组织芯片在前列腺癌研究中的可靠性分析

目的 探讨前列腺癌组织芯片结果的可靠性. 方法 收集48例前列腺癌病例,构建成直径2.0mm的组织芯片,进行HE染色并重新评价Gleason得分,同时应用免疫组化、原位杂交技术分别检测EZH2,并对照常规石蜡组织切片结果,进行统计学分析. 结果 前列腺癌组织芯片Gleason评分与常规石蜡切片比较,两者总体符合率为89.58％.前列腺癌组织芯片与常规石蜡切片比较,免疫组化结果一致率为95.65％(Kappa=0.810);原位杂交结果一致率为90.90％(Kappa=0.727). 结论 采用规范的组织芯片制作程序,直径2.0 mm组织芯片上的组织样本可以反映原组织结构的信息,可作为一种可靠的、有代表性的高通量组织分子分析工具用于前列腺癌大样本、回顾性的临床病理学研究.     

化学位移成像技术在检测肝胰脂肪病变中的应用

当肝内脂质含量超过肝脏湿重的5%,或肝组织切片在光镜下每单位面积见1/3以上肝组织有脂滴存在时,即可称为脂肪肝[1].化学位移成像(chemical shift imaging,CSI)技术是磁共振(MR)成像(magnetic resonance imaging,MRI)的常用技术之一,多用于人体脏器含脂病变的定性诊断和定量检测,具有准确、方便、快捷、安全、无创等优点,已逐渐应用于脂肪肝等腹腔脏器脂肪病变的临床诊断中[2].     

实时荧光逆转录定量聚合酶链反应甄别活性幽门螺杆菌方法的建立

幽门螺杆菌(Hp)感染与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌、胃黏膜相关淋巴样组织(MALT)淋巴瘤等多种消化系统疾病具有密切的关系[1-2].Hp生长缓慢,通常在微需氧条件下要3～7 d甚至更长时间才能形成针尖状小菌落,且对培养条件要求较高,因此给临床消化道疾病确诊带来很大麻烦.Hp的检测方法目前已有尿素酶试验、细菌培养、活检标本切片染色、聚合酶链反应(PCR)及免疫学方法等[3].     

膜联蛋白A1和增殖细胞核抗原在胰腺癌组织中的表达及其相互关系

目的 研究膜联蛋白A1(annexin A1,ANXA1)在胰腺癌中的表达及其与增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的相关性.方法 应用组织芯片制作仪构建芯片,芯片上有39例正常胰腺组织,42例胰腺癌组织,7例胰岛细胞瘤组织,8例壶腹腺癌组织.在连续的芯片切片上使用免疫组化法检测ANXA1和PCNA蛋白的表达,分析两者的相关性.结果 构建的组织芯片在免疫组化染色后的掉片率为11.7%～13.3%,满足实验要求.ANXA1在胰腺癌中的阳性表达率为71.4%(30/42),明显高于正常胰腺组织18.4%(7/38)的阳性率(P<0.01).PCNA在胰腺癌中的阳性表达率为73.8%(31/42),也明显高于正常胰腺组织22.2%(8/36)的阳性率(P<0.01).胰腺癌组织ANXA1表达与PCNA表达显著相关(P<0.01).结论 胰腺癌ANXA1蛋白的表达与PCNA表达同步增加.     

肺癌中Ets1 mRNA和c-Met蛋白表达细胞芯片的研究

目的 进行细胞芯片的研制,为快速、规范、简便、经济地进行各种细胞学检查提供一种新方法.方法 应用自制的细胞芯片检测装置(专利申请号:2005200278140),制成7×16点阵细胞芯片.对切片进行HE染色、免疫组织化学染色和荧光原位杂交技术检测.结果 制成的细胞芯片为112点阵,HE染色检测结果与相应涂片结果完全一致;应用细胞芯片进行了Ets1 mRNA荧光原位杂交和c-Met免疫组化染色,所得阳性结果与各例相应涂片检测结果均一致;将细胞芯片检测结果与进行Ets1 mRNA荧光原位杂交和c-Met免疫组化染色的Ⅲ+Ⅳ期肺癌的组织芯片阳性率进行比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 细胞芯片操作简单,节约试剂,减少实验误差,具有诊断快速准确、特异性高、信息量大的特点,在临床诊断、科研和流行病学筛查中将有广泛的应用前景.     

多肿瘤标志物蛋白芯片检测对泌尿系统肿瘤的诊断价值

肿瘤标志物单项指标检测在临床上已应用多年,但存在组织特异性不强、敏感性低和费用高等不足[1].近年来,临床上常将多项相关的肿瘤标志物组合对肿瘤进行检测.     

乙型肝炎患者循环血中血管内皮生长因子的含量及其与肝组织肝窦病变的关系

在乙型肝炎(乙肝)的病理发展过程中,其肝组织血管病变引入关注[1-17].我们曾有多篇研究[18-24]报告乙肝引发的肝内血管增生及改建与肝纤维化及肝硬变(LC)的关系、血管内皮细胞生长因子(VEGF)在乙肝肝组织中的表达.本文检测了乙肝患者循环血中VEGF含量,同时对这些患者肝组织进行体视学分析[25],进一步探讨了VEGF在临床上的应用价值.现将结果报告如下.     

自噬基因Beclin-l在不同进展阶段肺癌组织芯片中表达及意义

自噬是细胞成分更新及组织重塑的重要调控机制,能抑制突变,维持细胞的正常功能[1].我们应用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测Beclin-1、Caspase-9和Bcl-2在肺癌组织、癌旁组织、正常肺组织等中的表达,旨在探讨自噬与凋亡在肺癌中的关系.     

组织芯片在胃肠道肿瘤研究中的应用进展

近年来,随着基因芯片技术和功能基因组的发展,组织芯片(tissue microarray,TMA)技术应运而生。与细胞芯片、蛋白质芯片、抗体芯片一样,TMA属于一种特殊生物芯片技术,该技术可以将数十个甚至上千个不同个体的临床组织标本按预先设计的顺序排列在一张玻片上进行分析研究,是一种高通量、多样本的基因功能分析工具。其使科研人员第一次有可能同时对几百甚至上千种正常或疾病以及疾病发展不同阶段的自然病理生理状态下的组织样本进行某一个或多个特定基因,或与其相关的表达产物的研究。TMA技术可以与DNA、RNA、蛋白质、抗体等技术,以及传统的病理学技术、组织化学和免疫组化技术相结合,在基因、基因转录和相关表达产物的生物学功能三个水平上进行研究。这对人类基因组学的研究和发展,尤其是在基因和蛋白质与疾病关系的研究、疾病相关基因的验证、新药的开发和筛选、疾病的分子诊断、治疗过程的追踪和预后等方面具有实际意义和广阔的市场前景[1]。1998年Kononen等[2]首次应用TMA技术对6种基因在1000例乳腺癌中的表达情况进行了研究,揭开了TMA的研究序幕。本文综述了近年来TMA技术在胃肠道肿瘤研究中的应用进展,以便全面、深入地...     

幽门螺杆菌的血清学诊断

目前幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的实验诊断技术已日益完善,临床上常用的诊断方法包括细菌形态观察,细菌尿素酶活性测定,血清抗Hp抗体测定、细胞DNA检测及粪便Hp抗原检测[1].毋庸置疑,经内镜取材的标本进行快速尿素酶试验及组织病理学检查是确诊Hp感染的常用方法.但侵入性诊断在某些情况下并不适用,因此血清学检测和尿素呼吸试验等无创性检测方法也具广泛用途,而血清学检测被视为流行病学调查的首选方法[2].     

抗幽门螺杆菌IgG检测的临床评价

幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori，HP)是慢性胃炎和十二指肠球部溃疡的重要的致病因素之一。其检测的方法很多，其中，多聚酶链反应(PCR)检测胃粘膜组织HP-DNA、尿素酶检测、组织切片染色镜检都是常用的检测方法。为了解血清抗HP-IgG较之HPDNA检测及组织学方法在临床上的应用价值，我们将血清抗HP-IgG检测与胃粘膜组织切片染色镜检和PCR两种方法检测进行了比较，报道如下：     

同时进行HBV、HCV检测60-mer长链寡核苷酸芯片的研制

基因芯片主要有cDNA芯片和寡核苷酸(Oligo)芯片两种。我们已经对cDNA芯片用于病毒性肝炎联合诊断进行了研究[1-3],而对于Oligo芯片,其探针的制备更为简化,直接通过分子生物学软件设计好探针序列后,人工合成相应的Oligo探针,调整浓度后,将其打印并固定在芯片上即可。本文研制乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)联合检测芯片,探讨其应用于临床检测的可能性。材料与方法一、实验材料HBV全长质粒p3.8Ⅱ由基因工程研究所保存;HCV全长质粒pCV-J4L6S[4]由美国国立卫生研究院(NIH)的Jens Bukh博士馈赠;HBV、HCV阳性血清由广州军区…     

组织芯片在肝胆胰肿瘤研究中的应用进展

近年来,组织芯片(tissue microarray,TMA)技术随基因芯片技术和功能基因组的发展应运而生,与细胞芯片、蛋白芯片和抗体芯片一样,属于一种特殊的生物芯片技术。TMA技术可将数十个甚至上千个不同个体的临床组织标本按预先设计的顺序,排列在一张玻片上进行分析研究,是一种高通量、多样本的基因功能分析工具。它使科研人员第一次有可能同时对几百甚至上千种正常或疾病,以及疾病发展不同阶段的自然病理生理状态下的组织样本进行某一个或多个特定基因的研究,或与其相关表达产物的研究。TMA技术可与DNA、RNA、蛋白质和抗体等技术相结合,与传统的病理学技术、组织化学和免疫组化技术相结合,在基因、基因转录和相关表达产物的生物学功能水平上进行研究。这对人类基因组学的研究与发展,尤其对基因和蛋白质与疾病关系的研究,疾病相关基因的验证、新药物的开发和筛选、疾病的分子诊断,治疗过程的追踪和预后等方面具有实际意义和广阔的市场前景[1]。1998年Kononen等[2]首次应用TMA技术对6种基因在1000例乳腺癌患者中的表达进行了研究,并揭开了TMA的研究序幕。本文就近年来TMA技术在消化道肿瘤中的研究,以及全面深入认识其发生、发展...     

TUNEL联合免疫组化DcR3染色在肝癌组织切片检查中的应用

10例肝癌（HCC）组织各切片4张,其中1张单行DNA缺口末端标记（TUNEL）,1张单行免疫组化诱捕受体3（DcR3）染色,1张先行免疫组化DcR3染色再行TUNEL,1张先行TUNEL再行免疫组化DcR3染色。结果显示,10例HCC标本中,单行TUNEL的切片中9例可见凋亡细胞,单行免疫组化DcR3染色的切片中8例阳性,先行免疫组化DcR3染色再行TUNEL或先行TUNEL再行免疫组化DcR3染色的切片中也均有9例可见凋亡细胞、8例免疫组化DcR3染色阳性（凋亡信号呈现于细胞核,DcR3表达于胞质）,同1例HCC组织切片用不同的检测方法得到了相同的检测结果。认为在同一张HCC组织切片上进行TUNEL及免疫组化DcR3染色可同时了解细胞凋亡与DcR3的表达情况,该检测方法可用于研究DcR3在HCC组织中的表达与细胞凋亡的关系。     

肺癌患者血和组织中结核分支杆菌感染的研究

我们采用巢式聚合酶链反应 (Ｎ ＰＣＲ)和原位ＰＣＲ(ＩＳ ＰＣＲ)检测肺癌患者血和组织中结核分支杆菌ＤＮＡ (ＴＢ ＤＮＡ) ,以探讨结核分支杆菌感染和肺癌的关系。材料与方法　收集经手术切除病理证实的原发性肺癌组织标本 5 5份 (其中新鲜组织 2 3份 ,蜡块 32份 ) ,自身对照组织 2 0份 ,胎肺组织 10份为阴性对照 ,肺结核、冻干卡介苗为阳性对照 ,同时取血标本 ,并进行相关流行病学调查。切取肺组织制成 2～ 3张 7μｍ厚的石蜡切片 ,为避免交叉污染 ,每一蜡块切完后 ,均用 75 %的酒精擦洗切片刀 ,酒精灯烧烤镊子。石蜡包埋组织、新鲜组织…     

组织芯片检测人宫颈癌癌基因和存活素在胰腺癌中的表达及临床意义

人官颈癌基因(human cervical cancer oncogene,HCCR)是新近发现的癌基因,在白血病、乳腺癌、肾癌、胃癌、结肠癌和宫颈癌等肿瘤组织中可见其过量表达[1].目前在胰腺癌组织中HCCR表达及其在胰腺癌发生中的作用和机制少见报道.本研究应用构建的组织芯片,检测胰腺癌组织中HCCR和生存素的表达,探讨其在胰腺癌发生发展中的作用及临床意义.     

超声检测老年前列腺癌患者血流分级与术后组织中NRP1和NRP2的关系

临床常通过血清学中前列腺特异抗原(PSA)等肿瘤相关标志物的检测以早期发现肿瘤,但由于其特异性差,使其在临床中的应用并不理想.研究显示前列腺癌发生中血管生成相对于正常组织来说明显增多[1].临床上观察血流最简便而无创的是彩色多普勒超声检测血流分级.神经纤毛蛋白(NRP)1和NRP2是内皮细胞表面的一种受体,其对肿瘤的进展和血管形成均有促进作用[2,3].在超声检测中的血流分级提示器官内的血液流量,由于超声检测的无创性,早期通过超声将血流分级与肿瘤组织中的NRP1和NRP2联系起来,可能对早期判断肿瘤的生物学行为有一定意义.本文关注血流分级与术后组织中NRP1和NRP2的关联性.     

13C-尿素呼气试验和血清抗CagA IgG检测对幽门螺杆菌感染的诊断价值

幽门螺杆菌(Hp)是慢性胃炎,消化性溃疡的主要致病菌[1-4],并与胃癌、MALT淋巴瘤的发生发展密切相关[5-8].在我国,有报道Hp的感染率可高达70%[9].Hp感染的诊断方法有血清抗Hp抗体检测[10-14],13C-或14C-尿素呼气试验[15-21]、胃粘膜快速尿素酶试验[22]、胃粘膜组织学染色检查[23,24]、细菌分离培养及PCR扩增检测等[25-27].血清学检查和尿素呼气试验(UBT)具有非侵入性、无痛苦和检查相对简单等优点[28,29].为了进一步比较这两种诊断方法对Hp感染的临床应用价值,我们用双盲法对195例患者进行双重检测,现将结果报道如下.     

慢性胃炎简便三重染色法——同时检测胃黏膜组织、肠上皮化生和幽门螺杆菌的新方法

幽门螺杆菌(Ｈｐ)已被公认为是慢性胃炎一个重要的致病原因。目前,病理检验本病一般采用三张切片,分别染色,观察组织炎症、肠上皮化生和Ｈｐ感染情况。既耗材料试剂,又费时间,且不便于观察病变彼此间关系。我们将三种染色同时在一张切片上进行,建立了一种三重染色方法,供临床和相关科研单位应用。材料和方法一、材料我室1994～1998年胃镜活检600例中,确诊为Ｈｐ感染慢性胃炎伴肠上皮化生22例,重新作4μｍ厚切片,供三重染色试验用。染料配制:苏木精伊红及爱先蓝8ＧＸ(ｐＨ=2.5)染液均按我室常规方法配制。银染色采用福建三强生物技术有限公司…     

精密肝切片技术在肝纤维化研究中的应用研究进展

精密肝切片(precision-cut liver slice,PCLS)技术是一种介于器官与细胞水平间的肝脏体外实验技术,由于其切片技术相对简单,无需使用胶原酶,且能够较完整保存正常组织结构、细胞联系及细胞极性(polantyofhepatic cell),因而能最大限度地模拟在体状态,目前已广泛应用于药物(或毒物)代谢、氧化应激、种属间药物作用差异等方面的研究[1-2].近年来,PCLS技术因其在研究肝星状细胞(HSC)激活和肝纤维化方面的潜在应用价值而受到愈来愈广泛地关注.本文旨在介绍这一新技术的主要特点及其在肝纤维化方面的主要研究进展.