恢复良好。结论:该型颈椎病比较特殊,少见,因易与运动神经元病相混淆而导致误诊,提高对这种少见的非典型颈椎病的认识,尽早明确诊断和针对影像学而采取的治疗方案对该病的预后有重要意义。