羧甲基茯苓多糖含量测定

目的：建立羧甲基茯苓多糖含量测定方法。方法：以无水葡萄糖为对照,采用苯酚-硫酸法测定羧甲基茯苓多糖的含量。结果：葡萄糖在0.002～0.012mg·mL^-1范围呈良好的线性关系,回归方程为Y=49.016X-0.002 9（R=0.999 6）。测得羧甲基茯苓多糖含量为57.72%。结论：该方法操作简便,重现性好,测定结果准确可靠,可用于中药多糖含量的分析。     

羧甲基茯苓多糖药理作用研究进展

羧甲基茯苓多糖,为中药茯苓的主要成分茯苓多糖经羧甲基化而成,是当前茯苓研究最多的活性成分之一。研究表明,羧甲基茯苓多糖具有免疫调节、抗肿瘤等作用。近年来,随着研究的深入与拓展,羧甲基茯苓多糖的药理作用更加明确,进一步显示出其在肿瘤、免疫缺陷、肝硬化、炎症性肠病等诸多疾病治疗上可能具有广阔的应用前景。该文对羧甲基茯苓多糖药理作用的研究进展进行综述,可为进一步开展对羧甲基茯苓多糖的研究及尽早将其应用于临床治疗而奠定基础。     

羧甲基茯苓多糖钠体外抗单纯疱疹病毒I型的作用

目的观察羧甲基茯苓多糖钠体外抗单纯疱疹病毒 I型 (HSV- I)的作用.方法采用细胞病变抑制试验法,观察羧甲基茯苓多糖钠对因感染 HSV- I而引起的猪肾传代细胞病变的保护作用.结果在感染 10和 100 TCID50(半数细胞培养感染量 )的 HSV- I情况下,羧甲基茯苓多糖钠( 2.0 mg/mL)对 HSV- I的致猪肾传代细胞的细胞病变( CPE)具有抑制作用,在感染 HSV- I 10 TCID50的情况下,羧甲基茯苓多糖钠的 ID50为 0.5 mg/mL.结论羧甲基茯苓多糖钠在体外有抗 HSV- I作用.     

羧甲基茯苓多糖钠体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型的作用

目的 观察数甲基茯苓多糖钠体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-I)的作用。方法 采用细胞病变抑制试验法，观察羧甲基茯苓多糖钠对因感染HSV—I而引起的猪肾传代细胞病变的保护作用。结果 在感染10和100TCID50(半数细胞培养感染量)的HSV—I情况下，羧甲基茯苓多糖钠(2．0mg／mL)对HSV—I的致猪肾传代细胞的细胞病变(CPE)具有抑制作用，在感染HSV-I 110TCID50的情况下，羧甲基茯苓多糖钠的ID50为0．5mg／mL。结论 羧甲基茯苓多糖钠在体外有抗HSV-I作用。     

羧甲基茯苓多糖对小鼠免疫功能的影响

目的　观察羧甲基茯苓多糖 (CMP)体内外给药对小鼠免疫功能的影响。方法　体外方法为将指数生长小鼠淋巴细胞或巨噬细胞与不同浓度的羧甲基茯苓多糖共培养 ,观察小鼠脾淋巴细胞的增殖作用和巨噬细胞吞噬中性红的能力。体内方法为每日给正常小鼠分别静脉注射不同剂量的羧甲基茯苓多糖 ,连续注射 1 0d ,用与体外同样方法观察CMP对小鼠脾淋巴细胞的增殖作用及对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。结果　CMP静脉注射剂量在 5 ,1 0 ,50mg·kg- 1 时对小鼠脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞吞噬功能均有明显的促进作用 ,体外给药浓度在 0 .1～ 50 μg·mL- 1 时对小鼠脾淋巴细胞增殖有直接的促进作用。对小鼠混合淋巴细胞反应也有明显的促进作用 ,CMP还显著增强ConA及LPS活化的小鼠脾淋巴细胞的增殖反应及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的作用。结论　羧甲基茯苓多糖体内外给药均可显著增强小鼠免疫功能     

两亲性茯苓多糖纳米微球的制备及药物负载性能研究

目的 研究适用于水体系的羟基喜树碱的负载载体.方法 通过化学改性得到十二烷-羧甲基-茯苓多糖,并以此为载体材料,羟基喜树碱为模型药物,采用透析法制备载药两亲性茯苓多糖纳米微球;对纳米微球的粒径、载药量和包封率进行研究,考察其体外释药特性.结果 改性后的两亲性茯苓多糖在水溶液中能够自组装成50～100 nm左右的纳米微球,在透射电镜下能看见明显的核/壳结构.自制的两新性茯苓多糖纳米微球对羟喜树碱有一定的负载能力,载药量和包封率分别为2.94%和29.4%,并且具有良好的缓释性能,为茯苓多糖的开发与利用提供了可行性依据.结论 十二烷-羧甲基-茯苓多糖纳米微球是一个良好的羟基喜树碱的水分散体系.     

羧甲基茯苓多糖的抗肿瘤实验

茯苓[Poria cocos(Sehw．)Wolf]是一种药用真菌，是中药“四君八珍”之一，茯苓菌核中的β-茯苓聚糖(β-Pachyman)约占茯苓菌核干重的93％，β-茯苓聚糖转化成为β-茯苓多糖(β-Pachymaran)才具有抗肿瘤活性。为了使茯苓多糖溶于水，便于人体吸收，必须用氯乙酸进行醚化，使茯苓多糖变成一种水溶性多糖——羧甲基茯苓多糖(Carboxymethylpachymaran，CMP)。本文报道三明市真菌研究所药用真菌研究室研制的CMP抗肿瘤实验。     

家兔血浆中硫酸化茯苓多糖血药浓度的测定

 目的　建立分光光度法测定家兔血浆中硫酸化茯苓多糖的浓度。方法　将茯苓多糖硫酸化得到硫酸化茯苓多糖,利用光谱探针天青A与硫酸化茯苓多糖相互作用,其反应体系在625nm处吸光度与硫酸化茯苓多糖浓度成线性的特点,建立一种分光光度法测定家兔血浆中多糖浓度,线性方程A =1.135-7.397c,r=-0.998;线性范围0～0.4mg.mL^-1。结果　灌胃给药后,在测定的时间段内(0.33～8h)硫酸化茯苓多糖在血浆中均有分布,给药1.5h时达最大。结论　本方法简单、稳定、可靠,可用于多糖血药浓度分析及其药动学研究。     

蜗牛酶辅助降解茯苓多糖工艺优化研究

目的:优选蜗牛酶降解茯苓多糖的反应条件。方法:以茯苓多糖酶解得率为指标,采用单因素试验针对影响茯苓酶解的pH、加酶率、固液比、反应温度、反应时间等5个主要因素分别加以研究,并利用正交试验进行优化。结果:优选茯苓多糖的降解条件为:pH=6,加酶率1.8%,固液比1∶20,酶解温度40℃,酶解时间5h。结论:在该优选条件下,茯苓多糖降解率为40.2%,证实蜗牛酶可有效降解茯苓多糖,提高茯苓多糖的水溶性,与传统的水提醇沉法比较,得率提高65%以上。     

中药多糖对小鼠脾脏NK细胞活性的影响

~(51)Cr释放实验发现人参根多糖能增强小鼠脾脏NK细胞活性,在30μg/ml～120μg/ml浓度范围内随浓度增加作用增强,人参根多糖并能使大黄致“脾虚证”小鼠受抑制的NK细胞活性恢复。羧甲基茯苓多糖仅在100μg/ml浓度时有促进NK细胞活性效果,云芝多糖于100～400μg/ml浓度均无作用。     

白术、茯苓多糖的体外胃肠道代谢研究

目的:考察白术、茯苓多糖在胃肠道环境中的代谢情况.方法:白术、茯苓多糖分别与人工胃液、肠液和肠道菌共孵育,采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)测定多糖的含量变化,考察白术、茯苓多糖在人工胃肠道环境中的代谢以及与肠道菌共孵育的变化.结果:白术、茯苓多糖在人工胃肠道环境中没有明显代谢,而与肠道菌的共孵育过程中则产生显著代谢.结论:白术、茯苓多糖在胃肠道中的代谢主要是在肠道中进行,肠道菌在此过程中发挥着重要作用.     

光谱法测定大鼠血浆中茯苓多糖硫酸酯及其药代动力学研究

目的:利用光谱探针天青A(AA)与硫酸化多糖之间产生变色反应的特性建立大鼠血浆中茯苓多糖硫酸酯(PS)的光谱测定方法,测定大鼠腹腔注射和尾静脉注射PS后的血药浓度,并对这2种注射方法的药代动力学进行评价。方法:通过扫描和系列实验确定最佳检测波长、反应体系血浆和AA浓度。大鼠腹腔和尾静脉分别注射60,20 mg.kg-1的PS后,测定血浆中不同时间点的PS质量浓度,并计算主要药动学参数。结果:最佳检测波长为620 nm,反应体系血浆加入量最大为1.25%,AA最佳工作浓度为8.24×10-5mol.L-1,血浆中PS质量浓度在0~10 mg.L-1线性关系良好(R2=0.995 9),平均回收率为100.55%,组内和组间差异RSD均小于5%。大鼠腹腔和尾静脉注射PS的消除相半衰期t1/2(ke)分别是319.09,204.85 min,血液PS的消除符合一房室、一级消除的开放模型,腹腔注射给药的生物利用度F为69.12%。结论:本光谱法灵敏度高,操作简便,重复性和稳定性好,尤其适合于药代动力学的分析研究。     

药物分析中的显色反应

显色反应在药物分析中常用于药物的鉴别、检查和含量测定，文章着重讨论药物定量分析中的显色反应类型，特别是用于含量测定的显色反应类型——配位显色反应、氧化还原显色反应、离子缔合显色反应、重氮化-偶合显色反应、亚硝化显色反应、缩合显色反应、碱处理显色反应、脱水显色反应、电荷转移显色反应和超分子显色反应等。     

茯苓多糖对ApoE-/-AS小鼠肝脏脂质沉积及胆固醇逆向转运相关蛋白表达的影响＊

目的 探讨茯苓多糖对载脂蛋白E基因敲除（ApoE^-/-）动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS）小鼠肝脏脂质沉积及胆固醇逆向转运的影响。方法 采用随机数字表法将30只ApoE^-/-小鼠随机分为模型组、茯苓多糖组、辛伐他汀组，每组10只，10只C57BL/6J小鼠作为正常组。正常组给予基础饲料喂饲，其余小鼠给予高脂饲料喂饲12周。茯苓多糖组以0.2 g/kg/d灌胃，辛伐他汀组以2.275 mg/kg/天灌胃，正常组和模型组给予等体积生理盐水灌胃，共干预4周。全自动生化分析仪检测小鼠血清三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平，苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠肝脏病理形态学变化，油红O染色观察小鼠肝脏脂质沉积情况，ELISA检测各组小鼠血清载脂蛋白A1 （ApoA1）、对氧磷酶-1（PON1）含量，Real-time RT-qPCR法及Western Blot法检测肝脏胆固醇酯转运蛋白（CETP）、磷脂转运蛋白（PLTP）、卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT）mRNA及蛋白表达。结果 与正常组比较，模型组小鼠血清TG、TC、LDL-C含量均明显上升，HDL-C含量明显下降（P<0.01），肝细胞脂肪变性明显，肝脏脂质沉积明显，小鼠血清ApoA1、PON1含量均明显下降（P<0.01），小鼠肝脏CETP、PLTP mRNA及蛋白表达明显上升，LCAT mRNA及蛋白表达明显下降（P<0.01）。与模型组相比，茯苓多糖组血清TG、TC、LDL-C含量均显著下降（P<0.01），HDL-C含量呈上升趋势（P>0.05），肝细胞脂肪变性、脂质沉积程度均有所减轻，茯苓多糖组ApoA1含量明显上升（P<0.01），PON1含量呈上升趋势（P>0.05），茯苓多糖组CETP、PLTP mRNA及蛋白表达有所下降，LCAT mRNA及蛋白表达有所上升（P<0.05，P<0.01）。结论 茯苓多糖可能通过调控血脂水平与胆固醇逆向转运过程，改善ApoE^-/- AS小鼠肝脏脂质沉积，进而发挥防治AS作用。     

茯苓多糖对受照射白血病K562细胞N-乙酰氨基半乳糖转移酶-9和自由基等的影响

目的用化学方法提取茯苓多糖,并观察其对肿瘤细胞的作用。方法利用乙酸沉淀法、DEAE-纤维素层析法提取并分离茯苓多糖,并运用RT-PCR方法和流式细胞技术,检测其对受照射后肿瘤细胞的多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶-9(ppGalNAc-T9)mRNA表达、自由基活力以及细胞周期的影响。结果茯苓多糖可使经γ射线照射后的K562细胞中的自由基增多、ppFalNAc-T9表达增高、G_1期受阻明显。结论茯苓多糖对肿瘤细胞中自由基具有一定的清除作用,同时还可以增加ppGalNAc-T9在mRNA水平的表达。     

两种真菌多糖对HL-60细胞酪氨酸蛋白磷酸化作用的影响

 目的：研究猪苓多糖和茯苓多糖对人早幼粒白血病细胞(HL-60)酪氨酸蛋白磷酸化作用的影响。方法：用一定浓度的药物处理体外培养的HL60细胞。用放射免疫法测定经过培养12,24,48,72和120 h对照组和药物处理组细胞浆和膜部分的酪氨酸蛋白激酶(TPK)和磷酸酪氨酸蛋白磷酸酶(PTPP)的活力,比较酶活力变化情况。结果：两种多糖对胞浆和膜部分TPK活力均有不同程度的抑制作用。而对两部分PTPP的活力均有不同程度的激活作用。结论：两种真菌多糖均可使HL-60细胞酪氨酸蛋白磷酸化水平下降,提示两种多糖杭肿瘤作用的机制可能与酪氨酸蛋白磷酸化作用有关。     

美拉德反应对中药品质的影响及调控研究进展

美拉德反应是一种普遍存在于食品工业和中药加工炮制中的非酶褐变反应。美拉德反应不仅能改变中药的色泽、香味,延长中药的货架期和保质期,还能产生新的活性物质。除此之外,美拉德反应产生的5-羟甲基糠醛、晚期糖基化终产物等微量有毒有害物质逐渐被人们所重视。通过改变反应温度、反应时间、pH值,添加抑制剂、抗氧化剂等调控美拉德反应,进而控制中药品质的研究具有重要意义。综述了美拉德反应研究概况及其对中药品质影响及调控方面的研究进展,为进一步研究调控美拉德反应控制中药品质提供了参考。     

茚三酮比色法测定青天葵中总游离氨基酸的含量

目的利用α-氨基酸与茚三酮反应产生颜色,产生的颜色可以使溶液的吸光度变化的原理,采用可见光分光光度法测定青天葵中总游离氨基酸的含量。方法以亮氨酸为标准品溶液,在568 nm波长下测定供试品溶液的吸光度,根据朗伯-比尔定律计算供试品中总游离氨基酸的含量。结果茚三酮比色法显色反应的最佳反应条件为加入缓冲液的pH值为5.0,用量为1.0 mL;显色剂用量为2.0 mL;反应温度和时间分别为100℃水浴加热19 min,冷却10 min。结论本方法准确、灵敏、重复性好,具有简便实用的特点。     

二甲酚橙分光光度法测定硼砂中的微量铝

目的: 研究二甲酚橙与铝的显色反应体系,建立分光光度法测定硼砂中微量铝的新方法。方法: 在表面活性剂吐温-20存在下,pH 3.0的醋酸-醋酸钠缓冲液介质中,铝与二甲酚橙以1∶1形成稳定的紫红色络合物,在550 nm处测定其吸光度,并计算铝的含量。结果: 铝离子质量浓度在0.3~0.13 mg ·L^-1与吸光度呈良好的线性关系(r=0.998 4);重复性试验RSD为0.83%;加标回收率为98.83%,RSD为2.31%;最低检出量0.032 mg ·L^-1。结论: 该方法简便、快速、显色稳定,适用于硼砂中的微量铝的测定。