TNFα诱导人大肠癌LoVo细胞凋亡的电镜观察

目的观察用肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导的人大肠癌 LoVo 细胞凋亡的超微结构特点。方法用体外细胞培养方法,以 TNFα诱导 LoVo 细胞凋亡,倒置显微镜、透射电镜观察细胞形态。结果凋亡早期,LoVo 细胞外形不规则,胞体大小及胞浆变化不大,微绒毛变细,染色质凝集,开始向核膜下集中;中期,胞体缩小,胞膜完整,染色质呈颗粒、块状凝集在核膜内侧、核孔之间;后期,核裂解,形成凋亡小体,并可被未凋亡的肿瘤细胞吞噬和消化。结论 TNFα能够诱导大肠癌 LoVo 细胞凋亡,经透射电镜观察,其具有特征性的形态学改变。     

氧化砷诱导食管癌细胞系细胞凋亡的形态学研究

目的在氧化砷（As2O3）作用于食管癌细胞株EC8712过程中，用光镜和电镜观察培养细胞凋亡的形态改变方法ECh712于199培养基常规培养，以3μmolAs2O3作用于细胞，72h收获细胞，作光镜（HE染色，TUNEL标记）、透射电镜和流式细胞仪检查.结果3μmolAs2O3作用72h，出现许多凋亡细胞，培养细胞部分变圆，脱落.在光镜下HE染色观察2种凋亡细胞.一种核小；圆形，致密呈固缩核、和核碎,另一种胞质红染，染色质凝集，二者TUNEL标记阳性．流式细胞仪检测有凋亡峰出现（亚G1／G0峰）．电镜检查有二种凋亡类型.一呈典型凋亡细胞核改变；在早期染色质凝集成块状，细胞器保存完好.第二期，随着染色质改变，细胞核变圆，饱满，核膜完整，染色质靠边，大块染色质，构成车轮状或半月状.核膜变性解体，使染色质逸出．最后细胞变性坏死.凋亡小体易见，小块状球状，膜包或裸露.另一种固缩细胞，细胞皱缩，胞质致密，核电子密度高.结论光镜和电镜检查结果证实As2O3可以诱导食管癌细胞系ECh712细胞凋亡，因此As2O3可作为食管癌辅助治疗药物．     

顺铂诱导人胃癌SGC-7901细胞

目的探讨顺铂对胃癌（ＳＧＣ７９０１）细胞凋亡的诱导作用，以揭示顺铂治疗胃癌的作用机制．方法选用不同剂量顺铂与人胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１共同孵育不同时间后，应用光镜、电镜进行细胞形态学观察；细胞ＤＮＡ经特异性荧光染色后，用流式细胞仪分析细胞周期变化．结果细胞经顺铂处理后浓缩、深染、致密的染色质沿核膜下凝集、有凋亡小体形成．细胞周期分析Ｇ１期峰前出现典型的细胞凋亡峰，以２５ｍｇ／Ｌ顺铂作用２４ｈ，５０ｍｇ／Ｌ作用１６ｈ为例，定量分析凋亡细胞发生率分别为９３％和１４９％．结论顺铂可通过诱导人胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１发生细胞凋亡达到消灭肿瘤细胞的目的．     

亚硝基铁氰化钠处理的弓形虫速殖子的超微结构特征

目的 观察一氧化氮（NO）供体亚硝基铁氰化钠（SNP）处理的弓形虫速殖子的超微结构特征。方法 应用透射电镜观察SNP处理的速殖子的超微结构。结果 发现SNP处理的速殖子大部分具有凋亡的典型形态学特征：核染色质凝集，核固缩，核碎裂，凋亡小体形成（个别速殖子形态表现为胀亡细胞、溶解性坏死细胞和坏死型凋亡细胞特征）。结论 从形态学上证明NO供体SNP可诱导弓形虫速殖子凋亡及坏死。     

蓝氏贾第鞭毛虫滋养体有丝分裂的初步观察

目的观察体外培养的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体有丝分裂。方法用改良的TYI-S-33培养基培养贾第虫。从培养第6h开始,每间隔2h取分裂的细胞直至第24h,制备涂片,Giemsa染液染色,用光镜和透射电镜观察细胞分裂状况。结果有丝分裂前期:染色质凝集形成细长的染色质丝;中期:形成大小约1μm的棒状染色体,且全部排列在细胞核中央,或分散在核内;后期:姐妹染色单体分开,向细胞核两极移动,核膜拉长;末期:核膜中间向内缢束呈葫芦状,细胞核缢裂成两个子核,随即进行胞质分裂。结论蓝氏贾第鞭毛虫滋养体有丝分裂与典型真核细胞相似,但分裂期核膜始终存在,为半开放式分裂。     

TNFa诱导大肠癌细胞凋亡的实验研究

目的：探索肿瘤坏死因子a（TNFa）诱导人大肠癌细胞凋亡的可能性及其发生规律。方法 用细胞体外培养方法，以TNFa不同剂量，不同时间作用于入大肠癌Lovo细胞，经Hoechst33258荧光染色，光镜观察细胞的形态改变；DNA抽提、琼脂糖凝胶电泳，检测DNA断裂情况。结果：TNFal×10^5μ/ml作用12-48h和1×10^4-1×10^5μ/ml作用45h，Lovo细胞出现逐渐明显的凋亡形态学改变，1×10^5μ/ml作用48h，DNA电泳出现显示凋亡特性的梯形条带。结论 TNFa能够诱导人大肠癌Lovo细胞凋亡，并存在时间与剂量效应。     

白花丹醌对人肝星状细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的:研究白花丹醌对瘦素(Leptin)刺激体外培养人肝星状细胞株HSC-LX2凋亡及相关蛋白表达的影响,以探讨其抗肝纤维化作用的机制.方法:体外培养HSC-LX2,将其分为以下几组:空白对照组、Leptin对照组、秋水仙碱组、2、8、16μmol/L白花丹醌组.瘦素刺激24h,药物与细胞共孵育24h后,应用流式细胞仪Annexin/PI双染方法检测细胞凋亡,透射电镜观察HSC-LX2凋亡形态学变化,免疫组织化学法检测HSC-LX2凋亡基因p53、Bax、Bcl-2的蛋白表达.结果:细胞流式术结果显示,白花丹醌作用HSC-LX224h,HSC凋亡率明显增加,白花丹醌8、16μmol/L组和秋水仙碱组HSC凋亡率均显著高于空白对照组和Leptin对照组(5.21±0.41,8.10±0.63,10.1±1.08vs1.40±0.13,2.85±0.21,均P<0.01).透射电镜结果,空白对照组细胞形态清晰,细胞膜、核膜完整,胞质内细胞器清晰,染色质均匀,细胞表面微绒毛;药物组可见少量坏死细胞和许多不同程度的凋亡细胞,体积变小,核膜消失,胞质浓缩,胞质内出现大量空泡,细胞核染色质固缩,可见核碎裂,细胞表面微绒毛...     

氧化砷诱导胃癌细胞凋亡的实验研究

目的 研究三氧二化砷（氧化砷）对胃癌细胞的诱导凋亡作用。方法 应用ＴＵＮＥＬ染色、流式细胞仪技术研究氧化砷对胃癌细胞ＭＫＮ－４５、ＭＫＮ－２８的诱导凋亡作用。结果 氧化砷作用于不同分化程度的胃癌细胞后,可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化：细胞核固缩,染色质凝集,呈新月型紧贴于核膜周边,核碎裂,染色质片断化,凋 亡小体形成等。流式细胞仪ＤＮＡ直方图上出现典型的亚二倍体的“凋亡峰”。ＴＵＮＥＬ染色法     

蒿甲醚对小鼠体内弓形虫作用的超微结构研究

应用透射电镜观察蒿甲醚对弓形虫超微结构的影响。发现用药后弓形虫速殖子的主要病理改变为：虫体细胞膜、核膜断裂；线粒体肿胀，呈空泡变性或嵴凝集均质化；内质网扩张；棒状体及致密颗粒显著减少；甚至出现细胞核碎裂、溶解，胞质内基质破坏溶解呈大空泡，细胞成分可由细胞内脱出，整个虫体固缩或溶解死亡。     

蒿甲醚对小鼠体内弓形虫作用的超微结构研究

应用透射电镜观察蒿甲醚对弓形虫超微结构的。发现用药后弓形虫速殖子的主要病理改变为：虫体细胞膜、核膜断裂；线粒体肿胀，呈空泡变性或嵴凝集均质化；内质网扩张；棒状体及致密颗粒显著减少；甚至出现细胞核碎裂、溶解，胞质内基质破坏溶解呈大空泡，细胞成分可由细胞内脱出，整个虫体固缩或溶解死亡。     

朊蛋白106-126肽段对PC12细胞毒性作用的形态学观察

目的研究朊蛋白106-126肽段在细胞水平上的毒性作用。方法PC12细胞常规培养后加入神经生长因子(NGF)诱导成神经元样细胞,再加入朊蛋白106-126肽段,MTT法检测细胞存活率,观察细胞生长和形态变化。结果细胞接触肽段后存活率下降。光镜下可见细胞贴壁不良,胞体缩小,细胞突起断裂缩短;荧光染色可见到突起缩短、胞核固缩并染成橘红色的凋亡细胞;电镜下可见胞质中出现空泡样结构,细胞染色质浓集于核膜内侧并裂解成碎块状,可见凋亡小体。结论利用106-126肽段感染分化的PC12细胞可能是在细胞水平上研究朊蛋白毒性作用的理想模型。     

金雀异黄素诱导人肝癌细胞SMMC-7721细胞凋亡的研究

目的 探讨金雀异黄素(Genistein,Gen)对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡调控的作用.方法将Gen分为5.0、10.0、20.0 μg/ml 三个浓度处理组和对照组(未加金雀异黄素),作用SMMC-7721细胞不同时间后,透射电镜观察细胞超微结构变化;免疫组化法检测细胞内Bax、Bcl-2蛋白的表达水平.结果 与对照组比较,Gen处理组可使细胞核内异染色质呈块状凝集、胞质内线粒体肿胀空化,随着作用浓度增加,细胞核呈固缩状,核内异染色质趋边凝集,细胞质空化明显;免疫组化显示,随着Gen浓度增加,Bax蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达减弱,并呈剂量依赖性(P＜0.01).结论 金雀异黄素可以诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡.上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达可能是其诱导细胞凋亡的作用机制.     

PHA诱导日本血吸虫成虫培养细胞增殖的研究

研究PHA对日本血吸虫成虫培养细胞的促增殖作用。方法用浓度为333．3ug／ml的PHA处理日本血吸虫成虫培养细胞24h，在光镜和电镜下观察培养细胞的增殖情况。结果在光镜下发现在老化的培养细胞中间出现一些类似于淋巴母细胞样的新细胞；在光镜和扫描电镜下观察到有呈哑铃状的成对细胞；在透射电镜下观察到有细胞核膜消失，染色质变成粗颗粒状．中心粒一分为二，两中心粒之间还有纺锤丝牵引；还观察到处于分裂早期的细胞，核中染色质浓缩成四块状，核膜有部分消失、结论PHA对日本血吸虫成虫培养细胞有一定的促增殖作用。     

羟基喜树碱诱导胃癌细胞凋亡的作用机制初步研究

目的：研究羟基喜树碱（HCPT）诱导胃癌细胞的凋亡作用及对凋亡相关基因p53,c-myc,bcl-2,bcl-xl和bcl-xs表达的影响,探讨其诱导胃癌细胞凋亡的作用机制。方法：应用TUNEL染色、流式仪、免疫组化和RT－PCR技术等研究HCPT对胃细胞SGC－7901和MKN－45的诱导凋亡作用和对凋亡相关有达的影响。结果：HCPT作用于细胞后,可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化;细胞核固缩,染色质凝集,呈新月型紧核膜周边,核碎裂,染色质片段化,凋亡小体形成等。流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体的“凋亡峰”。流式细胞仪计数显示,10μg/ml的HCPT诱导胃癌细胞SGC－7901和MKN－45的凋亡率为21．88％和12．34％。TUNEL染色法显示,细胞凋亡指数在1．865－9．54％之间。免疫组化和RT－PCR结果显示：HCPT能够明显下调SGC－7901细胞的P53和bcl-2基因的蛋白和mRNA表达,对SGC－7901细胞的c-myc,bcl-xl和bcl-xs基因的蛋白表达无影响。HCPT作用后MKN－45细胞的p53蛋白和mRNA的表达增加,对MKN－45细胞的bcl-2,c-myc,bcl-xl和bcl-xs基因的表达无影响。结论：HCPT能够诱导胃癌细胞凋亡,可能是通过调控胃癌细胞的P53和bcl-2的表达而诱导胃癌细胞凋亡。     

过氧化氢体外诱导细粒棘球蚴原头节细胞Caspase-3表达及超微结构改变的影响

目的探讨过氧化氢(H2O2)体外诱导细粒棘球蚴原头节细胞凋亡、Caspase-3表达和细胞超微结构的影响。方法RPMI1640添加谷氨酰胺组即体外培养细粒棘球蚴原头节,用5mmol/L H2O2诱导8h,使其发生细胞凋亡。用原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶标记技术(TUNEL法)检测原头节细胞凋亡情况,用过氧化物酶标记链霉卵白素(SP)染色半胱天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)。在透射电镜下观察原头节细胞超微结构的变化。结果过氧化氢诱导原头节细胞凋亡细胞增加,caspase-3表达增加,电镜观察原头节细胞异染色质增加,部分细胞染色质异常浓缩呈现凋亡细胞征象。结论H2O2可诱导细粒棘球蚴原头节细胞凋亡,且caspase-3参与原头节细胞的凋亡。     

CDHS801光动力诱导膀胱癌细胞凋亡的机制探讨

目的探讨光敏剂CDHS801光动力诱导膀胱癌细胞凋亡的机制。方法将膀胱癌T24细胞分成A、B、C、D组。A组为空白对照组;B组与CDHS801避光孵育;C组仅予激光照射;D组与CDHS801共同孵育后接受激光照射。倒置相差显微镜和电镜下观察各组细胞凋亡情况,激光共聚焦显微镜检测JC-1荧光探针标记的线粒体膜电位,Western blot法检测细胞质中的细胞色素C。结果 D组细胞变小变圆,染色质浓缩,染色质凝集边集、有新月体形成;其余三组细胞正常。细胞JC-1探针检测显示D组发出绿色荧光,其余三组细胞发出橙红色荧光。Westernblot结果显示仅D组细胞质中检出了细胞色素C。结论 CDHS801光动力诱导膀胱癌T24细胞凋亡的机制是治疗后线粒体膜电位下降,线粒体通透性增加,细胞色素C由线粒体移位到胞质中,启动了线粒体途径的细胞快速凋亡。     

薏苡仁提取液对人胰腺癌细胞凋亡和超微结构的影响

背景:薏苡仁提取液目前已广泛应用于临床抗肿瘤治疗,但至今尚未见其单独应用于胰腺癌的报道.目的:观察薏苡仁提取液对人胰腺癌细胞凋亡和超微结构的影响,以探索胰腺癌治疗的新途径.方法:以不同浓度薏苡仁提取液处理人胰腺癌细胞系PaTu-8988后,分别通过光镜观察、Hoechst 33258荧光染色、末端脱氧核苷酸转移酶原位标记(TUNEL法)和流式细胞术检测细胞凋亡,应用透射电镜观察细胞超微结构的变化.结果:经10μl/ml和20μl/ml薏苡仁提取液作用72 h后,PaTu-8988细胞的增殖能力明显下降,其作用呈剂量依赖性;光镜观察显示凋亡细胞变圆、体积缩小,Hoechst 33258荧光强染,TUNEL标记阳性.20μl/ml薏苡仁提取液作用24、48和72 h后,流式细胞仪DNA直方图上出现亚二倍体凋亡峰,细胞凋亡率呈时间依赖性,分别为7.1%±.6%、113%±0.3%和15.1%±2.9%,显著高于对照组的2.4%±1.1%(P<0.01).透射电镜观察显示,凋亡早期主要是线粒体结构的改变,后期则出现典型的凋亡征象,如核固缩、染色质凝集靠近核膜和凋亡小体形成.结论:薏苡仁提取液可诱导人胰腺癌细胞凋亡,其作用呈剂量和时间依赖性,线粒体可能在早期细胞凋亡中起重要作用.     

维生素C和维生素K3联合诱导肝癌细胞Autoschizis的探讨

目的:探讨维生素C和维生素K3联合对诱导人肝癌细胞的Autoschizis现象.方法:采用体外培养技术,MTT法观察细胞生长抑制作用;普通光学显微镜、透射电镜及激光扫描共焦显微镜下分别观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期分布.结果:当维生索C(100、250、400、500 μmol/L),维生素K3(2、5、8、10μmol/L)单独作用时,对肝癌细胞的生长影响并不明显(P＞0.05),而维生采C和维生素K3以生理剂量联合后,能显著抑制肝癌细胞Hep G2的生长.维生素C和维生素K3作用于细胞后,可看到较为典型细胞凋亡的形态学变化:细胞核固缩,染色质凝集,呈新月型紧贴于核膜周边,核碎裂,染色质片断化,空泡形成和凋亡小体等.流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体"凋亡峰",表现为细胞周期特异性,作用72 h后,与对照组比较,C0/G1期细胞上升,S期细胞下降,细胞周期阻滞于C0/G1期.结论:维生素C和维生素K3抑制肝癌细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用明显,而从形态中未观察到Autoschizis特殊形式.维生素C和维生素K3可通过诱导肝癌细胞凋亡,而具有治疗肝癌的潜在价值.     

青蒿琥酯诱导U937细胞凋亡的研究

目的：研究青蒿琥酯体外诱导U937细胞凋亡及其过程中细胞内游离钙的变化。方法：采用光镜、透射电镜技术、DNA片段化电泳、流式细胞术对青蒿琥酯诱导U937细胞凋亡进行了观察，并应用激光共聚焦显微镜技术检测凋亡过程中细胞内游离钙浓度的变化。结果：6．250mg／L的青蒿琥酯可诱导U937细胞凋亡，作用于细胞后30min，Ca^2＋浓度即明显升高，1h达高峰，48h仍维持在较高水平。结论：青蒿琥酯可诱导U937细胞凋亡，细胞胞质内Ca^2＋是青蒿琥酯诱导U937细胞凋亡信号传导过程中重要的信号分子。     

平阳霉素诱导舌癌Tca8113细胞凋亡过程中p65信号转导通路的变化

目的 观察平阳霉素诱导舌癌Tca8113细胞凋亡过程中p65信号转导通路的动态变化。方法 在平阳毒素诱导Tca8113细胞凋亡过程中，流式细胞术检测细胞凋亡，免疫组化、Western blot检测p65蛋白。结果 平阳霉素能诱导Tca8113细胞凋亡，在凋亡发生时，p65蛋白由非活化状态转变为活化状态，从胞浆中穿过核膜进入细胞核，并调控靶基因表达。调控结束后，p65蛋白由胞核回到胞浆，并成为非活化状态。结论 平阳霉素诱导Tca8113细胞凋亡过程中，p65信号转导通路被激活。