依达拉奉保护H9c2心肌细胞对抗化学性低氧引起的损伤

目的探讨新型的自由基清除剂依达拉奉(EDA)能否保护H9c2心肌细胞对抗化学性低氧引起的损伤。方法应用化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)处理H9c2心肌细胞以建立化学性低氧损伤模型。应用CCK-8比色法检测细胞存活率;Hoechst 33258核染色法检测凋亡细胞的形态学及数量变化;双氯荧光素(DCFH-DA)染色荧光显微镜照像测定细胞内活性氧(ROS)水平;JC-1染色荧光显微镜照像检测线粒体膜电位(MMP)。结果应用100～1000μmol/L CoCl2处理H9c2心肌细胞24 h,呈浓度依赖性地降低细胞存活率;在12～36 h范围内,800μmol/L CoCl2呈时间依赖性地抑制细胞存活率;10～40μmol/L EDA或500～2000μmol/L N-乙酰半胱氨酸(NAC,为ROS的清除剂)预处理H9c2心肌细胞1 h呈浓度依赖性地对抗CoCl2对细胞存活率的抑制作用;在800μmol/LCoCl2处理H9c2心肌细胞前1 h,应用40μmol/L EDA预处理细胞不仅可明显的抑制CoCl2诱导的细胞内ROS生成增多,还能抑制CoCl2的致细胞凋亡作用及MMP的损伤作用。结论 EDA能保护心肌细胞对抗CoCl2诱导的损伤作用,此心肌细胞保护作用可能与其抗氧化作用及保护MMP有关。     

硫化氢通过抑制ROS-TLR4通路对抗高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤和炎症反应

目的探讨外源性硫化氢(H2S)能否通过抑制活性氧(ROS)-Toll样受体4(TLR4)通路对抗高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤和炎症反应。方法应用细胞计数盒(CCK-8)检测细胞存活率,用试剂盒检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,ELISA检测细胞培养液中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,Hoechst 33258核染色荧光显微镜照相法测定凋亡细胞数量,Western blot测定TLR4和Cleaved Caspase 3蛋白的表达水平,双氯荧光素染色荧光显微镜照相法测定细胞内ROS水平,罗丹明123染色荧光显微镜照相法检测线粒体膜电位(MMP)。结果应用35 mmol/L葡萄糖(高糖)作用H9c2心肌细胞24 h能上调TLR4的表达水平。在高糖作用前,应用1000μmol/L N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理60 min或400μmol/L硫氢化钠(Na HS)预处理30 min能明显减轻高糖对TLR4蛋白表达的上调作用。高糖作用心肌细胞24 h可引起心肌细胞损伤和炎症反应,使细胞存活率降低,LDH活性、凋亡细胞数量、Cleaved Caspase 3蛋白的表达、ROS生成、MMP丢失及IL-1β和TNF-α的分泌增加;400μmol/L Na HS预处理心肌细胞30 min后再予高糖作用24 h或30μmol/L TAK-242(TLR4抑制剂)和高糖共处理心肌细胞24 h能显著拮抗高糖引起的上述损伤和炎症反应。结论外源性H2S可通过抑制ROS-TLR4通路对抗高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤和炎症反应。     

虎杖苷通过激活Nrf2/HO-1信号抑制氧化应激诱导的心肌细胞损伤

目的研究过氧化氢(H2O2)诱导的H9c2细胞损伤模型中,虎杖苷对心肌细胞的保护作用及机制。方法建立H2O2诱导的H9c2细胞损伤模型,MTT检测细胞生存能力;Western印迹检测细胞蛋白表达;试剂盒检测细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平。结果MTT实验筛选药物剂量为100μmol/L;H2O2有效刺激剂量为100μmol/L;虎杖苷预处理抑制了H2O2诱导的细胞活性下降,抑制了H2O2诱导的细胞凋亡。虎杖苷促进了核因子E2相关因子(Nrf)2和血红素加氧酶(HO)-1蛋白的表达,降低了SOD的水平,同时使MDA水平升高。Nrf2抑制剂ML385与虎杖苷同时预处理后细胞凋亡得到抑制,同时Nrf2和HO-1蛋白的表达水平下降,SOD的水平升高而MDA水平下降。结论虎杖苷抑制H2O2诱导的H9c2细胞凋亡,其机制与激活Nrf2/HO-1信号通路有关。     

胰高血糖素样肽1对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用及机制研究

目的研究胰高血糖素样肽1(GLP-1)对H9c2心肌细胞缺氧复氧(H/R)损伤的保护作用及机制。方法培养H9c2心肌细胞,随机分为常规处理的对照组、H/R组及1、5、10μmol/L GLP-1组以验证GLP-1的保护作用,随机分为si-NC组、si-NC+H/R组、si-NC+H/R+10μmol/L GLP-1组、si-Nrf2+H/R+10μmol/L GLP-1组以验证核因子E2相关因子2(Nrf2)在GLP-1减轻细胞损伤中的作用。处理24 h后检测乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙二醛(MDA)、总抗氧化力(T-AOC)含量及Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)表达水平。结果 H/R组LDH、CK-MB、MDA的含量高于对照组,T-AOC的含量及Nrf2、HO-1的表达水平低于对照组;不同剂量GLP-1组LDH、CK-MB、MDA的含量低于H/R组,T-AOC的含量及Nrf2、HO-1的表达水平高于H/R组;敲低Nrf2表达后,si-Nrf2+H/R+10μmol/L GLP-1组LDH、CK-MB、MDA的含量高于si-NC+H/R+10μmol/L GLP-1组,T-AOC的含量及Nrf2、HO-1的表达水平低于si-NC+H/R+10μmol/L GLP-1组。结论 GLP-1对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤具有保护作用,激活Nrf2/HO-1通路是可能的分子机制。     

美金刚对过氧化氢诱导多巴胺能神经元氧化应激损伤的保护作用

目的探讨美金刚对过氧化氢(H2O2)诱导的多巴胺能神经元氧化应激损伤的保护作用。方法用400μmol/L H2O2诱导人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y损伤建立多巴胺能神经元氧化应激损伤模型,随机分为美金刚10、20、30μmol/L组和空白对照组,分别加入相应试剂(空白对照组加入等体积PBS);倒置显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞活性,比色法测定LDH释放率。结果 10、20、30μmol/L美金刚干预24 h后,SH-SY5Y细胞的吸光度值(A570)分别为0.936 5±0.033 2、0.974 9±0.030 0和0.948 7±0.033 6,空白对照组为0.924 7±0.039 8;组间比较无统计学差异(P=0.160)。经10、20、30μmol/L美金刚预处理2 h后,SH-SY5Y细胞的存活率分别为(59.92±3.64)%、(65.40±5.07)%和(62.63±5.01)%,与H2O2处理组比较有统计学差异(P<0.05或<0.01)。此外,10、20、30μmol/L美金刚预处理组SH-SY5Y细胞的LDH释放率分别为(38.70±7.88)%、(34.10±6.75)%、(35.58±8.68)%,与H2O2处理组比较均有统计学差异(P<0.05或<0.01)。结论美金刚对H2O2诱导的多巴胺能神经元氧化应激损伤具有保护作用。     

莱菔硫烷对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的:探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法:H9C2心肌细胞随机分为3组:正常对照组、缺氧/复氧组(H/R组)和SFN预处理组(10μmol/L SFN预处理细胞12 h后,进行缺氧/复氧处理)。采用倒置显微镜观察各组细胞形态及凋亡程度,CCK8法检测各组H9C2心肌细胞存活率,Western blot法检测血红素氧化酶1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果:与正常对照组相比,H/R组和SFN预处理组心肌细胞存活率均降低(P均0.01),HO-1、NQO1、Bcl-2和Bax蛋白表达水平及Bcl-2/Bax均升高(P均0.01)。与H/R组相比,SFN预处理组的细胞生长状态较好,细胞存活率明显提高[(76.00±0.52)%对(55.73±0.43)%,P0.01],HO-1(3.24±0.01对1.86±0.01,P0.01)、NQO1(1.67±0.01对0.95±0.01,P0.01)和Bcl-2(0.70±0.00对0.48±0.01,P0.01)蛋白表达水平及Bcl-2/Bax(1.22±0.01对0.56±0.00,P0.01)均明显升高,Bax蛋白表达水平明显降低(0.57±0.00对0.85±0.01,P0.01)。结论:SFN对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤有保护作用,可能与促进HO-1、NQO1、Bcl-2蛋白表达,抑制Bax蛋白表达有关。     

Hexarelin对H2O2诱导的大鼠胸主动脉内皮细胞损伤的抑制作用及其机制

目的: 观察人工合成的生长激素释放肽hexarelin对H2O2诱导的大鼠胸主动脉内皮细胞损伤是否有抑制作用及可能的机制。方法: 体外原代培养的大鼠胸主动脉内皮细胞,随机分为对照组、H2O2组及H2O2+10-5 mmol/L hexarelin组和H2O2+10-7 mmol/L hexarelin组,通过光镜和电镜观察各组细胞的形态学变化。采用MTT比色法检测各组细胞活力的变化;用比色法检测内皮细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）的含量;用硝酸还原酶法检测内皮细胞培养上清液中一氧化氮（NO）的含量。结果: 光镜和电镜观察发现,H2O2可以诱导大鼠胸主动脉内皮细胞损伤及凋亡;而Hexarelin能减轻H2O2所诱导的内皮细胞损伤及凋亡。MTT比色法检测发现,H2O2能使内皮细胞的活力由(0.39±0.03)下降为(0.23±0.04)(P<0.01);而1×10-5和1× 10-7 mmol/L hexarelin能减轻H2O2对内皮细胞活力的影响,内皮细胞的活力分别由（0.23±0.04）变为（0.30±0.02）和（0.29±0.02）(P<0.01)。H2O2能诱导内皮细胞产生LDH,由(31.11±4.97)U/L上升为(157.48±7.33)U/L(P<0.01);而1×10-5和1×10-7 mmol/L hexarelin能减少LDH的生成,由［(157.48±7.33)U/L下降为(55.12±6.11) U/L和(94.48±4.07) U/L(P<0.01)。另外,H2O2能引起NO生成减少,由（29.38±6.14）μmol/L降为 （17.24±7.51）μmol/L(P<0.01),而hexarelin能逆转H2O2引起的内皮细胞NO生成的减少,由(17.24±7.51)μmol/L变为(35.95±4.89)μmol/L和(19.73±2.50)μmol/L(P<0.01)。结论: Hexarelin能够抑制H2O2所诱导的大鼠胸主动脉内皮细胞的损伤及其凋亡,其机制可能与hexarelin抑制氧化应激反应及促进NO的产生有关。     

N-乙酰半胱氨酸保护心肌细胞对抗化学性低氧诱导的内质网应激反应

目的探讨活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸能否保护H9c2心肌细胞对抗化学性低氧引起的内质网应激。方法应用化学性低氧模拟物氯化钴处理H9c2心肌细胞,建立化学性低氧损伤心肌细胞的实验模型。在氯化钴处理H9c2心肌细胞前60 min把N-乙酰半胱氨酸加入培养基中,作为预处理。应用CCK-8比色法检测细胞存活率;Hoechst33258染色荧光显微镜照相术检测凋亡心肌细胞的形态学改变;双氯荧光素染色荧光显微镜照相检测细胞内活性氧水平;免疫印迹法检测内质网应激蛋白葡萄糖调节蛋白78的表达。结果在100～2 000μmol/L浓度范围内,氯化钴处理H9c2心肌细胞24 h,呈剂量依赖性地抑制细胞存活率。在12～48 h时间范围内,800μmol/L氯化钴处理H9c2心肌细胞呈时间依赖性地抑制细胞存活率。在氯化钴处理H9c2心肌细胞前60 min,应用2 000μmol/L的N-乙酰半胱氨酸不仅能抑制氯化钴对活性氧生成的促进作用,也能明显的抑制氯化钴诱导的细胞凋亡。不同浓度的氯化钴处理H9c2心肌细胞24 h,可使葡萄糖调节蛋白78表达增多,其中800μmol/L的氯化钴处理H9c2心肌细胞24 h时,葡萄糖调节蛋白78表达...     

Hexarelin对H2O2诱导的大鼠胸主动脉内皮细胞损伤的抑制作用及其机制

目的：观察人工合成的生长激素释放肽hexarelin对H2O2诱导的大鼠胸主动脉内皮细胞损伤是否有抑制作用及可能的机制。方法：体外原代培养的大鼠胸主动脉内皮细胞,随机分为对照组、H2O2组及H2O2＋10-5 mmol/Lhexarelin组和H2O2＋10-7 mmol/L hexarelin组,通过光镜和电镜观察各组细胞的形态学变化。采用MTT比色法检测各组细胞活力的变化;用比色法检测内皮细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）的含量;用硝酸还原酶法检测内皮细胞培养上清液中一氧化氮（NO）的含量。结果：光镜和电镜观察发现,H2O2可以诱导大鼠胸主动脉内皮细胞损伤及凋亡;而Hexarelin能减轻H2O2所诱导的内皮细胞损伤及凋亡。MTT比色法检测发现,H2O2能使内皮细胞的活力由（0.39±0.03）下降为（0.23±0.04）（P〈0.01）;而1×10-5和1×10-7 mmol/L hexarelin能减轻H2O2对内皮细胞活力的影响,内皮细胞的活力分别由（0.23±0.04）变为（0.30±0.02）和（0.29±0.02）（P〈0.01）。H2O2能诱导内皮细胞产生LDH,由（31.11±4.97）U/L上升为（157.48±7.33）U/L（P〈0.01）;而1×10-5和1×10-7mmol/L hexarelin能减少LDH的生成,由[（157.48±7.33）U/L下降为（55.12±6.11）U/L和（94.48±4.07）U/L（P〈0.01）。另外,H2O2能引起NO生成减少,由（29.38±6.14）μmol/L降为（17.24±7.51）μmol/L（P〈0.01）,而hexarelin能逆转H2O2引起的内皮细胞NO生成的减少,由（17.24±7.51）μmol/L变为（35.95±4.89）μmol/L和（19.73±2.50）μmol/L（P〈0.01）。结论：Hexarelin能够抑制H2O2所诱导的大鼠胸主动脉内皮细胞的损伤及其凋亡,其机制可能与hexarelin抑制氧化应激反应及促进NO的产生有关。     

硫化氢通过调控p38丝裂原活化蛋白激酶抑制阿霉素引起的心肌细胞损伤

目的 研究硫化氢(H2S)是否通过调控p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路保护H9c2心肌细胞对抗阿霉素(DOX)引起的损伤.方法 应用DOX处理心肌细胞建立心肌细胞损伤模型.为观察H2S的保护作用,在DOX处理心肌细胞前,应用400 μmol/L硫氢化钠(NaHS,为H2S的供体)预处理细胞30 min.Western blot法测定p38MAPK蛋白的表达水平;应用细胞计数试剂盒8(CCK-8)比色法测定细胞存活率;Hoechst 33258核染色法观察细胞凋亡的形态学改变;双氯荧光素(DCFH-DA)染色荧光显微镜照相测定细胞内活性氧(ROS)水平.结果 在15 ～60min的时间范围内,5μmol/L DOX呈时间依赖性地上调心肌细胞磷酸化p38MAPK的表达水平;在DOX作用心肌细胞前,400 μmol/L NaHS预处理30 min能明显地抑制DOX对p-p38MAPK表达的上调作用,并能显著地阻断DOX引起的心肌细胞损伤,使细胞存活率升高、凋亡细胞数量和ROS生成均减少;与NaHS的保护作用相似,p38MAPK的抑制剂SB203580(3 μmol/L)预处理60 min能保护H9c2心肌细胞对抗DOX引起的损伤.结论 p38MAPK通路参与DOX对心肌细胞的损伤作用;H2S可通过抑制p38MAPK通路保护心肌细胞对抗DOX诱导的损伤.     

硫化氢对大鼠肝星状细胞增殖及Ca2+浓度的影响

目的 探讨硫化氢(H2S)对大鼠原代肝星状细胞(HsC)增殖及Ca2+浓度的影响及其作用机制.方法 大鼠肝星状原代细胞作为研究对象,将过氧化氢(H2O2)作用于大鼠原代HSC制造肝纤维化的氧化应激模型,用钙离子荧光探针Fluo-3/AM负载细胞,并在此基础上应用不同剂量的NaSH(H2S供体)和KATP通道抑制剂(格列本脲)对各组细胞进行干预,用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)和CCK-8的方法分别检测不同刺激条件对细胞内Ca2+浓度改变及细胞增殖情况的影响.结果 低浓度H2S(100μmo/L NaSH)明显降低HSC细胞内Ca2+浓度(P＜0.05),抑制细胞增殖;K离子通道阻断剂——格列本脲可阻断H2S的作用.高浓度H2S(1mmol/L NaSH)使HSC细胞内Ca2+浓度增加,促进细胞增殖.结论 低浓度H2S通过激活HSC细胞KATP通道,降低细胞内Ca2+浓度,从而抑制细胞增殖;高浓度H2S使HSC细胞内Ca2+浓度增加,促进细胞增殖.     

氯通道ClC-3反义寡核苷酸对过氧化氢诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞凋亡的影响

目的研究ClC3反义寡核苷酸对H2O2诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞凋亡的影响。方法蛋白免疫印迹法检测ClC3蛋白表达;形态学方法、DNA琼脂糖电泳、MTT法和流式细胞仪观察和分析H2O2诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞形态学改变、DNA断裂、细胞存活率和凋亡率及ClC3反义寡核苷酸转染对其影响。结果ClC3反义寡核苷酸转染抑制内源性ClC3蛋白表达后,可加重H2O2诱导大鼠主动脉平滑肌细胞形态学改变及DNA断裂,细胞凋亡率由52.8%±13.6%增至75.7%±5.8%(n=6,P<0.01),而细胞存活率由48.9%±4.3%进一步降低为31.3%±4.3%(n=6,P<0.01)。结论ClC3反义寡核苷酸转染促进H2O2诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞凋亡。     

硫化氢与生物脂代谢

硫化氢（H₂S）作为人类发现的第三种气体信号分子已引起学术界的广泛关注。关于H₂S的报道研究很多,大部分集中在H₂S与心血管系统的体内平衡的相关研究。然而,有关于H₂S与生物脂代谢的关系的研究尚不多见。本文将从H₂S的理化性质开始,介绍H₂S在机体中脂代谢的作用及其在机体脂代谢相关疾病中的作用。以H₂S为基础的药物将为治疗这些疾病带来新的希望。     

L-type Ca channel facilitation mediated by H2O2-induced activation of CaMKII in rat ventricular myocytes

The Ca²⁺-dependent facilitation (CDF) of L-type Ca²⁺ channels, a major mechanism for force-frequency relationship of cardiac contraction, is mediated by Ca²⁺/CaM-dependent kinase II (CaMKII). Recently, CaMKII was shown to be activated by methionine oxidation. We investigated whether oxidation-dependent CaMKII activation is involved in the regulation of L-type Ca²⁺ currents (I_Ca,L) by H₂O₂ and whether Ca²⁺ is required in this process. Using patch clamp, I_Ca,L was measured in rat ventricular myocytes. H₂O₂ induced an increase in I_Ca,L amplitude and slowed inactivation of I_Ca,L. This oxidation-dependent facilitation (ODF) of I_Ca,L was abolished by a CaMKII blocker KN-93, but not by its inactive analog KN-92, indicating that CaMKII is involved in ODF. ODF was not affected by replacement of external Ca²⁺ with Ba²⁺ or presence of EGTA in the internal solutions. However, ODF was abolished by adding BAPTA to the internal solution or by depleting sarcoplasmic reticulum (SR) Ca²⁺ stores using caffeine and thapsigargin. Alkaline phosphatase, β-iminoadenosine 5′-triphosphate (AMP-PNP), an autophosphorylation inhibitor autocamtide-2-related inhibitory peptide (AIP), or a catalytic domain blocker (CaM-KIINtide) did not affect ODF. In conclusion, oxidation-dependent facilitation of L-type Ca²⁺ channels is mediated by oxidation-dependent CaMKII activation, in which local Ca²⁺ increases induced by SR Ca²⁺ release is required.     

阿托伐他汀通过抑制ERK/MAPK信号通路改善H2O2诱导的血管内皮细胞损伤的机制研究

目的探究阿托伐他汀通过调节ERK/MAPK信号通路改善H₂O₂诱导的血管内皮细胞损伤的作用机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分为空白对照组、模型组(H₂O₂处理)、阿托伐他汀组(阿托伐他汀+H₂O₂)、U0126组(ERK/MAPK信号通路抑制剂U0126+H₂O₂)、阿托伐他汀+LM22B-10组(阿托伐他汀和ERK/MAPK信号通路激活剂LM22B-10+H₂O₂)。采用MTT法、AO/EB染色法分别检测各组细胞活性、凋亡率;用酶联免疫吸附法检测各组细胞乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量;荧光法检测活性氧簇(ROS)水平;Western blot法检测各组细胞中ERK1/2、p-ERK1/2、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达。结果与空白对照组比较,模型组细胞增殖活性、SOD和GSH-Px含量降低,细胞凋亡率、LDH、MDA和ROS水平增加,p-ERK1/2/ERK1/2、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白表达比值上调(P均<0.05)。与模型组比较,阿托伐他汀组细胞增殖活性、SOD和GSH-Px含量升高,细胞凋亡率、LDH、MDA和ROS水平降低,且p-ERK1/2/ERK1/2、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白表达比值下调(P均<0.05)。与阿托伐他汀组比较,阿托伐他汀+LM22B-10组细胞增殖活性、SOD和GSH-Px含量降低,凋亡率、LDH、MDA和ROS水平升高,同时p-ERK1/2/ERK1/2、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白表达比值上调(P均<0.05)。结论阿托伐他汀能够改善H₂O₂诱导的血管内皮细胞损伤,其机制与抑制ERK/MAPK信号通路进而降低ROS介导的血管内皮细胞凋亡和氧化应激损伤有关。     

p53 and ATF-2 partly mediate the overexpression of COX-2 in H2O2-induced premature senescence of human fibroblasts

Cyclooxygenase-2 and release of prostaglandin E2 are up-regulated in replicative senescence of dermal and prostate fibroblasts and in H₂O₂-induced premature senescence of IMR-90 lung fibroblasts expressing the catalytic subunit of telomerase. Inhibition of cyclooxygenase-2 activity by specific chemical inhibitor or siRNA attenuates the H₂O₂-induced increase of senescence associated β-galactosidase positive cells and attenuates growth arrest. In this work, p38^MAPK activation and increased DNA binding activities of ATF-2 and p53 are shown to mediate cyclooxygenase-2 overexpression in premature senescence.     

二苯乙烯苷对H2O2诱导的血管内皮细胞P选择素和E选择素表达的影响

目的研究二苯乙烯苷(TSG)对H2O2诱导损伤的人脐静脉内皮细胞P选择素和E选择素表达的影响。方法运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测P选择素和E选择素的mRNA和蛋白表达。结果 200μmol/L的H2O2作用人脐静脉内皮细胞24 h,P选择素和E选择素的mRNA和蛋白表达水平均明显上调,与空白对照组比较,差异具有显著性(P<0.01),但TSG预处理人脐静脉内皮细胞4 h后再加200μmol/L H2O2作用24 h,H2O2诱导的内皮细胞P选择素和E选择素的mRNA和蛋白表达水平降低,与H2O2处理组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论 TSG通过降低黏附分子P选择素和E选择素的表达可保护内皮细胞免受氧化应激损伤,影响动脉粥样硬化进程。     

Histamine inhibits prostaglandin E2-stimulated rabbit duodenal bicarbonate secretion via H2 receptors and enteric nerves

The gastroduodenal epithelium is protected from acid peptic damage by an adherent mucus-bicarbonate layer. Bicarbonate is secreted by the surface epithelial cells into this mucus layer. Patients with duodenal ulcer disease have impaired proximal duodenal bicarbonate secretion. Mast cells, present in large numbers in the duodenal mucosa, release a number of inflammatory mediators, including histamine. Release of such mast cell mediators has been implicated in ulcer disease. In this study, the ability of histamine to regulate bicarbonate secretion was examined. Bicarbonate secretion by rabbit proximal duodenal mucosa was examined in vitro, and the effects of histamine, its agonists, and its antagonists were studied. Histamine essentially eliminated prostaglandin E₂-stimulated duodenal mucosal bicarbonate secretion, an effect reversed both by the neurotoxin, tetrodotoxin, and the histamine H₂-receptor antagonist, cimetidine, as well as reproduced by the H₂-receptor agonist, dimaprit. In addition to the stimulatory action of histamine on gastric acid secretion, histamine expresses an additional antidefensive action by inhibiting prostaglandin E₂-stimulated duodenal epithelial bicarbonate secretion. This effect of histamine is likely mediated via H₂ receptors located on enteric nerves.     

普罗布考抑制过氧化氢刺激大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的机制

目的研究普罗布考抑制过氧化氢促大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的机制。方法采用MTT3、H-胸腺嘧啶核苷掺入法、流式细胞术和逆转录聚合酶链反应观察过氧化氢刺激条件下普罗布考对血管平滑肌细胞细胞周期、DNA合成、细胞增殖和凋亡的影响。结果普罗布考抑制过氧化氢刺激血管平滑肌细胞增殖和DNA合成。与过氧化氢组比较,普罗布考 过氧化氢组细胞计数、吸光度值和3H-胸腺嘧啶核苷掺入量分别下降了46.9%、45.0%和39.5%(P<0.05)。普罗布考通过使血管平滑肌细胞生长停滞在G0/G1期抑制过氧化氢刺激细胞增殖。过氧化氢使细胞外信号调节激酶1 mRNA相对表达量增加近6倍,丝裂原活化蛋白激酶磷酯酶1 mRNA相对表达量下降了82.2%。普罗布考抑制细胞外信号调节蛋白激酶1 mRNA的表达,增强丝裂原活化蛋白激酶磷酯酶1 mRNA的表达。普罗布考诱导过氧化氢刺激条件下血管平滑肌细胞凋亡。结论普罗布考通过下调细胞外信号调节蛋白激酶1 mRNA的表达抑制细胞周期运转和诱导血管平滑肌细胞凋亡两种机制抑制过氧化氢刺激血管平滑肌细胞增殖。